POLARIMETRIA Y REFRACTOMETRIA

Natalia Arbelaez Ramos 0957140; Hebert Andrs Rengifo 1054357 Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Depto. Qumica, Qumica, Universidad del Valle, Cali, Colombia 2012

From the index of refraction of a substance it is possible to calculate his concentration, This technology I use to determine the percentage ethanol in an alcoholic commercial drink, Two methods were used, one was the regular method of calibration and other one the method of addition of standard, The obtained results were 19.41 % p/v with a mistake of 76.45 % and 6.54%p/v with a mistake of 40.54 % for every method respectively. POLARIMETRIA, DATOS CALCULOS Y RESULTADOS En la prctica se llevo a cabo la preparacin de 25.00mL de soluciones patrn de sacarosa, para determinar la concentracin de esta misma en una muestra de azcar los estndares se prepararon a las siguientes concentraciones: Estndar G sacarosa utilizados 0,0001 1 4,0068 1,0017 2 6,0028 1,5007 3 10,0264 2,5066 4 14,0036 3,5009 5 16,0464 4,0116 6 20,0704 5,0176 muestra 2,5573 Tabla. 1 concentracin de estndares de sacarosa y muestra Una vez preparadas las soluciones se procede a su inmediata medicin del ngulo de rotacin en el polarmetro estas mediciones se realizan por duplicado, y se saco un promedio de ellos que arrojo los siguientes resultados: estndar Rotacin promedio 1 49,30 2 46,63 3 40,93 4 33,43 5 21,05 6 31,68 muestra 46,33 Tabla. 2 ngulos de rotacin de las soluciones patrn y muestra Con los datos de la tabla 2 se procede a graficar la rotacin promedio de los estndares vs la concentracin %p/v de sacarosa %p/v[sacarosa]

RESUMEN Se determin el ngulo de rotacin de la sacarosa en estndares de concentracin conocida, tambin se midi la rotacin de la sacarosa en una muestra problema con el fin de determinar su concentracin y la rotacin especfica de la misma esta ultima fue de 3,84, el procedimiento se realiz con un polarmetro y con los datos obtenidos se realiz una curva de calibracin y a partir de la ecuacin de la recta se calcul la concentracin de sacarosa en la muestra de azcar que fue de 53,53%(p/p). A partir del ndice de refraccin de una sustancia es posible calcular su concentracin, esta tcnica se uso para determinar el porcentaje etanol en una bebida alcohlica comercial, se usaron dos mtodos, uno fue el mtodo regular de calibracin y el otro el mtodo de adicin de estndar, los resultados obtenidos fueron de 19.41 % p/v con un error de 76.45% y 6.54%p/v con un error de 40.54% para cada mtodo respectivamente. ABSTRACT There decided the angle of rotation of the saccharose in standards of known concentration, Also the rotation of the saccharose measured up in a sample problem in order to determine his concentration and the specific rotation of same finalizes this it was of 3,84 , The procedure was realized by a polarimeter and with the obtained information one realized a curve of calibration and from the equation of the straight line the concentration of saccharose was calculated in the sample of sugar that was 53,53 % (p/p).

60.0000 promedio rotacion 50.0000 40.0000 30.0000 20.0000 10.0000 0.0000 0 10 20 30

= 45,37% | |

Valor terico de sacarosa en azcar =98% y = -1.474x + 54.402 Valor experimental de sacarosa =53,53%
| |

concentracion (%p/v) sacarosa Grafico 1 Con ayuda de la ecuacin de la recta se procede a calcular la concentracin de la sacarosa en el azcar: Y= -1,474X+54,402 Rotacin de la muestra (azcar)= 46,33 46,33= -1,474X+54,402 X= 5,4762 % (g sacarosa/mL) Se calcula la rotacin especfica de la sacarosa por medio de la ecuacin de clerget: []=

REFRACTOMETRIA DATOS, CLCULOS Y RESULTADOS

Curva de calibracin (C.C). A partir de etanol con un 96% de pureza y una densidad experimental de 0.85 g/mL, se preparo una serie de soluciones patrn a diferentes concentraciones realizando previamente el calculo estequiometrico correspondiente para cada solucin. A cada una de estas soluciones se le midi el ndice de refraccin por duplicado. Tambin se preparo una muestra tomando una alcuota 17.0 mL de vino y enrasando a 25.00 mL, posteriormente se midi el ndice de refraccin al igual que al agua destilada. En la siguiente tabla se muestra los volmenes usados de etanol para la preparacin de las diferentes soluciones patrn y las concentraciones reales.

