Ensayos a la gota sobre papel de filtro de extractos fenlicos vegetales Antonio Quirante Candel aquirant@yahoo.

es Introduccin Los extractos acuosos de productos vegetales contienen cantidades apreciables de diferentes tipos de compuestos polifenlicos que pueden dar lugar a una gran variedad de reacciones inicas (cido-base, precipitacin y complejacin) con reactivos inorgnicos generales. Los compuestos formados tienen algunas veces coloracin directa apreciable y en muchas otras muestran coloraciones apreciables a la luz ultravioleta que permiten su observacin directa y deteccin. Cuando sobre un papel de filtro impregnado de un reactivo inorgnico adecuado (ion metlico o agente cido-base) se desarrolla lentamente un flujo continuo del extracto acuoso vegetal a partir de un punto fijo se desarrolla circularmente una mancha que puede contener anillos concntricos de diferente coloracin correspondientes a distintos tipos de compuestos. El tratamiento posterior de las manchas con otros agentes (calor o reactivos qumicos) puede dar lugar a variaciones relacionadas con propiedades qumicas de los diversos componentes que se reparten por el desarrollo de la mancha. Como ejemplos de aplicacin se observa el desarrollo de manchas de vino blanco de distinta procedencia sobre un papel de filtro impregnado previamente de disolucin saturada de bicarbonato sdico en agua observadas con luz visible o ultravioleta bien directamente o despus de algn tratamiento sencillo adicional. La actividad fluorescentes de componentes de la uva descrita en la bibliografa (1) puede dar origen a seales detectables por el procedimiento propuesto Procedimiento experimental 1) Desarrolla de la mancha

En un pequeo depsito cilndrico D se coloca la muestra lquida a desarrollar M que se conecta con un capilar C al centro de un papel de filtro F cubierto por dos placas de plstico transparente P Cuando la mancha ha alcanzado un dimetro de 4 cm, aproximadamente se retira el filtro del dispositivo y se seca con calor suave.

2) Reacciones y tratamientos A) Reaccin de vino blanco con bicarbonato sdico

Para llevar a cabo esta reaccin se desarrolla en primer lugar por el procedimiento descrito en el apartado 1 una mancha de disolucin saturada acuosa de bicarbonato sdico. Se seca mediante calentamiento suave la mancha obtenida. Sobre el centro de la mancha anterior, una vez seca, se desarrolla por el procedimiento (1) una mancha de la muestra de vino blanco a ensayar hasta alcanzar un dimetro aproximado de 2/3 de la mancha inicial de bicarbonato. Se somete a calentamiento suave y se procede a su observacin con luz UV. B) Reaccin de vino blanco con bicarbonato sdico y posterior calentamiento En esta caso la muestra obtenida en el apartado A) se somete a gradual calentamiento hasta que se haga visible un anillo de colo amarillo-marrn en el extremo de la mancha de vino. Se precede a su observacin y deteccin con luz visible y UV. C) Reaccin de vino blanco con bicarbonato sdico, posterior calentamiento y revelado con hidrxido clcico. El papel de filtro de la muestra obtenido en el apartado B) se pone en contacto con otro papel de filtro impregnado en su parte inferior con una suspensin acuosa de Ca(OH)2 Se somete despus a calentamiento suave y se procede a su observacin con luz UV 3) Obtencin de imgenes digitales

A) Imagen con luz UV

Se ilumina con una lmpara ultravioleta (L)el papel de filtro con la muestra de la mancha (P)y posteriormente se toma la imagen de la mancha observada con una cmara digital (C)

B) Imagen con luz visible Se fotografa con la cmara digital el papel de filtro con la muestra iluminada directamente con luz visible

4) Lectura densitomtricas de las imgenes de las manchas Se lleva a cabo midiendo la respuesta de una fotorresistencia colocada sobre la imagen en la pantalla del ordenador de las fotografas de las muestras obtenidas, tal como se muestra en otro trabajo de este autor sobre cromatografa circular en papel de filtro (2) Resultados Se muestran a continuacin fotografas y grficas de lecturas densitomtricas de manchas de vino blanco de tres variedades sometidas a los siguientes tratamientos qumicos y de obtencin de imagen Fotografas A: mancha obtenida por desarrollo de vino sobre papel impregnado de bicarbonato sdico observada con luz UV Fotografas B: la misma muestra anterior sometida a calentamiento progresivo hasta aparicin de un anillo amarillo en el extremo de la mancha. Observacin con luz UV Fotografas C: la misma muestra de la fotografa B observada con luz visible Fotografas D: la muestra de las fotografas B y C sometida a revelado con Ca(OH)2 y posterior calentamiento, observada con luz UV. Las grficas de lecturas densitomtricas muestran en ordenadas la respuesta de la fotorresistencia ,mediante la magnitud log(R/Ro) donde R es la respuesta de la fotorresistencia en cada posicin y Ro es la respuesta en el exterior de la mancha. En abcisas se representa la posicin de la fotorresistencia a lo largo de la mancha expresada como cociente entre la distancia al centro de la mancha y radio mximo de la mancha.

Muestra 1: Denominacin de origen: RIOJA Variedad: blanco semidulce

Figura 1. Fotografas de manchas de vino blanco RIOJA variedad blanco semidulce

0,080 0,060 0,040 0,020 0,000 0,000 -0,020 -0,040

0,100

0,200

0,300

0,400

0,500

0,600

0,700

0,800

0,900

1,000

Figura 2.Lectura densitomtrica de las manchas sobre papel de filtro de la muestra 1 sometidas a los tratamientos descritos

Muestra 2: Denominacin de origen: VALDEPEAS Variedad: blanco semidulce

Figura 3. Fotografas de manchas de vino blanco VALDEPEAS blanco semidulce

0,060 0,040 0,020 0,000 0,000 -0,020 -0,040 -0,060 -0,080

0,100

0,200

0,300

0,400

0,500

0,600

0,700

0,800

0,900

1,000

Figura 4.Lectura densitomtrica de las manchas sobre papel de filtro de la muestra 2 sometidas a los tratamientos descritos Muestra 3: Denominacin de origen: CATALUNYA Variedad: blanco semidulce

Figura 5. Fotografas de manchas de vino blanco CATALUNYA blanco semidulce

0,060 0,040 0,020 0,000 0,000 0,100 0,200 0,300 0,400 0,500 0,600 0,700 0,800 0,900 1,000 -0,020 -0,040 -0,060 -0,080 -0,100 -0,120 -0,140

Figura 6.Lectura densitomtrica de las manchas sobre papel de filtro de la muestra 3 sometidas a los tratamientos descritos Discusin y conclusiones Las fotografas y lecturas densitomtricas de las 3 muestras de vino sometidas a los tratamientos descritos indican algunas caractersticas comunes que se sealan a continuacin 1) Una banda de fluorescencia en el intervalo de abcisas 0,1-0,4 para las muestras sometidas al tratamiento D ( calentamiento y revelado con Ca(OH)2 ). 2) Una banda de fluorescencia al final de la mancha( abcisa entre 0,7 y 0,9) para las muestras del tipo A y B 3) Una banda observable con luz visible al final de la mancha

(1) Minghui Zhang,Bull. Chem. Soc. Ethiop. 2010, 24(1), 31-37. (2) A.Quirante, http://es.scribd.com/doc/13663086/Cromatografia-circular-en-papel-de-filtro