Fenomenos de Transporte

Transporte
a nuclesidos
travs dey nucletidos
membranas
Estructura de
Qumica-fsica del transporte
Difusin: ley de Fick

Bioenergtica
Potencial de membrana: ecuacin de Nernst
Clasificacin y tipos de transporte
Distinciones bioenergticas y cinticas

(mecanismos)
Difusin facilitada
Permeasas: Glut e intercambiador Cl-/HCO3 Canales inicos: estructura, funcin y regulacin
ATPasas de membrana: Bombas inicas
Estructura y clasificacin
P-ATPasas: mecanismo, ejemplos y funciones
V-ATPasas
Transportadores ABC/Mdr1/CFTR
Mecanismos de transporte acoplado
Intercambiadores: mecanismo y bioenergtica

Transporte transepitelial: trabajo conjunto
Transporte mediado por endocitosis
Clasificacin y tipos
Potocitosis: transporte de folato
Endocitosis mediada por receptor
Transcitosis
smosis y fenmenos osmticos
Ley de van't Hoff

Tonicidad de disoluciones: coeficiente de reflexin
Equilibrio Gibbs-Donnan
Regulacin del volumen celular
Enrique Castro, 2004
Permeabilidad de las membranas
Agua
H2O
Gases
O2, CO2,
NO, CO,
N2
polares
pequeas
sin carga
urea
etanol, glicerol
c. Actico
Hidrfobas c. grasos
pequeas Esteroides
polares
grandes
sin carga
glucosa
sacarosa
iones
K+, Na+, Ca2+, Mg2+

Cl-, HCO3-, H2PO4-
polares
cargadas
aminocidos
glucosa--6-P
ATP, nucletidos
Permeabilidad e Hidrofobicidad
K+
Na+
-12
glucosa
trp
Cl+
urea
-10
-8
-6
indol
H2O
-4
-2
Coeficiente de permeabilidad, cm/h
Permeabilidad
Coeficiente de permeabilidad, cm/s
Permeabilidad hidrofobicidad
Coeficiente de reparto aceite/agua
Hidrofobicidad
Log P
Difusin libre: leyes de Fick

Difusin: camino al azar (relaciones de Einstein)
D= coeficiente de difusin
x =0
(depende del tamao)
x =2 Dt
L 2 cm2
[D]= =
T
s
d = 2 Dt
En tres dimensiones
r= 6 Dt
Movimiento browniano
2n
Flujo a travs de una frontera: 1 ley de Fick

1
2
c2
c1
dn 1
dc
= J =D
,
dt A
dx
[J ]=
M
mol
=
2
2
L T cm s
Flujo proporcional al
gradiente de concentracin
Variacin temporal: 2 ley de Fick
2
dc
dJ
d c
= =D 2
dt
dx
dx
n
c x , t = D t e
2
t=1
C
x2
4Dt
Distribucin gausiana
t=4
t=16
t=64
-3
-2
-1
X
Difusin a travs de membrana
cm
dc m
J = D
= D
dx
c im
s
ci
c1m
=2
c im=cis ;
c m= c s
c1S
=1
D
J =
c s
=0.5
=0.2
J = P c s
0
P=
[P]= L TL 1 = cms
2
Coeficiente de permeabilidad
Coeficiente de reparto
Coeficiente de difusin (Mr)
Espesor de la membrana
c2m
c2S
Energa libre y transporte
equilibrio
componente
qumico
[ Na + ]destino
G = RTln [ Na ]
+
origen
componente
elctrico
zF E m
E m=E destino E origen
R = 8.315 Jmol-1K-1
(1.987 calmol-1K-1)
F = 96480 Cbmol-1 ( Jmol-1V-1 )
(23059 calmol-1V-1)
1 cal = 4.184 J
Difusin de iones:
potencial de membrana
Membrana impermeable
Em= 0 mV 0
-60
+60
NaCl
15 mM
NaCl
150 mM
Membrana permeable a Na+

Em= -59 mV
-60
+60
NaCl
15 mM
NaCl
150 mM
Na+
V= 0
V 0 constante
Membrana permeable a Cl0

Em= +59 mV
Membrana permeable
a Na+ y Cl0
PNa>PCl
-60
+60
-60
+60
NaCl
15 mM
NaCl
150 mM
NaCl
15 mM
NaCl
150 mM
Cl+
V 0 constante
Na+
Cl+
V 0 transitorio
Potencial de equilibrio
Inicio
Em=0
Equilibrio
Em=Eeq
[ Na + ]destino
G = RTln [ Na ]
+
origen
En el equilibrio
zFE m
G = 0 y E m = E eq
E eq = -
RT
zF
[ Na + ]destino
ln [ Na ]
+
origen
Ecuacin de Nernst
Walther Nernst
1864-1941
Premio Nobel 1920
R = 8.315 Jmol-1K-1
(1.987 calmol-1K-1)
F = 96480 Cbmol-1 ( Jmol-1V-1 )
Transporte
a nuclesidos
membranas
Estructura de

