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Biologa general del reactivo biolgico

Captulo 2.

Biologa general del reactivo biolgico


NIEVES SALVADOR CABOS Unidad de Produccin Animal Instituto Santiago Ramn y Cajal, CSIC, Madrid.

ANIMALES DE EXPERIMENTACION VERTEBRADOS A LOS QUE SE APLICAN LAS DISPOSICIONES DE LA DIRECTIVA COMUNITARIA 86/609/CEE Roedores: taxonoma, generalidades, macro y microambiente Ratn: peculiaridades anatmicas y fisiolgicas, reproduccin y manejo Rata: peculiaridades anatmicas y fisiolgicas, reproduccin y manejo Hmster: peculiaridades anatmicas y fisiolgicas, reproduccin y manejo Cobayo: peculiaridades anatmicas y fisiolgicas, reproduccin y manejo Conejo: taxonoma, generalidades, peculiaridades anatmicas y fisiolgicas, reproduccin, macroambiente y manejo Primates no humanos: taxonoma, generalidades, peculiaridades anatmicas y fisiolgicas, reproduccin, macroambiente y manejo Perro: peculiaridades fisiolgicas, reproduccin, macroambiente y manejo Gato: peculiaridades, reproduccin, macroambiente y manejo Codorniz: generalidades, reproduccin, macroambiente y manejo OTROS ANIMALES NO RECOGIDOS EN LA DIRECTIVA COMUNITARIA 86/609/CEE Aves Generalidades Pollos: reproduccin, macroambiente y manejo Palomas y trtolas: generalidades, reproduccin, macroambiente y manejo Gerbos Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas, reproduccin, ambiente y manejo Cerdos Peculiaridades fisiolgicas, reproduccin, macroambiente y manejo Ovejas y cabras Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas, reproduccin, macroambiente y manejo Armadillo Peculiaridades anatmica y fisiolgicas, y manejo Murcilago Taxonoma, peculiaridades anatmicas y fisiolgicas, reproduccin, alimentacin y manejo Peces Taxonoma, generalidades, reproduccin y macroambiente y manejo Anfibios Taxonoma, generalidades, reproduccin macroambiente y manejo Reptiles Taxonoma, generalidades, reproduccin, macroambiente y manejo Invertebrados. Artrpodos Taxonoma, generalidades. IDENTIFICACION Y MARCAJE RESUMEN BIBLIOGRAFIA

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En la actualidad, los experimentos con animales se utilizan fundamentalmente en investigacin bsica y en control de calidad de productos, donde no se han podido sustituir por tcnicas alternativas. Los animales de laboratorio deben estar sanos, genticamente definidos y mantenidos en un medio ambiente controlado, para que estos resultados experimentales obtenidos sean vlidos y reproducibles. Un uso responsable y racional de estos animales de experimentacin, conlleva un conocimiento previo de sus caractersticas biolgicas (anatmicas, fisiolgicas y etolgicas), y un mantenimiento (alojamiento, alimentacin y manejo) apropiado para satisfacer todas sus necesidades, promover su salud y bienestar, para lograr el fin propuesto. ANIMALES DE EXPERIMENTACION VERTEBRADOS A LOS QUE SE APLICAN LAS DISPOSICIONES DE LA DIRECTIVA COMUNITARIA 86/609/CEE La Comunidad Econmica Europea (C.E.E.) propuso la Directiva 86/609/CEE con el fin de armonizar la legislacin de los diferentes Estados miembros, en favor de un uso ms racional y tico de los animales utilizados en experimentacin. En el anexo I de dicha Directiva, se considera como animales vertebrados de experimentacin las siguientes especies (aunque no excluye el uso de otras, siempre que est justificado):

Ratn Mus musculus Rata Rattus norvegicus Cobayo Cavia porcellus Hmster dorado Mesocricetus auratus Conejo Oryctolagus cunicullus Primates no humanos Perro Canis familiaris Gato Felis catus Codorniz Cotornix cotornix
Las cuatro primeras especies de la lista pertenecen al orden roedores, y representan cerca del 80% de los animales vertebrados que se destinan a experimentacin, las otras especies aunque tambin son importantes, no pueden competir cuantitativamente con las anteriores. Todas estas especies (excepto la codorniz) pertenecen al grupo de los mamferos. stos se caracterizan por tener: temperatura propia, que los hace en cierto modo independientes del medio, piel con pelos y glndulas mamarias para alimentar a sus cras, un slo hueso en su mandbula inferior y tres huesecillos en su odo medio, en lugar de uno, un encfalo desarrollado, que se refleja en su conducta activa y exploratoria, fundamentalmente aprendida, a travs de la curiosidad y el juego, y una gran capacidad de adaptacin evolutiva. Casi todas las especies son vivparas, lo que permite el nacimiento de cras en un estado avanzado de desarrollo. El amamantamiento de las cras por la madre, permite el establecimiento de vnculos y un perodo de enseanza fundamental. En el Anexo 2 el artculo 5 de la Directiva comunitaria, se recogen las directrices que deben tenerse en cuenta, al menos en Europa, relativas al alojamiento y cuidado de estos animales. Habitualmente, en el diseo de los sistemas de alojamiento se ha prestado bastante atencin a los aspectos higinicos y econmicos descuidndose, a veces, las necesidades de los animales para que desarrollen su conducta

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natural, en la actualidad los estudios de enriquecimiento ambiental van encaminados a subsanar dicha deficiencia. En general, las jaulas deben ser: seguras, para que el animal no pueda fugarse, fcilmente identificables, cmodas con espacio suficiente para permitir el desarrollo de ciertas necesidades etolgicas y con un diseo tal, que no puedan autolesionarse y accedan fcilmente al alimento y a la bebida, atxicas y de fcil limpieza, que puedan desinfectarse y autoclavarse. Adems, es importante conocer el material que compone la jaula, ya que ste puede condicionar su mantenimiento (por ejemplo las sustancias alcalinas suelen atacar al macroln y las cidas a los materiales metlicos), y si los animales estn en contacto directo con la cama o sobre superficies perforadas, para elegir el lecho ms adecuado para esa especie o minimizar las incomodidades del animal, en el segundo caso. Las condiciones ambientales as como las recomendaciones de espacio para estos animales quedan recogidas en los Cuadros. 2-1, 2-2 y 2-3. Roedores: taxonoma y generalidades

Orden Rodentia

Suborden Myomorpha

Familia

Gnero/especie

Muridae Mus musculus (ratn comn) Rattus norvegicus (rata noruega) Mesocricetus auratus (hmster sirio) Meriones unguiculatus (gerbo) Cavia porcellus (cobayo)

Cricetidae Histricomorpha Caviidae

Son animales nocturnos que se adaptan con facilidad a su medio ambiente. No son animales gregarios aunque s les gusta el contacto fsico prximo. Poseen picos de actividad durante el perodo oscuro. Sus ojos estn adaptados a la oscuridad y tienen muy poca visin en color. Estn cubiertos de pelo por todo el cuerpo salvo nariz, labios, palma y pies. Presentan ojos saltones, prpados desarrollados y finas y cortas pestaas. Los machos adultos son de mayor tamao que las hembras. Presentan incisivos de crecimiento continuo, su frmula dental es 2 (1003). Son animales omnvoros que comen de forma semicontnua. La conducta sexual de los roedores puede estar influenciada por: el fotoperodo, la temperatura, la disponibilidad de alimento y las feromonas. En general, los machos son menos sensibles a estos factores externos que las hembras, y pueden cruzarse continuamente a lo largo del ao, siendo mayor su efectividad cuando se les dejan perodos de descanso entre montas (2 das/semana). La conducta sexual en las hembras est controlada por el ciclo estral. Como en la mayora de los mamferos, el ciclo se instaura tras la pubertad, debido al aumento en la secrecin de las gonadotrofinas hormona folculo estimulante (FSH) y hormona luteinizante (LH), que produce el crecimiento de los folculos en el ovario. stos a su vez secretan estrgenos, que alcanzando un determinado umbral producen un fuerte incremento de la secrecin de LH. Este aumento de LH provoca la ruptura de los folculos de Graff, la liberacin de los

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vulos maduros contenidos en los ovarios (ovulacin) y la formacin del cuerpo lteo que producir progesterona. Los ovarios modifican su morfologa en las sucesivas ovulaciones, pasando de tener una forma lisa y redondeada a una forma arracimada. Habitualmente, las hembras son poliestrales, con un ciclo estral muy regular de unos 4-5 das de duracin (excepto la cobaya 14-16 das), donde el cuerpo lteo persiste 2 3 das. Las diferentes etapas del ciclo (proestro, estro, metaestro y diestro) se pueden identificar observando la morfologa del epitelio vaginal en extensiones teidas con Giemsa (ver fig.2.1.A). En roedores, este aumento de LH sucede al final de la fase de proestro, verificndose la ovulacin 12 h despus, al principio de la fase de estro, momento en que son receptivas al macho. La fase de estro tambin puede determinarse midiendo la impedancia de la mucosa vaginal, mediante la introduccin de una sonda en la vagina del animal y su lectura. Este mtodo es rpido, eficaz, fcil de realizar y de interpretar, y no se necesita experiencia en citologa vaginal (ver fig.2.1.A). Esta tcnica muy utilizada en ratas est menos desarrollada en otras especies. Una de sus aplicaciones ms directas es la eleccin de hembras para la obtencin de gestantes con fecha de cubricin conocida. Aunque la ovulacin sea espontnea se necesita el estmulo de la cpula y el fracaso del apareamiento, para establecer un cuerpo lteo plenamente funcional con una vida media de unos 11-12 das (pseudogestacin). Los cambios que produzca este cuerpo lteo en la mucosa uterina sern indistinguibles de los observados en una gestacin normal. El acoplamiento se puede confirmar por la presencia de un tapn mucoso en la vagina de la hembra (formado por las secreciones de las glndulas accesorias del macho y las secreciones vaginales de la hembra, y cuya misin es mantener unas condiciones ms idneas para la supervivencia de los espermatozoides) o por la visualizacin de espermatozoides en el frotis vaginal. En estados posteriores, tambin se puede verificar por palpacin de los embriones en los cuernos uterinos. Las hembras de los roedores son multparas (varios embriones se desarrollan al mismo tiempo). Los embriones se implantan y se desarrollan en los cuernos uterinos. La placenta es discoidal, circunscrita y se limita a una zona determinada de la vescula embrionaria. La regeneracin de la mucosa uterina comienza hacia el final de la gestacin, quedando la placenta fetal unida a la materna tan slo por un pedculo en el momento del parto, de ah que su desprendimiento no ocasione ms que una pequea herida, y por eso sea posible una nueva fecundacin e implantacin, en la mayora de las especies, despus del parto. La placenta sustituye al cuerpo lteo (que involuciona) en la secrecin de progesterona, adems secreta inhibidores estrognicos para inhibir el desarrollo folicular y la ovulacin. Este tipo de placenta permite la transmisin al embrin de anticuerpos maternos durante la gestacin, que se complementarn con los recibidos en el calostro durante la lactancia. Tras el parto, la produccin y secrecin de la leche aumenta rpidamente y cae, siendo necesaria la succin de las cras para mantener una produccin constante durante toda la lactancia. La lactacin y la gestacin pueden simultanearse, aumentndose la produccin si se aprovecha el estro frtil que se origina tras el parto (24-48 h despus), aunque en estas condiciones la implantacin puede retrasarse aumentndose el perodo de gestacin entre 3-5 das. Las cras de roedores (excepto las cras de cobayo, ver cobayo reproduccin) nacen con la piel de color rojizo, sin pelo, con los ojos y los odos cerrados, la transparencia de la piel permite la observacin del corazn, el hgado, el bazo y la leche en el estmago. A los 2-3 das el color de la piel es ms claro y se les despegan las orejas, a la semana tienen el cuerpo cubierto de un fino pelaje, hacia los 10-12 das los incisivos superiores e inferiores han erupcionado y los pezones inguinales son visibles en las hembras, y en los das siguientes (13-16) abren los ojos. La edad ptima para el destete oscila entre los 21-25 das de edad.

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Cuadro 2-1. Requisitos ambientales y parmetros fisiolgicos en roedores.


Ratn Rata 20-24 60 10-15 12-14/12-10 4 350 800 250 14 250-400 220-300 2-3 300-500 70-110 37.5-38.5 42 50 g: 130 130 g: 250 200 g: 325 Hmster 20-24 50-60 10-15 12-14/12-10 2.5 180 650 n/a 12 120-140 140-160 2-3 250-500 40-120 37-38 44 125 g: 260 Gerbil 20-24 40-55 15-20 12-15/12-9 4 230 1300 pareja 15 75-125 70-100 3-4 170-210 70-100 38.1-38.4 44 190 g: 205 Cobaya 20-24 50 10-15 14/10 5-6 600 1200 1000 18 550-725 484-614 5-6 230-380 42-104 37.8-39.5 64 400 g: 565 800 g: 720

Requisitos ambientales
Temperatura (C) Humedad relativa (%) Ventilacin (cambios/hora) Luz/oscuridad (horas) BTU. calora/animal/hora Dimensiones mnimas del suelo de la cubeta Adulto alojado individualmente (cm2) Animal reproductor con cras (cm2) Grupo (cm2 /adulto)
P P P P P P

20-24 50-60 15 12-14/12-10 0.6 180 200 80 12 25-40 20-40 1-2 300-800 100-200 36.5-38.0 40 20 g: 36

Altura mnima de la cubeta (cm)

Parmetros fisiolgicos generales


Peso adulto (g) macho hembra Esperanza de vida (aos) Tasa cardaca (/min.) Tasa respiratoria (/min.) Temperatura corporal (C) Nmero de cromosomas (2n) Superficie corporal (cm2)
P P

Consumo de comida (g/da) Cra comienza comer slido (da) Consumo de agua (ml/100g/da) Pubertad (sem) macho hembra Edad para la reproduccin (semanas) macho hembra N de hembras por macho en los cruces Ciclo estral (das) Duracin del estro (horas) Mecanismo de ovulacin Tiempo de ovulacin tras inicio estro (h) N medio de vulos Tipo de placenta Tiempo de implantacin (das) Duracin pseudogestacin (das) Duracin del embarazo (das) Tamao de camada Peso al nacer (g) Peso al destete (g) macho hembra Edad del destete (das) Ovulacin tras destete (horas)

4-5 12-20 8-15 10-15 20-35 10 12 7-10 8-11 4-5 15 10-12 8-10 3-4 10 4-6 6 4-6 6-10 7-8 5 6-8 4-6 7-11 4-5 6-8 10-11 6-7 9-12 8-10 8-10 10-14 6-8 9-13 9-11 3-4 3-4 1 1 5 4 (2-9) 4-5 4 4-6 14-18 14 14 2-24 12-18 1-18 espontneo espontneo espontneo espontneo espontneo 8-12 8-11 10-12 10 10 10 10 7 (4-9) 3-4 DISCOIDAL - HEMOENDOTELIAL COROIDEA -DECIDUAS 5 5 5 6 6 12 12-14 7-13 16 19 (18-21) 21-23 15-17 25-26 68 (59-72) 6-12 6-15 6-8 4-6 1-6 0.5-1.5 5 2-3 2.5-3.0 35-70 18-25 55-90 35-50 45-80 100-130 16-25 45-80 40-60 40-80 100-120 21-28 21 20-22 20-30 15-28 2-3 8-10 8-12 45 10

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Cuadro 2-1. Continuacin.


Ratn Composicin de la leche (%/100 ml) Agua Grasa Protena Lactosa Glndulas accesorias macho Volumen de eyaculado (ml) Espermatozoides eyaculados 75 10-12 9 3 B, A, VG, P, CG Rata 70-75 10-15 7-12 3-3.5 B, A, VG, P, CG 1-2 50-60 104
P P

Hmster 74 16.6 9 34 B, A, VG, P, CG 0.01-0.02 1.8-2.8 103


P P

Gerbil 60.4 23.5 (slidos magros 26.1) B, A, VG, P, CG

Cobaya

B, VG, P, CG 0.5 2-160 104


P P

Parmetros sanguneos
Volumen de sangre (ml/kg) Hemoglobina (g/100 ml) Hematocrito (vol.%) Dimetro de los hematies () Velocidad de sedimentacin (mm) 1h/2h/24h Tiempo de sangra (%) Tiempo de coagulacin (%) Leucocitos ( 100/mm3) Neutrfilos (%) Eosinfilos (%) Basfilos (%) Linfocitos (%) Monocitos (%) Plaquetas (miles/ml)
P P

76-80 10-17 39-49 5.5 3/ 4-5/10 50-60 seg 90-180 min 5-12 10-40 0-7 0-1 35-90 0-3 250000 89 (63-176) 64 (26-82) 6.2 (4-8.6) 3 (2.5-4.8) 36 (23-48) 13 (2-24) 19 (10-28) 19.5 (14-28)

60 14-20 36-48 6.5 0.5-3/ 4-5/10 1-2 min 2-4 min 6-17 18-36 1-4 62-75 1-6 330000 75 (50-135) 27 (10-54) 7.6 (4.7-8.2) 3.7 (2.7-5.1) 63 (46-81) 24 (18-30) 87 (57-128) 14.5 (5-29)

80 10-18 36-60 6

66-78 13-16 44-47

3-11 3-43 0-2 3 50-96 0-1 380000 69 (33-118) 53 (10-80) 7.1 (4-8) 3.3 (2.5-4) 100 (38-168) 24 (12-36) 17 (3-31) 22 (12-26)

7-12 20-30

60-70 400000 94 (60-140) (90-130) 7.9 (5-17) 3.1 (2.5-4.5)

69-75 12-15 38-48 7 1.5/ 3/ 20 30-40 seg 2.5-3.5 min 7-13 18-60 1-5 0-3 55-88 1-2 400-500000 92 (82-107) 30 (16-43) 5.2 (5-6.8) 2.6 (2.1-3.9) (27-68) 42 (25-59) 70 (55-108) 23.5 (9-32)

Parmetros bioqumicos
Glucosa (mg/100 ml) Colesterol total (mg/100 ml) Protenas totales (g/100 ml) Albmina (g/100 ml) Transaminasas glutmicas (Mu/l) Transaminasas pirvicas (Mu/l) Fosfatos alcalinos (Mu/l) Urea en sangre (mg/100ml)

12.37 21 (17-31)

BTU: British thermal unit (unidad trmica britnica).

