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Balance de Masa de M.O.
Balance de Masa de M.O.
(
=
o
=
o
=
1
(8.5)
de modo que:
1 i 1 i
1 1
1 i 1 i
s P s P
s x s
s s s s
r Y r
r Y
r Y r
=
=
=
(8.6)
Los coeficientes de rendimiento verifican la siguiente relacin:
ji
ij
Y
1
Y = (8.7)
8.8.1. Unidades de velocidad de reaccin
Las unidades usadas para las diferentes velocidades de reaccin de los
componentes que participan de la reaccin son las siguientes:
h g / ) mol o ( g r
h
h g / ) mol o ( g r
o sec peso P P P
1
o sec peso s s s
i i i
i i i
=
=
=
Los gramos de peso seco (g
PS
) se refieren a los gramos de peso seco de biomasa.
De acuerdo a las unidades definidas para las velocidades de reaccin, los coeficientes de
rendimiento tendrn las siguientes unidades:
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.14
1 i i 1
1 1
1 i i 1
s P P s
s / ) oPS ( biomasa x s
s s s s
g / g Y
g g Y
g / g Y
=
=
=
8.8.2. Determinacin de los coeficientes estequiomtricos - Balances
elementales
Para plantear los balances de elementos, los cuales son una herramienta para
determinar coeficientes estequiomtricos, es necesario conocer la composicin elemental de
cada reactivo y producto. Consideremos la siguiente reaccin biolgica, que corresponde al
crecimiento de las saccharomyces cerevisae (habitualmente usadas para la fermentacin
alcohlica) en forma aerbica sobre glucosa
o
1
C
6
H
12
O
6
+ +o
2
O
2
+o
3
NH
3
CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ |
1
CO
2
+ |
2
H
2
O
Ahora veamos los pasos que seguiremos para determinar la estequiometra de esta
reaccin:
1. Llevamos los tomos de C a 1 en cada molcula en la cual exista este elemento:
o
1
C H
2
O + o
2
O
2
+o
3
NH
3
CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ |
1
CO
2
+ |
2
H
2
O
2. Dividimos por o
1:
C H
2
O + Y
s1s2
O
2
+ Y
s1s3
NH
3
Y
s1x
CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ Y
s1P1
CO
2
+ Y
s1P2
H
2
O
3. Planteemos los balances de los elementos C,H,O y N, para ello consideremos los
valores absolutos de los rendimientos:
Balance de C
1 - Y
s1x
- Y
s1P1
=0
Balance de H
2 + 3 Y
s1s3
1.70Y
s1x
-2Y
s1P2
=0
Balance de O
1+2 Y
s1s2
-0.46Y
s1x
-2Y
s1P1
- Y
s1P2
=0
Balance de N
Y
s1s3
- 0.17 Y
s1x
=0
Hay 5 rendimientos que determinar ( o lo que es lo mismo 6 coeficientes
estequiomtricos), sin embargo disponemos de 4 ecuaciones linealmente
Sacchromyces
cerevisae
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.15
independiente. Esto indica que un rendimiento debe ser informacin experimental.
Segn la ecuacin (8.6) un rendimiento puede calcularse si se sabe un par de
velocidades. Por ejemplo haciendo una reaccin biolgica en un reactor TAC,
podemos determinar valores de velocidad de reaccin.
Para el ejemplo que estbamos tratando se conoce el llamado coeficiente de
respiracin o (respiratory quotient- RQ), el cual es:
RQ=1.033=|
1
/o
2
= Y
s2P1=
Y
s1P1
/ Y
s1s2
, esto implica que:
Y
s1P1
=1.033 Y
s1s2
Esta es una quinta ecuacin que junto con los balances elementales permiten el
clculo de los coeficientes estequiomtricos, los que para el ejemplo resultan:
C H
2
O + 0.657O
2
+ 0.055 NH
3
0.321 CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ 0.679CO
2
+ 0.809H
2
O
Observaciones finales importantes
- Dados los balances elementales, si el nmero de incgnitas es mayor a 4,
entonces se requerir informacin experimental.
