NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5295
2004-09-29

BEBIDAS ALCOHLICAS. MTODOS PARA DETERMINAR EL CONTENIDO DE COBRE

E:

ALCOHOLIC BEVERAGES. DETERMINATION

METHODS

FOR

COPPER

CORRESPONDENCIA:

DESCRIPTORES:

bebida alcohlica; cobre; anlisis de cobre.

I.C.S.: 67.160.10
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC) Apartado 14237 Bogot, D.C. Tel. 6078888 Fax 2221435

Prohibida su reproduccin

Editada 2004-10-08

PRLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993. ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo caracterizado por la participacin del pblico en general. La NTC 5295 fue ratificada por el Consejo Directivo del 2004-09-29. Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades y exigencias actuales. A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a travs de su participacin en los Comits Tcnicos 57 Destilacin, rectificacin y mezcla de bebidas espirituosas y 58 Industrias vincolas. ASOCIACIN COLOMBIANA DE EMPRESAS LICORERAS ACIL ASOCIACIN COLOMBIANA DE IMPORTADORES DE LICORES Y VINOS -ACODILBODEGAS AEJAS LTDA. BODEGAS DEL RHIN COLOMA LTDA. CONCESIN LICORSA INDUSTRIA DE LICORES DEL HUILA DE SARGO LTDA. EMPRESA DE LICORES DE CUNDINAMARCA FBRICA DE LICORES DEL TOLIMA FABRICA DE LICORES Y ALCOHOLES DE ANTIOQUIA FRUVER Y CIA. LTDA. INDUSTRIA DE LICORES DEL VALLE INDUSTRIA LICORERA DE CALDAS INSTITUTO COLOMBIANO DE GEOLOGA Y MINERIA - INGEOMINAS MERCK COLOMBIA PEDRO DOMECQ COLOMBIA S.A. SABAJN APOLO S.A. UNIDAD DE LICORES DEL META

Adems de las anteriores, en Consulta Pblica el Proyecto se puso a consideracin de las siguientes empresas: LABORATORIO DE ANLISIS: AMBIENTAL, ALIMENTOS, AGUAS, PETROQUMICO, FARMACUTICO, HIGIENE INDUSTRIAL ASINAL BODEGAS VIEJAS CEPAS EMPRESA DE LICORES DE CAQUETA INSTITUTO NACIONAL DE VIGILANCIA DE MEDICAMENTOS Y ALIMENTOS -INVIMAMARPICO S.A. SECRETARIA DISTRITAL DE SALUD

ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados normas internacionales, regionales y nacionales. DIRECCIN DE NORMALIZACIN

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BEBIDAS ALCOHLICAS. METODOS PARA DETERMINAR EL CONTENIDO DE COBRE

1.

OBJETO

Esta norma establece los mtodos para determinar el contenido de cobre en bebidas alcohlicas. 2. 2.1 METODOS DE ENSAYO METODO A (Mtodo empleando cuprizona (bis[ciclohexilidenhidrazida] de cido oxlico)

2.1.1 Fundamento del mtodo Los iones cobre (II) forman en medio amoniacal con cuprizona un complejo azul, cuya concentracin se determina fotomtricamente. Las mediciones se realizan con la ayuda de un fotmetro que permita leer a 595 nm. La concentracin de cobre se determina comparando la absorbancia leda contra una grfica de calibracin. Los productos coloreados como vinos tintos y blancos se analizan sobre las cenizas o realizando un tratamiento previo de oxidacin con perxido de hidrgeno. 2.1.2 Reactivos Se utilizan reactivos bajos en cobre.

Agua destilada libre de cobre. Solucin de citrato amoniacal. Se disuelven 75 g de cido ctrico en 100 ml de agua destilada. Se trata la solucin con 95 ml de solucin amoniacal al 25 % y se completa con agua destilada a 250 ml. Solucin de cuprizona (bis[ciclohexilidenhidrazida] de cido oxlico). Se disuelven 0,5 g de cuprizona C14H22N4O2 en 100 ml de etanol al 50 % calentando para favorecer la disolucin. Esta solucin es estable por tres meses si esta bien tapada y si se guarda refrigerada.