La determinacin del sexo en las cras puede realizarse desde el nacimiento, considerando la distancia entre la papila genital y el ano (ver fig. 2.1.B.). En los machos esta distancia suele ser aproximadamente el doble que en las hembras, este conocimiento puede ser aprovechado para igualar el nmero de cras en las diferentes camadas (randomizar). En estados posteriores se pueden diferenciar ambos sexos por la presencia de mamas en las hembras o en el caso de los machos, por el descenso de los testculos a la zona inguinal, a partir del da 14, ante una ligera presin en la zona del abdomen. El destete es el momento adecuado para proceder al alojamiento de las cras separndolas por sexos y estableciendo los nuevos grupos. De manera artificial se puede interferir en algunas de las fases naturales del ciclo estral, para conseguir una mayor produccin, adelantar el momento de la concepcin o manipular los vulos o embriones. Las alteraciones ms habituales suelen ser:

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Anaovulacin: los anaovulatorios (progesterona y derivados) impiden la maduracin de los folculos e inhiben la ovulacin. Se utilizan para sincronizar el celo de las hembras. Superovulacin: se provoca la maduracin y la expulsin de un elevado nmero de vulos en un momento determinado. Es una prctica frecuente en ratones. Se consigue inoculando gonadotropinas. La eficacia del mtodo depende de la edad, peso y estirpe de las hembras, dosis de gonadotropina y momento de su administracin.
U U U U

Fertilizacin in vitro: es una tcnica habitual en el caso de la produccin de animales transgnicos. Es una tcnica laboriosa, donde la cronometracin de los tiempos es decisiva. En ratas y ratones, los vulos fertilizados se transfieren a madres adoptivas previamente cruzadas con machos vasectomizados, ya que estas especies necesitan la estimulacin del coito para obtener un cuerpo lteo funcional y que la gestacin pueda seguir posteriormente adelante (ver captulo 6 transgenizacin).
U U

Roedores: macro y microambiente En general, se debe proporcionar espacio adicional siempre que sea posible. Salvo que lo requiera el experimento, deben alojarse en jaulas de suelos slidos. El lecho debe ser absorbente, atxico, adecuado para esa especie y proporcionado en cantidad suficiente, para que los animales puedan manipular su medio ambiente, siendo este requisito especialmente importante en las especies que construyen nidos (hmster). Variaciones en el material del lecho es una forma fcil de enriquecimiento ambiental. Animales mantenidos sobre superficies perforadas se encuentran incmodos y no suelen criar. Los animales alojados en cubetas provistas de una cubierta de policarbonato que llevan incorporado un filtro desechable, mantienen un entorno ms protegido (microclima), a costa de un aumento en la temperatura interior de la jaula, un aumento en la concentracin de gases y una disminucin del aire fresco, parmetros que deben tenerse en cuenta para adecuar el nmero de cambios. Para minimizar estos problemas, hoy en da, se han desarrollado microaisladores que permiten la inyeccin de aire estril, manteniendo el nmero de renovaciones y la disminucin de las concentraciones de amoniaco. Si se utilizan para el mantenimiento de animales inmunodeprimidos todo el material que est en contacto con el animal (cama, comida y agua) debe estar esterilizado, y el personal que los maneja debe utilizar gorros, guantes, mascarillas, calzas y trajes desechables. Estas cubetas deben mantenerse dentro de unidades protegidas o aisladores, y los cambios deben realizarse en campanas de flujo laminar. El uso de jaulas transparentes u opacas, no parece importante, existiendo defensores y detractores en ambos bandos. Sin embargo, la localizacin de la jaula juega un gran papel, en cuanto a como pueden afectarle otros parmetros de su entorno: intensidad de luz, corrientes de aire, renovaciones de aire. Con independencia del tipo de jaula utilizado, deben mantenerse grupos estables siempre que sea posible, evitando el hacinamiento y los grupos muy reducidos. De existir variaciones deben buscarse signos de comportamiento agresivo y heridas tras la creacin del grupo y la limpieza de la jaula, ya que la eliminacin de olores activar las luchas entre ellos. El hacinamiento produce disminucin de la fertilidad y aumento de mortalidad en cras jvenes. Las hembras suelen ser ms tranquilas (menos las hembras hmsters) que los machos, pero pueden presentar un comportamiento aberrante sobre todo cuando estn criando. Lechos con olores fuertes pueden llevarlas a abandonar el cuidado de su camada. Habitualmente se les administra comida y bebida ad libitum, aunque se haya observado en rata y ratn una reduccin en la incidencia de tumores cuando la dieta se racionaliza. Los animales SPF y axnicos no tienen una flora normal, y pueden carecer de las bacterias necesarias para la sntesis de algunas vitaminas (vitamina K y complejo B), siendo necesaria su adicin a la dieta. Lo mismo ocurre con los cobayas que no pueden sintetizar vitamina C.

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El agua puede suministrarse mediante biberones o por un sistema de bebida automtica, debe ser potable y libre de agentes patgenos o contaminantes. Para conseguirlo el agua puede clorarse o acidificarse, filtrarse o irradiarse con luz ultravioleta. La acidificacin del agua pH 2.5, es una prctica ampliamente distribuida para el control de la microflora particularmente en los sistemas de bebida automtica. Sin embargo, no debe realizarse cuando se aaden antibiticos o vitaminas al agua por poder cambiar las variables experimentales. La falta de agua es peor tolerada que la falta de alimento, variando la gravedad segn la especie y estado fisiolgico del animal. En general, los sntomas aparecen a los 2-3 das y la muerte poco tiempo despus si no se remedia la situacin. La temperatura, la Humedad Relativa (HR) y la calidad del aire son los parmetros ms importantes en el macroclima de los roedores. Los cambios de temperatura producen cambios en el metabolismo, en la circulacin perifrica, en la actividad y el comportamiento de los animales y, como no, en los resultados experimentales. Al producirse variaciones en la ingesta pueden existir variaciones en los test de incorporacin de drogas. Tambin pueden existir variaciones en la actividad de estas drogas o interferir en funciones endgenas como lactacin, gestacin o espermatognesis. En general, los roedores soportan mejor las bajas que las altas temperaturas (T 32C pueden producirles la muerte). Los roedores disipan el calor con dificultad, al carecer de glndulas sudorparas, no jadear y tener casi toda su superficie corporal cubierta de pelo. Las zonas sin pelo, como la cola y las orejas, el descenso testicular al saco escrotal y conductas como el enterramiento o el recubrimiento del cuerpo con saliva, son vitales para disminuir su temperatura corporal. En ambientes fros, se observa una disminucin en la concentracin de cido ascrbico en las glndulas suprarrenales, tanto en ratas como en cobayos, aconsejndose en estas condiciones, la administracin de vitamina C para aumentar su supervivencia. Las variaciones en los porcentajes de humedad relativa producen diferentes patologas. As, por ejemplo, un aumento en la HR produce el aumento de la concentracin de amoniaco en las jaulas que puede ser responsable de procesos patolgicos en el tracto respiratorio. De igual forma, una HR baja produce un aumento de hasta un 5% en el consumo de alimentos o, en animales jvenes, enfermedades tan caractersticas como la cola anillada. Respecto a la calidad del aire, se debe tener en cuenta la ausencia de sustancias aromticas, pesticidas o cargas inicas introducidos por el sistema, que podran ser potencialmente carcinognicas o modificar la respuesta inmune. El sistema de ventilacin debe disearse de tal modo que se eviten las corrientes de aire perjudiciales, siendo suficiente una tasa de ventilacin de 15-20 renovaciones de aire por hora. Los roedores, adems, son sensibles a ultrasonidos, por or frecuencias 80 KHz. En general, los sonidos constantes y de baja frecuencia son menos traumticos que los sonidos intermitentes y de alta frecuencia. Adems de la intensidad del sonido influye la duracin, el tiempo de exposicin y posibilidad de nuevas exposiciones, as como la especie y el estado fisiolgico del animal expuesto. Animales sometidos a sonidos pueden presentar daos en el odo, hipertensin, cambios en su peso corporal, en su respuesta inmune, en su qumica sangunea y en su distribucin celular, canibalismo, fallos reproductivos y de audio-acondicionamiento. Se recomienda en las habitaciones no tener un ruido superior a los 50 dB. Tambin son sensibles a las variaciones en la intensidad, color o periodicidad de la luz, sobre todo los animales albinos, que producen alteraciones en la estimulacin y sincronizacin del ciclo sexual (an en perodos muy cortos de luz durante el perodo oscuro), en la movilidad gastrointestinal, en la actividad motora en ratn, en el tiempo de maduracin de las ratas, en la retina... Se recomienda el uso de fluorescentes de 350-400 lux de intensidad, en animales albinos la intensidad de la luz no debe exceder los 60 lux. Para examinar a los animales en perodos de oscuridad se recomienda el uso de luz roja por ser invisible para la mayora de las especies. De forma similar, cualquier olor anmalo penetrante puede alterar su percepcin y provocar cambios en su conducta social.

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Ratn Los ratones empezaron a utilizarse en biomedicina a finales del siglo XIX por su pequeo tamao, su fcil manejo, su variabilidad gentica y su alta tasa reproductiva. En la actualidad existen ms de 1000 cepas congnicas genticamente definidas. Algunas de estas cepas presentan caractersticas anatmicas y fisiolgicas especficas, que les confieren propiedades de modelo experimental. Se utilizan en la investigacin sobre el cncer, nuevos frmacos, toxicidad de productos, preparacin de vacunas y produccin de anticuerpos poli y monoclonales. Entre las cepas ms usadas se pueden destacar: Ratones Swiss y NMR1: cepas no consanguneas usadas en farmacologa y toxicologa. Ratones Balb/c: cepa consangunea usada en la produccin de anticuerpos. Ratones C57BL6, C3H: cepas consanguneas usadas como base en lneas modificadas genticamente. Ratones inmunosuprimidos (Swiss +/nu y Balb/c A-nude -ver cap. 15-): son atmicos y con el sistema inmunitario deficiente. Esta propiedad les hace susceptibles de desarrollar de una manera natural o inducida experimentalmente cualquier tipo de enfermedad. Se utilizan en inmunologa en estudios de regulacin de la respuesta inmune, como modelos de deficiencia linfoctica de origen tmico o en la produccin de anticuerpos monoclonales. En cncer, en la induccin de virus espontneos o tumores qumicos, en el desarrollo de tumores despus de la exposicin a sustancias qumicas carcinognicas, en cncer cutneo, y en estudio de tumores o posibles tratamientos antitumorales. En estudio de infecciones experimentales, como la inmunidad adquirida durante infecciones parasitarias, bacterianas y virales. En ocasiones se utilizan como centinelas en las salas del animalario, por presentar una sintomatologa clara ante cualquier posible infeccin por variacin de las condiciones medio ambientales (macroclima). Ratones con mutaciones inducidas, animales transgnicos (ver captulos 6 y 15). Muchos de los cuales se han utilizado como modelos para el estudio de enfermedades humanas y de los animales domsticos. En neurobiologa pueden ayudar a entender la maduracin del sistema nervioso o desenmascarar enfermedades hereditarias de origen gnico del sistema nervioso por defectos celulares o moleculares. En inmunologa se usan en la bsqueda de cepas resistentes a infecciones o parasitosis mediante la introduccin de genes heterlogos que se encuentran asociados a la resistencia, y cuya aplicacin ms inmediata es la obtencin de alimentos modificados genticamente por ingeniera gentica.
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La transgenizacin ha sido desarrollada fundamentalmente en ratones por ser manejables, presentar una buena tasa reproductora y necesitar menos espacio y alimento que otras especies, en resumen ser ms econmicos. Las limitaciones actuales de esta tcnica tanto en ratn como en otras especies son: el conocimiento de los genes implicados en el fenmeno a estudio, el conocimiento de los mecanismos de regulacin de expresin gnica, la existencia de individuos viables tras la manipulacin y el mantenimiento de estos animales una vez generados (congelacin de embriones de mutantes o de semen, medios de cultivo, instalaciones, etc.). Su produccin exige de ms espacio que para otras lneas y un personal ms especializado para su mantenimiento. Las colonias de ratones transgnicos se componen de hembras donantes de embriones, hembras receptoras de embriones modificados genticamente, machos reproductores y machos orquiectomizados de las cepas que se vayan utilizar. Esto supone un mayor volumen de jaulas, rejillas, comida e instalaciones adecuadas para su mantenimiento.

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Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas El hgado es pentalobulado y presenta vescula biliar. El bazo en los machos es de menor tamao que en las hembras. Se evidencia el dimorfismo sexual en las glndulas salivares y en los glomrulos renales. Presentan hematopoyesis extramedular. Al igual que las ratas, el canal inguinal permanece abierto tras la pubertad, pudiendo encontrar los testculos en el escroto o en la cavidad abdominal. Esta caracterstica anatmica es aprovechada para regular su temperatura corporal. Los ratones de una misma jaula desarrollan una jerarqua social en la que un macho es el dominante y los otros son los subordinados. La estabilidad de esta jerarqua es variable y est relacionada con el tamao del grupo. Los ratones no son agresivos, pero pueden llegar a serlo si se los mantiene en grupos reducidos (3 o menos animales), en presencia de hembras y al reagruparlos tras permanecer aislados o haber sido utilizados como reproductores. El afeitado (prdida de los bigotes por lamido continuo) o los mordiscos en la grupa y en la base de la cola, son ejemplos de jerarquas exacerbadas. Una vez establecido este tipo de conducta, la eliminacin del macho dominante no soluciona el problema. En las hembras estos comportamientos son menos frecuentes. Reproduccin Las hembras de ratn alojadas individualmente en ausencia de machos presentan ciclos ms largos (57 das), irregulares y con tendencia a pseudogestaciones espontneas. Lo mismo sucede si se alojan en grupos pequeos (efecto Lee-Boot), mientras que si se mantienen en grupos mayores muestran tendencia al anestro. Las feromonas andrognicas presentes en la orina de los ratones machos son capaces de interferir el ciclo estral de las hembras. Se ha observado que la introduccin de un macho o el tratamiento de la cama con orina de machos, en los grupos anteriormente descritos, produce el inicio de un nuevo ciclo estral y una sincronizacin de sus ciclos (efecto Whitten). De igual forma, tras un apareamiento frtil, si las hembras se alojan con otro macho durante las 24 h siguientes al coito, no se produce la implantacin de los vulos fertilizados y se reabsorben los embriones (efecto Bruce). Este efecto es ms frecuente en hembras de cepas consanguneas. La camada suele estar formada por 10-12 cras, salvo en las lneas consanguneas que tiene un tamao ms reducido (6-8 cras). Los datos fisiolgicos ms significativos relativos a la reproduccin se recogen en el Cuadro 2-1. Manejo Se aconseja no realizar movimientos ni ruidos extraos para evitar excitar a los ratones antes de abrir la jaula. No son animales agresivos, pero si se mantienen suspendidos en el aire pueden girar sobre s mismos e intentar morder. Las cras si estn nerviosas tienden a saltar fuera de la jaula a partir de los 1721 das del nacimiento. Para sacar un ratn de su jaula: se sujeta con firmeza por la base de la cola y se apoya lo antes posible sobre una superficie (Figura 2-1). Para determinar el sexo del animal: se sujeta con firmeza por la base de la cola y dejando que se apoye en sus manos, se levanta ligeramente la parte trasera del ratn para observar mejor su rea inguinal.

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Para inmovilizar al animal: se sujeta al animal por la base de la cola y sobre una superficie rugosa donde pueda agarrarse, se pinza la piel del cuello con el pulgar y el ndice de la otra mano. Una vez hecho esto, se levanta al animal y se atrapa la cola entre el dedo anular y la palma de la mano. Si se realiza la sujecin utilizando una sola mano, se coloca la base de la cola entre los dedos meique y anular, y volteando la mano sobre la espalda del ratn se pinza la piel del cuello con los dedos pulgar e ndice. Si tras la inmovilizacin se quiere inyectar intraperitonealmente se debe inclinar al animal para favorecer el desplazamiento del paquete intestinal hacia la cabeza y tener un mayor campo de accin (ver fig. 5.2.) .Si por el contrario se va administrar una sustancia por va oral, se colocar al animal en posicin vertical manteniendo la cabeza en lnea con el cuerpo. Si la cabeza no queda bien sujeta el animal intentar girar el cuello y morder la mano que lo sujeta. Tambin puede intentarlo cuando desaparezca la presin del cuello.

A Figura 2.1. Manejo e inmovilizacin en ratn

Rata Las ratas comenzaron a utilizase a mediados del siglo XIX, proceden de la rata noruega Rattus norvegicus. De la raza salvaje se derivaron 2 poblaciones: Rata Long evans: pelo negro en cabeza y cuello, resto del cuerpo de color blanco. Ratas albinas: Sprague-Dawley (Madison USA), ratas ms largas con cabeza ms estrecha y cola ms larga que el cuerpo y Wistar (Filadelfia USA), ratas con orejas ms grandes, cabeza ms ancha y cola de menor longitud que su cuerpo.