Bioenergtica

(mecanismos)
Difusin facilitada
V-ATPasas
Transcitosis
Ley de van't Hoff
Ionforos
transportadores
canales
Complejo
valinomicina-K+
Canal de gramicidina
Valinomicina (K+)
nonactina
monensina (Na+)
gramicidina
En bicapa
lipdica
Hlice 6.3 hueca

dmero cabeza-cabeza
En solvente
hidrfobo
Transporte
a nuclesidos
membranas
Estructura de

Bioenergtica

(mecanismos)
Difusin facilitada

V-ATPasas
Transcitosis
Ley de van't Hoff
D. facilitada: Glucosa permeasas
Saturable
Especfico
Estructura de transportadores Glut
Elementos funcionales
12 segmentos transmembrana
9 hlice anfipticas (polares no cargados)
haz de hlices (sitio de unin)
Puentes de
Hidrgeno
Hlice anfiptica
Haz de hlices
(bolsillo de unin)
Intercambiador Cl-/HCO3- :
banda 3/pAE1 del eritrocito
Capilares sistmicos
alta pCO2, baja pO2
(metabolismo tisular)
hemoglobina
Anhidrasa carbnica
eritrocito
Protena AE1
Capilares pulmonares
baja pCO2, alta pO2
(ventilacin)
Anhidrasa carbnica
eritrocito
Efecto Bohr
Canales inicos
Componentes funcionales
Filtro
Bocas: externa e interna Fick

Poro
Boca externa
Filtro selectivo
Sensor
Compuerta
Saturable
baja G
alto n recambio
(>107 ion/s)
poro
Sensor
compuerta
Boca interna
Topologa transmembrana
Activados por cNMP
Bsico: 2TM/P
Componentes adicionales
Bucle P
sensibles a Em
INa, IK, ICa
Unin de
nucletido
TM
No sensibles a Em
Activados por ligando
(R. Ionotrpicos)
IK ir
IK (Ca) big
IK (rep)
Unin de
ligando
Canales inicos: selectividad

Canal de K+:
estructura del poro
mal
ajuste
Buen
ajuste
Selectividad=
compensar desolvatacin
Bucle P
extracelular
citosol
Filtro
selectivo
compuerta
Poro
inico
Vista superior
Mecanismos de compuerta
Receptores ionotrpicos
fam. nAchR
fam. iGluR
fam. P2X
Canales dependientes
de voltaje
Na+, Ca2+
K+ etc.
de voltaje
Ca2+
K+ etc.
IK(M)
de voltaje y Ca2+
IK(Ca)
Canales dep. cAMP

(olor, gusto)
Canales dep. cGMP

(vista)
Canales dep. ATP

(clula )
Transporte
a nuclesidos
membranas
Estructura de

Bioenergtica

(mecanismos)
Difusin facilitada
V-ATPasas

Transcitosis
Ley de van't Hoff
Transporte activo primario:

ATPasas de Membrana
ATPasas tipo P
Tetrmeros 2/2
Asp-P (vanadato)
m. plasmtica y r. endoplsmico
Na+, K+, H+, Ca2+ (y otros)
asp-P P-asp
ATPasas tipo V y F
Muy complejas
3 integrales 8 perifricas
Exclusivamente H+
D. integral: canal de H+
D. perifrico: unin de ATP
Intracelular
ATP-sintasa mitocondrial
Lisosomas vesculas sinpticas
F: mitocondria
ATP
F1,
V1
citosol
matriz
Canal
de H+
F0, V0
citosol
V: vesculas
ATPasas tipo "transportadores ABC"

4 dominios 2T+2A
Estructura diversa
(mono-, di-, tetramricas)
Membrana plasmtica
Iones y compuestos orgnicos
citosol
ATP ATP
extracelular
Na+/K+-ATPasa de membrana
Estructura
Tetrmero 2/2
Sitio de unin de ATP intracelular
Asp-P
Subunidad :
esencial para plegamiento
3 N-glicosilada
1 TM
40 kD
Subunidad :
Centro activo
citosol
No glicosilada
10 TM
120 kD
extracelula
r
Funcin
Transporte vectorial
3 Na+ / 2K+ / 1ATP
Inhibida por vanadato
Inhibida por cardiotnicos
(ouabaina digoxina)
citosol
aspP
Pasp
extracelular
Actividad biolgica
control del volumen celular
control del pHi
control de [Ca2+]i
importacin de metabolitos
(cotransporte)
excitabilidad elctrica
citosol
Gradiente Na+/K+
25-30% consumo ATP
>60% en cerebro
Mecanismo de la Na+/K+-ATPasa
Cardiotnicos
ATPasas "transportador ABC"

