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Objetivo General: .Determinar presencia o ausencia de hongos y levaduras en una muestra de tierra de la Universidad Tcnica de Manab Objetivos Especficos:
.Aplicar todos los conocimientos obtenidos en el curso de Microbiologa
Marco Terico: Los hongos son microorganismo eucariota de mayor tamao y complejidad que las bacterias. Segn su morfologa los hongos se pueden dividir en dos grupos: mohos (hongos filamentosos) y levaduras. Las levaduras son unicelulares y generalmente presentan reproduccin asexual por gemacin.
Los mohos presentan una estructura vegetativa denominada micelio, el cual est formado por una serie de tubos rgidos ramificados, dentro de los cuales se encuentra el citoplasma multinucleado. Estos tubos reciben el nombre de hifas. De esta forma a partir de una espora en germinacin se desarrolla una hifa, esta se ramifica y forma un micelio. El crecimiento del hongo se prolonga hasta que los nutrientes desaparezcan. Las hifas pueden ser de dos tipos: vegetativas que penetran el substrato con el fin de
Absorber nutrientes e hifas areas que son las portadoras de las estructuras reproductoras. La clasificacin de los hongos se hace segn las caractersticas de las hifas, la formacin de esporas asexuales, las estructuras que contienen stas y la capacidad de producir esporas sexuales.
Orden de caracteres para la identificacin en hongos: Aspecto macroscpico de la colonia Tipo de hifa Colocacin del o los esporforos Presencia de esterigmatas (esporangiforo o conidiforo) y el orden que presentan Forma tamao y distribucin de las esporas Presencia o no de rizoides. Slo se presentan en hongos de hifa no septada. Por ejemplo: Rihizopus, Rhizomucor, Absidia Practicar pruebas de identificacin bioqumica
Materiales y Equipos
Sustancias y Reactivos
Autoclave Balanza Analtica Contador de colonias Pera Incubadora Cabina de Flujo Laminar (Biobase) Pipetas Matraz Cajas Petri Tubos de ensayo Hornilla elctrica
Agar Sabouraud Dextrose Agar with Chloramplenicol Agua Peptonada Agua Residual Agua destilada
Procedimientos: Medio de cultivos: Medio de Cultivo: Sabouraud Dextrose Agar with Chloramplenicol 1. Combinar 19,5g de medio con 300ml de agua desionizada. Mezclar para obtener una solucin homognea 2. Hervir el agua desionizada para disolver completamente. No sobrecalentar. 3. Autoclavamos a 121C por 15 minutos.
Agua Peptonada 1. Suspender 7,5g en 500ml de agua destilada. Mezclar bien y dispensar en tubos.
Preparacin de la muestra: Tierra: 1. Tomamos un frasco para muestra previamente esterilizado, colocamos la tierra y tapamos. 2. Pesamos 1g de la muestra y la diluimos en agua destilada hasta obtener una solucin no tan turbia. Diluimos 1g en 350ml. 3. Trasladamos la muestra diluida a la cabina de flujo laminar para realizar disoluciones. Realizamos 4 disoluciones en tubos de ensayo 1ml de la muestra y 10 de agua peptonada. 4. Tomamos 1ml del primer tubo y lo depositamos en una caja petri. Realizamos el mismo proceso con los dems tubos 2, 3, 4, por vertido doble. 5. Colocamos el medio en las cajas petri que contienen las muestras de los tubos. Esperamos hasta que gelifique. 6. Incubamos por 1 semana a 20C. 7. Observamos los resultados.
Resultados: Disolucin #1 (Tubo #1) Presencia de 5 hongos y 8 levaduras Disolucin #2 (Tubo #2) Presencia de 1 levadura y 2 hongos
Disolucin #2 (Tubo #2) Presencia de 3 levaduras y 2 hongos Disolucin #3 (Tubo #3) Presencia de 3 levaduras y 2 hongos Disolucin #3 (Tubo #3) Presencia de 2 levaduras y 1 hongo Disolucin #4 (Tubo #4 y 4) No se observ presencia de levaduras ni hongos.
Conclusiones: La obtencin de Hongos fue claramente exitosa, lo q demuestra una prctica exitosa Las muestras ms contaminadas determinamos que fueron la tercera ya que en este hubo mayor presencia de hongos
Recomendaciones: Utilizar guantes, mascarilla, gorros para evitar la contaminacin de las muestras mientras se las manipula. Mantener todos lo instrumentos y las muestras dentro del rea estril del laboratorio para evitar contaminacin externa.
Bibliografa:
http://www.buenastareas.com/ensayos/Cultivo-e-Identificaci%C3%B3n-DeHongos/4366172.html
Anexos
Pesado de Muestras
Sembrado
Incubado
Primeros Resultados
Resultados Finales