APLICACIN DE METODO PICO DE FLAUTA PARA CULTIVO DE

HONGOS Y OBSERVACION DE LOS MISMOS AL MICROSCOPIO

Prctico:

Fecha:

18/03/2015

Integrantes:

Romina Franco
Rina Tanaka
Johana Sosa
Patricia Alvarenga

En la clase prctica de la fecha se llevaron a cabo las siguientes

actividades: la implementacin del mtodo de la cinta para la observacin de
hongos en el microscopio, el aislamiento en picos de flauta, previamente
preparados, de los hongos observados y la preparacin de los nuevos pico de
flauta que posteriormente se utilizaron para el repique dichos hongos.

Mtodo de la cinta: Es un mtodo rpido para observar microscpicamente

los hongos sin alterar el arreglo de sus conidias.
Una de las desventajas es que si la cinta transparente no se presiona con
suficiente firmeza sobre la superficie de la colonia, la muestra no es adecuada,
ya que al no quedar bien adherida la cinta, las esporas o las hifas no se pueden
identificar
Procedimiento
1. Colocar sobre un portaobjetos una gota de solucin de lactofenol no
demasiado grande para evitar que el cubreobjetos flote y la preparacin
quede demasiado gruesa.
2. Cortar un trozo de cinta adhesiva transparente de aproximadamente
2cm.
3. Tocar con el lado adhesivo de la cinta la superficie de la fruta o el pan
enmohecidos o el borde de una colonia de hongo de un cultivo.
4. Pegar la cinta adhesiva sobre la gota del portaobjetos.
5. Eliminar el colorante sobrante con un papel de filtro.
6. Observar al microscopio

Los hongos
se
extrajeron

de un trozo de pan que bajo condiciones adecuadas de temperatura y

humedad, sirvi de sustrato para que dichos hongos pudieran crecer y
reproducirse.

Trozo de pan utilizado

para la extraccin de los
hongos observados

Observaciones microscpicas

Siembra en Pico de flauta: para obtener una mayor superficie de

cultivo, se deja enfriar el agar dentro de un tubo de ensayo inclinado,
debidamente esterilizado y manipulado en las formas establecidas
La siembra por puntura en agar inclinado o pico de flauta se
realiza de la siguiente manera:
Se toma el organismo que se quiere en este caso aislar
con una ansa de siembra esterilizada en la llama del
mechero
Introducir el ansa dentro del agar sin tocar el fondo o las
paredes del tubo
Retirarlo suavemente y sembrar en estras por la superficie
en pico de flauta

Pico de flauta ya preparado, listo para la siembra

Preparacin de nuevos medios de cultivo: para el posterior repique

de los organismos aislados, se procedi a la preparacin de un nuevo
medio de cultivo para lo cual se utilizaron los siguientes materiales:
1 vaso de precipitado
4 Erlenmeyer
1 vidrio reloj
1 probeta
1 cuchara/esptula
20 tubos de ensayo
20 tapones de algodn
El medio seleccionado para el repique es el P.D.A. (Potato Dextrose Agar), la
cantidad de polvo de P.D.A. utilizado fue de 12.6 gr para 300ml de lquido que
fue disuelto segn las indicaciones que mostraba el envase y luego distribuido
en los 20 tubos de ensayo con una cantidad de 15 ml del lquido para cada
uno. Los tubos fueron tapados y autoclavados. Al final del proceso de
autoclavado fueron colocados de forma horizontal con un cierto ngulo de
inclinacin, para que, al enfriarse queden formados los pico de flauta.