Estructura
4 dominios 2T+2A
Estructura diversa
(mono-, di-, tetramricas)
MDR
CFTR
2T+2A fusionados
12 TM
Funcin
Membrana plasmtica
Exportacin de mol. hidrfobas (MDR1)
Canal de aniones (CFTR)
Destoxificacin
interferencia antitutorales
Frmacos quimioterpicos y MDR
Estructura del CFTR
Transporte
a nuclesidos
membranas
Estructura de
Bioenergtica
(mecanismos)
Difusin facilitada
V-ATPasas


Transcitosis
Ley de van't Hoff
Familias de transportadores
F. co-transportador Na+-glucosa
14 TM
1-2 Na+:1 sustrato
Intestinal (SGLT1), renal (SGLT2)
Sitio de
permeasa
F. co-transportador Na+/Cl- de neurotransmisores
12 TM
cotransporte Cl- obligado (antiporte K+)
2 Na+:1 Cl-:1 sustrato+
GABA, monoaminas, Gly/Pro, NTT4
exterior
Cocaina, anfetas, tricclicos
citosol
F. co-transportador de glutamato
8 TM
antiporte K+ obligado
1Na+:1Glu-/1K+:HOExclusivamente Glu sinptico
exterior
citosol
exterior
F. antiportador Na+/Ca2+
12 TM
3 Na+:1 Ca2+
citosol
F. transportador dependiente de H+
12 TM
Antiporte 2 H+:1 sustrato+
Vesculas sinpticas y lisosomas
(neurotransmisores)
Reserpina, extasis(H )
+
citosol
Luz vescula
Transportadores de membrana
y regulacin del pHi
glucosa
HOAntiportador Cl-/HOCl
acidificacin
glucosa
Antiportador Na+/H+
lactato
alcalinizacin
Activado por H+
Na+
amilrido
H+
CO2
H+
HCO3-
HCO3-
Cl
Na+
DIDS, SITS
intercambiador Cl-/HCO3-
Intercambiador Cl-/HCO3dependiente de Na+

HCO3acidificacin
acidificacin
inhibido por H+
Dependencia
del pH de los
transportadores
de H+ y HCO3-
velocidad relativa, %
activado por H+
intercambiador
Cl-/HCO3-
antiportador
Na+/H*
intercambiador
Na+ Cl-/HCO3pH intracelular
Transporte transepitelial de glucosa

SGLT
luz intestinal
[Na+] alta (dieta, secretado)

[glucosa] baja
glucosa
(activo)
activo
contra
gradiente
(pasivo)
2 Na+
Cl-
2 Na+
citosol
[Na+] baja
(12 mM)
[glucosa] alta
[K+] alta
(150 mM)
canal Cl-
Cl-
glucosa
canal K+
(pasivo)
gluc
ADP
Pi
ATP
3 K+
pasivo
a favor de
gradiente
Glut2
sangre
(permeasa)
[Na+] alta
[glucosa] media (5.5 mM)
[K+] baja (5 mM)
gluluz+2Na+luz
glucit
2Na+cit+3K+sangre+ATP
3K+cit
2Cl-luz
2Cl-cit
gluluz+2Na+luz+2Cl-luz+ATP
2 Na+
glucosa
3 K+
Cl-
Na+/K+-ATPasa
(activo)
glucit+2Na+cit
glusangre
2Na+sangre+3K+cit+ADP+Pi
3K+sangre
2Cl-cit
2Cl-sangre
glusangre+2Na+sangre+2Cl-sangre+ ADP+Pi
Transporte
a nuclesidos
membranas
Estructura de
Bioenergtica
(mecanismos)
Difusin facilitada
V-ATPasas
Transcitosis

Ley de van't Hoff
Potocitosis= endocitosis mediada por caveolina
Transporte
a nuclesidos
membranas
Estructura de
Bioenergtica
(mecanismos)
Difusin facilitada
V-ATPasas
Transcitosis
Ley de van't Hoff

Canales de agua: Acuaporinas
Regulacin del volumen celular/presin osmtica
Las membranas biolgicas

son muy permeables al agua
Acuaporinas: Estructura y funcin

Acuaporinas: canales de H2O
6TM (3+3 invertido)

Tetrmeros
Impermeable a iones y mol. pequeas
Columna de H2O
en poro
invertido
A
A'
B'
C' extracelular
citosol
Transporte 5108 s-1
directo
CHIP 28 kDa
Acuaporinas: localizacin y funciones

localizacin
funcin
AQP-1 ubicua: rinn, pulmn, Reabsorcin de agua en tbulos

ojo, plexos coroideos colectores; secrecin de fluido en humor
acuoso y lquido cefalorraquideo;
homeostasis de agua en el pulmn
AQP-2 Rinn: Tbulo colector Reabsorcin de agua (diabetes inspida)

AQP-3 Rinn: Tbulo colector Retencin de agua
AQP-4 cerebro: vellosidades Reabsorcin de lquido cefalorraquideo en
SNC. Regulacin del edema cerebral
aracnoideas
AQP-5 glndulas salivares,
lacrimales y epitelio
alveolar
secrecin de fluido

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Bocas: externa e interna Fick

Activados por cNMP

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