En la actualidad existen ms de 50 cepas no consanguneas y ms de 400 cepas consanguneas definidas genticamente. Se utilizan sobre todo en medicina, nutricin, toxicologa, estudios del sistema nervioso y conducta animal. Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas La anatoma y la fisiologa de la rata y el ratn son similares. Tienen poca vista, de hecho es difcil saber si son ciegas o no. Presentan un hgado pentalobulado, pero a diferencia del ratn, carecen de vescula biliar. Las glndulas suprarrenales estn ms alejadas de los grandes vasos, la adrenalectoma es menos arriesgada en esta especie. Las nefronas de la corteza renal son fcilmente accesibles. No pueden regurgitar ni vomitar por lo que son muy sensibles a los txicos. Como los ratones comen de forma semicontnua, aunque en condiciones ad libitum comen principalmente durante el perodo de oscuridad.

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Las glndulas de Harder, situadas detrs del globo ocular, producen una secrecin rica en porfirinas de color marrn rojizo que lubrifica al ojo. Si disminuye el bienestar animal en estos animales (por ejemplo estrs) se observan lgrimas rojizas alrededor de los ojos y la nariz, que al secarse parecen sangre. Esta secrecin es fluorescente bajo luz UV, pudiendo diferenciarse de la sangre verdadera asociada a otros procesos patolgicos (por ejemplo, neumona sanguinolenta). Reproduccin Los datos fisiolgicos de esta especie se recogen en la tab. 2.1. En gran medida la reproduccin de la rata y el ratn son comparables, aunque no se produzca el efecto Bruce y la sincronizacin del ciclo estral provocada por las feromonas del macho presentes en la orina no sea tan evidente. La membrana vaginal se abre a las 5 semanas de vida y las hembras son sexualmente maduras a las 68 semanas de vida. Las hembras en fase de estro presentan los siguientes signos: temblor de orejas, frotamientos de cabeza y espalda, nerviosismo y lordosis al acariciarlas. Antes del parto tambin presentan una conducta caracterstica aumentando el acicalamiento de la parte posterior del cuerpo. Estas lamidas parecen activar la secrecin de las glndulas mamarias. Momentos antes del parto se observa una descarga de la mucosa vaginal. El tamao de la camada oscila entre 10-15 cras aunque su nmero vara considerablemente dependiendo de la edad de la madre, cepa, estado sanitario, nmero de partos, alimentacin. Las cras son semejantes a las descritas en generalidades de roedores. Las hembras son madres excelentes, al aceptar cras procedentes de otras camadas siempre que estn en buen estado y la diferencia de edad no sea grande. Este fenmeno no suele revestir ningn problema en cras sin pelo menores de dos das. Es aconsejable no obstante frotar a las cras con el lecho de la madre nodriza para minimizar el olor de las mismas. El parto no es necesario para que la hembra muestre comportamiento maternal. Cras nacidas por cesrea son atendidas por las madres poco tiempo despus de despertarse de la anestesia. Manejo Las ratas son animales dciles, de fcil manipulacin, no deben manejarse con rapidez o de forma brusca, sobre todo si se encuentran sobre un suelo de rejilla para evitar la rotura de uas. Si la rata est preada o es muy grande, se aconseja apoyar el tercio posterior del cuerpo en la otra mano. A veces, al sujetarla por la cola, si se mantiene suspendida gira en redondo en el aire y puede lesionarse al desprenderse la piel del rabo desde el punto de sujecin. Si no se tiene experiencia se pueden ayudar con un guante grueso o un pao al realizar alguna de las manipulaciones siguientes: Para sacarla de la jaula: pasando la palma de la mano por debajo del vientre, o similar al ratn. Para determinar el sexo: como se describi en ratn. Para inmovilizarla: habitualmente, se coloca una mano alrededor del pecho con el pulgar situado bajo el mentn y el ndice alrededor del cuello, y se asegura la cabeza con firmeza. Con el resto de la mano, se sujeta toda la piel de alrededor de los hombros. Tambin se consigue el mismo resultado, agarrando con una mano un gran pliegue de piel en la zona de la espalda y del cuello (Figura 2-2). Otra posibilidad es sujetar la piel de la base del cuello y la cabeza, pinzando con el dedo pulgar e ndice el rea de la oreja, manteniendo la cabeza en lnea con el resto del cuerpo. Esta forma de inmovilizacin se utiliza para administrar sustancias por va oral.

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Se pueden utilizar cilindros de plstico para inmovilizarlas durante cortos perodos de tiempo. Estos cepos son tiles en las extracciones de sangre de la cola, y se pueden usar tanto en ratas como en ratones.

A Figura 2-2. Manejo e inmovilizacin en rata.

Hmster Comenzaron a usarse como animales de experimentacin a principios de los aos 30. En la actualidad su empleo es reducido (<1% del total). Estn descritas tres especies: Hmster sirio o dorado (Mesocricetus auratus): el ms utilizado. Hmster gris o chino (Mesocricetus griseus): de menor tamao, de pelaje ms oscuro en el dorso y con vientre gris blancuzco. Hmster negro o europeo (Cricetus cricetus): mayor que el hmster sirio. Las reas en las que ms se utilizan son las relacionadas con: circulacin sangunea, en problemas relacionados con microcirculacin; hipotermia, al hibernar a temperaturas 5C; procesos neoplsicos, por ser suceptibles a una amplia gama de virus oncognicos (sarcoma de Rous, SV5, polioma, etc); procesos infecciosos inducidos experimentalmente: leptospira, influenza, moquillo, ya que no son susceptibles a enfermedades infecciosas espontneas comunes; o como modelo de diabetes mellitus y caries dental.
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Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas Desde el punto de vista anatmico, son semejantes a la rata, aunque presentan una cola corta y cubierta de pelo. Externamente, la regin inguinal es redondeada en los machos y puntiaguda en las hembras. Internamente, se puede destacar el mayor tamao de las glndulas suprarrenales en los machos; el estmago grande y dividido en dos por un pliegue; abazones o bolsas bilaterales que forman parte de sus mejillas, y que utilizan para almacenar alimento o transportar a sus cras; o la orina turbia, de apariencia lechosa y pH bsico. Poseen glndulas sebceas pigmentadas localizadas en los flancos detrs del arco costal, que se identifican como manchas de color oscuro con pelos gruesos. Estas glndulas secretan feromonas, que les sirven para marcar su territorio estn muy desarrolladas en los machos sexualmente maduros. Son animales solitarios que se alojan de forma individual. Las hembras suelen ser ms agresivas que los machos, siendo a veces necesario colocarlas separadas desde el inicio de la pubertad.

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Hibernan cuando las temperaturas son iguales o menores de 6C, disminuye la disponibilidad de comida, o el fotoperodo es inferior a 8 h de luz. Durante la hibernacin, la temperatura corporal y las frecuencias respiratoria y cardaca disminuyen considerablemente. En este estado, se alternan perodos de sueo de 2-3 das con perodos de vigilia de aproximadamente 12 h, donde los parmetros fisiolgicos alcanzan sus valores normales. Estmulos exteriores tambin pueden despertarlos, de ah que necesiten agua y comida cuando estn hibernando. Siempre construyen nidos, especialmente cuando la temperatura ambiente es baja, en hembras con camada la ruptura del nido provocar la muerte de las cras. Son menos sensibles a la morfina y ms tolerables al pentobarbital que la mayora de los roedores. Algunos antibiticos (penicilina, eritromicina y tetraciclina) indirectamente pueden producirles una enterotoxemia letal por alterar la relacin entre las bacterias gram + / gram - del intestino. Otros, les producen un aumento de clostridium que origina inflamacin de la pared intestinal, toxemia y muerte. Es difcil que sufran un shock anafilctico por la pobre respuesta inducida por histamina. Sin embargo, son ms sensibles a los corticoides. Reproduccin La iluminacin es especialmente importante a efectos reproductivos El fotoperodo influye negativamente en el ciclo sexual. Perodos de luz inferiores a 12.5 h de luz/da en hembras y de 14 h luz/da en machos, producen el bloqueo de la secrecin gonadotropa hipofisaria, que conlleva a prolongados perodos de anestro y atrofia testicular, respectivamente. En estado natural, las hembras tienen tendencia al anestro invernal y en los machos, en esta misma poca, se produce una disminucin del peso testicular. Las hembras son muy agresivas. El macho debe introducirse en la jaula cuando la hembra sexualmente madura produce una secrecin vaginal mucosa, translcida, filante (momentos previos al estro), para evitar que agreda al macho. La hembra responde con lordosis al olfateo del macho. La copulacin se repite varias veces durante un perodo de 20-60 minutos. Tras la cpula deben separarse. Si aparece una secrecin vaginal opaca y densa en los 5-9 das posteriores al apareamiento, la hembra no est preada. Si la cpula ha sido infrtil o existe agrupamiento homosexual de las hembras, puede aparecer una pseudogestacin los 7-13 das siguientes. El hmster chino tiene un perodo de gestacin mayor (21 das) que el hmster sirio (16 das). El tamao de la camada oscila entre 5-10 cras. Ambos presentan estro postparto, pero ste es anovulatorio, es decir, no se produce la liberacin de vulos. El primer estro frtil ocurre varios das despus del destete de las cras. No son buenas madres. El canibalismo aparece fundamentalmente en primparas, durante la primera semana despus del parto. Las causas pueden ser variadas: destruccin del nido, falta de experiencia, exceso de excitacin, camadas excesivamente grandes, agalasia. Se aconseja no tocar las jaulas desde un da antes del parto hasta una semana despus del mismo. En la manipulacin, las cras no deben permanecer mucho tiempo fuera de la jaula para evitar que sean atacadas por la madre al introducirlas nuevamente. Dada la agresividad de las hembras, la adopcin no suele tener xito. Las cras deben empezar a comer y beber alimento slido entre los 7-10 das, para no padecer trastornos en el tracto intestinal. Es aconsejable colocar granos de pienso dentro de la jaula, para que practiquen su conducta de acumulacin, y suplementar la dieta con vitamina E, para que no aparezca ninguna deficiencia. Manejo Son animales muy nerviosos y no deben manipularse hasta estar seguros de que estn despiertos. Para sacarlos de la jaula: pasando la palma de la mano por debajo del vientre o sujetndolos entre las manos,

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si son agresivos, con unas pinzas se les puede sujetar por la piel de la espalda o con ayuda de un bote, sacarlo una vez que se haya metido dentro. Para inmovilizarlos: se coloca la mano sobre el animal, y se sujeta con firmeza el pliegue de piel del cuello y de la espalda, de una forma parecida a la descrita para la rata. Cobayo Estos roedores comenzaron a usarse como animales de experimentacin a comienzos del siglo XX, en la actualidad su uso es reducido (<1% del total). De las 3 estirpes principales descritas, la primera es la ms utilizada en experimentacin: Cobayo inglesa (Cavia porcellus): de pelo corto y spero Cobayo abisinia: pelo corto, rizado agrupado en mechones. Cobayo peruana: pelo largo y revuelto.

Se utilizan principalmente en: produccin y control de sueros, vacunas y otros productos biolgicos; estudios de enfermedades infecciosas por su alta suceptibilidad (tuberculosis, difteria, leptospirosis y brucelosis),; estudios de eventos hormonales y glandulares a lo largo de la gestacin; estudios de otologa, por la anatoma de su odo medio; como modelo para el estudio de la sntesis de colgeno. Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas Son animales rechonchos, apacibles, de fcil cra, muy sensibles al fro y al calor. Los incrementos de temperatura combinados con escasas renovaciones de aire predisponen la aparicin de neumonas. Presentan un ciego voluminoso que ocupa una parte significativa del abdomen. Son herbvoros. Poseen molares inclinados transversalmente. Los incisivos y los molares presentan crecimiento continuo. Mezclan el agua con el alimento en la boca, y depositan al beber parte de esta mezcla en los bebederos. Los comederos deben ponerse a cierta altura porque defecan en ellos. No son capaces de sintetizar vitamina C, para que no aparezcan deficiencias, debe aadirse 100 mg/Kg pv de cido ascrbico y unos 200 mg/l de vitamina C en el agua de bebida. Alternativamente se pueden suministrar 50 g diarios de col. El cobayo macho carece de abertura genital entre el orificio uretral y el ano, pero presentan un par de pezones en la zona inguinal. Los testculos se palpan fcilmente y el pene se puede exteriorizar por presin digital. Las hembras poseen una abertura genital en forma de U, que se pone de manifiesto al presionar ambos lados de la protuberancia urogenital. La vagina permanece protegida por la membrana vaginal. En un frotis sanguneo se pueden observar leucocitos mononucleares que transportan inclusiones ovaladas (cuerpos de Kurloff). stos son ms abundantes durante la gestacin, y se les atribuye un papel protector, por defender al feto de las clulas inmunocompetentes de la madre que se encuentran presentes en la placenta. Son muy susceptibles a Bordetella. Si en la instalacin existen conejos, como precaucin, deben limpiarse despus y no deben alojarse junto a ellos, ya que pueden enfermar. Presentan altos niveles de actividad frente a la histamina, que a veces les puede ocasionar incluso la muerte. Son ms sensibles a los antibiticos que los hmsters, no siendo recomendable el uso de penicilina, ni eritromicina, por poder causarles la muerte. Sin embargo, son indiferentes a los corticoides.

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Reproduccin Las hembras tienen un perodo de fertilidad entre 18-24 meses, segn el tipo de cra utilizado. Son sexualmente maduras entre las 4-5 semanas con un peso aproximado de 200 g, aunque su perodo ptimo de apareamiento es a los 3 meses cuando pesa 450 g. Los machos maduran ms lentamente, considerndolos frtiles entre las 8-10 semanas, aunque no conviene aparearlos hasta los 3 meses con un peso de 500 g. El apareamiento acorta el perodo estral. Se puede reconocer a una hembra en estro por: la rotura de su membrana vaginal, intentar montar otras hembras, mostrar lordosis y disparar pequeas cantidades de orina ante la proximidad de un macho. Las cras nacen muy desarrolladas, siendo frecuentes las distocias en hembras primparas, sobre todo cuando se retrasa la edad de cruce. En hembras jvenes, se reduce el problema porque la articulacin sacroilaca no se encuentra fusionada, siendo el canal del parto mayor, y ms fcil el alumbramiento de las cras. En hembras ms viejas se observa una disminucin de la fertilidad y un mayor riesgo a que las cras nazcan muertas. Las cras nacen con pelo, con los ojos y los odos abiertos, con los dientes bien desarrollados y caminan de forma casi inmediata. La hembra 12-24 h despus del parto limpia el rea genital de las cras para estimular la miccin y la defecacin. Los neonatos pueden ingerir alimentos slidos desde la primera semana de vida, la microflora intestinal que necesitan la obtienen comiendo las heces de su madre. Las hembras de cobaya preadas producen leche antes del parto, pudiendo amamantar a otras cras antes del mismo. Dada la precocidad de las cras no existen problemas con la lactancia artificial, aunque se siga aconsejando ablandar la comida. Manejo Son animales muy nerviosos y escurridizos. El manipulador debe aproximarse por delante y por detrs con ambas manos. Lo mejor es sujetarla con firmeza alrededor de los hombros y del trax y apoyar el cuerpo y las patas traseras en la otra mano. En hembras gestantes, la otra mano se adelantar hacia la parte ventral del tronco y del abdomen. Debe tenerse cuidado al sujetarlas, por ser muy delicada la zona dorsal del tronco, si se sujetan con fuerza se les puede causar un shock o provocar lesiones pulmonares. A pesar de sus grandes dientes raramente muerden. Conejo Taxonoma

Orden
Lagomorfos

Familia
Ocotnidos Lepridos

Gnero
Pikas Lepus (liebres) Sylvilagus (conejos americanos) Oryctolagus cuniculus (conejo europeo)

Generalidades Se trata de una familia de mamferos con orejas grandes y largas, al igual que los ojos. A diferencia de los roedores presentan, adems de dos dientes incisivos grandes (caracterstico de los roedores), otros dos incisivos de menor tamao en la mandbula superior, y el hocico, la cola y las patas cubiertas de pelo. Sus patas posteriores son ms robustas y largas que las anteriores. En las liebres esta diferencia les permite desplazarse a saltos.

