NORMA TCNICA

COLOMBIANA

NTC
4519
2009-04-15

MICROBIOLOGA DE LOS ALIMENTOS PARA

CONSUMO HUMANO Y ANIMAL.
MTODO HORIZONTAL PARA EL RECUENTO DE
MICROORGANISMOS. TCNICA DE RECUENTO
DE COLONIAS A 30 C

E:

MICROBIOLOGY OF FOOD AND ANIMAL FEEDING

STUFFS. HORIZONTAL METHOD FOR THE ENUMERATION
OF MICROORGANISMS COLONY-COUNT TECHNIQUE AT
30 DEGREES C

CORRESPONDENCIA:

esta norma es modificada (MOD) con

respecto a su documento de
referencia, la norma ISO 4833:2003.

DESCRIPTORES:

microbiologa;
alimentos
para
consumo humano; alimentos para
animales; deteccin y numeracin de
enterobacterias; tcnica de NMP;
tcnica con pre-enriquecimiento.

I.C.S.: 67.240
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC)
Apartado 14237 Bogot, D.C. - Tel. (571) 6078888 - Fax (571) 2221435

Prohibida su reproduccin

Primera actualizacin
Editada 2009-04-28

PRLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo

nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993.
ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.
La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica
est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo
caracterizado por la participacin del pblico en general.
La NTC 4519 (Primera actualizacin) fue ratificada por el Consejo Directivo el 2009-04-15.
Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.
A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a
travs de su participacin en el Comit Tcnico 25 Microbiologa.
3M COLOMBIA
ALIMENTOS POLAR COLOMBIA S.A.
ALPINA PRODUCTOS ALIMENTICIOS S.A.
ANNAR DIAGNSTICA IMPORT LTDA.
ARCHIVO DE BOGOT ALCALDA MAYOR
DE BOGOT
ASBIOQUIM LTDA.
BIANLISIS
BIOCONTROL LTDA.
BIOQUILAB LTDA.
BIOTRENDS LABORATORIOS LTDA.
CALIDAD INDUSTRIAL LTDA.
CARULLA VIVERO S.A.
CONGELAGRO S.A.
CASA LUKER
CREPES & WAFFLES S.A.
CONGELAGRO S.A.
CORPOLAC
ECOKAPKA
ENZIPN DE COLOMBIA LTDA.
INDUSTRIAS ALIMENTICIAS ZEN S.A.
INDUSTRIA PRODUCTORA DE ACEITES
RENOVABLES.
INSTITUTO DE GENTICA UNIVERSIDAD
NACIONAL DE COLOMBIA

IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA.

KOYOMAD S.A.
LABCONTROL E.U.
LABFARVE

LABORATORIO
DE
FARMACOLOGA VEGETAL
LABORATORIOS ERMA S.A.
LABORATORIOS GRAM
LABORATORIOS MICROLAB LTDA.
LABORATORIO SFC LTDA.
MERCADEO DE ALIMENTOS DE COLOMBIA
S.A.
MICROBILOGOS ASOCIADOS
NULAB LTDA.
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
PURIFICACIN Y ANLISIS DE FLUIDOS
LTDA
QUALA S.A.
SECRETARA DISTRITAL DE SALUD DE
BOGOT
SUIZO S.A.
UNIVERSIDAD DE LOS ANDES
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
VECOL S.A.
VILASECA LTDA.
VITROFARMA S.A.

Adems de las anteriores las siguientes empresas aportaron durante la consulta publica:
ACEGRASAS S.A.
ACUAGYR S.A. E.S.P.
ALGARRA S.A.
AQUALAB
AREPAS DOA ALEJA
ASEBIOL
ASINAL
ASOCIACIN COLOMBIANA DE CIENCIA
Y TECNOLOGA COSMTICA -ACCYTECASOCIACIN
COLOMBIANA
DE
MICROBIOLOGA
BAVARIA S.A.
BECTON DICKINSON DE COLOMBIA LTDA.
CALIDAD INDUSTRIAL LTDA.
CARULLA VIVERO S.A.
CERVECERA LEONA S.A.
COLOMBIANA S.A.
COMPAA NACIONAL DE CHOCOLATES
S.A.
CORPORACIN PARA EL AVANCE DE LA
MICROBIOLOGA Y LA MICROSCOPIA
MICROS