C: concentracin de la muestra g/mL l: longitud del tubo (dm) []:rotacin especifica

[]=

3,84 mL/dmg

Porcentaje de sacarosa en la muestra: Se calcula el porcentaje de sacarosa en la muestra realizando el siguiente clculo:

Alcuota Etanol (mL) 0.3 0.9 1.8 2.8 3.7 4.6

Volumen Concentracin solucin total real etanol (%p/v) 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00 0.97 2.93 5.87 9.13 12.07 15.01

Tabla1. Alcuotas y concentraciones de soluciones patrn para la curva de calibracin.

%sacarosa en el azcar=53,53%(p/p) Se procede a calcular el porcentaje de error de sacarosa en el azcar con el dato obtenido experimentalmente comparado con el reportado en la etiqueta que es de 98%

A continuacin se muestra en la tabla 2 los ndices de refraccin para cada solucin como para la muestra y el agua destilada. ndices de refraccin Concentracin Promedio real etanol Lectura Lectura

(%p/v)
0.97 2.93 5.87 9.13 12.07 15.01 Agua destilada muestra

2 1.3340 1.3340 1.3365 1.3380 1.3400 1.3410 1.3340 1.3400 Para determinar la concentracin de etanol presente en el vino se procede a hacer el siguiente clculo: Se despeja X de la ecuacin.

1.3340 1.3340 1.3340 1.3340 1.3365 1.3365 1.3380 1.3380 1.3400 1.3400 1.3410 1.3410 1.3340 1.3340 1.3400 1.3400

Tabla 2. ndices de refraccin (patrn, muestra y agua)

Con los promedios de los ndices de refraccin y las concentraciones de las soluciones patrn se construye una curva de calibrado. 1.3420 promedio indice de refraccion 1.3400 1.3380 1.3360 1.3340 1.3320 0 5 10 15 20 Curva de calibracin de adicin estndar (C.C.A.E) concentracion (%p/v) etanol R = 0.9739 Se halla el porcentaje de error en la determinacin de etanol en la muestra de aguardiente aplicando la siguiente ecuacin:

y = 0.0005x + 1.3334

Grafica 1. Curva de calibracin (promedio ndice refraccin Vs concentracin)

Calculo de concentracin por interpolacin. Ecuacin de la recta:

Para la determinacin por este mtodo se procedi a preparar una serie de soluciones agregando a cada una de ellas 10.00 mL de vino, y un volumen conocido distinto a cada solucin, enrazando a 25 mL con agua destilada. Los volmenes se muestran a continuacin.

Donde: Y= seal (ndice de refraccin) b= pendiente x= concentracin a=intercepto

Volumen (vino) mL

Volumen etanol (mL)

Volumen Concentracin solucin real etanol total (%p/v)

(mL) promedio indice de refraccion

10.00 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00

0.0 0.5 1.0 2.0 3.0 4.0

25.00 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00

0.0 1.63 3.26 6.52 9.79 13.05

Tabla 3. Soluciones preparadas con la muestra junto con los volmenes de etanol agregados para la C.C.A.E.

1.3460 1.3450 1.3440 1.3430 1.3420 1.3410 1.3400 1.3390 1.3380 1.3370 1.3360 0

y = 0.0006x + 1.3366

R = 0.9567

5 10 concentracion (%p/v) etanol

15

Posteriormente a cada una de las soluciones preparadas y descritas en la tabla anterior se le midi el ndice de refraccin (por duplicado), los datos obtenidos se reportan en la siguiente tabla.

Grafica 2. Curva de calibracin de adicin estndar.

Calculo de concentracin por extrapolacin Concentracin ndices de refraccin etanol absoluto %p/v 0.3%p/v Lectura Lectura Promedio 1 2 agua 1,3340 1.3340 1.3340 Con la ayuda de la ecuacin de la recta y volviendo la seal=0 se procede a calcular el porcentaje de etanol en la muestra. Al intercepto de la curva se le resta el ndice de refraccin del agua.

0.0 1.63 3.26 6.52 9.79 13.05

1,3375 1,3375 1,3375 1,3375 1,3375 1,3375 1,3410 1,3410 1,3430 1,3430 1,3450 1,3450

1,3375 1,3375 1,3375 1,3410 1,3430 1,3450 Se procedi a hallar el porcentaje de error.

