LACTATO DE MENTILO

El lactato de mentilo (ML), un ster de mentol y cido lctico, es un agente refrescante fisiolgico
ampliamente utilizado en sabores, cuidado oral y cosmticos. Recientemente, ML se propuso para
el tratamiento del cncer o como agente de diagnstico (vase, por ejemplo, la patente de los
Estados Unidos. Appl. Publ. 2005/0054651). Debido ML tiene cuatro centros quirales, hay diecisis
posibles estereoismeros. El ismero ms comn ML, 1, se deriva de / mentol y L (+) - cido
lctico:

Se han reportado pocas rutas sintticas para ML. Un enfoque general consiste en la reduccin
asimtrica de piruvato de mentilo (vase, por ejemplo, Nishiyama et al., J. Chem. Soc Chem.
Commun. (1976) 101 y Ojima et al., J. Orq. Chem. 42 (1977) 1671. este enfoque utiliza reactivos
quirales sofisticados y da ML en los rendimientos pticos modesta y qumica.
- La forma ms sencilla de hacer ML es la esterificacin directa de cido lctico con
mentol. Sorprendentemente pocos detalles acerca de este mtodo estn disponibles en la
literatura, sin embargo. Hace un siglo, McKenzie et al. (.. J. Chem Soc 87 (1905) 1016) describe la
preparacin de / -mentilo-c // - lactato por esterificacin de / - mentol y c // - cido lctico "por el
mtodo de cloruro de hidrgeno." Esto parece implicar burbujear gas cloruro de hidrgeno en una
solucin que contiene ter / - mentol y una cantidad en exceso de c // - Aadir lctico, seguido de
lavado de la fase de ter con carbonato de sodio acuoso y agua, seguido de secado, la
concentracin y destilacin. McKenzie observ cambios en la actividad ptica cuando steres de
mentilo o bornilo pticamente activos (incluyendo ML) se hidrolizaron con hidrxido de potasio
alcohlico a temperatura elevada para dar las sales de cido carboxlico correspondiente. Las
condiciones usadas no eran eficaces para minimizar la hidrlisis de lactato de mentilo; de hecho,
que fueron diseados para producir mentol y cido lctico por hidrlisis de ML.
Kuhn et al. (. Patente de EE.UU. No. 5.783.725) ensean una esterificacin catalizada por cido de
L (+) - cido lctico y / mentol. Los cidos recomendados son cido sulfrico, cido fosfrico, cido
metanosulfnico, cido p-toluenosulfnico, arcillas cidas y resinas de intercambio inico

cidas. Despus de una serie de anlisis tpico, el producto ML se destila a 97-98% de pureza. La
referencia proporciona algunos detalles sintticos y no dice nada sobre el rendimiento de ML
obtenido.
Hemos encontrado sorprendentemente que la reaccin de cido lctico y mentol produce no slo
lactato de mentilo, sino tambin cantidades significativas de steres de lactoil ms altos de ML,
incluyendo lactato de mentilo lactoil (MLL) y mentilo lactoil lactoil lactato (MLLL). Los steres lactoil
ms altas, aunque previamente desconocido, pueden comprender 25% o ms de una mezcla de
esterificacin directa; por desgracia, la destilacin usual para obtener ML les sacrifica en una
fraccin de alto punto de ebullicin, que normalmente se desecha. En un procedimiento de la
invencin, el mentol y cido lctico reaccionar para producir una mezcla que comprende lactato de
mentilo y uno o steres lactoil ms altos de lactato de mentilo. La hidrlisis de la mezcla de
esterificacin sigue en presencia de una base acuosa y en condiciones eficaces para convertir los
steres de lactoil superiores a lactato de mentilo. Casualmente, las condiciones de minimizar la
hidrlisis de lactato de mentilo al mentol, maximizando as el rendimiento global de ML. Otro
proceso de la invencin implica la hidrlisis controlada de una mezcla que comprende steres de
lactoil ms altos de lactato de mentilo. Cada proceso es fcil de practicar y proporciona
rendimientos excepcionalmente altos de ML.
El mentol adecuado para su uso en la invencin puede tener cualquier estereoqumica
deseada. Con tres centros quirales, mentol tiene ocho estereoismeros posibles. Una muestra de
mentol podra tener varios estereoismeros diferentes presentes. Los ejemplos incluyen / mentol,
c / mentol, d / ~ mentol (es decir, una mezcla racmica de / mentol y c / mentol), ismeros de
neomentol, isomentol, y neoisomentol, y mezclas de los mismos. / Mentol, c / mentol, c // - mentol,
y otros ismeros estn todos disponibles comercialmente. Debido a que proporciona ML que tiene
excelentes propiedades refrescantes fisiolgicos, / Se prefiere particularmente mentol (2).