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Actualmente se cran ms de 70 razas diferentes de conejo con fines comerciales: produccin de carne, peletera, mascotas. Existe un nmero limitado de cepas congnicas. Si se compara con el nmero de ratones y ratas usadas en biomedicina, el nmero de conejos utilizados es ms bien reducido, constituyendo alrededor del 2% de todos los animales de laboratorio. Como animal de experimentacin se utiliza: para probar la eficacia de los medicamentos; en la produccin de vacunas y anticuerpos; en el estudio de microorganismos, al ser su suero un excelente caldo de cultivo, en pruebas de pirgenos y de toxicidad (teratgenos); en estudios sobre aterosclerosis y en test cosmticos, fundamentalmente en pruebas de irritacin ocular y cutnea. Las razas de conejos ms utilizadas son: New Zealand White (NZ); American Dutch, la segunda raza ms usada en EEUU, los conejos son de menor tamao que los NZ y California, semejante al NZ pero con las orejas, el hocico y las patas negras. Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas Son animales que presentan: 4 incisivos superiores; orejas muy desarrolladas, con una estructura vascular de fcil acceso; un tercer prpado cartilaginoso en el ngulo medial del ojo; hgado con 4 lbulos y con vescula biliar; ciego de gran tamao (6-12 veces el tamao del estmago), un saco redondo formado por tejido linfoide prximo a la unin ileo-cecal, con funciones semejantes a la bolsa de Fabricio de las aves; glndulas odorferas inguinales y mentonianas, para marcar su territorio. Los leucocitos neutrfilos son pseudoeosinfilos, es decir, contienen muchos grnulos eosinoflicos en su citoplasma, y su orina tiene un alto contenido en amonaco y cristales de fosfatos y carbonatos. Las hembras presentan un doble cervix, que se abre en la vagina por separado, y su ovulacin es provocada o inducida por el coito. Su esqueleto representa aproximadamente el 7% de su peso corporal, y debido a la fragilidad de su esqueleto y a la potente musculatura de sus patas posteriores, son frecuentes las fracturas lumbares. Uno de cada tres conejos posee la enzima atropin-esterasa, que explica por qu son refractarios a la administracin de atropina. Los conejos practican la cecotrofia, fenmeno que permite un mejor aprovechamiento de la dieta y que no debe confundirse con la coprofaga o ingestin de heces, vicio que se produce en diferentes especies animales debido a una carencia nutricional. El conejo no ingiere heces propiamente dichas, sino un producto intestinal de notable inters alimenticio (cecotrofos) que adems de macroingredientes, contiene vitaminas y oligoelementos. Los conejos comienzan la cecotrofia cclica en el momento del destete, ingiriendo los cecotrofos directamente del ano. En funcin de la composicin de la dieta se regula la produccin e ingestin de cecotrofos, en dietas ricas en protenas este fenmeno disminuye. Los cecotrofos son porciones del contenido del colon en forma de esfera rodeados por una pelcula de moco o mucina. Fsicamente, tiene el aspecto de bolas hmedas, brillantes y blandas, aisladas o agrupadas en forma de cadenas o racimos, siendo su olor y su composicin completamente distinta al de las heces duras. Su color vara segn el tipo de alimento que ingieran (alfalfa-verde oscuro, zanahoria-grisceos, remolacha-blanquecinos...). La cecotrofia est regulada por las glndulas suprarrenales. Para que se produzca esta actividad es necesaria la tranquilidad y el sosiego de los animales, inhibindose en caso de estrs. La ablacin del recto y la privacin del sentido del olfato tambin la interrumpen, a pesar de que se elaboren perfectamente los cecotrofos. Su formacin est regulada por el ritmo nictameral, aunque no existe una separacin neta entre esta actividad y la produccin de heces. La diferente motilidad del intestino grueso es la causante del

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fenmeno. En los 10 primeros cm. del colon proximal se determina qu fracciones pasan a ser cecotrofos y cules pasan a ser excrementos. En el colon distal, ser donde se recubran los cecotrofos de mucina. La capa de mucina de los cecotrofos, permite que la actividad microbiana se prolongue dentro del estmago hasta ser digeridos en la zona pilrica, liberando cidos grasos, protenas, vitaminas (del grupo B) y minerales, aprovechndose al mximo unos alimentos tericamente pobres. Reproduccin La hembra no presenta un ciclo sexual regular. Se reconocen 2 fases diferentes que pueden denominarse: fase folicular (proestro y estro) y fase lutenica (postestro y diestro). Existen expertos que postulan que las conejas no tienen ciclo, afirmando que si las condiciones nutritivas son favorables, los ciclos de maduracin folicular se producen en oleadas de 7-10 das de manera ininterrumpida, aunque existen discrepancias al discutir la presencia continua o no de folculos maduros. Otros autores afirman que presenta un ciclo estral de 16-17 das, de los cuales sera fecundable durante 13 das (del 2 al 14). El anestro durara entre 46-48 h, durante las cuales, las conejas rechazaran sistemticamente el coito. Los partidarios de esta teora consideran que el ciclo es incompleto porque la ovulacin no se produce de una forma espontnea sino provocada por contacto sexual (10 h despus de la cpula), denominando a este tipo de ciclo, ciclo estral monofsico bloqueado en fase de estro. Como resultado del apareamiento, la glndula pituitaria secreta la hormona luteinizante (LH) que induce la ovulacin. Esto implica que la ovulacin puede ser inducida por medio de la inyeccin de LH, lo cual tiene aplicaciones en el caso de la inseminacin artificial y para la investigacin en el campo de la reproduccin. Los frotis vaginales no son tiles en esta especie, porque el epitelio vaginal no sufre variaciones a lo largo de la maduracin sexual de los folculos, ya que es necesario el coito para que se evidencie la fase lutenica, y porque al realizarlo se puede provocar el reflejo neuroendocrino del coito y desencadenar una pseudogestacin. La edad ptima para la reproduccin se encuentra entre los 5 meses y los 3 aos. Las hembras son multparas y pueden tener hasta 4 camadas anuales de unos 6-8 gazapos (de 4 a 14 gazapos por camada). Cuando se van a aparear, se coloca a la coneja con el macho durante 15-20 minutos. Si la hembra no se aparea o empiezan a pelearse, se puede intentar con otro macho o volver a intentarlo con el mismo despus de 1-2 das. De no producirse gestacin, el cuerpo lteo permanecer activo durante 16-18 das. Algunos das antes del parto, la coneja se arranca el pelo de la regin abdominal, dejando sus mamas al descubierto (4 pares) y proporcionando material para el nido. Las conejas se pueden aparear otra vez despus del destete, aunque tambin se puede producir un apareamiento justo despus del parto. La gestacin se puede confirmar por medio de palpacin abdominal de 10 a 14 das despus del apareamiento. Los gazapos nacen ciegos, desprovistos de todo pelaje, y abren los ojos a los 10 das. Dependen de la leche materna, y durante los primeros 18 das de vida son amamantados unas dos veces al da, empezando a comer alimentos slidos a las 3 semanas de edad. Las cras permanecen en el nido unas 3 semanas, despus el nido se cierra, se destetan a las 6-8 semanas y alcanzan su desarrollo completo a los 8 meses de su nacimiento. Los gazapos hurfanos pueden alimentarse con leche utilizando una jeringuilla, un bibern o una sonda gstrica. La primera semana se les daran 5 mL de leche al da, en varias tomas (de 1 a 3). La segunda semana 15 mL y la tercera, 25 mL. Los gazapos no necesitan tomar calostro, ya que toda la inmunidad pasiva la adquieren a travs de la placenta. Los machos pueden sufrir una disminucin en la produccin de espermatozoides en un ambiente calurosos.

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Macroambiente En general se les proporcionar espacio adicional siempre que sea posible. Suelen alojarse en jaulas de suelos perforados, aunque dentro de las mismas sea conveniente proporcionarles un espacio slido donde apoyarse, as como una superficie para desgastar las uas. En caso contrario, stas deben cortarse peridicamente para evitar que se las arranquen al enganchrselas en el suelo de la jaula. Las jaulas para cra deben disponer de una conejera sin luz, donde se instalar el nido, y un rea adicional. La conejera debe ser de suelo slido y contar con material para que la madre construya el nido. Se pueden mantener varias hembras dentro de la misma jaula si el tamao de la misma lo permite, por el contrario el agrupamiento de machos est desaconsejado por las lesiones que se causan. Se debe tener en cuenta el alto contenido de amoniaco de la orina de los conejos, ya que su acumulacin en el medio, puede producir infecciones respiratorias o pododermitis. Existe una mayor predisposicin a padecer problemas respiratorios, si se mantienen en instalaciones con una alta HR o con corrientes de aire frecuentes. Son sensibles a los aumentos de temperatura y se comportan de manera similar a los roedores respecto a los cambios de luz y sonido. Son animales asustadizos, y si se sienten amenazados, pueden expresar su miedo con un chillido muy agudo. Son omnvoros, y comen pienso de unos 3 mm de dimetro. Los gazapos y las conejas con camadas deben tener acceso ad libitum a la comida, mientras que al resto se les debe racionar para evitar la obesidad. El contenido en fibra cruda de la dieta no debe ser inferior al 10%. Se aconseja darles heno o aceite como complemento para prevenir trastornos u obstrucciones intestinales producidos por la ingestin de bolas de pelo. Deben tener acceso ad libitum a agua potable no contaminada. Manejo Los conejos son animales de fcil manejo. Se debe tener precaucin con sus patas posteriores, siendo aconsejable llevar cubiertos los brazos y las muecas a fin de evitar un posible araazo. En animales nerviosos se puede administrar algn tranquilizante, aunque para tranquilizarlos suele dar buen resultado taparlos los ojos. Nunca se debe forcejear con el animal, para evitar fracturar la columna vertebral. En el caso de que esto ocurra, se debe practicar de inmediato el sacrificio humanitario del conejo. Tampoco se debe sujetar al animal por las orejas. Para sacar al conejo de la jaula: es el momento donde pueden aparecer los problemas. Los animales pueden refugiarse en un rincn de la jaula y patear hacia el manipulador. Si la jaula est situada en un estante superior es ms difcil la maniobra de sujecin. Se sujeta con firmeza la piel del cuello y el dorso con una mano, mientras que se apoya la barriga y se fijan las patas traseras con la otra.
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Para transportarlos: se sostiene la cabeza del animal entre el brazo y el cuerpo del manipulador y, con la otra mano, se sujetan las patas traseras por encima del tarso. Tambin se pueden transportar sujetando con firmeza la piel del cuello y el dorso con una mano, y descansando la parte final de la espalda sobre la otra mano. En esta posicin las patas traseras no pueden nunca alcanzarnos. Para inmovilizarlos: se pueden utilizar diferentes tcnicas: envolverlos en un pao, dejando nicamente fuera la cabeza, colocarlos dentro de una caja de inmovilizacin (cepo) o tumbarlos sobre una superficie antideslizante, tapndole los ojos y controlndole la cabeza con una mano, mientras que con la otra se sujeta el tercio posterior del cuerpo a la altura de la cadera. El mtodo de eleccin depender del tipo de manipulacin que se vaya a realizar (Figura 2-3).

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Para examinarlos: se examinan de cubito-supino. Para ello, se sujeta al animal por la zona del cuello, se eleva y se gira, mientras tanto, con la otra mano, se fijan las extremidades posteriores a la altura de la regin inguinal. En esta posicin el conejo se encuentra tranquilo y relajado. En general, los conejos se ponen nerviosos sobre superficies lisas, donde no pueden sostenerse siendo aconsejable depositarlos sobre superficies rugosas, como por ejemplo una toalla, arpillera o una red. Si los conejos estn tranquilos y relajados respiran con el abdomen.

A Figura 2-3. Manejo e inmovilizacin de conejo.

Primates no humanos Los primates son muy costosos y difciles de manejar, muchos de ellos estn en peligro de extincin y protegidos por el convenio CITES. La mayora de los monos empleados en nacen y se cran en laboratorios, su nmero como animal de experimentacin est en descenso. Su uso solamente est justificado en estudios experimentales como penltimo eslabn de la investigacin o cuando ninguna otra especie animal puede ser utilizada en el estudio como modelo. Taxonoma
Orden Primates Suborden Prosimios Familia Tupaidos Lemridos Indridos Daubentnidos Lorsidos Galgidos Tarsidos Platirrinos Catarrinos Gnero

Simios

Cbidos Haplidos Cercopitcidos Hilobtidos Pngidos Homnidos

Se utilizan habitualmente por la semejanza de sus respuestas a las humanas en: farmacologa y toxicologa como ltimo paso en las pruebas de vacunas y medicamentos, antes de comenzar los ensayos clnicos; en estudios de conducta y comportamiento; en virologa (por ejemplo en estudios del virus de la

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poliomelitis, o virus lentos y latentes como HIV y vacunas frente a ellos); en parasitologa (estudios de malaria); en hematologa, inmunologa e inmunosupresin (as se descubri y describi el factor RH); y en trasplante de rganos y tcnicas quirrgicas. En el Cuadro 2-2 se indican los parmetros ambientales y fisiolgicos de las especies ms utilizadas en experimentacin. Generalidades Se trata de mamferos vivparos donde se conserva la pentadactilia (5 dedos), el pulgar es oponible, lo que posibilita la aprehensin y facilita la marcha entre las ramas. Persiste la clavcula que acta de puntal donde apoyan los brazos para realizar movimientos laterales. Los dientes trituradores (premolares y molares) presentan una estructura simple y primitiva dado su dieta fructfera e insectvora que tiende al omnivorismo. La mayora de los primates han sustituido las garras afiladas por uas planas y redondeadas. Casi todas las especies son arborcolas. La vida en los rboles modific los sentidos, el olfato pierde utilidad y es gradualmente sustituido por la vista, muy perfeccionada, con ojos desplazados hacia el frente que permiten la superposicin de imgenes y el clculo de distancias, pudiendo realizar rpidos desplazamientos o acrobacias. El cerebro es grande y complejo. Los catarrinos, tambin llamados monos afroasiticos, se diferencian anatmicamente de los platirrinos (monos sudamericanos) por la posicin de los orificios nasales. En los monos del viejo mundo dichas aberturas estn situadas muy prximas y dirigidas hacia adelante o adelante y abajo, mientras que en los neotropicales el tabique nasal est muy ensanchado, y los orificios nasales se encuentran muy separados y dirigidos hacia los lados. Los catarrinos presentan un tabique nasal estrecho, abazones donde acumular alimento y slo 2 premolares en cada lado de la mandbula. La mayora son arborcolas y aunque existen familias con cola (no prensil), es frecuente observar una reduccin o ausencia de la misma. En todos, la piel se espesa en la parte posterior, pierde el pelo y forma las llamadas callosidades isquiticas, cuyo papel principal es hacer el descanso o el sueo confortable. Todos son sensibles al bacilo tuberculoso. El tipo de dieta condiciona el tamao del estmago. El encfalo es complicado aunque el lbulo frontal, asiento de la mayor parte de las funciones asociativas est poco desarrollado respecto otras reas de la corteza cerebral. Todas las familias tienen algn tipo de vida social. El gnero cercopitcidos se diferencia del antropoide, fundamentalmente, por su manera de desplazarse. Estos diferentes hbitos de locomocin se deben a la longitud de sus extremidades. Los cercopitcidos tienen las extremidades anteriores iguales o de menor tamao (cuadrpedos), mientras que los antropoides (gibones, chimpancs, gorilas y orangutanes) se desplazan balancendose de las ramas con el cuerpo suspendido (braquiacin), al tener las extremidades anteriores ms largas que las posteriores. Los platirrinos se caracterizan por tener el cuerpo y las extremidades con frecuencia muy delgados, la cola larga y potente, 3 premolares en cada lado de la mandbula y ser insensibles al bacilo tuberculoso. Por otra parte, el dedo pulgar de estos monos es poco oponible o no lo es en absoluto. Su cerebro es ms simple y carecen de abazones y callosidades isquiticas. Se dividen en: cbidos, monos de mediano o gran tamao, cola generalmente bien desarrollada y prensil en algunas especies, con 3 molares en cada mandbula, y calitrcidos monos de pequeo o muy pequeo tamao, con garras en vez de uas y 2 molares en cada mandbula.
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Cuadro 2-2. Requisitos ambientales y parmetros fisiolgicos en el mono tit, el mono ardilla, el mono rhesus, el chimpanc y el mandril.
Mono Tit Mono Ardilla 20-24 50-70 9-12 13/11 Mono Rhesus 20-24 50-70 9-12 13/11 60-200 0.9-1.1 1.1 0.9 90-120 4-9 6-11 20-30 100-150 40-65 36-40 42 3-4 3-4 4-5 3-4 28 (25-39) 2-7 espontneo 11-14 das despus del inicio del menstruo 1 Zonal bidiscoidal hemocoiral no 155-180 1 450-700 1000-3500 3-6 3 tras destete Chimpanc 20-24 50-70 9-12 13/11 Mandril 20-26 45-60 12-16 12-14/12-10 60-140 0.9-1.3

Requisitos ambientales
Temperatura (C) Humedad relativa (%) Ventilacin (cambios/hora) Luz/oscuridad (horas) BTU (calora/ animal/ hora) Dimensiones mnimas suelo cubeta Adulto alojado individual (cm2) Animal reproductor con cras (cm2) Grupo (cm2 /adulto) Altura mnima de la cubeta (cm)
P P P P P P

22-28 40-60 13/11

0.25 0.25 0.25 60 0.4-0.6 0.4-0.5 10-16 0.8-1 0.8-1 1.2-1.7 1.5-2 27-29 no espontneo -

0.7-0.9 0.9 0.7 90 2.5-6 4-8 15-25 100-150 40-65 37-40 3-4 3-4 4-5 4-5 9 no espontneo -

2.5 200

90-120

Parmetros fisiolgicos
Peso adulto (kg) macho hembra Esperanza de vida (aos) Tasa cardaca (/min.) Tasa respiratoria (/min.) Temperatura corporal (C) Nmero de cromosomas (2n) Pubertad (aos) macho hembra Edad para la reproduccin macho (aos) hembra Ciclo estral (das) Lquido menstrual (das) Mecanismo de ovulacin Tiempo de ovulacin (das) 35-45 8-12 45-60 6-10 40-50 30-40 85-90 30-60 36-39 38.5 48 8-10 3-4 6-8 3-4 10-12 5-6 9-11 4.5-12 35 (33-38) 31-32 3 3 espontneo espontneo 22-28 das 2-3 das del despus del inicio de la piel inicio del del sexo menstruo turgente 1 1 Zonal monodiscoidea hemocorial

N medio de vulos Tipo de placenta

1-3 1 Zonal monodiscoidea hemocorial no 142-150 2 (1-3) 25-35 80-120 3-6 no 140-180 1 96 300-500 4 -

Duracin pseudogestacin (das) Duracin del embarazo (das) Tamao de camada Peso al nacer (g) Peso al destete (g) Edad del destete (meses) Retorno actividad ciclo postparto (meses) Composicin de la leche (%/100 ml) Agua Grasa Protena Lactosa Cenizas Glndulas accesorias macho Volumen eyaculado (ml) X y rango

no 210-260 1 1000-2000 4000-5000 12-24 despus del destete 87.9 3.7 1.2 7.0 0.2

no 164-186 1 420-550 2000-4000 5-7 4-8

85.8 5 1.6 7.3 0.3 Sv, P, B 1 (0.5-2)

Sv, P, B -

Sv, P, B 0.4 (0.2-1.5)

Sv, P, B 1.1 (0.2-4.5)

Sv, P, B 1.9 (0.5-6.2)

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Cuadro 2-2. Continuacin


Espermatozoides eyaculados (n x 106/ml) media y rango
P P

Mono Tit -

Mono Ardilla 2.1 (0.8-3.1)

Mono Rhesus 1.1(1-3.6)

Chimpanc 6.1 (2.3-12.7)

Mandril 5 (3.5-6.5)

Parmetros sanguneos
Volumen de sangre (ml/kg) Hemoglobina (g/100 ml) Hematocrito (vol.%) Leucocitos ( 100/mm 3) Glucosa (mg/100 ml)
P P

70 -

50-90 11-12.5 39-43 7-13 60-160

62-65 10-14 38-43 10-14 80-95

BTU: British thermal unit (unidad trmica britnica).

Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas Muchas especies de primates viven en grupos con un orden social muy diferenciado. Los grupos no suelen ser cerrados, el tamao del grupo depende de la especie, alimentacin, hembras sexualmente maduras. En general, las especies arborcolas son menos agresivas que las especies que habitan en el suelo. Los machos chimpancs ascienden de rango a medida que crecen en edad y desarrollo fsico, y pueden continuar en el grupo dominante, aunque hayan perdido parte de sus energas, por su experiencia y sabidura personal. La dominancia la ejercen con poca energa, ya que comparten alimento y hembras con el resto grupo. Sin embargo, los macacos presentan una jerarqua rgida, con un grupo rector tambin jerarquizado, donde las interacciones de dominancia y subordinacin son resueltas de forma ritualizada. La rigidez de la jerarqua de un grupo social es directamente proporcional a la agresividad de sus individuos. Cada grupo tiene un comportamiento social diferenciado. Individuos que no han vivido juntos no pueden organizarse en una sociedad normal, ratificndose la idea de que el comportamiento social no es innato. Al agruparlos se debe tener en cuenta la especie, la edad, y el sexo. Es aconsejable mantener en continua observacin el grupo para identificar los posibles cambios de jerarqua. Entre ellos se comunican mediante vocalizacin y mmica facial o postural. Los primates ocupan la mayor parte de su tiempo en recolectar comida, asearse y descansar. La mayora de las especies arborcolas juegan entre los rboles mayoritariamente en las primeras y en las ltimas horas del da. Reproduccin La obtencin de cras en cautividad exige cuidados meticulosos, y se debe realizar en centros especializados. Estudios desarrollados en primates salvajes y criados en cautividad demuestran alteraciones en la conducta social de los segundos. En general, stos son ms agresivos, menos gregarios, emplean menos tiempo en los aseos personales e interpersonales, y han olvidado o modificado alguna de las costumbres sociales (no construyen nidos para dormir en el caso de los chimpancs, no adoptan la postura clsica de monta en el caso de los macacos...). Las primates hembras al igual que la mujer, presentan un ciclo menstrual, donde la falta de hormonas (estrgenos y progesterona) al final del ciclo ovrico produce necrosis y desprendimiento de la capa decidua del endometrio (menstruacin). Las hembras presentan un ciclo menstrual que dura de 28 a 36 das segn la especie, con mayor o menor grado de tumefaccin de la regin ano-genital a lo largo del ciclo. En los machos, la espermatognesis es continua, no observndose variaciones en el grado de apetito sexual en las distintas pocas del ao. En la mayora de las especies no existen parejas estables y la hembra receptiva puede aparearse con diferentes machos.

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Cuando las hembras son receptivas se las lleva a la jaula del macho. Se puede verificar el apareamiento por: la presencia de un tapn de coagulacin o espermatozoides en la vagina, unas horas despus del coito, mediante una ecografa, o por palpacin rectal del tero, despus de la cuarta semana de gestacin. Los primates presentan una placenta completa, discoidal, hemocorial, decidual. Hacia el final de la gestacin, se comprueba la posicin del feto, para determinar si el parto es natural o hay que practicar una cesrea. La mayora de las especies de monos tienen una sola cra por camada. Es excepcional que tengan dos. La cra se puede destetar entre los 3 y los 6 meses de edad. Las hembras chimpancs se ayudan a s mismas en el parto ensanchando con sus dedos la regin vulvar y sacando a la cra. Las hembras primparas pueden tener problemas al ser poco diestras. La forma de mantener al recin nacido parece ser resultado del aprendizaje. Las hembras primerizas por miedo pueden mantener al retoo cabeza abajo, mordisquearle los pies y abandonarlo. En general, las cras nacen completamente inermes. Sus capacidades se reducen a mamar, chuparse el dedo y agarrarse al pelo materno, suelen presentar un color rosceo que se va oscureciendo con el tiempo hasta alcanzar la coloracin tpica del adulto. Las cras de chimpanc por ejemplo, no son capaces de enfocar la mirada hasta los 21 das y de realizar movimientos coordinados hasta la octava semana. A los 3 meses ya pueden mantenerse de pie en el suelo, aunque sern transportados abrazados por su madre hasta que cumplan siete meses, despus ir en su espalda o caminando junto a ella en los trayectos cortos, hasta que cumpla los 3 aos. Al ao comienza adoptar los gestos y posturas tpicas de los adultos. Despus de los tres aos y medio no depender de su madre para comer, desplazarse o construir su propio nido, aunque sta contine protegindolo. El penacho blanco tpico de las cras desaparece y las reprimendas de los adultos son mayores. De los 7 a los 13 aos se completa el aprendizaje de las relaciones sociales y alcanza la pubertad. Macroambiente Existe una gran diversidad de especies incluidas en primates no humanos. Los requerimientos ambientales, nutricionales y sociales son en muchos casos totalmente diferentes. Como resultado, las condiciones idneas para unas especies no son necesariamente apropiadas para otras. En general, las dimensiones mnimas en lo que se refiere a la superficie del suelo y la altura de la jaula varan segn la especie y el tamao de los animales. Las lneas directrices europeas dividen los monos en siete grupos segn su peso corporal. La altura de la jaula como mnimo debe proporcionar a los monos la posibilidad de ponerse de pie. En el caso de los monos araa, debe haber suficiente espacio para que se cuelguen con facilidad del techo y se estiren. Aparte de la superficie del suelo y la altura, la forma de la jaula tambin es importante. Siempre que sea posible, debera contar con pequeos estantes para que los animales se puedan sentar y descansar cerca del techo de la jaula. Cuando sea necesario colocar a los monos temporalmente de forma individual (una cuarentena, un procedimiento experimental o durante la recuperacin de una anestesia), las jaulas se deben disponer de manera que los animales puedan o no mantener un contacto visual. En general, el confinamiento de un solo mono durante un largo perodo de tiempo puede inducir una conducta anormal, aunque algunos primates, como el orangutn macho pueda vivir solo, o los monos tit en parejas mongamas. La temperatura ptima para la mayora de las especies de monos es de 20-24C, aunque los monos Tit prefieran una temperatura un poco ms elevada, entre 22 y 28C. La ventilacin debe ser la adecuada para minimizar corrientes, olores, condensacin de humedad, etc. La luz debe ser uniforme y lo suficientemente intensa, pero no excesiva, como para permitir la inspeccin rutinaria y la limpieza. En libertad, una buena parte de su tiempo la emplean en recolectar la comida, siendo aconsejable el suministro de alimentos variados, no contaminados, sabrosos y en suficiente cantidad para satisfacer las necesidades especficas de cada especie, y mantener ocupado al animal. En el caso de grupos, es esencial

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comprobar que todos los animales tienen acceso a suficiente comida. Se les puede suministrar alimentos preparados para monos, teniendo en cuenta que todos los primates necesitan un aporte exgeno de vitamina C (1-5 mg/kg pv/da) y que algunos no pueden absorber algunas vitaminas. Por ejemplo, los monos sudamericanos, como los monos tit, no pueden absorber la vitamina D2, como fuente de vitamina D. Los restos de comida deben retirarse diariamente para evitar olores y contaminaciones. En general, no necesitan disponer de agua ad libitum, siendo aconsejable ofrecrsela dos veces al da. Si la base de su dieta es fruta, los requerimientos de agua sern menores. Manejo El manejo adecuado de estos animales es muy importante y debe ser realizado por un experto. Las especies ms grandes de monos, son animales fuertes, rpidos y en ocasiones agresivos. Debe tenerse cuidado con sus brazos, manos y dientes caninos. Cuando se manejan animales de gran talla, puede que sea necesario el uso de guantes gruesos o de tranquilizantes (ketamina) antes de proceder a su manipulacin. Para inmovilizarlos: en monos mantenidos aislados puede utilizarse jaulas de pared corredera, en monos mantenidos en cercados, una red, asegurando los brazos del mono detrs de su espalda, una vez que est dentro de la red. Para experimentos de corta duracin se pueden mantener en sillas de inmovilizacin, o con cinturones de contencin, aunque estos mtodos no sean los ms aconsejables.
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Como profilaxis, los primates se someten a un calendario de vacunaciones (no se debe olvidar que son posibles transmisores de zoonosis), y se les suministra un tratamiento regular contra los ecto y/o endoparsitos. Perro Hoy en da existen unas 300 razas, que se clasifican en funcin de su peso y tamao en variedades, las ms pequeas presentan unos 18 cm de altura y 1-2 kg y las grandes y pesadas unos 80 cm de alto y 90 kg de peso. El perro beagle, es habitualmente utilizado como animal de laboratorio, alcanzando un peso medio de unos 10-12 kg. Su empleo se ha reducido en los ltimos aos y se destinan para estudios cardiovasculares referentes al gasto y monitorizacin cardaca; arterioesclerosis compatible; shock endotxico; transplantes; desarrollo de tcnicas quirrgicas; estudios digestivos relacionados con el anlisis de las secreciones de jugo gstrico y de la secrecin pancretica, lceras gstricas, obesidad, regeneracin heptica; estudios de metabolismo y nutricin referentes al metabolismo energtico, absorcin de sustancias, o como modelo en estudios dentales. Peculiaridades fisiolgicas Los parmetros fisiolgicos del perro se conocen muy bien (vase Cuadro 2-3). Las diferencias biolgicas son considerables dada la gran variedad existente entre las distintas razas. El perro es un animal social. Existe un complicado orden social en el seno del grupo, cuya jerarqua depende en gran medida del sexo del animal. En general, los machos son ms agresivos que las hembras, especialmente con otros machos y con perros adultos que no les resultan familiares. Los machos marcan los lmites de su territorio depositando regularmente orina en distintos lugares. El manipulador siempre debe ser el dominante del grupo, y debe permanecer cerca de los perros durante el perodo de socializacin (entre las 4-8 semanas de vida), para garantizar su adaptacin. Se debe prestar especial

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atencin a los grupos donde se reintroducen animales que han permanecido aislados, para confirmar que se integran normalmente. El manejo experimental nunca se debe realizar en el territorio del animal.
Cuadro 2-3. Requisitos ambientales y parmetros fisiolgicos en el conejo, el cerdo, la oveja, la cabra, el perro y el gato.
Conejo Cerdo 17-24 40-60 100-180 12/12 4350 0.35-0.8 0.2-2.5 30-40 1-15 1-12 5-6 130-320 30-60 38.5-39.5 44 1270-3040 5 10 0.7-1 2-3 5-8 28 Inducido 10h tras cubricin Hemoendoteria l discoidal 7 14-16 30-33 4-14 30-100 0.8-1.5 0.6-1.5 5 10-12 50-80 200-300 150-220 14-18 60-90 8-18 38-40 38-40 Oveja/Cabra 10-24 40-60 100-150 12/12 1160/800 0.7-0.8 0.7-0.8 1200-2000 50-70 40-60 10-15 70-80 12-25 38.5-40 54/60 Perro 15-21 40-60 20-80 12/12 530 0.75-1.75 0.5(1)-2(4) 60-180 6-80 6-60 10-15 80-150 20-30 38-39 78 Gato 15-21 40-60 20-50 12/12 152 0.2-0.6 0.58 0.2-0.6 50 3-7 3-4 10-17 100-120 20-40 38-39.5 38 8-10 21-28 segn dieta 6.5-7 6-8 10-12 >12 15-18 2-14 inducido pocas h tras cubricin

Requisitos ambientales
Temperatura (C) Humedad relativa (%) Ventilacin (cambios/hora) Luz/oscuridad (horas) Calor basal: Kcal/24 horas Dimensiones mnimas, suelo cubeta Adulto alojado individualmente (m2) Animal reproductor con cras (m2) Grupo (m2 /adulto)
P P P P P P

15-21 50-60 5-15 12/12 117 0.14-0.36 0.30-0.50

Altura mnima de la cubeta (cm)

Parmetros fisiolgicos generales


Peso adulto (Kg) macho hembra Esperanza de vida (aos) Tasa cardaca (/min.) Tasa respiratoria (/min.) Temperatura corporal (C) Nmero de cromosomas (2n) Superficie corporal (cm2) Consumo de comida (g/100g/da) Cra comienza comer slido (da) Consumo de agua (ml/100g/da) Pubertad (mes) macho hembra Edad para la reproduccin (mes) macho hembra N de hembras/macho (cruces) Ciclo estral (das) Duracin del estro (horas) Mecanismo de ovulacin Tiempo de ovulacin (h)
P P

2.6 5-7 5-7 >7 >7 18-24 2(1-3) espontneo 24-36h tras inicio estro epitelio corial

6-10 6-10 >10 >10 14-20/15-24 1-2 espontneo 8-18h antes del final del estro sindesmocorial

Segn dieta 7-8 8-14 9-14 >12 120-240 6-9-14 espontneo tercio medio del estro

N medio de vulos Tipo de placenta Tiempo de implantacin (das) Duracin pseudogestacin (das) Duracin del embarazo (das) Tamao de camada Peso al nacer (g) Peso al destete (Kg) macho hembra Edad del destete (semanas) Ovulacin tras destete (horas)

endotelio-corial

110-118 11-16 900-1600 6-8 6-8 4-7

144-155 1-2

4-8

63-67 3-6 200-500 1.5-4 1.5-4 8-10

60-65 3-5 90-130 0.6-0.8 0.6-0.8 6-7

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Cuadro .2.3. Continuacin Conejo Composicin de la leche (%/100 ml) Agua Grasa Protena Lactosa Cenizas Glndulas accesorias macho Volumen del eyaculado (ml) Espermatozoides eyaculados (106/ml)
P P

Cerdo 80.4 7.9 5.9 4.9 0.9

Oveja/Cabra

Perro 76.9 9.5 9.3 3.1 1.2 10 (1-25) 125 (4-540)

Gato 78.1 7.1 10.1 4.2 0.5

73.6 12.2 10.4 1.8 2.0 1 (0.5-6.0) 700 (100-2000)

78.2/88 10.4/3.5 6.8/3.1 3.7/4.6 0.9/0.8 B, A,VG, P,CG 250 (150-500) 1 (0.7-2) 100 (25-300) 3000 (2000-5000) 100 11-13 41 6 40/30 11-13/8-12 32//34 4.8/4

Parmetros sanguneos
Volumen de sangre (ml/Kg) Hemoglobina (g/100 ml) Hematocrito (vol.%) Dimetro de los hematies () Velocidad de sedimentacin (mm) 1h/2h/24h Tiempo de sangra (%) Tiempo de coagulacin (%) Eritrocitos (X106/mm3) Leucocitos ( 100/mm3) Neutrfilos (%) Eosinfilos (%) Basfilos (%) Linfocitos (%) Monocitos (%) Plaquetas (miles/ml)
P P P P P P

12

20 10.5-20 37-55 7

1-3/2.5-4/ 25-50 1 min 5-8 min 5.5-6.5 80-150 45 1 2 50 3 240 78-155 20-83

3 12 24-55 6 4/10

6-8 150-220 30-35 2-5 <1 55-60 5-6 350150 80-120 100-250

10-13/13-14 70-100/80-120 25-30/35-40 2-5 <1 60-65/50-55 5

6-8 90-130 65-70 2-5 <1 20-25 5

6-8 100-150 55-60 2-5 <1 30-35 5

Parmetros bioqumicos
Glucosa (mg/100 ml) Colesterol total (mg/100 ml) Protena plasmtica total (g/100 ml) Protena srica total (g/100 ml) Albmina (g/100 ml) Globulinas (g/100 ml) Cloruros (mEq/l de suero) Fsforo inorgnico (mEq/l de suero) cido rico en sangre (mg/100ml) 30-50/45-60 100-150/55200 5.74-7.27 5.38/6.67 3.07/3.96 2.31-2.71 95-110/100125 2-5.2 0.05-2/0.3-1 80-120 125-250 6.72 6.2 3.57 2.63 105-120 1.3-2.6 0-0.5 80-120 90-110

2.5-4 92-112 2.3-6.9

6.3 2.03 3.27 95-110 3.2-5.2 0.05-2

7.58 4.01 3.57 105-120

Reproduccin En general, la reproduccin de los perros no se produce en los centros de investigacin. La fertilidad es estacional. Normalmente, las perras presentan 2 ciclos al ao, en primavera y en otoo. El intervalo medio entre dos perodos de celo dura de 6 a 7 meses. En general, las razas de mayor tamao tienen intervalos ms largos que las pequeas, excepto los Dachshund (7-8 meses) y el pastor alemn (4-5 meses). En Beagle aparece cada 7-8 meses, considerndose normal intervalos de hasta 14 meses. Las hembras individualmente suelen ser constantes en la aparicin de sus ciclos.