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Solucin patrn de cobre. Se utiliza nitrato de cobre(II) trihidratado (Cu(NO3)23H2O) para anlisis o una solucin patrn lista de cobre Cu(NO3)2 en HNO3 0,5 M (mol/L) de 1 000 mg Cu/L (ppm) con su certificado de trazabilidad. Solucin patrn de cobre de 100 mg/L (ppm). Se disuelven 3,817 g de nitrato de cobre (II) trihidratado (Cu(NO3)2 3H2O). Se diluye hasta 1000 ml con solucin de cido ntrico 0,5 M y se mezcla. Tambin se puede utilizar una solucin patrn lista de cobre Cu(NO3)2 en HNO3 0,5 M de 1 000 mgCu/L(ppm) con su certificado de trazabilidad y se realiza una dilucin con agua destilada libre de cobre hasta obtener una concentracin de 100 mg/L (ppm). (Se toman 100ml de la solucin patrn de cobre de 1 000 mg/L (ppm) y se lleva hasta 1 000 ml con agua destilada y se mezcla).

2.1.3 Equipos y materiales

Balanza analtica Espectrofotmetro con sus respectivas celdas de medicin de 50, 20, 10 mm segn el intervalo de medicin que permita leerse a 595 o 600 nm: 50 mm 20 mm 10 mm 0,02 1,20 mg/L (ppm) de Cu 0,05 3,0 mg/L (ppm) de Cu 0,1 6,00 mg/L (ppm) de Cu

Material de vidrio de laboratorio

2.1.4 Procedimiento 2.1.4.1 Preparacin de soluciones de calibracin de cobre Dependiendo de la celda a utilizar se preparan las soluciones a las siguientes concentraciones: Celda de 50 mm Celda de 20 mm Celda de 10 mm 0,02; 0,1; 0,25; 0,5; 1,0 mg/L (ppm) de Cu 0,05; 0,1; 1,0; 2,0; 3,0 mg/L (ppm) de Cu 0,1; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 6,0 mg/L (ppm) de Cu
1)

NOTA la norma de calibracin DIN 38402-51 intervalo de medicin.

recomienda la preparacin de 10 puntos dentro del

Las soluciones estndar de Cu para la calibracin deben ser frescas y preparadas a partir de la solucin de cobre patrn de 1 mg/L (ppm) y 100 mg/L (ppm) de Cu tomando los siguientes volmenes: Patrn de 0,02 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 20 ml de solucin patrn de 1 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1L con agua destilada.
1)

German Standard Methods for the Examination of Water, Waste Water and Sludge; General Information (Group A); Calibration of Analytical Methods, Evaluation of Analytical Results and Linear Calibration Functions Used to Determine the Performance Characteristics of Analytical Methods (A 51)

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Patrn de 0,05 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 50 ml de solucin patrn de 1 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1L con agua destilada. Patrn de 0,1 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 100 ml de solucin patrn de 1 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1L con agua destilada. Patrn de 0,25 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 250 ml de solucin patrn de 1 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1L con agua destilada. Patrn de 0,5 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 5 ml de solucin de trabajo de 100 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1L con agua destilada. Patrn de 1 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 10 ml de solucin de trabajo de 100 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1L con agua destilada. Patrn de 2 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 25 ml de solucin de trabajo de 100 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1 litro con agua destilada. Patrn de 3 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 30 ml solucin de trabajo de 100 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1L con agua destilada. Patrn de 4 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 40 ml de solucin de trabajo de 100 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1L con agua destilada. Patrn de 6 mg/L (ppm) de Cu. Se toman 60 ml de solucin de trabajo de 100 mg/L (ppm) de Cu y se completa a 1L con agua destilada. 2.1.4.2 Elaboracin de la curva de calibracin con el reactivo de cuprizona 2.1.3.2.1 Preparacin del blanco Se mezclan 30 ml de agua destilada con 10 ml de solucin de citrato amoniacal, su pH debe estar entre 8 y 9. Luego se agregan 5 ml de solucin de cuprizona, se esperan 2 min y se completa a 50 ml con agua destilada. Despus de 30 min se mide la absorbancia del complejo azul a 595 nm empleando un fotmetro. Este dato se considera como blanco de la determinacin. 2.1.3.2.2 Preparacin de los patrones Se mezclan 30 ml de los diferentes patrones con 10 ml de solucin de citrato amoniacal, su pH debe estar entre 8 y 9. Luego se agregan 5 ml de solucin de cuprizona, se esperan 2 min y se lleva a 50 ml con agua destilada. Despus de 30 min se mide la absorbancia del complejo azul a 595 nm empleando un fotmetro. Del valor de absorbancia obtenido en cada patrn debe restarse el valor del blanco. Con los resultados se construye una curva de calibracin y a partir de ella se calculan las concentraciones de las muestras. Se determina la pendiente, el punto de corte en el eje Ao (Ordenada 0) y el coeficiente de correlacin de los datos. 2.1.4.3 Preparacin de la muestra 2.1.4.3.1 Las muestras se analizan inmediatamente despus de la toma de estas. En caso diferente, se conservan con cido ntrico al 65 % (se adiciona 1 ml de cido ntrico a 1L de solucin de la muestra). 3