- El rendimiento Ys1H20 o cualquier otro que este relacionado con el agua NO es
recomendable medir. Las reacciones biolgicas se llevan a cabo en medios
lquidos, de modo que el agua metablica generada ser mucho menor que la
existente en el medio de cultivo, de manera que pueden existir grandes errores
experimentales en la determinacin.
- No todos los rendimientos conducen a una solucin del sistema lineal de
ecuaciones generado por los balances de masa.
8.9. CINTICA DE CRECIMIENTO
La velocidad con que ocurre una reaccin biolgica puede ser modelada asumiendo
diferentes hiptesis. En la figura 8.10 se presentan los diferentes modelos aplicables a las
reacciones biolgicas.
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.16
Modelos No
Estructurados
Modelos
Estructurados
No segregado
"CAJA NEGRA"
Segregado
CASO REAL
Figura 8.10. Representacin matemtica de cinticas biolgicas
Los modelos segregados son complejos ya que a las clulas se las reconoce como
discretas. Estos modelos pueden reconocer como diferentes a las "clulas ms viejas" de
las "clulas ms jvenes". En cambio en los modelos no segregados se considera que una
"clula promedio" puede representar toda la poblacin.
Los modelos estructurados modelan a la clula (a la biomasa) como un sistema de
componentes mltiples (ribosomas, enzimas, membranas,etc.). Como caso ms simple, se
presentan los modelos no estructurados donde todos los componentes celulares se
representan por una nica concentracin, la de la biomasa (X). Una reaccin biolgica real
debera ser representada por un modelo segregado estructurado. Sin embargo, los modelos
no segregados no estructurados son usados por su simplicidad matemtica y por su
capacidad de representar adecuadamente un vasto conjunto de reacciones biolgicas de
inters. Los modelos no segregados no estructurados suelen llamarse del tipo "Caja
Negra".
8.9.1. Velocidad de reaccin enzimtica
Antes de introducir las velocidades de reaccin biolgica ms empleadas,
discutiremos el mecanismo de una reaccin enzimtica.
Entendemos por reaccin enzimtica, cualquier reaccin qumica que sea catalizada
por una enzima (que es una protena). Las enzimas permiten la produccin de qumicos con
una especificidad muy elevada a ciertos ismeros. Las reacciones enzimticas no tienen por
que estar asociadas al crecimiento de bacterias en forma simultnea, de hecho no es
necesario la existencia de bacterias en un medio para que se d una reaccin enzimtica.
Consideremos la siguiente reaccin:
P S
1
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.17
Si ahora consideramos que la reaccin anterior es catalizada por una enzima E, el
mecanismo que puede ocurrir es el siguiente:
E P ES
ES E S
K
K
K
+
+
3
2
1
*
1
*
1 1
donde
*
1
ES representa un complejo enzima-sustrato. Suponiendo que en el mecanismo
anterior la ltima etapa controla el proceso (8.8) y que el complejo se encuentra en estado
pseudo estacionario (8.9) (si no recuerda estos conceptos de fisicoqumica, ver Captulo 6)
se obtiene:
| |
*
1 3
ES k r
P
= (8.8)
| || | | | | |
*
1 3
*
1 2 1 1
0 ES k ES k E S k = (8.9)
Despejando la concentracin del complejo de la ecuacin anterior, resulta:
| |
| || |
3 2
1 1 *
1
k k
E S k
ES
+
= (8.10)
adems la concentracin de enzimas totales ( lo cual es un dato conocido) debe cumplir con
la siguiente ecuacin:
| | | | | |
| || |
| |
| | | |
| |
| |
| |
| |
( )
| |
(
+ +
+
=
=
|
|
.
|
\
|
+
+ +
=
|
|
.