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Los primeros signos del celo se muestran en perras jvenes entre los 6-8 meses, aunque el celo propiamente dicho no aparece hasta los 10-12 meses. La fase de proestro dura unos 9 das y se puede detectar en la perra por la inflamacin de la vulva, seguida de una hemorragia que dura de 6-10 das. En esta fase la hembra ahuyenta a mordiscos a los machos que atrae con su olor sexual. Al finalizar esta fase comienza el perodo del estro, que dura entre 7-13 das. El mejor momento para el apareamiento es entre el da 10 y el 12 despus de iniciarse la hemorragia vulvar. En este perodo la hembra acepta a cualquier macho, el semen de los diferentes posibles padres se almacena, ya que la fecundacin no tiene lugar hasta concluir este perodo, lo que explica la aparicin de cachorros diferentes dentro de una misma camada. Las fases de metaestro y diestro duran mucho tiempo. Entre ciclos se observa un perodo de anestro donde no existe actividad hormonal. La gestacin se puede confirmar tras el apareamiento, mediante: control del peso, ecoscopia a los 14 das, o palpacin entre el da 21 y el 28. A partir del da 25, el diagnstico por palpacin se hace ms difcil. El grado de inflamacin mamaria no es indicativo de gestacin, ya que el cuerpo lteo persiste hasta 70 das. Habitualmente las perras tienen 2 partos al ao. En la ltima semana de la gestacin, hay que proporcionar a la perra una caja para hacer la cama. El intervalo entre el nacimiento de cada cra no suele ser superior de 1 hora. Finalizado el nacimiento de cada cra, la perra corta el cordn umbilical con la boca y se come la placenta. Las camadas oscilan entre 2-3 cachorros en las especies de pequeo tamao y 4-12 en las de gran tamao. Las cras son amamantadas cada 2 horas durante la primera semana de vida, despus la frecuencia disminuye. Las cras recin nacidas dependen del calor externo para regular su temperatura corporal durante los primeros 5-10 das de vida, necesitando ambientes caldeados. Los ojos y odos de las cras se abren entre el da 10 y el 14, y pueden caminar y empezar a comer alimento slido desde el da 20. Se pueden criar cachorros con leche artificial, teniendo en cuenta que la leche de perra contiene un porcentaje mayor de grasas, protenas, calcio y fsforo que la leche de vaca. El semen en los machos reproductores se puede recolectar por vagina artificial. Los espermatozoides deben mantenerse a unos 37C protegidos de la luz y en un frasco donde se pueda medir su volumen. Al microscopio ptico, en una gota se observar: la movilidad (70%), la vitalidad y la concentracin de los espermatozoides. En una extensin de esperma secada al aire y teida con un panptico rpido, negrosina-eosina, Diff-Quick, se pueden estudiar las formas anormales (<20%) y las muertas (se tien de rojo). El recuento de espermatozoides se realiza con un hematmetro tras diluir la muestra. Los valores normales en perro varan entre 50.000 y 600.000/mm3 y su pH oscila entre 6.3-7. La variacin de pH de la muestra puede indicar infecciones de prstata en el macho. Por bacteriologa se pueden determinar las posibles infecciones de prstata ascendentes ocasionadas generalmente por grmenes aerobios. Otro parmetro a considerar es la determinacin de fosfatasa alcalina en plasma seminal, como marcador del eyaculado completo del epiddimo. En perro como valores normales se admiten entre 5.000-40.000 UI/L.
P P

Macroambiente Se pueden alojar tanto en lugares cerrados como al aire libre. Es preferible alojarlos en grupos pequeos con una zona cubierta y un espacio al aire libre. Los cercados cubiertos deben tener en una zona un suelo de rejilla y en el resto un suelo blando, y deben mantenerse templados y sin corrientes de aire. Deben disponer de una zona para dormir aislada y seca, a ser posible con calefaccin bajo el suelo. El suelo del espacio al aire libre debe tener una inclinacin en torno al 5%, para asegurar un drenaje correcto. De forma temporal, se pueden utilizar jaulas para alojar a los perros. stas segn las directrices europeas, estn en relacin con el tamao del perro, siendo la superficie mnima mayor cuando los animales se mantienen en grupo. De igual forma, se aconseja que la altura mnima de la jaula sea el doble

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respecto a la altura a la cruz del animal. Por ejemplo, un beagle necesita una superficie mnima de suelo de 1 m2 y una altura de 80 cm para una estancia corta, mientras que si se mantiene en grupo necesita una superficie interior de 1.2 m2 y un espacio exterior de al menos 1.6 m2 por animal. Si se mantienen aislados es conveniente, siempre que sea posible, disponer de un recinto de paseo, donde puedan permanecer al menos durante media hora.
P P P P P P

Los perros no se aclimatan bien a las bajas temperaturas. Se aconsejan temperaturas entre 22-25C. stas deben ser ligeramente superiores cuando se alojen en solitario. Las cras recin nacidas durante la primera semana de vida, dependen del calor externo para regular su temperatura corporal, necesitando que el alojamiento se mantenga entre 26 y 29C, para conseguirlo se suele instalar una lmpara de calor a una altura mnima de 1 metro. La ventilacin debe ser la adecuada para minimizar las corrientes y los olores. La luz debe ser uniforme y lo suficientemente intensa, pero no excesiva, como para permitir la inspeccin rutinaria y la limpieza. Son sensibles a ruidos de alta frecuencia. Estos sonidos pueden producirles alteraciones fsicas y comportamentales, que pueden interferir con los resultados experimentales. Los perros son animales carnvoros, cuando son adultos deben alimentarse una vez al da, con comida preparada para perros (seca o hmeda). En el caso de los cachorros, es preferible dosificar la dieta en varias tomas. Para enriquecimiento ambiental, se aconseja variar el tipo de dieta. En el caso de grupos, es esencial comprobar que todos los animales tienen acceso a suficiente comida. Habitualmente, tienen acceso ad libitum al agua, ya sea en un bebedero o por medio de un sistema automtico de bebida, aunque pueden mantenerse suministrndoles agua dos veces al da en perodos no inferiores a una hora. Manejo En general, son animales tranquilos. Si muestran una disposicin nerviosa y agresiva deben ser calmados, utilizando un sedante, si se considera necesario. Los perros que persisten en su actitud, deben desecharse o utilizarse en experimentos agudos. Uno debe acercarse de cara al animal, movindose despacio y hablndolo al mismo tiempo. El silencio provoca desconfianza en cualquier perro. Se recomienda acariciar habitualmente a los animales a fin de evitar su recelo al manipularlos. Proteccin contra mordiscos: los bozales, no son absolutamente fiables. La lazada de hocico o la sujecin del morro por el mtodo de la corbata, son ms seguros. En este ltimo, se pasa una cinta de unos 7 cm alrededor del morro y se hace un nudo sencillo bajo el hocico, despus se llevan los dos extremos de la cinta por detrs de las orejas del perro y se hace un segundo nudo y una lazada en la nuca. Para sujetarlo: se coloca una mano en la barriga y la otra en la piel del cuello, se utiliza un collar, o un lazo. Para inmovilizarlo: la mejor forma y la ms segura es en posicin yacente lateral. Para ello, se sujetan por debajo del cuerpo las dos patas del perro del lado de quien inmoviliza al animal, forzando al perro a que se tumbe. Una vez tumbado, uno de los antebrazos le presiona la zona de la cabeza y del cuello y, el otro, la parte posterior del cuerpo. En estas condiciones, si se cuenta con un ayudante es fcil realizar un reconocimiento a fondo del animal (Figura 2-4). Para inspeccionar la cavidad bucal: se rodea la boca con la mano suavemente y se presiona cada vez con ms fuerza sobre la dentadura. Cuando el perro abre la boca se procura que entre los dedos y los dientes del perro queden siempre los belfos, para que si cierra la boca se muerda y no lo intente nuevamente.

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Para medir la temperatura: se sujeta al perro por la piel de la nuca y se introduce unos 5 cm el termmetro impregnado en vaselina durante unos 3 minutos en el recto. En perros se puede hablar de fiebre a partir de 38.5-39C, mientras que en cachorros la temperatura debe ser superior. Para medir la frecuencia del pulso: el nmero de pulsaciones por minuto vara considerablemente segn el tamao corporal del perro, oscilando entre 60-120 pulsaciones o ms cuando se hallan agitados. El pulso se toma colocando dos dedos en la mitad superior de la cara interna de una de las patas traseras. Para administrar supositorios: se colocan fcilmente con el perro en posicin yacente. Si el perro conoce la maniobra se puede poner sin necesidad de tumbarlo entre dos personas, la primera sujeta al perro por la piel de la nuca, mientras que la segunda le agarra la cola con una mano y le introduce el supositorio impregnado de grasa para que se deslice mejor con la otra. Finalmente, se aconseja presionar la cola contra el ano para evitar que expulse el supositorio. Para administrar lquidos: se sujeta la cabeza con el morro cerrado en posicin vertical y se introduce el lquido con una jeringa empujando hacia abajo el belfo inferior. Si el animal no quiere tragar se masajea la laringe para ayudarlo. Si le sobreviene un acceso de tos se debe liberar al animal, porque el lquido ha podido pasar al conducto respiratorio. Para administrar pastillas: directamente introduciendo dos dedos sobre el arranque de la lengua, para forzar la deglucin. Si no se tiene experiencia se pueden administrar mezcladas con un poco de comida, comprobndose que no escupen el preparado. Para administrar gotas en los odos: se mantiene al perro sentado. Se desplaza la oreja hacia atrs y hacia arriba para facilitar la introduccin del lquido en el conducto auditivo. Se termina masajeando la zona situada en el arranque de la oreja, para favorecer la progresin del preparado. Como profilaxis, los perros se someten a un calendario de vacunaciones, y se les suministra un tratamiento regular contra los ecto y/o endoparsitos. El sarro de los dientes se les debe eliminar de forma regular. Las perras pueden someterse a un programa de control del estro, inyectndolas hormonas cada 56 meses. Debe tenerse en cuenta que todos estos tratamientos pueden influir en el resultado experimental.

Figura 2-4. Tcnica de inmovilizacin en el perro. Para una explicacin detallada, vase texto.

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Gato Hoy en da existen ms de 100 razas, que proceden originariamente de cruces entre Felis silvestris y Felis lybica. En los ltimos tiempos, el nmero de gatos utilizados en experimentacin ha disminuido. Como animales de laboratorio se usa mayoritariamente Felis catus, resultado del cruce del gato tipo europeo y del gato abisinio. Estos animales se siguen empleando en el desarrollo de frmacos y el estudio de sustancias que actan sobre el sistema nervioso central, en investigacin neurolgica y sobre patologa cardiovascular por mantener buenas presiones bajo anestesia en estudios de motricidad por el gran desarrollo de sus reflejos, y en estudios de comportamiento. Peculiaridades Son predadores territoriales, con una buena vista y un fino odo, que se comunican entre s y con el hombre a travs de diferentes sonidos, (maullidos y ronroneos), expresiones faciales (posicin de sus orejas) y corporales (pelo erizado, espalda arqueada, uas extendidas). Marcan el territorio a travs de una excrecin de las glndulas perianales y de la orina, y lo defienden frente a los intrusos. Son animales generalmente sedentarios. En general, las hembras y los machos castrados son menos agresivos, siempre que hayan sido castrados antes de la madurez sexual. Los grupos de machos son mucho ms conflictivos, siendo difcil la introduccin de nuevos machos en un grupo ya existente. Los gatos comunes presentan algunas glndulas serosas y mucosas en la submucosa peribronquial, inexistentes o poco desarrolladas en los gatos SPF. Los riones tienen un color marrn-amarillento debido a la de grasa depositada en los tbulos contorneados, que aparentemente no interfiere con la funcin renal, asociada a la presencia de vitaminas liposolubles en la orina. Son sensibles a: productos organofosforados, carbamatos, solventes orgnicos voltiles como el tricloroetileno y la acetona, anticongelantes glicolados, mercurio, arsnico, cido peractico y la morfina. Reproduccin Las gatas son polistricas estacionales. La duracin del ciclo es de unos 14 das con un perodo interestral de entre 3 y 6 das. Los ciclos son anaovulatorios si no se produce la cpula. Las hembras pueden manifestar hiperestesia temporalmente en el rea dorsal antes (entre 5-7 das) y durante el estro, una gata en estro suele delatarse por su conducta: mantiene la cola erecta, el cuerpo estirado, y la espalda hundida. Tras la cpula aparece la fase lutenica que dura unos 36 das. La inseminacin artificial no es fcil de realizar, porque tras la manipulacin y al faltar la estimulacin coital, puede no producirse la ovulacin. Por ser animales territoriales, el apareamiento debe realizarse en el territorio del macho. Los machos presentan espculas en el pene y el tamao de stas parece estar en relacin con la concentracin de testosterona del animal. Estas espinas se clavan en la vagina el momento de la cpula para estimular e inducir la ovulacin de la hembra. Las gatas que estn en un estado avanzado de gestacin deben ser separadas del grupo unos das antes del parto, mantenindolas aisladas en jaulas con una caja para criar. Las cras nacen en intervalos de 30 minutos, y durante los primeros das de vida, dependen del calor externo para regular su temperatura corporal, necesitando ambientes caldeados (23 2C). Las gatas tienen 8 mamas dispuestas de dos en dos, si tienen ms de 6 cras puede suceder que alguna no reciba suficiente comida. Si la gata no produce suficiente leche, las cras pueden ser adoptadas por otra gata. En caso de ser alimentadas artificialmente con bibern se les administra leche con alto contenido en protenas en cuatro tomas diarias. Si las cras

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amamantadas no progresan adecuadamente, es decir no ganan aproximadamente unos 100g/semana, se les debe administrar una toma de bibern adicional. Las cras nacen ciegas y sordas pero con un olfato muy desarrollado. En sus dos primeros das no sueltan las mamas ni cuando duermen, cuando succionan dan patadas a su madre, las llamadas patadas de leche para estimular el flujo lcteo. Para facilitar la miccin y la defecacin la madre frota la barriga y la zona inguinal de las cras, siendo necesaria esta prctica cuando se realiza cra artificial. A los 8-11 das abren los ojos y erupcionan los dientes de leche. A las 3-4 semanas, juegan torpemente y pueden empezar a ingerir alimentos slidos, aunque el destete no se realiza hasta las 7-8 semanas. Para reconocer el sexo de las cras se observa la distancia entre el ano y la abertura genital, y la forma de sta ltima. En los machos la distancia es mayor y la forma es redondeada, mientras que en las hembras es menor y alargada. Macroambiente Se pueden alojar hasta 20 hembras en un cercado interior, a ser posible con un espacio exterior. La zona cubierta para un grupo de 10-20 gatos debe tener una superficie de suelo mnima de 12-25 m2 con un desnivel del 3-5% para permitir el drenaje y una altura de 2-3 m. El cercado debe disponer de instalaciones para trepar y afilarse las garras, lugares para dormir que no sean el suelo, un nmero de bandejas para deposiciones y una doble puerta para evitar que se escapen. Debe ser posible ver el interior del recinto para observar la conducta del grupo. Se aconseja la existencia de un espacio exterior al que se pueda acceder a travs de dos o ms puertas. Sin embargo, para evitar peleas, los machos tienen que separarse a partir de los 4-6 meses, a menos que pertenezcan a una misma camada. El mantenimiento de un nmero reducido de animales en un rea extensa, favorece la aparicin de subgrupos y las peleas entre ellos por el territorio.
P P

Conviene limitar al mnimo el alojamiento de gatos en jaulas, es aconsejable que los gatos as recluidos, salgan al menos una vez al da hacer ejercicio, siempre que esto no dificulte el experimento. La zona de las repisas se puede incluir al calcular la superficie mnima del suelo. Esta superficie debe ser mayor si incluye a una gata y su prole. Segn se establece en las Directrices Europeas, estas jaulas deben contar con un estante suspendido para que el gato duerma, una bandeja para deposiciones y mecanismos para trepar y afilarse las garras. Los gatos son animales esencialmente carnvoros, aunque en ocasiones pueden comer legumbres y vegetales. La alimentacin debe ser de su agrado o no comen. A los adultos se les puede alimentar una vez al da con una variedad de comida preparada para gatos, mientras que a las cras, la dieta debe distribuirse en 2 3 tomas. Cuando se mantienen en grupos, es necesario comprobar que todos los animales comen. En general, necesitan una dieta rica en protenas, vitamina B5 (cido nicotnico), vitamina A, cido araquidnico y taurina. El consumo de agua vara segn el tipo de dieta, en dieta hmeda debe ser de unos 30-40 g/da, mientras que en dieta seca este valor es unas 7 veces mayor. El agua debe ser fresca y abundante, puede estar clorada (0.2-1.0 ml de cloro libre/ litro) pero no debe estar acidificada. Manejo Lo ideal es que el manejo y el cuidado de los gatos lo realice una sola persona. No deben encargarse de su cuidado personas que no les gusten estos animales. El acercamiento y el manejo por personas que no les son familiares pueden influir en el resultado experimental. Los gatos solitarios suelen ser ms nerviosos y ms difciles de manejar y su reintroduccin en un grupo puede ocasionar graves problemas, siendo aconsejable en caso de realizarse, el seguimiento del

