Clase 1 Microbiologia Basica y Aplicada A La Minera

FACULTAD DE RECURSOS DEL MAR-DEPARTAMENTO DE ACUICULTURA
Pila de Biolixiviacin 16 m. a 3300 msnm. Foto. Mario Esparza 2012.
Biotecnologa Minera y Lixiviacin

Microbiana
Dr. Mario Esparza Mantilla

Laboratorio de Biominera. Departamento de Acuicultura. Facultad de
Recursos del Mar. Universidad de Antofagasta. Chile.
mesparza@uantof.cl
Mayo 2013
Contenidos del curso Teorico-Prctico
Unidad I:
MICROBIOLOGIA
BASICA Y APLICADA A
LA MINERA
Unidad III.
OPERACIONES DE
BIOHIDROMETALURGICA
Microbiologa
Bioinformtica
Gentica
Biologa Molecular
BIOMINERIA
Bioprocesos
Bio-Hidrometalurga
UNIDAD II. LIXIVIACION MICROBIANA

A. ferrooxidans
A. caldus
FACULTAD DE RECURSOS DEL MAR-DEPARTAMENTO DE ACUICULTURA
I UNIDAD
Lixiviacin Microbiana
Desde las clulas microbianas a la obtencin industrial de metales
MICROBIOLOGIA BASICA Y APLICADA A LA MINERA
Entrenar a los estudiantes en tcnicas de muestreo, aislamiento,

conteo e identificacin molecular de microorganismos biolixiviantes.
CONTENIDOS:
1. Introduccin a la microbiologa. Los dominios de la vida. Bacterias,
arqueas y eucarias.
2. Cintica de crecimiento microbiano. Parmetros de anlisis.
3. Fisiologa Microbiana. Metabolismo auttrofo y hetertrofo,
nutrientes, demanda de oxgeno, carbono y sustratos energticos.
4. Muestreo y aislamiento de bacterias, recuento microbiano,
caracterizacin morfolgica y cultivos slidos y lquidos de bacterias y
arqueas biolixiviantes.
5. Identificacin molecular de microorganismos biolixiviantes. Anlisis
de ADN y marcadores genticos asociados al metabolismo energtico
de metales y al metabolismo de carbono.
Laboratorio de Biominera
I UNIDAD
OBJETIVOS:
Clase 1
Introduccin a la Microbiologa
Cintica de crecimiento microbiano
Zammit y cols ( 2010).
Fisiologa Microbiana
Clase 2
Muestreo y aislamiento de bacterias
Recuento y caracterizacin microbiana
Identificacin molecular y genmica
I UNIDAD
I UNIDAD
Las clulas microbianas digieren minerales
M2+
Fe2+
Zammit y cols ( 2010).
Fe3+
SO42- + 2H+
S
Sulfuro Metlico
(MFeS2)
1.
2.
Comprender como crecen y funciona la

clulas microbiana.
Entender el rol de la clula en un
ambiente extremo: pH cido, poco
sustrato, metales pesados, etc.
M2+
Bacterias Biolixiviantes
1. Cmo realiza el proceso?
2. Qu elementos biolgicos tiene para
digerir el mineral?
3. Cmo evade la toxicidad del metal,
mecanismos?
El 80% de la historia de la tierra fue

exclusivamente dominada por vida
microbiana.
I UNIDAD
El origen de los dominios de la vida
LUCA ( Last Universal Common Ancestor)
Brock Biology of the Microorganism, 13 ed (2012)
I UNIDAD
Los dominios de la vida
Virus
24 300 nm
Bacterias
0.5 5 m
Protozoos
1 10 m
Algas
10 m a
tamaos
mas
grandes
Hongos
(levaduras y
mohos)
6 m a
tamaos
mas
grandes
I UNIDAD
Tamaos de los microorganismos
I UNIDAD
Composicin qumica de las Bacterias
I UNIDAD
Tipos de Bacterias
I UNIDAD
Tipos de Bacterias
I UNIDAD
Estructura de la clula procariota
La mayora tiene pared celular

