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BIOSENSORES

Son dispositivos compactos de anlisis conformados por un


elemento de reconocimiento biolgico (cido nucleico, enzima,
anticuerpo, etc.) asociado a un sistema de transduccin que permite
procesar la seal producida por la interaccin entre el elemento de
reconocimiento y el analito.
El principio de deteccin de un biosensor se basa en la interaccin
especfica entre el compuesto o microorganismo de inters y el
elemento de reconocimiento.

Como resultado de esa unin se produce la variacin de una o varias


propiedades fisicoqumicas (pH, transferencia de electrones, de calor,
variacin de propiedades pticas, etc.) que detecta el transductor.

Este sistema transforma la respuesta


del elemento de reconocimiento en
una seal electrnica indicativa de la
presencia del analito sometido a
estudio o proporcional a su
concentracin en la muestra..
El trmino biosensor comenz a
utilizarse a partir de 1,977,
designando como tal la unin entre
un material biolgico y un
transductor fsico
A partir de ese momento, el diseo
y las aplicaciones de los biosensores
en distintos campos de la qumica
analtica y en el control de procesos
on line ha continuado creciendo.

Funcionamiento General de los Biosensores


Elementos Componentes del Sistema:
Elemento de
Reconocimiento

Analito

Otros componentes
de la muestra

Funcionamiento:

En una muestra compleja, el elemento de reconocimiento


biolgico es capaz de discriminar entre los distintos
componentes de la misma e interaccionar con el compuesto
a analizar.
Una vez producida la interaccin se dispara una seal que
es conducida por el transductor.
La seal as transmitida es convenientemente registrada y almacenada para su
posterior tratamiento.

Caractersticas de los Biosensores


Alta Sensibilidad: para el anlisis de ciertos analitos con efectos txicos
sobre la salud humana y animal, incluso a concentraciones del orden de partes
por billn.

Alta Selectividad: para que el dispositivo interaccione exclusivamente con el


compuesto de inters y no con otros de propiedades similares. Se consigue
mediante elementos de reconocimiento muy especficos.

Alta Fiabilidad: Los sistemas de transduccin se disean de manera que no


puedan ser alterados (o sean mnimamente) por la muestra y no tengan
problemas de ruidos.

Tiempo de vida largo: que no obligue a sustituciones frecuentes del


dispositivo siesta integrado a la lnea de produccin de la industria. La
estabilidad qumica, fsica y mecnica del elemento de reconocimiento
condicionan su duracin; sin embargo, debemos considerar de que los
componentes biolgicos por su propia naturaleza cuentan con una vida media
limitada.

Bajo costo de produccin: En produccin a gran escala bajan los costos


(economa de escala); sin embargo, la disponibilidad limitada de algunas enzimas
y la existencia de fases crticas en su construccin dificultan la fabricacin en
masa.

Tiempo de anlisis corto: que posibilite un tiempo de actuacin rpida


(retiro o correcciones). Muchos biosensores consumen pocos minutos en
cuantificar el compuesto de inters y no requieren de un periodo de espera largo
hasta el siguiente anlisis.

Pretratamiento de la muestra innecesario: que conlleva a un ahorro de


tiempo, materiales y reactivos; sin embargo, en ciertas determinaciones son
imprescindibles las etapas de concentracin y purificacin, para asegurar la
eliminacin de interferencias y la presencia de una cantidad suficiente de analito
en el pequeo volumen utilizado.

Manejo sencillo: Esta tecnologa no requiere personal cualificado.


Capacidad de Anlisis en Tiempo Real: esta caracterstica es de especial
importancia en Control de Procesos, ya que permite controlar los parmetros
deseados de forma inmediata y automtica.

Porttiles: para que sea posible realizar anlisis in situ.


Automatizables: Prescindir del control manual de estas unidades facilita su
integracin dentro de los sistemas que monitorizan los procesos industriales.