|
\
|
+
+
=
+
+
= + =
3 2 1 1
3 2
3 2
3 2 1 1
3 2
1 1
3 2
1 1 *
1
/
1 /
k k S k
k k E
E
k k
k k S k
E
k k
S k
E E
E
k k
E S k
E ES E
T
T
T
T
(8.11)
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.18
Reemplazando la ltima expresin de la ecuacin (8.11) en (8.10) resulta:
| |
| |
( )
| |
| || |
| |
3 2 1 1
1 1
3 2
3 2 1 1
3 2
1 1
*
1
k k S k
E S k
k k
k k S k
k k E
S k
ES
T
T
+ +
=
+
|
|
.
|
\
|
+ +
+
= (8.12)
Ahora ya contamos con la expresin del complejo para ser reemplazada en la
velocidad de reaccin definida por (8.8)
| || |
| |
| |
| |
m
T
P
K S
S V
k k S k
E S k k
r
+
=
|
|
.
|
\
|
+ +
=
1
1 max
3 2 1 1
1 3 1
(8.13)
La ecuacin (8.13) es conocida como Michaelis-Menten.
8.9.2. Velocidad de reaccin biolgica (reaccin nica) -Modelo de Monod
(1942)
En una reaccin biolgica son varios los sustratos que participan en ella, las bacterias
crecen y utilizan muchsimas enzimas para llevar a cabo la reaccin biolgica deseada. Si se
quisiera describir detalladamente las reaccin deberamos usar un modelo segregado y
estructurado, lo cual es muy complejo y escapa a este captulo que debe considerarse como
introductorio a la temtica de bioreactores.
Monod en 1942 desarroll una ecuacin muy simple para representar los procesos
biolgicos que funciona en general muy bien. Para ello asumi que si bien pueden existir
muchos sustratos, uno de ellos ser el limitante. En este modelo se asume que la produccin
de biomasa depende exclusivamente de la concentracin de este sustrato limitante. Para
una reaccin biolgica del tipo oSX, la velocidad de crecimiento de biomasa puede
representarse como sigue:
= =
max
s
K s
s
+
(8.14)
donde
max
=velocidad especfica de crecimiento mxima, h
-1
K
s
=constante de saturacin, g/l
S=concentracin de sustrato limitante, g/l
Como puede observarse la ecuacin (8.14), que es semiemprca, es anloga a la de
Michaelis-Menten. En efecto se deriva de suponer que una nica enzyma con una cintica
del tipo Michaelis-Menten es la responsable del consumo de S y conjuntamente que la
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.19
cantidad de enzima o bien su actividad cataltica es lo suficientemente baja como para
controlar el crecimiento (pueden haber otras reacciones enzimticas, pero slo controla una
de ellas).
max
K
s
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
0 5 10 15 20 25 30
Concentracin de sustrato, g/l
v
e
l
o
c
i
d
a
d
d
e
c
r
e
c
i
m
i
e
n
t
o
,
1
/
h
max
K
s
max
/2
Figura 8.11. Efecto de la concentracin de sustrato sobre la velocidad de crecimiento
bacteriano.
max
=3 h
-1
, K
s
=3 g/l
Cuando s , la velocidad
max
, cuando s0, 0 y cuando s=K
s
, =
max/2
.
De acuerdo a la ecuacin (8.5):
s sx
r Y =
, entonces:
r
s
=Y
xs
(8.15)
r
s
=Y
xs
max
s/(s+K
s
) (8.16)
En forma anloga la velocidad de un producto P puede expresarse como:
r
P
=Y
xp
max
s/(s+K
s
) (8.17)
8.9.3. Velocidad de reaccin biolgica reacciones mltiples
El modelo de Monod no considera que parte del sustrato puede utilizarse para
mantenimiento. Si aceptamos que esto puede ocurrir, las reacciones que tienen lugar son:
X
Energa
S o
+
como r
s
=1/Y
sx
, se verifica:
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.20
s
true
sx
s
m
Y
1
r =
(8.18)
donde,
m
s
= a la velocidad de consumo de s utilizado para mantener el desarrollo metablico
(energa), y no para el crecimiento de las clulas, g
s
/g
PS
h. Se trata de una velocidad que se
considera en general de orden 0 con respecto a la concentracin de sustrato.