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2.1.4.3.2 El valor de pH debe encontrarse en el intervalo de 8 a 10. Si es necesario, se ajusta con solucin de hidrxido de sodio o con cido sulfrico. 2.1.4.3.3 Las muestras turbias se deben filtrar. 2.1.4.4 Determinacin de cobre en las muestras 2.1.4.4.1 Blanco Se mezclan 30 ml de agua destilada con 10 ml de solucin de citrato amoniacal, su pH debe estar entre 8 y 9. Luego se agregan 5 ml de solucin de cuprizona, se espera 2 min y se lleva a 50 ml con agua destilada. Despus de 30 min se mide la absorbancia del complejo azul a 595 nm empleando un fotmetro. Este dato se considera como blanco en la determinacin. 2.1.4.4.2 Muestra Se mezclan 30 ml de la muestra con 10 ml de solucin de citrato amoniacal, su pH debe estar entre 8 y 9. Luego se agregan 5ml de solucin de cuprizona, se espera 2 min y se lleva a 50 ml con agua destilada. Despus de 30 min se mide la absorbancia del complejo azul a 595 nm empleando un fotmetro. Del valor de absorbancia obtenido en cada patrn debe restarse el valor del blanco.
NOTA 1 Ciertos fotmetros exigen un blanco (preparado como la muestra de medicin, pero con agua destilada en lugar de la muestra). NOTA 2 limpio. NOTA 3 NOTA 4 Para la medicin fotomtrica, las celdas deben estar limpias. Si es necesario, se utiliza un pao seco y

La turbidez generada despus de terminar la reaccin da como resultado valores falsamente elevados. El valor del pH de la solucin de medicin debe encontrarse en el intervalo entre 8 y 9,5.

2.1.5 Expresin de resultados El cobre presente se debe expresar como mg de Cu2+ por litro o dm3 de muestra. Debe tenerse en cuenta el factor de dilucin si fuera necesario. 1. Si se toma de la grfica (curva de calibracin), se interpola el valor de absorbancia obtenido:
Contenido de Cu en mg/L = Interpolacin (Am Ab) x Fd

2.

Si se usa la ecuacin:
Contenido de Cu en mg/l = [Ao + (Am-Ab) x 1/b] x Fd

en donde Ao Am Ab b Fd

= = = = =

intercepto en el eje X valor de absorbancia de la muestra. valor absorbancia del blanco. pendiente de la curva de calibracin. factor de dilucin.