Algunas presentan capsula
Presentan cromosoma circular,
( algunos de forma linear)
Algunas presentan plsmidos
Algunas presentan Pili o flagelos.
Algunas
presentan
inclusiones
intracelulares (Glicgeno; carboxisomas,
magnetosomas).
Algunas pueden producir esporas.
I UNIDAD
Caractersticas de las Bacterias
I UNIDAD
Estructuras anatmicas de las Bacterias
I UNIDAD
Clasificacin de las Bacterias
Clasificacin de las Bacterias
GramI UNIDAD
Gram +
I UNIDAD
Cintica de crecimiento microbiano
I UNIDAD
Cintica del crecimiento microbiano
Las bacterias mineras extremo acidfilas presentan un

crecimiento poblacional lento ( desde das a semanas)
Cintica del Crecimiento Microbiano
I UNIDAD
Crecimiento de Acidithiobacillus ferrooxidans ATCC23270 en 9K+Azufre (control a pH: 1,5)
MADIGAN, M., MARTINKO, J. & PARKER, J. (2008). BROCK BIOLOGY OF THE MICROORGANISMS.
Li y cols. (2011). Folia Microbiol 56:439451
I UNIDAD
Tasa especfica de crecimiento () de bacterias

La ecuacin que describe el crecimiento, est dada por:
Ecuacin de Mond
N: cantidad de bacterias
t: Tiempo de incubacin
: Tasa de crecimiento bacteriano
Integrando:
N: Cantidad inicial de bacterias

t: Tiempo de generacin bacteriana
I UNIDAD
Tasa especfica de crecimiento () de bacterias
Las bacterias mineras extremo acidfilas presentan las

siguientes caractersticas
I UNIDAD
1. El habitad presenta escasos nutrientes

2. Condiciones de pH muy cidas
3. La distribucin de la fuente de Carbono y energa es heterognea
4. Inicio y termino del proceso con escasa densidad celular
5. La disponibilidad de 02 es diferentes para la mayora de las clulas
6. Las clulas no llegan a densidades mayores a 1010/ml

7. El metabolismo predominantes es quimiolitoauttrofo
8. Escasa materia orgnica para biosntesis celular
9. Alto estrs celular
10. Alta cantidad de metales pesados y iones txicos al metabolismo
celular bacteriano.
11. Dificultad de manipulacin gentica
I UNIDAD
Las clula biolixiviante Acidithiobacillus ferrooxidans se alimentan de CO2 y obtienen

energa de la oxidacin de Fe 2+,S, tiosulfato, H2 e Uranio.
Esparza y cols., (2009)
I UNIDAD
La fijacin de carbono en microorganismos quimiolitoauttrofos
Los carboxisomas almacenan CO2 en bacterias

quimilitoauttrofas
I UNIDAD
Metabolismo de CO2 y sntesis de compuestos orgnicos en Bacterias auttrofas
Bowien, (1997); Tabita, (2000); Omata y cols, (2000); Cerff, (2001), Romagnoli y tabita, (2007)
Esparza y cols., (2009)
I UNIDAD
Metabolismo microbiano
I UNIDAD
Metabolismo energtico en Bacterias
Bacterias Biolixiviantes
I UNIDAD
La membrana celular bacteriana
I UNIDAD
La membrana celular de bacterias y arqueas
I UNIDAD
Anatoma de la membrana Celular Bacteriana
Bacterias Gram (-)
I UNIDAD
Respiracin y cadena de energa de las Bacterias
Coenzima Q ( oxidada y reducida)
E0 (V)
I UNIDAD
Fuentes energticas para el crecimiento microbiano ( respiracin aerbica)
Azufre
-0,50
-0,30
+0,05
Hierro
+0,10
Generacin de la Fuerza Motriz Protnica

durante la respiracin aerbica de las Bacterias
I UNIDAD
Cantidad de energa producida por oxidacin de donadores de

electrones inorgnicos
I UNIDAD
I UNIDAD
Metabolismo de H2 en bacterias y produccin de material celular
I UNIDAD
Proceso de Oxidacin de azufre por bacterias
I UNIDAD
Proceso de Oxidacin de azufre por bacterias
I UNIDAD
Metabolismo del de azufre por bacterias
I UNIDAD
Transporte de electrones y conservacin de energa en bacterias reductoras del sulfato
I UNIDAD
Fuentes energticas para el crecimiento microbiano ( respiracin anaerbica)
A. ferrooxidans
S2O32-
S
1.5x0.5m
I UNIDAD
Fisiologa microbiana
3.0x0.25m
La morfolgica de la clulas lixiviantes depende del sustrato energtico