Y
sx
true
= se denomina coeficiente de rendimiento verdadero
El coeficiente global de rendimiento se calcula como sigue:
s
true
sx
s
global
sx
m
Y
1
= = (8.19)
Dividiendo la ecuacin (8.19) por , resulta:
1
s
true
sx
s
global
sx
m
Y
1
1
r
= = (8.20)
Observemos que Y
sx
global
es una funcin de la velocidad de crecimiento (), sin
embargo cuando el modelo de Monod puro es aplicable a la velocidad de desaparicin de
sustrato el Y
sx
global
es constante.
La velocidad de crecimiento de biomasa, para este caso, sigue siendo representada
por la ecuacin (8.14).
8.9.4. Modelo cinticos alternativos
- Ms de un sustrato limitante
=
max1
1
s 1
1
K s
s
+
max2
2
s 2
2
K s
s
+
(8.21)
- Inhibicin por alta concentracin de sustrato
=
max
s i
2
K s K / s
s
+ +
(8.22)
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.21
- Inhibicin por un producto metablico
=
max
s
K s
s
+
i
K / p 1
1
+
(8.23)
8.10. CULTIVO BATCH
Basado en la fisin binaria de las clulas, sera razonable pensar que el crecimiento
de las bacterias es del tipo exponencial. Este tipo de crecimiento, en un reactor discontinuo,
puede darse hasta un punto en el que los nutrientes empiezan a acabarse u otros factores
ambientales limiten el crecimiento. En la Figura 8.12 se presenta una curva de crecimiento
tpica para un medio de cultivo que ha sido inoculado al tiempo 0 en un TAD. Se supone que
las condiciones del medio de cultivo son ptimas (i.e., adecuados nutrientes, temperatura,
etc.). Bajo estas condiciones se reconocen 4 fases en el ciclo del crecimiento: demora, fase
exponencial, fase estacionaria y muerte.
N
m
e
r
o
d
e
c
l
u
l
a
s
Tiempo, horas
Demora
Crecimiento
Exponencial
Fase
Estacionaria
Muerte
Figura 8.12: Curva tpica de crecimiento de una poblacin bacteriana en un sistema batch
8.10.1. Fase de demora
Esta fase corresponde al tiempo que le lleva a la bacteria adaptarse al nuevo medio
cultivo. Durante esta fase el crecimiento es prcticamente nulo. La fase de demora puede ser
corta si las bacterias se inoculan en un medio similar al medio en el cual se haban
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.22
desarrollado. En cambio cuando se inoculan en un medio de diferente composicin, el
tiempo de demora puede ser de 10, 20 horas o mayor. La fase de demora puede
interpretarse como el tiempo que necesitan las bacterias para sintetizar las enzimas
necesarias para metabolizar los nuevos nutrientes.
8.10.2. Fase de crecimiento exponencial
El crecimiento exponencial sigue a la fase de aclimatacin. Esta fase ocurre si no
existe ningn factor que limite el crecimiento de las bacterias. El crecimiento en esta fase se
representa mediante una ecuacin que surge del balance de masa del TAD:
j
j
r
dt
dC
= (8.24)
Si lo aplicamos al componente biomasa:
* r
dt
dx
x
= (8.25)
donde x tiene unidades de g
ps/
cm
3
s, r
x
*
las mismas unidades. Comnmente la velocidad de la
reacciones se denota con la letra , que tiene unidades de inversa de tiempo, de modo que
es necesario multiplicarla por x para balancear las unidades
x
dt
dx
= (8.26)
donde,
x= concentracin de clulas (biomasa), gramos de peso seco/cm
3
t= tiempo, h
= constante de proporcionalidad definida como velocidad de crecimiento especfico, h
-1
(esta velocidad especfica es funcin, entre otras variables, de la temperatura y
concentraciones de sustrato).