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2.2

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METODO B (Mtodo empleando dibenzilditiocarbamato de zinc)

2.2.1 Fundamento del mtodo Se basa en la reaccin del dibenzilditiocarbamato de zinc (ZDBT) con los iones cpricos la cual forma un complejo coloreado cuya intensidad se mide a 438 nm. La absorbancia leda se interpola en una grfica de calibracin. 2.2.2 Reactivos Agua destilada. Para destilar el agua se debe emplear un equipo en vidrio pyrex o similar. Debe comprobarse que est libre de cobre. Etanol. Debe redestilarse en las mismas condiciones que el agua. Patrones de cobre: a) Solucin de reserva Se disuelven 0,393 g de CuSO4.5 H2O r.a libre de cualquier depsito blanco, en 300 cm3 de agua destilada, que contenga 2cm3 de H2S04 r.a y se completa a volumen en un matraz volumtrico de 500 cm3. 1 cm3 de esta solucin corresponde a 0,2 mg de Cu. b) Solucin de trabajo Se prepara diariamente, diluyendo 2 cm3 de la solucin anterior hasta 100 cm3 con agua bidestilada. 1 cm3 corresponde a 0,04 mg de Cu. Solucin de dibenzilditiocarbamato de zinc. Se disuelven 2 g de ZDBT en 1 dm3 de tetracloruro de carbono, calentando, si es necesario, en un bao Mara a temperatura inferior a 70 C. Se filtra por un papel Whatman No. 41 o un papel similar (lavado con cido). Debe guardarse en una botella oscura en un refrigerador. Tetracloruro de carbono, CCl4 cido sulfrico 6 N.

2.2.3 Equipos y materiales Balanza analtica Ampollas de separacin. Se emplean ampollas de separacin de tipo periforme de 60 ml (cm3) provistas de llaves de tefln. Deben lavarse con mezcla crmica caliente y luego con agua bidestilada. 5

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Antes de cada anlisis se colocan en cada ampolla de separacin 10 ml de agua bidestilada, 0,5 ml de cido sulfrico 6 N y 10 ml de solucin ZDBT-CCl4 Se agita por 1 min, se retira el lquido y se lava con agua bidestilada. 2.2.4 Espectrofotmetro o colormetro que permita leer a 438 nm. Material de vidrio de laboratorio.

Procedimiento

2.2.4.1 Preparacin de las diluciones para la calibracin

Para muestras con contenido de etanol superior a 40 % En ampollas de separacin que contengan 5 ml de etanol bidestilado, se colocan 0,0 ml; 0,50 ml; 1,00 ml; 2,00 ml y 3,00 ml de la solucin de trabajo de cobre, y respectivamente 5 ml; 4,5 ml; 4 ml; 3 ml y 2 ml de agua bidestilada. En esta forma, se tiene una serie de 0,0; 0,20; 0,40; 0,80 y 1,20 microgramos de cobre por cm3 (mg/L) (mg/dm) (ppm).

Para muestras acuosas, vinos y otras muestras con bajo contenido alcohlico Se procede como en el caso anterior, pero en lugar de los 5 ml originales de alcohol, se colocan 5 ml de agua bidestilada.

2.2.5

Determinacin del contenido de cobre

A una ampolla de separacin que contenga 10 ml de muestra (diluida adecuadamente para que contenga no ms de 40 % de alcohol) o de cada una de las soluciones de calibracin, se agregan 0,5 ml de cido sulfrico 6 N y 10,0 ml de la solucin ZDBT-CCl4; se tapa y se agita brevemente. Se alivia la presin interior retirando el tapn. Se vuelve a colocar ste y se agita vigorosamente (100 veces) y se deja en reposo. Con un trozo de papel de filtro se seca interiormente el tubo de salida de la ampolla de separacin y se inserta en el mismo, una pequea cantidad de algodn de vidrio, para filtrar el lquido que se va a retirar. Se dejan salir unos pocos ml del lquido y luego se recoge directamente en la celdas del equipo. Se determina la absorbancia a 438 nm dentro de los siguientes 60 min, contra el blanco. Con los valores de la serie de calibracin se construye una grfica de calibracin y a ella se refiere el valor obtenido para la muestra. 2.2 EXPRESIN DE RESULTADOS

El cobre presente debe expresarse como mg de Cu en un dm3 o L de muestra, mg/L (ppm). Debe tenerse en cuenta el valor de dilucin, si fue necesario efectuar ste.

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2.3 MTODO C

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El contenido de cobre tambin se puede determinar empleando espectrofotometra de absorcin atmica, siguiendo las instrucciones del fabricante del equipo empleado.