degradador de compuestos cianurados en cultivos de papa (Solanum tuberosum ) INTRODUCCION El cianuro (CN) es el compuesto lixiviante ms utilizado en la industria metalrgica de metales preciosos por su gran afinidad con el oro y la plata. Este compuesto tambin est presente en sustancias u!micas ue se utilizan para el revelado de fotograf!as" producci#n de papel" textiles y plsticos ($%$&'(N" )*+," $-C./ $. et al." ,001). 2or tanto estas industrias adems de ser grandes consumidoras de CN" son fuente de contaminaci#n ambiental por la utilizaci#n de este compuesto. 'u alta toxicidad y su efecto in3ibitorio en la respiraci#n celular son conocidos desde la segunda dcada del siglo 44 y estn relacionados a su especiaci#n fisicou!mica. /a especie ms t#xica es la forma 5CN" CN6 mientras ue los comple7os con metales (8e(CN)9 16 " 8e(CN)9 :6 son relativamente menos t#xicos ((;%<E5$N." -. et al." ,00," -;N= %.$" et al.")**>). /a degradaci#n natural del cianuro o por procesos u!micos se emplea actualmente para detoxificar desec3os y?o efluentes contaminados" siendo la primera forma la de mayor inters para la industria por los altos costos ue genera la utilizaci#n de productos u!micos. &uc3os estudios enfocados a la atenuaci#n natural del CN" 3an concluido ue la concentraci#n de este compuesto disminuye con el tiempo debido a fen#menos de volatilizaci#n" precipitaci#n" comple7aci#n" adsorci#n y biodegradaci#n mediada por microorganismos nativos ((;%<E5$N." -. et al." ,00," $-C./ $." ,001). &uc3os autores (-;N= %.$" et al.")**>" $-C./ $." ,001" @$NA C.'." et al.")**9) 3an documentado la 3abilidad de ciertos microorganismos para resistir y crecer en cianuro tomndolo como fuente de nitr#geno. %e lo anterior se deduce ue el tratamiento biol#gico de fuentes contaminadas con CN" provee una alternativa econ#mica y efectiva sin generar o aBadir u!micos en el ambiente ($-C./ $." ,001). ;na de las especies &icrobianas ue ms se 3a estudiado por su capacidad de degradar compuestos cianurados es Pseudomonas fluorescens ((;%<E5$N." -. et al." ,00," $-C./ $." ,001). En este traba7o se prob# la alternativa biotecnol#gica de degradar cianuro empleando una cepa nativa de P. fluorescens. OBJETIVOS ). /ograr aislar bacterias con capacidad degradadora de cianuro a travs de papa ('olanum tuberosum). ,. Cerificar sus usos en la lixiviaci#n de suelos afectados. MATERIALES Y METODOS Recoleccin de muestrs &uestras de ra!ces completas obtenidas de plantas de Solanum tuberosum Trtmiento de l muestr 2seudomonas fluorescentes de la rizosfera y rizoplano sern aisladas de acuerdo con algunas modificaciones realizadas a la metodolog!a de /emanceau et al. ()**D). /as suspensiones rizosfricas se obtendrn lavando suavemente diez gramos de ra!z por cada planta en *0 ml de &g'(:.+5,0.0") & previamente esterilizada. /as suspensiones de rizoplano sern obtenidas agitando (a 900 rpm) el sistema radicular previamente tratado" en presencia de *0 ml de una soluci#n de &g'(:.+5,( 0") &" en la cual se 3an adicionado ,0 perlas de vidrio estriles. Esta VALDERRAMA BELLIDO CRISTIAN VALENCIA PORTILLO RUTH agitaci#n se realizara durante diez minutos (%andurand and -nudsen" )**+E /emanceau et al., )**D). 2osteriormente se realizan diluciones seriadas de los dos tipos de muestras" las cuales sern posiblemente plateadas en medio -ing F modificado. Cada diluci#n ser incubada por +, 3 a ,DGC. /a diluci#n con un recuento entre )0 y 10 unidades formadoras de colonias (ufc) de pseudomonas fluorescentes sern contadas en presencia de luz ;C (a una longitud de onda de 10, nm). ;n mximo de D colonias de pseudomonas fluorescentes por muestra rizosfrica analizada" se seleccionaran aleatoriamente" con el ob7eto de caracterizarlas mediante el sistema de pruebas biou!micas de la casa comercial Fiomerioux $2. ,0 NE. Cada uno de los aislamientos sern caracterizados taxon#micamente por criopreservados a 6+0GC en medio A3erna ()*>9).