CORPOICA - CORPOLAB
DUPONT QUALICON
EMPRESA
DE
ACUEDUCTO
Y
ALCANTARILLADO DE BOGOT E.S.P.
FABRICA
DE
ESPECIAS
Y
CONDIMENTOS EL REY S.A.
FRUGAL S.A.
JOHNSON DIVERSEY
KLIK S.A
LABORATORIO A.B.B.A
LABORATORIO BIOCONTROL LTDA.
LABORATORIO DE GENTICA Y BIOLOGA
MOLECULAR
LA CAMPIA
MICROBIOLOGOS ASOCIADOS LTDA.
MULTIDIMENSIONALES S.A.
NESTL DE COLOMBIA S.A.
QUIK LTDA.
ROCHE DIAGNOSTICS
SERVICIOS DE LABORATIO CLNICO
LTDA.
UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN

ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales.
DIRECCIN DE NORMALIZACIN

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NTC 4519 (Primera actualizacin)

RESUMEN

CONTENIDO

Pgina
INTRODUCCIN ......................................................................................................................1

1.

OBJETO Y CAMPO DE APLICACIN ........................................................................1

2.

REFERENCIAS NORMATIVAS ...................................................................................2

3.

TRMINOS Y DEFINICIONES .....................................................................................2

4.

PRINCIPIO....................................................................................................................2

5.

MEDIOS DE CULTIVO Y DILUYENTES ......................................................................2

5.1

DILUYENTES ...............................................................................................................3

5.2

AGAR PARA RECUENTO EN PLACA (PCA) .............................................................3

5.3

MEDIO DE RECUBRIMIENTO ....................................................................................4

6.

APARATOS Y MATERIAL DE VIDRIO .......................................................................4

6.1

APARATO PARA ESTERILIZACIN EN SECO (HORNO) O

ESTERILIZACIN HMEDA (AUTOCLAVE) .............................................................5

6.2

ESTUFA DE INCUBACIN ..........................................................................................5

6.3

CAJAS DE PETRI ........................................................................................................5

6.4

PIPETAS.......................................................................................................................5

6.5

BAO DE AGUA ..........................................................................................................5

6.6

EQUIPO DE RECUENTO DE COLONIAS ...................................................................5

6.7

PH-METRO ...................................................................................................................5

6.8

TUBOS DE ENSAYO ...................................................................................................5

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NTC 4519 (Primera actualizacin)

RESUMEN

Pgina

7.

TOMA DE MUESTRAS ................................................................................................5

8.

PREPARACIN DE LA MUESTRA PARA ANLISIS ................................................5

9.

PROCEDIMIENTO........................................................................................................6

9.1

PORCIN PARA ANLISIS, SUSPENSIN INICIAL Y DILUCIONES ......................6

9.2

SIEMBRA E INCUBACIN ..........................................................................................6

9.3

RECUENTO DE COLONIAS ........................................................................................6

10.

EXPRESIN DE LOS RESULTADOS .........................................................................7

10.1

MTODO DE CLCULO..............................................................................................7

10.2

PRECISIN ..................................................................................................................7

10.3

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS ANALTICOS .......................................7

10.4

LMITES DE CONFIANZA ............................................................................................8

11.

INFORME DE ANLISIS..............................................................................................8

BIBLIOGRAFA ......................................................................................................................10
ANEXOS
ANEXO A (Informativo)
UTILIZACIN DE LA DIFERENCIA CRTICA (DC) PARA LA INTERPRETACIN
DE LOS RESULTADOS...........................................................................................................9
ANEXO B (Informativo)
CUADRO DE DIFERENCIAS ENTRE LA NTC4519 (Primera actualizacin) y la
ISO 4833:2003 .......................................................................................................................12

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NTC 4519 (Primera actualizacin)

RESUMEN

MICROBIOLOGA DE LOS ALIMENTOS

PARA CONSUMO HUMANO Y ANIMAL.
MTODO HORIZONTAL PARA EL RECUENTO DE
MICROORGANISMOS. TCNICA DE RECUENTO
DE COLONIAS A 30 C