Miniaturizables: Gracias al desarrollo de la microelectrnica y la


nanotecnologa, se ha logrado reducir las dimensiones de estos dispositivos. Es
por ello que pueden ensamblarse varios dispositivos en un mismo sistema que
realiza varias tareas a la vez o que el volumen de la muestra o localizacin de la
medida son factores limitantes.

Pocos requerimientos operativos y de almacenamiento: que faciliten su


empleo y no supongan un coste adicional. En el caso de los componentes
biolgicos pueden necesitar condiciones controladas (pH, Temperatura) para su
uso y conservacin debido a su baja estabilidad

Capacidad de Multianlisis: Ciertos sensores llevan a cabo la


determinacin de diferentes analitos en forma simultnea.

Clasificacin de los Biosensores


Los Biosensores pueden clasificarse en funcin del tipo de interaccin que se
establece entre el elemento de reconocimiento y el analito; el mtodo utilizado
para detectar dicha interaccin; la naturaleza del elemento de reconocimiento; o
el sistema de transduccin.

En la prctica, la eleccin del material biolgico depende de las caractersticas


del compuesto a analizar. Por ejemplo si se trata de detectar una sustancia
alrgena se utilizan anticuerpos.
La eleccin del transductor esta condicionada por el tipo de elemento de
reconocimiento elegido, ya que ste determina cul ser la variacin en las
propiedades fsico-qumicas que ocurra como consecuencia de la interaccin.

Tipos de Interaccin
Sensores

BIOCATALTICOS:

se basan en la utilizacin de
biocatalizadores, que son elementos que favorecen que ocurra una reaccin
qumica en la cual a partir de uno o varios sustratos se forman uno o varios
productos conocidos sin consumo del biocatalizador, que se regenera y puede ser
utilizado de nuevo.
Enzimas
Clulas Completas (bacterianas, fngicas, protozoos, etc.)
Orgnulos Subcelulares (cloroplastos completos, tilacoides o mitocondrias)
Tejidos

Sensores de BIOAFINIDAD: se basan en la interaccin del analito de


inters con el elemento de reconocimiento, sin que exista transformacin
cataltica, sino que se produce una reaccin de equilibrio en la que se forma un
complejo analito-receptor.
Anticuerpos
Receptores
Clulas Completas
Lectinas
cidos Nucleicos, etc.

Tcnicas de Inmovilizacin

Sistemas de Transduccin
Transductor, es el elemento que convierte las variaciones de las propiedades
fsicas o qumicas que se producen por la interaccin entre el elemento de
reconocimiento y el analito en una seal que puede ser amplificada, almacenada
y registrada.

Transductor Electroqumico:
Transforma la seal que se produce por la interaccin entre el sistema de
reconocimiento y el analito a detectar, en una seal elctrica.

En un sensor electroqumico amperomtrico, la interaccin entre el elemento de reconocimiento y


el analito provoca la conversin electroqumica de una especie redox que genera una corriente
elctrica.

Se tiene cuatro tipos de transductores, conductimtricos, potenciomtricos


amperomtricos e impedimtricos, en funcin de si se detectan cambios en la
conductividad, en el potencial, en una corriente generada o en la impedancia.
En general se utilizan con los elementos de reconocimiento biocatalticos ya
que las reacciones enzimticas generan aparicin de sustancias electro activas,
cambios en el pH o en el potencial, etc.

Dentro de los aspectos favorables y contrarios de estos transductores tenemos:

Transductor ptico:
Los transductores pticos se basan en la medicin de las variaciones que se
producen en las propiedades de la luz como consecuencia de la interaccin fsica
o qumica entre el analito a detectar y el elemento de reconocimiento biolgico
del biosensor.
Las bases fsicas de este tipo de sensores son los cambios que ocurren en
absorcin, fluorescencia, luminiscencia, dispersin o ndice de refraccin,
cuando la luz se refleja en las superficies de reconocimiento.
Los transductores que tiene propiedades pticas son muy variados en funcin
de las propiedades, incluyendo sensores de fibra ptica (mas usados), de
resonancia de plasmodes y de onda evanescente.