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grupo. Para su exploracin deben situarse en superficies no resbaladizas y elevadas. Si son agresivos se les puede administrar previamente un tranquilizante. Si est suelto, uno debe acercarse movindose sin brusquedad, hablndole, sin mirarle a los ojos. Si es dcil, se puede acariciar de arriba-abajo (a favor del pelo) de la nuca a la cruz, y sujetarlo, pasando el brazo por debajo del cuerpo del animal manteniendo la mano entre el pecho y el cuello, fijando las patas delanteras con los dedos. Para sacarlo de una jaula y sujetarlo: se agarra con firmeza por la nuca (reflejo de rigidez), y se sujeta como se haba descrito previamente. Si el gato es dcil puede sujetarse, una vez tumbado fuera de la jaula, rodeando la parte delantera del cuerpo con las manos aumentando o aflojando la presin, sin llegar a estrangularlo, segn la actitud del animal. Si es agresivo, se puede inmovilizar utilizando unos guantes de cuero con refuerzos para los brazos, una red, un pao para gatos, o dentro de la jaula si sta tiene una pared mvil (vase Figura 2-5). Para inmovilizarlo: el mejor mtodo es colocarlo de lado sobre una mesa (posicin yacente lateral). Se procede igual que en perro, pero una vez tumbado, se traban firmemente las extremidades anteriores y posteriores entre los dedos, mientras que la cabeza es contenida contra la mesa utilizando la mueca. En estas condiciones, si la sujecin la realiza un ayudante es fcil reconocer al animal. Tambin se puede sujetar al gato con firmeza por la piel de la nuca con una mano mientras que con la mano libre se agarran seguidamente las dos extremidades posteriores (sujecin disuasoria o persuasiva). Para tomar la temperatura: se coloca al gato sobre una superficie lisa. Una persona sujeta al animal con ambas manos por la parte delantera del cuerpo, mientras que otra le levanta la cola y le introduce unos 2-3 cm un termmetro impregnado en vaselina, que se mantiene entre los dedos durante unos 3 minutos. A partir de los 40C el gato tiene fiebre. El proceso debe hacerse con tacto para evitar que sea doloroso y debe finalizar con caricias conciliadoras. Para introducir supositorios: se procede como para tomar la temperatura. Si el gato es dcil, una sola persona puede realizar el proceso. Para ello, le mantendr en el regazo, le levantar la cola y le introducir el supositorio engrasado. Para evitar que expulse el supositorio mantener al gato en el regazo acaricindolo. Para poner gotas en los odos: se calientan previamente las gotas entre las manos. Se sujeta al animal, y se le gira con suavidad pero con firmeza la cabeza. Con el pulgar se retira hacia atrs el pabelln auditivo, y se aplican las gotas. Se masajea la base de la oreja para evitar que el producto se vierta fuera. Estos procesos suelen ser repetitivos, y si se consigue que el gato est cmodo, opondr menos resistencia en los sucesivos tratamientos. Para poner gotas en los ojos: Se calienta previamente el preparado entre las manos, ya que las gotas o pomadas oculares fras pueden irritar los ojos. Se sujeta la cabeza del animal con una mano y con el pulgar y el ndice se separan con cuidado los prpados. Con la otra mano se deposita la pomada directamente entre el globo ocular y el prpado o las gotas en el globo ocular. El cuentagotas debe situarse a una distancia mxima de 1 cm del ojo. Una vez concluida la operacin debe acariciarse al gato. Si no se posee experiencia es mejor realizar el proceso entre dos personas. Para inspeccionar la boca: se coloca al gato en una mesa o sobre el regazo. A continuacin, se sujeta con una mano mientras que con la otra se le agarra el pabelln auditivo entre los dedos pulgar e ndice. Seguidamente, se tira de la oreja hacia atrs, mientras que con la otra mano se presionan las mandbulas para favorecer la apertura de las fauces. Para una buena visualizacin se debe iluminar la cavidad bucal

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con una linterna a una distancia de medio metro (por ejemplo con una lmpara de cabeza). Como en las manipulaciones anteriores, tras finalizar el examen se debe acariciar al gato (Figura 2-5). Para administrar lquidos: se sujeta con una mano la cabeza del gato y se mantiene en posicin vertical. Se introduce la punta de una jeringa lateralmente en las mandbulas y posteriormente se vierte despacio el lquido, la boca puede permanecer cerrada. Durante unos segundos, se mantiene en esta posicin la cabeza para obligarle a tragar. Si la solucin tiene un sabor agradable, se puede administrar en un pequeo tazn para que la tome. Para administrar pastillas: se le abre la boca, como se describi previamente, y se coloca la pastilla sobre el fondo de la lengua, para que se desencadene el reflejo de deglucin. La otra mano presiona la piel de las mandbulas para evitar que la dentadura se cierre. Tambin se puede utilizar una pinza curvada para colocar las pastillas. Personas sin experiencia, pueden intentar administrar pastillas dentro de una comida sabrosa para el animal, el tamao de los bocados debe ser menor que una cereza. Si el animal descubre el engao escupir la pastilla. Como profilaxis, se los puede someter a un calendario de vacunacin, y administrarle un tratamiento regular contra ecto y/o endoparsitos, (no deben utilizarse productos organofosforados). Para evitar el estro, las gatas pueden recibir un tratamiento hormonal. Todos estos tratamientos pueden influir en el resultado experimental.

Figura 2-5. Diferentes detalles de inmovilizacin y manejo en gato.

Codorniz Las codornices se emplean como modelo experimental desde 1950, por su alta tasa reproductora (hasta cinco generaciones al ao), con una produccin de unos 80-90 huevos en unos 100 das. Las codornices se utilizan fundamentalmente en las reas de embriologa, farmacologa y toxicologa. Generalidades Anatmica y fisiolgicamente presentan las caractersticas generales de las aves, explicadas ms adelante. Morfolgicamente los adultos presentan el aspecto de una perdiz muy pequea. Su dorso es arenoso con rayas pardas y negras, franjas claras y oscuras en los costados, ms claras en la parte inferior. Ceja blanca y una lista del mismo color sobre la cabeza. Los machos tienen manchas negras en el cuello, ausentes en las hembras, donde el color es pardo uniforme. Las hembras presentan el pecho barreado. Los jvenes muestran diferente coloracin, tienen la cabeza rojiza con una raya en el centro bordeada de negro, y dos manchas sobre el odo, una negra y otra amarillenta. El dorso es rojizo amarillento con dos rayas negras y manchas del mismo color en las alas. Por debajo son amarillentos. Los jvenes se parecen a las hembras adultas pero con el pecho menos manchado.

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Reproduccin La produccin de huevos comienza a la edad de 40-45 das y disminuye despus de las 26 semanas. En total, pueden poner hasta 300 huevos por ao. El ciclo da/noche es importante en las unidades de reproduccin, siendo normalmente de 14 horas de luz y 10 horas de oscuridad. La mayora de los huevos los ponen durante las ltimas 6 horas del perodo de luz. Para una fertilizacin efectiva, se necesita un macho por cada 2-3 hembras, alojndose habitualmente unos 20 machos con unas 40-50 hembras, para conseguir una tasa de fertilizacin del 80-90%. Los mejores resultados se obtienen utilizando animales que tengan entre 8 y 20 semanas de edad. Los polluelos rompen el cascarn despus de un perodo de incubacin artificial de 16 das. Es difcil conocer el sexo de las codornices jvenes por las diferencias anatmicas de la cloaca, y se necesita mucha experiencia. Ms adelante, entre la 2-3 semana, se puede saber el sexo por el color de las plumas del pecho. En los machos estas plumas son de color marrn, mientras que las hembras son grises con manchas negras. Macroambiente Se puede alojar en grandes grupos en jaulas con serrn, pero en estas condiciones no pueden construir un nido y los huevos estarn esparcidos por la jaula. Por eso, es mejor formar grupos pequeos de reproduccin (1 macho y 4 hembras) en jaulas separadas, aunque las hembras pueden mostrarse agresivas hacia el macho. Segn las Directrices Europeas, una codorniz adulta alojada en grupo, debe contar con una superficie mnima de 200 cm2 por animal. El alojamiento individual es posible en jaulas cerradas y pequeas, o en jaulas de tela metlica con unas dimensiones mnimas del suelo de 350 cm2 y una altura mnima de 15 cm, en donde al menos los animales puedan mantener contacto visual. Este tipo de alojamiento es de baja calidad y no satisface sus necesidades de conducta. Conviene revisar las aberturas de las mallas en los suelos de rejilla, el grosor del alambre y la inclinacin del suelo para mejorar las condiciones de las aves alojadas. Las jaulas deben estar equipadas con perchas.
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Los adultos se mantienen entre 19-23C, mientras que las cras necesitan temperaturas superiores, entre 35-37C. El calor adicional se les proporciona mediante el calor generado por una bombilla elctrica. En las semanas posteriores, se debe disminuir de forma gradual la temperatura, hasta alcanzar la temperatura de los adultos. Se necesita un buen sistema de ventilacin, para reducir los olores, recomendndose una velocidad de 1.7 m3/hora/animal para animales en crecimiento y de 30-35 m3/hora/animal en el caso de codornices adultas. Sin embargo, la humedad relativa no parece influir de manera decisiva en estos animales.
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Son aves gramneas que debido a su tasa de crecimiento y a su alta produccin de huevos, necesitan un alimento continuo y rico en protenas (25-28%) y energa (2 kcal/g) aunque coman a intervalos. El agua se proporciona ad libitum. Es aconsejable que los comederos y los bebederos tengan el mismo tamao. Si se utilizan bebederos con tetina o copas cada ave debe tener acceso a dos. Manejo La codorniz es un ave nerviosa. Los polluelos son muy pequeos y se suelen agarrar entre el pulgar y el ndice, mientras que las codornices adultas hay que inmovilizarlas con una mano colocando el pulgar en el pecho, y el dedo ndice y el medio sobre las alas. Las patas se sujetan con el dedo anular y el meique.

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OTROS ANIMALES NO RECOGIDOS EN LA DIRECTIVA COMUNITARIA 86/609/CEE Aves Existen unas 8.500 especies de aves diferentes, que conforman un grupo muy uniforme. Las aves suman entre un 8-10% del volumen total de animales utilizados en experimentacin. Las ms utilizadas son: el gallo domstico (Gallus domesticus), la paloma (Columba livia) y la trtola (Streptopelia risoria).

Generalidades Las aves poseen unas caractersticas fisiolgicas y anatmicas especficas. Son vertebrados adaptados al vuelo y, aunque alguna haya perdido esta facultad, toda su anatoma y fisiologa estn ordenadas en funcin de esta adaptacin. Las aves tienen el cuerpo cubierto de plumas, stas son exclusivas de esta especie, y les sirven para volar y protegerse. Las patas carecen de plumas y suelen estar formadas por escamas parecidas a los reptiles. Su piel est desprovista de glndulas sudorparas y sebceas. Tienen un esqueleto ligero y resistente. La rigidez del esqueleto se consigue por: el acortamiento del cuerpo, el gran desarrollo de la cintura escapular y del esternn, la soldadura de las vrtebras, la prolongacin en forma de gancho de las costillas, la longitud de la cintura pelviana y la forma de unirse el muslo al cuerpo. Las extremidades anteriores estn convertidas en alas, sus dedos reducidos a tres, quedan englobadas en un mun comn. Las posteriores sostienen todo el cuerpo. El muslo queda unido a la masa muscular del cuerpo para adelantar el punto de apoyo y mantenerlo ms o menos horizontal. El pie tiene 4 dedos como mximo, y los tarsianos y metatarsianos se sueldan en un solo hueso. Las aves carecen de diafragma. Los pulmones estn conectados a la cavidad torcica y poseen un sistema de sacos de aire que constituye una estructura esencial en el proceso de respiracin. El intercambio gaseoso se realiza en los pulmones de manera continua, en serie, tanto a la entrada como a la salida del aire, a diferencia del resto de las especies vertebradas. Los sacos areos sirven para aligerar el peso, aumentar el volumen del pulmn y ayudan a regular la presin. La cavidad abdominal es bastante pequea e incluye la parte caudal de la molleja y el intestino, el bazo y los ovarios con el oviducto o los testculos con el ductus deferente. No tienen vejiga. La orina se transporta a travs de los urteres que desembocan en la cloaca. El sistema circulatorio es completo. El corazn es grande con 4 cavidades. Los eritrocitos son ovalados y nucleados. No tienen plaquetas propiamente dichas, sino trombocitos nucleados. La hembra es heterogamtica (2 cromosomas sexuales diferentes), mientras que el macho es el sexo homogamtico. Presentan un encfalo bien desarrollado. En general, tienen una rica organizacin familiar y social, y una conducta instintiva muy desarrollada. Si se comparan con los mamferos, las aves presentan una alta tasa metablica, es decir, la absorcin, el metabolismo y la eliminacin de los elementos nutritivos y los excrementos se realiza ms rpidamente, necesitando un aporte alimenticio continuo y rico en energa, que consiguen aunque la comida se realice a intervalos, debido a la existencia del buche que almacena y regula el trnsito del alimento. Esta caracterstica debe tenerse en cuenta cuando se utilizan como animales de experimentacin. Pollos Las diversas razas de pollos que existen hoy en da proceden del gallo de jungla (Gallus gallus). Por seleccin gentica hoy se disponen de dos tipos de razas de pollo: las razas ligeras, destinadas a la produccin de huevos (ponedoras), y las pesadas, para la produccin de carne (pollos).

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Los pollos pueden utilizarse en todos los estados de su desarrollo. El criterio de seleccin de la raza de la gallina ir en funcin del experimento. En general, es preferible disponer de huevos de un mismo origen, y de una estirpe SPF. Los huevos frescos se utilizan para la preparacin de medios de cultivo. Se debe utilizar una raza seleccionada para la puesta, con una puesta media de 150 huevos al ao (razas italianas de plumaje pardo, La Rhode-Island. Los huevos embrionados se emplean en: el diagnstico etiolgico por aislamiento directo; la produccin econmica de antgenos para diagnstico; la fabricacin de vacunas de bajo costo; la adaptacin y conservacin de cepas vricas o bacterianas; estudios de desarrollo en reas tales como la virologa, embriologa y toxicologa. Se deben usar razas seleccionadas para la puesta, cuyos huevos tengan preferentemente la cscara blanca para localizar al embrin ms fcilmente, y dura para soportar sin problemas la incubacin artificial (Leghorn, Sussex). Las ventajas que presenta la investigacin con embriones de pollo sobre los animales de experimentacin son: la ausencia de virus latentes; si las ponedoras son SPF, la facilidad para hacer inoculaciones y dems maniobras aspticamente; la rapidez en los diagnsticos por observarse las lesiones fcilmente; y la seguridad de que no existen anticuerpos que puedan inhibir la multiplicacin del virus inoculado, por la falta de complemento. Los polluelos se utilizan en numerosas pruebas biolgicas, y los adultos en pruebas de diagnstico y ensayos de vacunas; tambin como donantes de sangre para pruebas sexolgicas, especialmente en investigaciones sobre nutricin, vacunacin e inmunologa y toxicologa. Si se necesitan adultos como donantes de sangre, se debe elegir una raza pesada de crecimiento rpido (Brahma, Sussex, Wyandotte). Reproduccin Las gallinas son sexualmente maduras hacia los 5-6 meses, los gallos a los 4 meses, aunque no deben utilizarse como reproductores hasta los 6 meses de edad. Para garantizar la fertilizacin de los huevos se debe mantener un gallo con 15 gallinas en las razas ligeras y con 10 gallinas en las razas pesadas. Una copulacin garantiza la fecundacin de los huevos durante los 20 das siguientes. Los huevos destinados al incubador no deben tener ms de 10 das, despus de esta fecha disminuye el porcentaje de huevos eclosionados. Los huevos se recogen de 2-4 veces al da y despus de desinfectarlos, se incuban en estufa a 37C con una humedad relativa del 60-80%. Durante los primeros 18 das se les debe dar la vuelta de 35 veces al da. El desarrollo de los embriones es rpido, hacia el 5-6 da de incubacin se pueden inspeccionar los huevos para determinar el nmero de embriones muertos, que aparecen como una mancha marrn, y no presentan ni movimiento propio ni un dibujo vascular claro cuando transilumina el huevo. Los polluelos no reciben ningn alimento las 24 h siguientes a la eclosin de los huevos. A partir del segundo da es preciso darles de comer cada 3-4 h, incluyendo arena o grava con la dieta para facilitarles la digestin. Tras el nacimiento, no es fcil determinar el sexo de los polluelos, es necesario un especialista. Ms adelante, a la edad de 4-6 semanas, las gallinas y los gallos se pueden diferenciar por sus caracteres sexuales secundarios. Los gallos desarrollan una cresta prominente, sus patas son ms gruesas y tienen espolones. Macroambiente Con frecuencia se colocan en jaulas de tela metlica apiladas en dos o ms niveles. Sin embargo, este sistema se considera en la actualidad de baja calidad, dado que no satisface los requerimientos de conducta propios de la especie. Se pueden alojar de forma individual, en parejas o en grupos. Al agruparlos, pueden mostrar una jerarqua social acusada jerarqua del picotazo, encontrando animales desplumados que, en casos extremos, incluso puede conducir al canibalismo. Las directrices Europeas contemplan 5 variantes, dependiendo del peso de los animales y del nmero de animales por jaula. En

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general, la rejilla del suelo debe tener un grosor mnimo de 2 mm, y una anchura mxima de 10 25 mm segn se utilice en alojamientos para polluelos o para adultos y jvenes. Los suelos deben estar bien fijados y reforzados por varillas de 6 mm. La inclinacin del suelo recomendada en las jaulas de las gallinas ponedoras es del 8%, y no debe pasar del 14%. En experimentos de larga duracin, para minimizar o evitar la recolocacin y reagrupamiento de los animales durante este tipo de experiencias, debe tenerse en cuenta la rpida tasa de crecimiento de los polluelos. Los polluelos deben mantenerse los primeros das de vida a unos 35C, por medio de una o ms lmparas de calor, disminuyendo en las semanas posteriores de forma gradual esta temperatura hasta alcanzar unos 18-21C. La ventilacin debe ser la adecuada, el nmero de renovaciones depende del nmero de animales, de su tamao y de la temperatura ambiente. Lo habitual, son 7 renovaciones/m3 de aire fresco/hora/kg pv, a una velocidad baja.
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Los pollos son animales granvoros, que desde su nacimiento deben tener comida a su disposicin suministrada en platos llanos o en comederos cuando son adultos. Adems de la comida se les debe proporcionar gravilla o arena en su dieta, para optimizar la trituracin del alimento en la molleja. El agua puede suministrarse en bebederos, semejantes a los comederos, o a travs de un sistema automtico con boquillas, que debe ser revisado con frecuencia, para comprobar que no est obstruido. Manejo Los polluelos jvenes se inmovilizan con una mano colocando con cuidado el pulgar y el ndice alrededor del cuello. Para sacar a una gallina desarrollada de su jaula, es necesario utilizar ambas manos con los dedos muy abiertos y los pulgares colocados dorsalmente sobre las alas. La contencin de la gallina no debe ser brutal. Las manos deben colocarse alrededor del cuerpo de la gallina de forma que la cabeza de la misma quede mirando hacia el manipulador. Posteriormente, una mano inmoviliza las patas mientras que la otra mantiene reunido el cuello y las alas plegadas. La fijacin es posible colocando las alas en la espalda. Despus, la gallina se puede colocar de lado (Figura 2-6).