LA LIPASA CATALIZA LA ESTERIFICACIN DE CIDO LCTICO

Las reacciones entre cidos y alcoholes lctico o cidos carboxlicos catalizadas por lipasa de
Candida antarctica se evaluaron con hexano como disolvente. El cido lctico era un buen donador
de acilo y los steres de ambos alcoholes primarios y secundarios se sintetizaron de manera
eficaz. No se observ la formacin de dmero de interferencia debido a la actuacin de cido lctico
como donante nuclefilo y acilo. De acuerdo con esto, no se produjo de esterificacin entre el cido
lctico y cidos carboxlicos.

Las lipasas se han utilizado con xito como catalizadores para la sntesis de steres, tanto en el
trabajo a pequea escala y en una escala industrial (Miller et al., 1988). Las condiciones de
reaccin suaves en las reacciones enzimticas hacen posible la obtencin de productos de muy
alta pureza. Otra ventaja de las enzimas es su selectividad. La selectividad es de gran importancia
cuando las reacciones que implican compuestos polifuncionales se llevan a cabo. A menudo es
posible llevar a cabo la reaccin enzimtica altamente selectiva sin el uso de grupos protectores.
En el presente estudio, los steres de cido lctico con diferentes alcoholes estaban preparados.
En estas reacciones, existe el riesgo potencial de que el cido lctico ser actuar como donador de
acilo y nuclefilo, produciendo de este modo dmeros y oligmeros de cido lctico. Para evitar
esto, se puede ya sea proteger el grupo hidroxilo del cido lctico o usar una enzima con la que el
cido lctico no es eficaz como un nuclefilo. Aqu, la segunda alternativa se evalu usando una
lipasa disponible comercialmente de Candida antarctica como catalizador.

Materials and methods

El cido lctico se adquiri de ICN como un 85% (v w /), una solucin racmica y como 99% (w /
w), L - (+) - enantimero puro, slido cristalino. La preparacin de enzima, Novozyme SP 435, se
obtuvo de Novo Nordisk Industri A / S, Dinamarca. n-butanol, n-hexanol, noctanol, n-decanol, 2butanol, 2-propanol y 3-metil-2-butanol se usaron como nuclefilos. Todos los productos qumicos
fueron de grado analtico.
Una reaccin tpica contiene de 3 5 mg, enzima con alcohol y cido lctico en cantidades
equimolares o un exceso de una parte. Los reactivos se diluyeron en hexano y se form un sistema
de dos fases visual. Los solventes y alcoholes fueron agua saturado para obtener una actividad
constante del agua. Las reacciones de la balanza analtica se realizaron a 25 C en frascos de
vidrio de 4 mL tapado, con recproco sacudiendo a 185 rpm.
Las sntesis lactato de butilo escala preparativa se realizaron en sistemas de dos fases a 70 C
con el alcohol disuelto en hexano se mezcla con un exceso de cido lctico en matraces de 100 ml
de fondo redondo, equipado con agitador magntico y condensador. Despus de la reaccin, las
partculas de enzimas se eliminaron por filtracin y se descart la fase acuosa. Por ltimo, el
disolvente se elimin por evaporacin y el producto se recogi por destilacin a 70 C, 25 mm Hg.
Los anlisis se realizaron con un Shimadzu GC-09 a.m. equipado con un FID y un vaso-columna
de 2,1 m con un dimetro de 2,6 mm, rellena con 10% SP-1000 en 100/120 Chromosorb WAW.
La rotacin ptica del lactato de butilo se midi en etanol seco con una actividad ptica Ltd., AA100 polarmetro automtico.
Resultados y discusin
El cido lctico como donador de acilo