INTRODUCCIN
Dada la gran variedad existente de productos alimenticios destinados al consumo humano y animal
este mtodo horizontal puede no ser directamente aplicable para ciertos productos. En estos casos,
se pueden emplear diferentes mtodos, especficos para estos productos, si est absolutamente
justificado por razones tcnicas. Sin embargo, se debera intentar aplicar este mtodo horizontal
siempre que sea posible.
Cuando se revise esta norma nacional, se tendr en cuenta toda la informacin disponible en ese
momento, sobre la aplicacin de este mtodo y las razones que han originado desviaciones para
productos concretos.
La armonizacin de los mtodos de anlisis no puede ser inmediata y, para ciertos grupos de
productos pueden existir ya normas internacionales que no se ajusten a este mtodo horizontal. Se
espera que cuando esas normas se revisen, se cambien para que se ajusten a esta norma
nacional y que solo se conserven las divergencias inevitables justificadas por razones tcnicas.
Esta norma es una adopcin modificada (MOD) por traduccin, respecto a su documento de
referencia, la norma ISO 4833:2003. Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs. Horizontal
Method for the Enumeration of Microorganisms Colony-Count Technique at 30 Degrees C

1.

OBJETO Y CAMPO DE APLICACIN

Esta norma nacional especifica un mtodo horizontal para el recuento de microorganismos, contando
las colonias que crecen en un medio slido despus de la incubacin aerbica a 30 C. Esta norma
nacional es aplicable a los productos destinados al consumo humano o animal, aunque sujeta a las
limitaciones expuestas en la introduccin.
La aplicabilidad de esta norma nacional al examen de determinados alimentos fermentados y
alimentos para animales es limitada. Para el examen de determinados alimentos fermentados y
alimentos para animales, pueden ser ms apropiados otros medios y/u otras condiciones de
incubacin.

1 de 12

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2.

NTC 4519 (Primera actualizacin)

RESUMEN

REFERENCIAS NORMATIVAS

Las normas que a continuacin se relacionan contienen disposiciones vlidas para esta norma
nacional. En el momento de la publicacin estaban en vigor las ediciones indicadas. Toda
norma est sujeta a revisin por lo que las partes que basen sus acuerdos en esta norma
nacional deben estudiar la posibilidad de aplicar la edicin ms reciente de las normas
indicadas a continuacin. Los miembros de CEI y de ISO poseen el registro de las normas
internacionales en vigor en cada momento.
NTC 4491-1, Microbiologa de los alimentos para consumo humano y animal. Preparacin de
las muestras de ensayo, suspensin inicial y las diluciones decimales para examen
microbiolgico Parte 1: Reglas generales para la preparacin de la suspensin inicial y de
diluciones decimales
NTC 4092, Microbiologa de los alimentos para consumo humano y animal. Reglas generales
para los exmenes microbiolgicos
GTC 78, Microbiologa de alimentos y alimentos para animales. Gua para la preparacin y
produccin de medios de cultivo. Gua general para el aseguramiento de la calidad para la
preparacin de los medios de cultivo en el laboratorio.
ISO 8261, Leche y productos lcteos. Directrices generales para la preparacin de muestras
para anlisis, suspensiones iniciales y diluciones decimales para el examen microbiolgico.
ISO 4833-2, Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs. Horizontal Method for the
Enumeration of Microorganisms. Surface Colony Count Technique at 30 C.

3.

TRMINO Y DEFINICIN

Para los propsitos de esta norma nacional, se aplica el siguiente trmino y definicin.
3.1 Microorganismo. Bacterias, levaduras y mohos que forman colonias contables, producidas
en las condiciones especificadas en esta norma nacional .

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NTC 4519 (Primera actualizacin)

RESUMEN

BIBLIOGRAFA

[1]

PITON, C., GRAPPIN, R. A Model For Statistical Evaluation Of precision Parameters Of

Microbiological Methods: Application To Dry Rehydratable Film Methods And IDG
Reference Methods For Enumeration Of Total Aerobic Mesophilic Flora And Coliforms In
Raw Milk. J AOAC, 74, 1991, pp. 92-103.

[2]

SCOTTER, S., ALDRIDGE. M., BACK, J., WOOD, R. Validation of European Community
Methods for Microbiological and Chemical Analysis of Raw and Heat-Treated Milk. J.
Assoc. Publ. Analyst., 29, 1993, pp.I-32.

[3]

DAHMS. S., WEISS, H. Estimation of Precision Values for Microbiological Reference

Methods: Standardized Pour Plate Technique. Milchwiss., 53, 1998, pp.555-559.

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NTC 4519 (Primera actualizacin)

RESUMEN

IMPORTANTE

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