Determinacin Cuantitativa De Azucares Reductores UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRS

Lab. Ing. Bioqumica

INFORME N 2 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE AZUCARES REDUCTORES

NOMBRE: AGUILAR CORIA XIMENA GABRIELA
DOCENTE: ING. VIRGINIA ROJAS 07/10/2013

Determinacin Cuantitativa De Azucares Reductores

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DETERMINACIN CUANTITATIVA DE AZUCARES REDUCTORES 1. Variantes en el Proceso: Se realiz la preparacin de 250 ml. de solucin de glucosa a la concentracin de 1 g/l y se parti de esta solucin para las dems en menor concentracin. Se utiliz la mitad del volumen en el caso de todos los reactivos y muestras para los anlisis: Volumen de Glucosa en los tubos de ensayo 0.5 ml. Volumen de Reactivo B 0.5 ml. Volumen de Reactivo A 0,5 ml. Volumen de Reactivo C 4.5 ml. Volumen de Muestra 0,5 ml. Se hizo la dilucin de la muestra 1,5:1000 para que nuestra muestra entre en la curva calibrada. No se hicieron otras modificaciones aparte de las anteriores. 2. Clculos: 2.1. Calculo del volumen de glucosa para las diferentes concentraciones:

Concentracin 0,2 g/l

Para las dems concentraciones:

Concentracin 1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 Volumen Requerido 250 25 25 25 25 25 25 25 25 25 Cantidad de disolucin 1 g/l en ml. 250 22,5 20 17,5 15 12,5 10 7,5 5 2,5

2.2. Calculo de la cantidad de Hidrxido de Sodio 10 %:

2.3. Datos Curva de Calibracin. Se obtuvieron los siguientes datos producto de las medidas realizadas con el espectrofotmetro para la obtencin de la curva de calibracin Concentracin Absorbancia 0.1 0.071

Determinacin Cuantitativa De Azucares Reductores 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 Con los datos se obtiene la curva de calibracin: 0.197 0.258 0.458 0.629 0.612 0.613 0.614 0.634

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Absorbancia Vs. Concentracin

0.8 0.7 0.6 Absorbancia 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 Concentracin (g/l) Absorvamcia Vs. Concentracin Linear (Absorvamcia Vs. Concentracin) y = 0,82572x + 0,0376 R = 0,9256

La ecuacin resultante es: A=0,82572*C+0,0376.(1) Las muestras dieron los siguientes datos : Absorbancia Muestra 1 Absorbancia Muestra 2 0,351 0,332

Mediante la ecuacin (1) se calcula la concentracin de cada muestra: Concentracin Muestra 1 Concentracin Muestra 2 Entonces la concentracin promedio ser: 0,379 0,356

2.4. Calculo de la concentracin de azcares en la melaza:

Determinacin Cuantitativa De Azucares Reductores ( Segn la ley de Lambert y Beer Por lo tanto se obtendr la misma grafica anterior. 2.5. Comparacin entre datos en glucosa terica y prctica:
0.8 0.7 0.6 Absorbancia 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 Concentracin

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Absorbancia vs. Concentracin (Teorico) Absorvancia Vs. Concentracin Prctico Linear (Absorbancia vs. Concentracin (Teorico)) Poly. (Absorvancia Vs. Concentracin Prctico)

3. Resultados: Se obtuvieron los siguientes resultados: Curva de calibrado de la glucosa: A=0,82572*C+0,0376 Concentracin de azcares en las muestras: Concentracin Muestra 1 Concentracin Muestra 2 Concentracin promedio: 0,379 0,356

Concentracin de ART de la muestra problema. ( )

4. Interpretacin de Resultados: Se observaron las propiedades reductoras de los azucares contenidos en las muestras tanto patrn como problema, ya que la solucin alcalina de cobre reaccion con la sustancia reductora en el bao a ebullicin. Tambin se observ la formacin del precipitado rojo ladrillo producto de la reduccin de los iones cpricos a cuprosos.

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La formacin del color azul oscuro en los tubos de ensayo al aadir el reactivo fosfomolibdico nos desmostro que los iones vuelven a su forma cprica cuando el cido fosfomolibdoso produce este cambio. El contenido de azucares es de 245(g_azcar/l) lo cual es razonables por tratarse de una muestra con contenido alto de azucares. 5. Conclusiones: * Se determin la cantidad de azcares reductores totales por el mtodo de Folin Wu obtenindose como resultado un contenido de azucares de 245(g_azcar/l). * La construccin de la curva de calibracin nos ayud a deternimar el contenido de azcar (glucosa) en la muestra problema en este caso fue el medio clarificado (melaza) para su uso como medio de cultivo. * Es importante seguir a detalle los procedimientos para que obtengamos buenos resultados. 6. Recomendaciones: Realizar clculos y mediciones con la mayor exactitud posible. Tener especial cuidado al momento de realizar el bao mara de los tubos. Seguir el procedimiento al detalle sobre la medicin de la absorbancia en el espectrofotmetro. 7. Bibliografa: Control fisicoqumico de Leche Pasteurizada. Serie manuales tcnicos, Direccin General de Epidemiologa. Laboratorio Nacional de Salud Pblica, 1988. Manual of Food Quality Control. 3 Commodities. Food and Agriculture Organization of the United Nations. Rome 1979. F.A.O., Food and Nutrition Paper 1463; Pag. 3.