1.2x0.4m
A. caldus
2.4x0.2m
S2O32-
He, H y cols.(2010). Geomicrobiology Journal (27):707713.
I UNIDAD
Distribucin de Bacterias en partculas de suelo y restos orgnicos
Las Bacterias buscan un soporte inorgnico para formar colonias

I UNIDAD
Proceso de Oxidacin del Hierro por bacterias
Flujo de electrones durante la oxidacin de Fe 2+ por Acidithiobacillus ferrooxidans

I UNIDAD
Bacterias oxidantes del Hierro
I UNIDAD
Bacterias Biolixiviantes oxidantes del Fe 2+
I UNIDAD
I UNIDAD
I UNIDAD
I UNIDAD
Avances y modelos de Estudio
El manejo de la fuente de carbono incrementa la biomasa celular
Acidithiobacillus ferrooxidans en presencia de ms cantidad de CO2 en el medio

aumenta su densidad celular
La Combe & Luecking. (1990)

Resultados en la obtencin de oro por A. ferrooxidans
I UNIDAD
I UNIDAD
Resultados en la obtencin de metales por A. ferrooxidans al incrementar la fuente de

carbono
Se demuestra que la bacteria que

crece en exceso de CO2 se
aumenta el rendimiento de la
biolixiviacin, segn lo anterior se
debera a que hay ms biomasa
y por ende mayor capacidad
lixiviante.
Acevedo y cols. (1998). Biotech.let.20(3): 257-259.
I UNIDAD
Metabolismo del arsnico en bacterias
I UNIDAD
Preguntas

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Pila de Biolixiviacin 16 m. a 3300 msnm. Foto. Mario Esparza 2012.

Biotecnologa Minera y Lixiviacin

Dr. Mario Esparza Mantilla

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Desde las clulas microbianas a la obtencin industrial de metales

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Entrenar a los estudiantes en tcnicas de muestreo, aislamiento,

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Cintica de crecimiento microbiano

Zammit y cols ( 2010).

Muestreo y aislamiento de bacterias

Recuento y caracterizacin microbiana

Identificacin molecular y genmica

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MICROBIOLOGIA BASICA Y APLICADA A LA MINERA

MICROBIOLOGIA BASICA Y APLICADA A LA MINERA

Las clulas microbianas digieren minerales

Zammit y cols ( 2010).

Comprender como crecen y funciona la

Dr. Mario Esparza Mantilla

El 80% de la historia de la tierra fue

El origen de los dominios de la vida

LUCA ( Last Universal Common Ancestor)

Brock Biology of the Microorganism, 13 ed (2012)

Dr. Mario Esparza Mantilla

Los dominios de la vida

Brock Biology of the Microorganism, 13 ed (2012)

Dr. Mario Esparza Mantilla

Tamaos de los microorganismos

Dr. Mario Esparza Mantilla

Composicin qumica de las Bacterias

Brock Biology of the Microorganism, 13 ed (2012)

Dr. Mario Esparza Mantilla

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Estructura de la clula procariota

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La mayora tiene pared celular

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Caractersticas de las Bacterias

Estructuras anatmicas de las Bacterias

Brock Biology of the Microorganism, 13 ed (2012)

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Clasificacin de las Bacterias

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Brock Biology of the Microorganism, 13 ed (2012)

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Cintica de crecimiento microbiano

Cintica del crecimiento microbiano

Las bacterias mineras extremo acidfilas presentan un

Dr. Mario Esparza Mantilla

Cintica del Crecimiento Microbiano

Crecimiento de Acidithiobacillus ferrooxidans ATCC23270 en 9K+Azufre (control a pH: 1,5)

Li y cols. (2011). Folia Microbiol 56:439451

Dr. Mario Esparza Mantilla

Cintica del Crecimiento Microbiano

Tasa especfica de crecimiento () de bacterias

N: Cantidad inicial de bacterias