La ecuacin (8.26) representa la ecuacin de diseo de un reactor biolgico tipo TAD,
para el componente biomasa. Asumiendo que la velocidad de crecimiento es constante en la
etapa de crecimiento exponencial, e integrando la ecuacin (8.26) entre t=0 y t=t , intervalo
de tiempo en el cual el nmero de clulas pasa de un nmero N
0
a N, o dicho de otro modo
la concentracin de clulas pasa de x
0
a x, se obtiene
} }
=
t
0
x
x
dt
x
dx
0
(8.27)
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.23
t
x
x
ln
0
=
|
|
.
|
\
|
(8.28)
) kt exp( x x
0
= (8.29)
El tiempo de duplicacin puede calcularse si x=2x
0
, o sea N (nmero de bacterias)=2
N
0
(nmero de bacterias iniciales):
ln2=t
d
(8.30)
t
d
=ln2/ (8.31)
La velocidad de crecimiento puede ser representada por la cintica del tipo Monod
(8.14), si es as es funcin de la concentracin del sustrato. Sin embargo, durante el
crecimiento exponencial de una bacteria, puede suponerse que S>> K
s
, de manera que se
verifica que =
max
, la velocidad procede con un valor constante e independiente de S.
Ejemplo 8.1
Se han medido 34000 bacterias/l uego de 4 horas de haber inoculado un
medio. Despus de 24 horas el nmero de bacterias aument a 5.2 10
6
/l.
Asumiendo que la fase de demora es despreciable, calcular:
1. La velocidad especfica de crecimiento.
2. El nmero de bacterias que fueron inoculadas.
Solucin:
1. ln(N
2
/N
1
)= (t
2
-t
1
)
= ln(5.2 10
6
/34000)/(24-4)=0.25 h
-1
2. De la ecuacin 8.29:
N
0
=N e
-kt
N
0
=34000 bact/l e
-0.25x4
= 12500 clulas/l
8.10.3. Fase estacionaria
El crecimiento en esta fase no cesa, sin embargo el crecimiento neto es 0. Las
clulas se dividen utilizando nutrientes almacenados o componentes de clulas muertas. Las
clulas inician los procesos que le son necesarios para sobrevivir al perodo de falta de
nutrientes. Esta fase dura en la mayora de los casos entre 12 y 36 horas. Esta etapa indica
como se comportan las bacterias en situaciones adversas. Las que logran sobrevivir han
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.24
sido capaces de almacenar cantidades de compuestos durante los perodos de alta
concentracin, estas bacterias suelen ser importantes en los procesos de tratamiento
cclicos. Esta etapa tambin es modelada por cinticas simples como la de Monod.
8.10.4. Muerte
Cuando la bacteria cesa de crecer, eventualmente mueren. La muerte puede
asociarse a la inactivacin de la actividad metablica, o puede ser la descomposicin real de
las clulas. Ciertas bacterias pueden alimentarse de la materia orgnica de las clulas
muertas. La disminucin neta de bacterias puede ser aproximada por una funcin
exponencial del tipo:
x
dt
dx
| = (8.30)
8.10.5. Modelado completo de una curva de crecimiento BATCH
Si se quiere modelar las etapas de crecimiento exponencial, estado estacionario y
muerte (se desprecia la fase de demora), las reacciones (considerando que S slo se utiliza
para generar biomasa) biolgicas que deberamos considerar son las siguientes:
Muerte
P X S
+
+ | o
Los balances de masa que debiramos considerar para el esquema anterior, considerando
los valores absolutos de los rendimientos, son:
Sustrato: x
K s
s
Y x Y
dt
dS
s
max
1 xs 1 xs
+
= =
Biomasa: x x
K s
s
x x
dt
dx
s
max
|
|
+
= =
Producto: x Y
dt
dP
1 xp
=
Slo dos ecuaciones deben resolverse, ya que el sistema es de dos reacciones
independientes.