Hexano se ha demostrado que es un buen disolvente para las reacciones de esterificacin (Miller
et al., 1988, Valivety et al., 1991). El ster producto es bien solubiliza en este disolvente y altos
rendimientos de este modo se puede obtener. Por consiguiente, la esterificacin del cido lctico
con unos alcoholes primarios diferentes se intent en hexano. La lipasa utilizada, Novozyme SP
435 (de Candida antarctica) est disponible y se sabe que es un buen catalizador en reacciones de
transesterificacin en medios orgnicos comercialmente (hrner et al., 1994) y en la lactonizacin
de cido 16-hidroxihexadecanoico (Robinson et al. , 1994). En la esterificacin de cido lctico, la
velocidad de reaccin ms alta se obtuvo con 1-butanol, mientras que los alcoholes ms largos
dieron lugar a tasas ms bajas (Figura 1). Parte de este efecto es ms probablemente causado por
la solvatisation efectiva de los alcoholes de cadena larga en el disolvente, dando como resultado
los coeficientes de actividad bajos y velocidades de reaccin bajas (Janssen y Halling, 1994). Por
supuesto, el efecto tambin puede ser debido a la especificidad de la lipasa de alcoholes de
longitud de cadena diferente.

Las reacciones se llevaron a cabo con diferentes relaciones molares de alcohol

y cido lctico. Se observ que un exceso de alcohol causada generalmente
velocidades de reaccin bajas, mientras que un exceso de cido lctico
causado velocidades de reaccin altas (Tabla 1). Los efectos fueron ms
pronunciados para los butanol y hexanol que para los alcoholes ms largos.
probablemente el alcoholes cortos inhiben la enzima, mientras que la alta
concentracin (1 M) de cido lctico no lo hizo. Las velocidades de reaccin
obtenidos con alcoholes secundarios fueron considerablemente ms bajos que
con alcoholes primarios, pero todava lo suficientemente alto como para que
las reacciones de valor prctico (Tabla 1). Los resultados estn de acuerdo con
observaciones anteriores de que las lipasas generalmente expresan mayor
actividad hacia los alcoholes primarios (Miller et al., 1988).
No se observ formacin de dmeros de cido lctico u oligmeros en
cualquiera de estas reacciones. En consecuencia, ser bastante fcil de
optimizar las reacciones para obtener altos rendimientos de varios steres de
cido lctico.
El cido lctico como nuclefilo
La ausencia de la formacin de dmero indica que el cido lctico no acta
como un nuclefilo cuando C. antarctica lipasa se utiliza como catalizador. Esto
se ensay adicionalmente usando mezclas de reaccin que contienen cido
lctico y cido decanoico.
Longer cidos grasos son buenos donantes de acilo para esterificaciones lipasa
catalizada. Sin embargo, no se observ produccin de lactil-decanoato, la
verificacin de la baja nucleofilia del grupo hidroxilo del cido lctico. Una
posible razn para la pobre reactividad en estas reacciones es el impedimento
estrico. Previamente se ha observado que la lipasa de C. antarctica cataliza la
lactonizacin de cido 16-hidroxihexadecanoico (que tiene un grupo hidroxilo
primario) (Robinson et al., 1994), es decir los hidroxicidos pueden ser