1. Sensor de Fibra ptica (optopodo u optropodo):


Consisten en una fibra ptica, en uno de sus extremos se inmoviliza el
elemento de reconocimiento (tipo biocataltico o de bioafinidad), y en el
otro el elemento de deteccin.
Es necesaria la utilizacin de marcadores, que pueden ser indicadores
pticamente activos como colorantes sensibles al pH, a la concentracin de
O2 o H2 O2, molculas fluorescentes y en menor medida, molculas bio o
quimioluminiscentes.
Como consecuencia entre la interaccin entre el analito y el elemento de
reconocimiento se produce un cambio detectable en el marcador que se
propaga por la fibra ptica hacia el detector.

Transductor Piezoelctrico:
Los sistemas de transduccin piezoelctricos, msicos, gravimtricos o
acsticos miden cambios directos de masa inducidos por la formacin del
complejo antgeno-anticuerpo.
Los cristales se recubren con el elemento de reconocimiento (que suele ser de
bioafinidad anticuerpos, lectinas, etc.) y se pone en contacto con la muestra que
contiene el analito que se desea detectar.

Como consecuencia de la interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito, se produce


un cambio en la frecuencia de resonancia del cristal.

Los dos tipos principales son:


Bulk acoustic wave (BAW): La resonancia ocurre en toda la masa del cristal
Surface acoustic wave (SAW): La resonancia ocurre solo en la superficie del
cristal

Dentro de los aspectos favorables y contrarios tenemos:

Transductor Termomtrico:
Los sistemas de transduccin termomtricos se basan en la deteccin del calor
generado en las reacciones enzimticas exotrmicas que se pueden relacionar con
la concentracin del analito.
Los cambios de temperatura mencionados normalmente se determinan por
medio de termistores a la entrada y a la salida del dispositivo en el que se
encuentran inmovilizadas las enzimas.

Como consecuencia de la interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito, se produce


una reaccin exotrmica que es proporcional a la concentracin de analito. El inconveniente que
presentan es las prdidas de calor por radiacin, conduccin o conveccin que puedan tener.

Transductor Nanomecnico:
En los transductores nanomecnicos el elemento de reconocimiento biolgico
se inmoviliza sobre una superficie de una micropalanca de silicio, que se
sumerge en una muestra lquida.
La interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito produce un
cambio diferencial en la tensin superficial del lquido y la micropalanca sufre
una respuesta de tipo nanomecnico que consiste en un cambio en la deflexin y
de la frecuencia de resonancia.

El aumento de la masa, producto de


la interaccin entre el analito y el
elemento de reconocimiento provoca
un curvamiento de la micropalanca.

Control de Procesos
Los sistemas de monitorizacin continua en un proceso industrial permiten
detectar en tiempo real los posibles errores de la cadena de produccin para
subsanarlos de manera inmediata.
Hasta el momento se ha utilizado en el control de parmetros como el pH, la
temperatura, la presin, etc. Gracias a las tecnologas de biosensores ahora
tambin pueden determinarse y cuantificarse on line diversos compuestos de
gran importancia.

Compuestos monitorizados en tiempo real mediante la tecnologa de los biosensores.

La utilizacin de biosensores para la monitorizacin en tiempo real de los


analitos mencionados en la tabla anterior, conlleva a menores prdidas
econmicas para el fabricante.
Adicionalmente, estos dispositivos pueden integrarse en el sistema de Anlisis
de Peligros y Puntos de Control Crtico (APPCC) y verificar que el proceso se
ha realizado correctamente.
A pesar de todo, esta tecnologa ve limitado su uso en el control de procesos
por varios motivos:
El corto tiempo de vida de los sensores enzimticos.
La necesidad de calibrarlos con frecuencia.

Falta de una respuesta fiable a diferentes concentraciones o con condiciones


variables en el medio.

Bibliografa
www.madrimasd.org/informacinidi/biblioteca/publicaciones/doc/vt-1
vtbiosensores.pdf

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