Un sistema que contemple que parte del sustrato se consuma para realizar tareas de
mantenimiento o generacin de energa y adems que la biomasa pueda morir, implica el
siguiente esquema cintico:
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.25
Muerte
P X
Energa
S
+
+
+
| o
Los balances de masa para el esquema, considerando los valores absolutos de los
rendimientos, son:
Sustrato: x ms x
K s
s
Y x ms x Y
dt
dS
s
max
1 xs 1 xs
+
= =
Biomasa: x x
K s
s
x x
dt
dx
s
max
|
|
+
= =
Producto: x Y
dt
dP
1 xp
=
Para el esquema ms simple de la reaccin biolgica, el esquema cintico es:
P X S | o +
los balances de masa, considerando los valores absolutos de los rendimientos, son:
Sustrato: x
K s
s
Y x Y
dt
dS
s
max
1 xs 1 xs
+
= =
Biomasa: x
K s
s
x
dt
dx
s
max
+
= =
Producto: x
K s
s
Y x Y
dt
dP
s
max
1 xp 1 xp
+
= =
Slo un balance es requerido resolver, el resto de los componentes pueden determinarse por
estequiometra.
Ejemplo 8.2
La fermentacin de glucosa a etanol se lleva a cabo en un reactor TAD
usando S. cerevisae. Las concentracin inicial de glucosa es de 250 g/dm
3
, la
concentracin de clulas inicial es de 1.0 g/dm
3
. La velocidad de reaccin
sigue una cintica del tipo Monod, los parmetros cinticos son:
max
=0.33 h
-1
,
K
s
=1.7g/dm
3
, Yxs=0.08g/g.
1) Grafique la concentracin de biomasa y sustrato vs. Tiempo, suponiendo
que todo el sustrato se consume para dar biomasa.
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.26
Solucin:
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.27
Solucin cont.:
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.28
8.11. QUIMIOSTATO - CULTIVO CONTINUO
8.11.1. Descripcin del equipo
El crecimiento de bacterias mostrado en la Figura 8.12 corresponde a un cultivo
discontinuo. Los estudios continuos son de utilidad para determinar parmetros cinticos. Un
dispositivo de laboratorio muy usado es el quimiostato, el que es bsicamente un reactor
tanque agitado continuo (Ver Figura 8.13). La Figura 8.14 muestra un sistema continuo con
los todos los elementos que permiten llevar a cabo una reaccin biolgica de manera
controlada.
8.11.2. Balances de masa
En la Figura 8.13 se presenta un esquema simplificado de un quimiostato.
Figura 8.13. Quimiostato
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.29
Figura 8.14. Sistema Continuo para estudio de reacciones biolgicas
F , C
0
F , C
C
Figura 8.15. Esquema de un quimiostato
Supongamos que en el reactor de la figura 8.15 se lleva a cabo la siguiente reaccin biolgica:
o
1
S
1
+ o
2
S
2
+ o
3
S
3
X + |
1
P
1
+ |
2
P
2
+ |
3
P
3
Balance de masa para el sustrato 1 (lquido)
Atencin en reactores biolgicos es comn el uso de la letra F como caudal volumtrico y no
flujo molar!!!!
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.30
FCs
1,0
- FCs
1
+ r
s1
x V=0
(8.30)
Donde:
F=caudal de entrada, l/h
Cs
1,o
=concentracin del sustrato 1 a la entrada, mol
s1
/l o g
s1
/l.
Cs
1
= concentracin del sustrato 1 a la salida, mol
s1
/l o g
s1
/l.
r
s1
= velocidad de consumo de sustrato, mol
s1
/gPS h o g
S1
/gPS h
V= Volumen de reaccin, l
x= concentracin de biomasa, gPS/l
Dividiendo por V la ecuacin 8.30 resulta:
(F/V)(Cs
1,0
- Cs
1
) + r
s1
x =0
(8.31)
La relacin F/V se denomina velocidad de dilucin (D):
F/V=D (h
-1
) (8.32)
La velocidad de dilucin es la inversa del tiempo espacial:
D=1/t (8.33)
Balance de masa para la biomasa
Supongamos que la concentracin de la biomasa en la alimentacin es 0, entonces el
balance de masa para este producto celular es:
-F x + x V=0 (8.34)
donde
x= concentracin de biomasa a la salida del reactor, gPS/l
= velocidad de crecimiento, h
-1
Dividiendo la ecuacin 8.34 por V, resulta
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.31
(-D + )x =0 (8.35)
En un quimiostato la relacin de dilucin elegida es igual a la velocidad de crecimiento
especfica:
D = (8.36)
En la Figura 8.16 se presentan los valores de las concentraciones del sustrato (s
1
) y
biomasa(x) en funcin del coeficiente de dilucin. Si el coeficiente de dilucin se aumenta en
forma excesiva el medio de cultivo "se lava" y la concentracin de clulas a la salida del
reactor cae a 0. Existe un valor ptimo de D que permite operar el reactor con una alta
velocidad de crecimiento. Este valor lo derivaremos ms adelante.