Tabla 4. ndice de refraccin para las slnes preparadas C.C.A.E.

Se grafic, tomando las concentraciones vs el promedio de las lecturas de los ndices de refraccin. La grfica es la siguiente:

La ausencia de efectos de matriz conlleva a pendientes (sensibilidades instrumentales) estadsticamente iguales por ambos mtodos. Cualquier diferencia entre los dos mtodos de calibracin regular y adicin estndar puede verificarse mediante una prueba de significacin. A continuacin se muestra una tabla con las formulas necesarias para hacer los respectivos clculos.

Ecuacines

(
) )

( (

b= = 0.454
Tabla5. Formulas para la prueba de significacin.

Con la aplicacin de las formulas reportadas en la tabla 5. Se obtienen los siguientes resultados para cada una de los mtodos (C.C, C.C.A.E).

tcri con 95% de confianza y 9 grados de libertad = 2.26 Como tcri excede tcal a un 95% de confianza se puede decir que las pendientes no son significativamente diferentes. Se concluye estadsticamente la ausencia de efectos de matriz en los dos mtodos.

C.C
b= 0.0005 a=1.3334

C.C.A.E
b= 0.0006 a=1.3366

Calculo de LCD. Como Para la curva de calibracin normal

Tabla 6. Datos obtenidos con la aplicacin de formulas de tabla 5

Se realiza una prueba T para comparar las sensibilidades: H0: Las pendientes no son diferentes. H1: las pendientes son diferentes. Se utilizan las siguientes ecuaciones:

Para la adiccin estndar es de:

Donde SR:

DISCUSION En la prctica se emple un polarmetro para cuantificar la sacarosa en una muestra de azcar y as determinar la rotacin especfica de la misma, La polarimetra es una tcnica que se basa en la medicin de la rotacin ptica producida sobre un haz de luz polarizada al pasar por una sustancia pticamente activa. La actividad ptica rotatoria de una sustancia tiene su origen en la asimetra estructural de las molculas [1]. El instrumento utilizado(polarmetro) consta de un lente polarizador, al pasar la luz que se

Tcrit para (f1+f2) grados de libertad.

descompone en ondas electromagnticas que se propagan en todas las direcciones por el objeto polarizador se convierte en un rayo de luz polarizado en un solo plano, seguido de esto el rayo pasa atreves de la celda que contiene la muestra con actividad ptica, este haz de luz se desva a la izquierda y se dice que la sustancia es levgira o a la derecha dextrgira, el instrumento tambin determina el ngulo de rotacin. Esta tcnica aparte de determinar la rotacin especifica de la sacarosa tambin permite calcular la concentracin de una muestra problema en este caso azcar a partir de una curva de calibracin con estndares de concentracin conocida en este caso a partir de soluciones de sacarosa pura y midiendo tambin el ngulo de rotacin a una solucin de concentracin desconocida, con los datos obtenidos se construye la grafica numero 1.con una interpolacin de determino la concentracin de sacarosa en la muestra de azcar Incauca que arrojo un valor de 53,53%(p/p) este comparado con el de la etiqueta que era del 98% tuvo un error del 45,37% las causas de este posible error son las siguientes: El primer error que se puede discutir, es de carcter humano, es decir el analista no observ bien el punto que daba el polarmetro. Este error es el que ms influye en el resultado, debido a que para determinar la lectura en el polarmetro se debe observar muy bien la escala, la cual resulta difcil de observar y respectivamente leer por incomodidad. Adems de no percibir bien la escala del polarmetro, el ojo humano posee un error de imagen y este error es proporcional dependiendo del ser humano. Lo anterior afecta a la hora de tomar la lectura, por lo que se debe de tener mucha precaucin, debido a que cuando se introduce la muestra se observa dos bandas en la esfera. Entonces para determinar el ngulo de rotacin, se debe girar la perilla hasta que la esfera se vea completamente de un solo color que en este caso fue naranja oscura. Por lo anterior, dependiendo del ojo humano se tiene lecturas diferentes. La lectura correcta se muestra en la siguiente figura:

Para corregir este error y cuantificar bien el analito, se debe utilizar un detector fotoelctrico que da lecturas ms confiables, reduciendo as el error y mejorando la sensibilidad del mtodo. La principal desventaja es que resulta ms costoso. La rotacin observada de la muestra de azcar fue 46,33 a la derecha. Los azucares tienen la capacidad de desviar el plano de la luz polarizada eso se debe a la presencia de tomos de carbono asimtrico en la molcula (centros quirales), como se sabe un azcar es un polmero conformado por varias unidades monomericas, estas unidades de obtienen por medio de la hidrlisis del azcar, para el caso de la sacarosa se obtiene L-fructosa y D-glucosa. Las interacciones entre la radiacin electromagntica y la materia generan fenmenos naturales de gran importancia que pueden servir como elementos para cuantificar o identificar cierto tipo de parmetros. Uno de estos fenmenos es la refraccin, el cual se presenta por cambio en la velocidad de propagacin de las ondas electromagnticas entre dos medios por diferencias en la composicin o temperatura entre estos. El cambio de la velocidad de propagacin de las ondas genera una variacin en la direccin del rayo una vez incide sobre el medio. Esta relacin entre velocidades es conocida como el ndice de refraccin y usualmente se toma respecto al aire, teniendo en cuenta que cuanto mayor es este, ms lenta es la velocidad de la luz en este medio. La variacin en la temperatura no homognea en un medio, puede generar este fenmeno por cambios en la energa cintica de las partculas y su densidad [3]. Por eso es conveniente que cualquier tipo de anlisis que implique la evaluacin del ndice de refraccin se realice bajo el control de la temperatura. Las variaciones de composicin de las soluciones deberan generar un cambio en el ndice de refraccin, ya que el ngulo en el cual el rayo es refractado depende del tipo de sustancia. A medida que la concentracin de etanol en una solucin acuosa aumenta, debera generar un cambio proporcional en el ndice de refraccin de la solucin, ya que la naturaleza de la solucin se asemeja ms a la del etanol puro, el cual presenta un ndice de refraccin diferente al del agua. Las molculas de etanol son diferentes en cuanto a

Detectando la rotacin de la luz polarizada por medio del ojo humano. [5]

estructura, peso molecular y composicin atmica; lo que naturalmente debe ocasionar un cambio en el paso de la luz a travs de un medio, causando que esta atraviese el medio con mayor dificultad. Para la determinacin cuantitativa del etanol en la muestra de vino se utiliz la curva regular de calibracin, la cual consiste en preparar una serie de soluciones estndares, es decir, soluciones que contiene el analito que se va a determinar, en este caso se utiliz etanol con una pureza de 96.0%(p/p) y una densidad experimental de 0.85 g/mL para preparar seis soluciones con diversas concentraciones entre 1.0%p/v y 15%p/v. Llevando una secuencia, se midi el ndice de refraccin de los seis estndares por duplicado. Se grafic la curva de calibracin, colocando las lecturas del instrumento en el eje Y, y las concentraciones estndares en el eje X, como se pudo observar en la grfica 1.El coeficiente de relacin (R) obtenido fue de 0.97 lo cual indica que hay una relacin lineal muy buena entre las dos variables (concentracin e ndices de refraccin). La concentracin de la muestra desconocida se obtuvo por interpolacin utilizando la ecuacin de la curva y la lectura promedio que arroj la muestra la cual fue de 1.3400, Se realiz el clculo y se encontr que la concentracin de etanol en la muestra de vino es de 19.41%(p /v) Se determin que haba un error de 76.45 %. Como se puede apreciar, existe un error alto involucrado en la cuantificacin que se explica por las siguientes causas. El primer error tiene que ver con el aspecto humano, en el que el causante es el analista que no realiz una adecuada medicin de los ndices de refraccin en el refractmetro. Este tipo de error es muy comn debido a que a la hora de realizar las mediciones en el refractmetro se debe calibrar adecuadamente la escala de la sombra y la luz en el instrumento, lo cual se dificulta por lo incomodo que resulta leer con los ojos los cuales son sensibles a desviar la imagen y no tener una posicin fija de la medida, Por lo cual es recomendable adaptarle al instrumento un dispositivo fotoelctrico que me permita tener una correcta lectura de los ndices de refraccin, esto har que se mejore la precisin y que los lmites de deteccin sean ms bajos.