aceptados como nuclefilos de este lipasa. Como se discuti anteriormente, los

alcoholes secundarios no son tan buenos nuclefilos como los primarios. En el
cido lctico el impedimento estrico se incrementa an ms por la presencia
del grupo carboxilo. A fin de probar la importancia de los efectos estricos, 3metil-2-butanol se puso a prueba como nuclefilo en la esterificacin catalizada
por lipasa. se produjo ninguna reaccin, lo que indica que el impedimento
estrico es importante para determinar qu nuclefilos son eficaces.
Estereoselectividad en la esterificacin catalizada por lipasa de cido
lctico
Con el fin de estudiar la preferencia de la lipasa para los diferentes
enantimeros de cido lctico, las sntesis preparativas de lactato 1-butilo se
llevaron a cabo con cido racmica y pticamente pura L-lctico. El lactato de
butilo preparado a partir del cido lctico pticamente puro tena una rotacin
ptica de [a] D25 = -12,0 y que a partir de cido lctico racmico tena una
rotacin ptica de [a] D25 = -0,18. Por tanto, es claro que la lipasa cataliza la
esterificacin de ambos enantimeros de cido lctico con tasas casi iguales,
por lo que esta reaccin no se puede usar para la resolucin de cido lctico.
Tal vez otras lipasas expresan enantioselectividad en esta reaccin? Este
resultado est de acuerdo con investigaciones anteriores que reportan buena
estereoselectividad de la enzima slo cuando el centro quiral est situado en el
lado de alcohol (Quiros et al., 1993. Sinisterra et al., 1994.).
CONCLUSIONES
La lipasa de Candida antarctica es un catalizador til para la fabricacin de
steres de cido lctico. La lipasa expresa alta actividad con alcoholes
primarios como nuclefilos.
Los alcoholes secundarios sin otros grupos funcionales adyacentes al grupo
hidroxilo de ramificacin o se aceptan como nuclefilos, mientras que el cido
lctico y otros alcoholes con un mayor impedimento estrico no son reactivos.

ESTERIFICACIN CATALIZADA POR LIPASA DE CIDO LCTICO EN

DIXIDO DE CARBONO SUPERCRTICO

SNTESIS VERDE DE PALMITATO DE LAURILO POR LA REACCIN

CATALIZADA POR LIPASA
Palmitato de laurilo Sntesis:
El sistema de reaccin consista en 2,0 mmol de cido palmtico, 4,0
mmol de alcohol de laurilo, 2,0 ml de hexano y 0,3 g de Novozym 435.
La mezcla se incub a 37 C usando un agitador de bao de agua
horizontal. La velocidad de agitacin se fij en 150 rpm y la mezcla de
reaccin se hizo reaccionar de forma continua durante 180 minutos.
Despus, la reaccin se termin mediante dilucin con 7,0 ml de
etanol / acetona (1: 1 v / v).

PRODUCTION AND CHARACTERIZATION OF ISOPROPYL LAURATE USING

IMMOBILIZED LIPASE
Reaccin de esterificacin a menos que se indique lo contrario, las reacciones
se llevaron a cabo al mezclar 100 mg de cido lurico, 200 mg de tamices
moleculares y 50 mg de Novozym 435. Despus de la adicin de 4 ml de
alcohol isoproplico, la reaccin fue permitida que se produzca en un vaso de
100 ml cierre hermtico matraz Erlenmeyer en 120 golpes/min en un agitador
de bao de agua termo-constante (Nuve, Sanayi ve Malzemeleri Imalat ve Tic.
COMO Estambul, Turqua) durante 15 minutos a 60 C. Para mejorar la
reaccin hacia la sntesis, tamices moleculares fueron usados (Arcos et al.,
1998a). La cantidad de tamiz molecular fue mayor que lo necesario para
absorber completamente la cantidad de agua que se producira desde la
completa esterificacin de los cidos grasos presentes, teniendo en cuenta la
alta capacidad de tamices moleculares para la absorcin de agua (20% w/w).
Investigaron a sustrato ptimo y las concentraciones de enzima y los efectos
de la temperatura y el tiempo en la actividad enzimtica para la produccin de
laurato de isopropilo.

http://journals.tubitak.gov.tr/engineering/issues/muh-04-28-4/muh-28-4-3-04023.pdf