0
2
4
6
8
10
12
13579
1
1
1
3
1
5
1
7
1
9
2
1
2
3
2
5
velocidad de dilucin (D), h-1
C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i
n
,
g
/
l
Sustrato
Biomasa
D x
Figura 8.16: Dependencia de las concentracin de sustrato,
concentracin de clulas y velocidad de produccin de clulas (Dx) en
funcin de la velocidad de dilucin.
Balance de masa para un producto 1 (lquido)
Suponiendo que no alimento el producto 1,
-F Cp
1
+ rp
1
x V=0 (8.37)
donde,
Cp
1
=Concentracin del producto 1, g
p1
/ l h o moles p
1
/l h.
rp
1
= velocidad de produccin del producto 1, g
p1
/gPS h o moles p
1
/gPS h.
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.32
Balance de masa para el sustrato 2 (gaseoso, por ejemplo O
2
)
Puede suponerse distintos modelos de mezclado para los sustratos o productos
gaseosos. Puede asumirse por ejemplo un mezclado perfecto (i.e., la composicin en el
volumen de reaccin es nica) o flujo pistn (las burbujas viajan a travs del reactor con un
frente plano, i.e. igual concentracin en toda el rea transversal para una dada altura). En
este curso supondremos que se puede asumir un mezclado perfecto para los productos o
sustratos que se encuentren en fase gas.
La Figura 8.17 muestra un volumen de control donde se puede observar una interfase
gas-lquido. El transporte de masa en la capa lmite deber ser considerado en los balances
de masa de los reactantes gaseosos.
Figura 8.17: Interfase gas - lquido
El balance de masa lo planteamos en la fase lquida, ya que nos interesa saber el
valor de la C
s2
en dicha fase (fase donde las clulas pueden usarlo para sintetizar productos
metablicos y a la vez crecer).
El balance de masa para el componente s
2
en la fase lquida puede expresarse como:
FCs
2,0
- FCs
2
+ k
L
a (Cs
2
*
- Cs
2
) V +r
s2
x V=0
(8.38)
donde
F=caudal de entrada, l/h
Cs
2,o
=concentracin del sustrato 2 disuelto en el caudal F a la entrada, mol
s2
/l o g
s2
/l.
Cs
2
= concentracin del sustrato 2 disuelto a la salida, mol
s2
/l o g
s2
/l.
Cs
2
*
= solubilidad del s
2
en el medio de cultivo, mol
s2
/l o g
s2
/l.
r
s2
= velocidad de consumo de sustrato2, mol
s2
/gPS h o g
S2
/gPS h
V= Volumen de reaccin, l
O
2
Lquido
Medio de
cultivo
Lq. Gas
C
s2
g
C
s2
L C
s2
*
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.33
x= concentracin de biomasa, gPS/l
k
L
a= h
-1
k
L
=coeficiente de transferencia de masa, m/h
a= rea interfacial por unidad de volumen, m
2
/m
3
Dividiendo la ecuacin 8.38 por V, resulta:
D(Cs
2,0
- Cs
2
) + k
L
a (Cs
2
*
- Cs
2
) + r
s2
x V=0
(8.39)
El valor de Cs
2
*
(solubilidad) puede calcularse a travs de la Ley de Henry
conociendo la presin parcial de este compuesto en la fase gas (Cs
2
*
=p
s1
/H).