Otra causa de error son las incertidumbres asociadas a los volmenes de las soluciones estndares preparadas lo cual influye en las lecturas obtenidas por el instrumento. La muestra (bebida alcohlica) que se analiz fue un vino, la cual en la etiqueta mostraba que contena 11%(v/v) de etanol. Tambin, se utiliz otro mtodo para encontrar la concentracin de etanol en la muestra, y es el que tiene que ver con el mtodo de adicin de estndar, el cual consiste en tomar volmenes iguales de la muestra, de acuerdo al % de etanol en la muestra se agreg 10.0 mL de vino a 6 matraces de 25.00 mL Todas estas soluciones excepto la inicial se trataron (doparon) por separado mediante la adicin de volmenes diferentes de etanol, y se enrasaron hasta su volumen total. Se midi el ndice de refraccin por duplicado igualmente como en el mtodo anterior y en la grfica 2 se observan los puntos obtenidos. El coeficiente de relacin (R) obtenido fue de 0.95 lo cual indica que hay una asociacin lineal muy buena entre las dos variables (concentracin e ndices de refraccin).Se encontr la ecuacin de la recta y con sta se hizo una extrapolacin con la pendiente (b) y el intercepto de la curva de adicin de estndar. Hay que mencionar que se rest al intercepto el ndice de refraccin del agua experimental (1.3340), el cual se haba utilizado como referencia. Se realiz el clculo correspondiente y se encontr que la concentracin de etanol en la muestra de vino es de 6.54%. Se determin que haba un error de 40.54%. Como se puede apreciar, existe un error muy alto involucrado en la cuantificacin que se explica por las siguientes causas: El mtodo de adicin estndar es menos preciso que el mtodo regular de calibracin. El precio que uno paga para reducir el error aleatorio es una disminucin en la precisin. El mtodo de adicin estndar requiere cantidades de muestra ms grandes que el mtodo regular de calibracin. Su principal desventaja consiste en ser un mtodo de extrapolacin, por lo tanto es menos preciso que las tcnicas de interpolacin. Posteriormente, se realiz la comparacin entre los dos mtodos utilizados: calibracin vs adicin de estndar, con el propsito de definir la existencia o ausencia de efectos de matriz en las cuantificaciones. Por ello, se utiliz una prueba T para comparar las pendientes (sensibilidades) y los resultados mostraron que los dos mtodos no presentan efectos de matriz.

Los lmites de deteccin encontrados fueron 5.30 para el mtodo de calibracin regular y 7.17 para el mtodo de adicin de estndar. Con base en lo anterior, se afirma que se puede detectar ms fcilmente una mnima concentracin del analito (etanol) con el mtodo de adicin de calibracin regular que con el mtodo de calibracin de adicin estndar.

pesar del resultado de la prueba pudieron haber sustancias interfiriendo en la seal, y tambin errores humanos al momento de la medicin que alteraron los resultados finales. Las preguntas fueron resueltas en la seccin de datos clculos y resultados. BIBLIOGRAFIA [1]http://www.uned.es/094258/contenido/tecnicas/ polarimetria/polarimetria.htm

CONCLUSIONES * En las tcnicas polarimetrcas es necesario que el instrumento (polarmetro) se encuentre en un lugar con una buena iluminacin para que as se permita ver claramente el crculo naranja que indica el ngulo de rotacin de la sustancia para que no afecte en la cuantificacin de la muestra activa. *Cuando se quiere analizar una sustancia a nivel cuantitativo es de gran importancia saber que propiedades especificas tiene la sustancia que la haga diferir de las dems, como para esta practica que se analiza la desviacin del plano de luz polarizada de la sacarosa y a partir de los datos obtenidos saber la concentracin de una muestra problema. *En general los errores asociados a mtodos pticos se asocian a errores visuales debido al alcance de visin de cada analista y esto se puede corroborar con el porcentaje de error que dio en este mtodo a la hora de cuantificar sacarosa 45,37%.

[2]http://www.uhu.es/quimiorg/actopt.html
[3]ndice de Refraccin. Anlisis de resultados (Artculo de internet) http://www.ellaboratorio.co.cc/pr acticas/indice_refraccion.pdf. Miller, James N, Estadstica y quimiometria para qumica analtica, Cuarta Edicin, Pearson Prentice Hall. 2002 pg. 127-128

*El mtodo de curva de calibrado regular es mas

preciso siempre y cuando no hallan efecto de matriz, por el contrario, si lo hay, es conveniente usar la curva de calibrado de adicin estndar.

* Con los resultados obtenidos en la practica y al

hacer los clculos correspondientes para hallar las concentraciones de etanol por cada mtodo. Se obtuvo que para la curva de calibrado regular se presentaba un mayor error, y para la de adicin estndar un error alto pero menor al anterior, sin embargo al realizar la prueba de significacin se obtuvo que los mtodos no diferan significativamente, por lo tanto no haba efecto matriz, basndonos en esto podemos decir que a