Balance de masa para el producto 2 (gaseoso, por ejemplo CO
2
)
En forma equivalente a lo desarrollado para el sustrato 2, el balance de masa para el
producto 2 gaseoso es:
D(Cp
2,0
- Cp
2
) + k
L
a (Cp
2
*
- Cp
2
) + r
p2
x V=0
(8.40)
Los balances planteados permiten, conociendo los valores de concentraciones en la
fase lquida, determinar los valores de velocidad de reaccin de sustratos, biomasa y
productos metablicos.
Ejemplo 8.3
Suponga que un sustrato estril se incorpora en forma continua en un
quimiostato.
1. Derive la expresin de la concentracin de salida de biomasa y sustrato
(lq.) en funcin de la velocidad de dilucin. Asuma que la reaccin
biolgica procede con una cintica del tipo Monod.
2. Grafique la concentracin de sustrato y biomasa en funcin de D. K
s
=3 g/l,
max
=3 h
-1
, Y
xs
=5 g
s
/g
biomasa
, s
0
= 10 g/l.
3. Determine el valor de la velocidad de dilucin de "lavado
4. Estime la velocidad mxima de clulas de salida.
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.34
Solucin:
9. D(s
0
- s) = r
s
x (balance para el sustrato) (A)
D x= x (balance biomasa)(B)
r
s
=Y
xs
max
s/(s+K
s
)
D(s
0
- s) = Y
xs
x
max
s/(s+K
s
) (C)
Dividiendo A por B resulta:
(s
0
-s)/x=r
s
/
(s
0
-s)=Y
xs
x o Y
sx
(s
0
-s) =x (D)
Reemplazando (D) en (C),
s= DK
s
/(
max
-D) (E)
Reemplazando (E) en (D)
X=Y
sx
(s
0
- DK
s
/(
max
-D)) (F)
2.
-2
0
2
4
6
8
10
12
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
D, 1/h
C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i
o
n
e
s
,
g
/
l
y
D
X
S
x
DX
3. Cuando se lava el reactor x a la salida es 0 y D=D
max
, usando la ecuacin
(F):
D
max
=
max
s
0
/(s
0
+ K
s
) = 0.98
Note que el reactor es muy sensible a cambios de D cuando su valor est
cercano al D
max
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.35
4. La velocidad de produccin de clulas es Dx (g biomasa/l h), esta cantidad
se grafica en la figura anterior. El valor mximo de Dx se puede calcular
haciendo: d(Dx)/dD=0
5. Multiplicando la ecuacin (F) por D y derivndola resulta:
6. D
max prod.
=
max
(1 - ((K
s
/(K
s
+s
o
)))
1/2
=0.86
8.12. INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA EN LA CINTICA DE CRECIMIENTO
Un aumento en el valor de la temperatura ocasiona una mayor velocidad de
crecimiento. A diferencia de lo que ocurre para las reacciones qumicas, si la temperatura se
eleva demasiado las protenas se desnaturalizan y la velocidad de crecimiento decrece
rpidamente. Para temperaturas debajo de la que se inicia la desnaturalizacin, se verifica
la siguiente expresin:
max
=A exp (-E/RT)
(8.41)
donde
A = constante, h
-1
E= energa de activacin, KJ/mol
La expresin que permite contabilizar el efecto de la desnaturalizacin es la siguiente:
max
=
) RT / G exp( B 1
) RT / E exp( A
A +
(8.42)
donde
A y B son constantes
E= energa de activacin, KJ/mol
DG= cambio de energa libre ocasionado durante la desnaturalizacin de las protenas,
KJ/mol.
En la figura 8.18 se observa
max
vs 1/T. Puede observarse que existe una
temperatura de operacin ptima que maximiza la velocidad de crecimiento.
Captulo 8
Captulo 8 Introduccin a Bioreactores 8.36
0.1
1
10
3.1 3.2 3.3 3.4 3.5
1000/T (1/K)
v
e
l
o
c
i
d
a
d
d
e
c
r
e
c
i
m
i
e
n
t
o
m
a
x
,
1
/
h
Figura 4.18. Influencia de la temperatura sobre
max.