Figura 2-6. Forma de inmovilizar una gallina.

Palomas y trtolas Existen cerca de 650 especies de palomas y ms de 800 razas. Las palomas (Columba livia) y las trtolas (Streptopelia risoria) constituyen menos del 0.1% del total de los animales utilizados en experimentacin. Se destinan a estudios de fisiologa, aterosclerosis, conducta, farmacocintica y toxicologa.

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Generalidades Son aves que se mantienen en pequeos grupos y/o en semilibertad, con la peculiaridad de que las enfermedades infecciosas son raras o pasan desapercibidas, pero adquieren un carcter epidmico cuando el nmero de animales es elevado o el espacio que ocupan insuficiente. Una paloma sana se caracteriza por no presentar a la palpacin ningn tipo de exudado en la regin farngea, trquea, buche y abdomen. La regin anal debe estar limpia y sin inflamaciones. El ojo debe estar limpio, y la mucosa bucal debe tener un color rosa y no despedir mal olor. Por el contrario, una paloma enferma come poco y de forma irregular, se mantiene encogida con las plumas erizadas, y si est criando abandona el nido. Al explorarla muestra un ojo apagado, mal olor al abrir el pico, abatimiento general y deposiciones de color verdoso. Reproduccin No existe dimorfismo sexual en las palomas. Para determinar el sexo de las trtolas y palomas se necesita mucha experiencia. En los pichones macho, los ojos suelen estar ms separados que en las hembras y la cabeza suele ser ms plana. Las palomas macho adultas presentan una constitucin ms robusta y una cabeza ms grande. Si existe alguna duda, se debe realizar una endoscopia que determine la anatoma sexual. Se reproducen durante todo el ao cuando estn en un recinto interior con condiciones adecuadas de luz. En libertad son estacionales. Una pareja puede realizar 5 nidadas al ao. Las hembras son mongamas y slo dejan de serlo si su pareja no est disponible. Los nidos son construidos preferentemente por las hembras. La produccin de huevos se inicia por medio de la copulacin. En un ciclo reproductor normal y completo, la hembra produce nidadas de 2 huevos, de unos 18g de peso, cada 34-40 das. La incubacin la realizan ambos sexos y dura entre 16-19 das. Los progenitores se implican en el cuidado y cra de los pichones, ya que ambos producen leche del buche que es el nico alimento que ingieren las cras durante los primeros 5-7 das de vida. Los pichones crecen con mucha rapidez, en 48 horas duplican su peso, y al mes casi se han desarrollado por completo. Los polluelos dependen de sus padres hasta 10 das despus del nacimiento. Comienzan abandonar el nido sobre los 20 das sin el plumaje completo, y son totalmente independientes hacia los 35-37 das, cuando poseen todo el plumaje. Es posible la incubacin de los huevos aunque la cra artificial sea problemtica. Los pichones deben mantenerse a una temperatura de unos 32C y alimentarlos con una dieta rica en protenas y grasas, suplementada con vitamina D2. Para controlar la poblacin de palomas se ha desarrollado un pienso anticonceptivo, efectivo durante 6 meses, compuesto por maz tratado con ornisteril o azacholesterol. Debe suministrarse durante 10 das, preferentemente hacia el final del verano y del invierno, a una dosis de 30g/da/paloma. Macroambiente Si se dispone de espacio suficiente y de suficientes nidos o lugares en los que puedan descansar, es mejor mantener a las palomas en bandadas, porque aunque predomine un sexo, nunca aparecer rivalidad. Sin embargo, las trtolas comunes se pelean continuamente cuando el nmero de machos es mayor que el de hembras. Las palomas que se utilizan como animales experimentales se pueden acomodar de forma individual en jaulas de 404040 cm, colocando barras metlicas en la parte frontal con dispositivos para comederos

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y bebederos. El suelo puede ser de barras metlicas de 3 mm de grosor separadas unos 2 cm para permitir que las heces las atraviesen y caigan en la arena o papel, aunque este tipo de alojamiento no sea el ms adecuado. Las palomas pueden sobrevivir a temperaturas extremadamente bajas, pero el alojamiento debera proporcionar, al menos, un refugio adecuado para la lluvia y el viento. Existe comida especialmente preparada para palomas y trtolas. Es preferible colocar los comederos y bebederos en la parte exterior de las jaulas con acceso desde dentro para evitar su contaminacin por las heces. Un adulto consume unos 30g/da entre semillas de cereales, legumbres, arena y agua. El agua se proporciona ad libitum, y los bebederos se deben limpiar a diario. Si se mantienen alojadas en bandadas, se alimentarn en bandadas. La jerarqua de la bandada establece un sistema tal que las aves que ocupan el centro obtienen mayor cantidad de comida por minuto y rea, mientras que las subordinadas en la periferia obtienen una cantidad inferior. Las palomas que se mantienen con un ciclo luz/oscuridad de 14:10 horas, consumen una mayor cantidad de alimento entre las 17 y las 20 horas. Esta caracterstica fisiolgica condiciona los valores sanguneos de las sustancias administradas a travs del alimento o el agua, y debe tenerse en cuenta al evaluar los datos experimentales recogidos. Manejo El manejo diario de las palomas y trtolas debe llevarse a cabo de manera pacfica, con movimientos pausados y sin brusquedad. En la oscuridad, se pueden atrapar con facilidad cuando se alumbran con un haz de luz, aunque est prctica no se desarrolle normalmente. En grandes grupos, se puede usar una caja alargada plegable de tela metlica, que se monta delante de la entrada del palomar, seleccionando nicamente los animales que interesan segn entran en el mismo. Las palomas se pueden sostener con una o con las dos manos. Cuando se sostienen con una mano, deben colocarse en la palma de la mano, agarrando sus patas entre los dedos medio y anular y dejando el pulgar libre para inmovilizar la cola y la punta de las alas. Gerbo Una de las variedades de mayor utilizacin en el laboratorio es la denominada "aguti". Cuenta con estirpes en las que son frecuentes los ataques epilpticos, determinados por la existencia de un gen que acta de factor predisponente, y otras resistentes a determinadas infecciones. Se han utilizado en: estudios vricos como rabia, rickettsiosis; estudios sobre cancergenos, por poseer pocos genes de histocompatibilidad; estudios gerontolgicos, por conseguir isquemia cerebral unilateral ligando la cartida unilateralmente; estudios nerviosos como modelo de epilepsia. Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas Su pelo es suave, de color marrn claro pero su vientre y los miembros anteriores grisceos. Las extremidades anteriores tienen cinco dedos y slo cuatro las posteriores, todos armados de afiladas uas de color negro. Es caracterstica su cola gruesa, de 9-12cm, recubierta de escamas que pueden desprenderse fcilmente. Las glndulas adrenales son relativamente grandes y es caracterstico y de inters tener en consideracin su alto nivel de colesterol en sangre. Presentan una circulacin cerebral diferente a otras especies de roedores, por recibir irrigacin cada hemisferio cerebral de manera independiente. Son animales de gran capacidad exploratoria, apenas producen olores, son poco agresivos, y estn dotados de un mecanismo especial que les facilita la retencin hdrica. Son especialmente sensibles a la hidatidosis, parsitos intestinales y fasciolosis.

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Ambiente Macro y microambiente similares a los descritos para los roedores en general. Reproduccin Es de tipo monogmico y similar al descrito en roedores. Los parmetros ms destacados se incluyen en el Cuadro 2-1. Manejo Semejante al descrito para la rata. Cerdos Probablemente del cerdo asitico (Sus vitatus) procedan los jabales europeos (Sus scrofa), del que derivan la mayora de las variedades y razas actuales. En la investigacin biomdica, se utilizan junto con el cerdo Gttingen miniatura de Alemania y las variedades Pittmoore, Minnesota y Yucatn de los EEUU, muchas razas comerciales como el cerdo Large White Landrace y el cerdo Yorkshire. En la actualidad desplazados por cerdos ms pequeos (minipigs y micropig). El nmero de cerdos que se utilizan en investigacin es menor del 1%. Se utiliza como modelo animal para el hombre ya que presenta muchas similitudes con los humanos en diferentes reas, en el sistema cardiovascular, en estudios anatmicos de las arterias coronarias, estudios sobre conduccin nerviosa, estudios de fisiologa hemodinmica y electrocardiologa, estudios de patologas asociadas al sistema como arterioesclerosis, infartos, anomalas congnitas. En el sistema gastrointestinal, en estudios de denticin, estudios de obesidad, estudios de lceras gastroduodenales. En dermatologa, en estudios de trnsito transcutneo de medicamentos, de cicatrizacin. En hematologa, en estudios de coagulacin, en estudios de morfologa y bioqumica de plaquetas, por presentar un complejo de histocompatibilidad semejante al humano. Tambin se utiliza en estudios de alcoholismo y en investigacin relacionada con la diabetes mellitus. Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas Los datos fisiolgicos relacionados con los cerdos se muestran en la tabla 2.3. Los minicerdos muestran, en algunos casos, valores diferentes para algunos de los parmetros. Los cerdos viven en grupos sociales. En libertad existe un marcado orden jerrquico: los machos adultos (verracos) viven solos o son el lder de un grupo. En experimentacin es mejor utilizar lechones de temprana edad, ya que los mayores pueden iniciar peleas. Los lechones jvenes son muy activos por naturaleza y les gusta jugar. Si estn aburridos mostrarn una conducta anormal mordindose la cola y las orejas o chupndose el ombligo, la vulva o el prepucio. En general, son animales muy sensibles al estrs y a las corrientes de aire. Reproduccin Las cerdas son hembras polistricas continuas. Los primeros signos de que la hembra se encuentra en celo se observan el segundo y tercer da de proestro y se caracterizan por intranquilidad, una disminucin en la ingesta de alimentos y un enrojecimiento e hinchazn de la vulva. Una hembra en estro reacciona a la presin en la espalda o al olor del macho mostrando la llamada reaccin de inmovilidad o reflejo postural para el apareamiento. Este comportamiento se utiliza para garantizar la inseminacin artificial.

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Ya sea por cubricin natural o por inseminacin, el mejor momento para la cubricin es unas 24-48 h al comienzo del celo. Presentan una placenta de tipo epitelio-corial. Los lechones nacen en intervalos de 10-30 minutos. Las placentas o bien salen durante el parto o 2-3 horas despus de nacer la ltima cra. La camada est formada por unas 5-7 cras. Los lechones pueden ser adoptados por otra madre con facilidad durante la primera semana de vida. Para evitar una baja tasa de crecimiento en los lechones, se les debe inyectar hierro (150-200 mg/lechn, i.m.) en la primera semana de vida. A la tercera semana, los lechones empezarn a ingerir pienso para lechones y a partir de la cuarta se pueden destetar.

Macroambiente Los cerdos jvenes se pueden colocar en grupos en cercados interiores con un suelo de rejilla o de madera de establo sin lecho o, mejor an, sobre un suelo de hormign con paja o serrn. La paja adems de comerla les da la oportunidad para jugar. La mejor forma de establecer nuevos grupos de lechones es juntar a los animales de forma simultnea en un cercado limpio justo antes de darles de comer o del perodo de oscuridad. Los olores corporales pueden ser camuflados mediante ozonificadores. Los cerdos adultos se mantienen entre 17-24C, con una humedad relativa del 40-60%. Los recin nacidos necesitan una temperatura ambiental mayor (30-32C), para mantener su temperatura corporal. Esta temperatura se puede alcanzar colocando una lmpara de calor en una esquina del cercado, y debe reducirse a 22C de manera gradual en un perodo de 3 semanas. La ventilacin debe ser la adecuada pero sin que existan corrientes de aire, dado que son propensos a padecer procesos respiratorios. Se aconseja menos de 0.3 m/seg y 0.1 m/seg, para los animales adultos y los recin nacidos, respectivamente. La comida puede administrarse en forma de pienso, harina o pasta, y debe cubrir sus necesidades en las diferentes edades. Segn las Directrices Europeas, deben existir suficientes comederos por jaula o cercado, y deben estar construidos de manera que se puedan colocar en las paredes o en la puerta, asegurando que no se desperdicie la comida. El agua se proporciona ad libitum por medio de bebederos y boquillas automticas. Manejo La forma de manejar a los cerdos depende de su edad. Los manipuladores tienen que tener fuerza para poder sujetar a los animales. Los caninos pueden resultar peligrosos. Los cerdos pueden emitir chillidos muy estridentes y a una alta frecuencia que pueden resultar desagradables. Lechones jvenes < 5 kg: pueden agarrarse por una pata trasera y transportarlos con ambos brazos. Lechones > 5 kg: se coloca un brazo bajo el tronco y barriga, con el otro brazo desplazar hacia atrs la cabeza del animal, fijndola por medio del codo contra el cuerpo del manipulador.

Los adultos, en particular los machos no familiares o las hembras con cras, tienen que ser tratados con precaucin porque pueden reaccionar de forma agresiva. En ese caso, es aconsejable el uso de tranquilizantes. En animales que vayan a ser anestesiados, resulta til la inyeccin a distancia mediante una jeringa acoplada a un tubo de plstico del preanestsico dentro del propio corral, para no estresar al animal, manipulndolo cuando est inducido.

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Como profilaxis los cerdos deben estar sometidos a un calendario de vacunaciones y tratamientos peridicos contra ecto y endoparsitos. Debe recordarse que estos tratamientos pueden modificar algunos resultados experimentales. Ovejas y cabras El nmero de ovejas (Ovis aries) y cabras (Capra hircus) utilizadas en investigacin biomdica es menor de un 0.2%. Existen ms de 60 razas diferentes. Estos animales se emplean en: estudios de hemodinamia, por su fcil caterizacin, estudios de circulacin cerebral utilizando la cabra como modelo; como donantes de sangre para medios de cultivo microbiolgicos; estudios renales en oveja, por ser modelo de glomerulonefritis primaria; estudios musculares, por presentar distrofia muscular hereditaria; e investigacin perinatal.

Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas Las ovejas son animales gregarios, que se mantienen mejor sueltos y agrupados que aislados, mientras que las cabras forman grupos ms reducidos o permanecen aisladas. En general, ambos son asustadizos, aunque consiguen acostumbrarse a las personas que las cuidan regularmente. Son rumiantes, es decir, adems de un estmago verdadero (abomaso) tienen 3 proventrculos: el rumen, el retculo y el omaso. En el rumen se produce la fermentacin microbiana del material vegetal. Este proceso comienza tan pronto como el animal cambia de una dieta de leche a una dieta slida, rica en fibra. Cada 24 horas, tienen lugar unos 15 perodos de rumia que varan en su duracin de 1 a 120 minutos. En total, pasan en torno a 8-10 horas del da rumiando. El proceso de la rumia lo realizan en decbito. Reproduccin Las ovejas y cabras son animales polistricos estacionales. Normalmente presentan 2 ciclos sexuales anuales. Pueden ser inseminados artificialmente. Dependiendo de la raza nacen 1 2 cras por parto. Son frecuentes las distocias y los partos de nalgas. Los recin nacidos pueden caminar sin ayuda a la hora de haber nacido y enseguida empiezan a buscar la mama para tomar el calostro. La adopcin de los corderos no siempre tiene buenos resultados, ya que las ovejas reconocen a sus cras por el olor. Para mejorar los resultados debe impregnarse a la cra con el olor de la nueva madre o de su prole. Es posible alimentarlos con bibern, pero debe tenerse en cuenta que la leche de oveja contiene 1.5 veces ms materia seca que la leche de vaca. A las 2.5-3 semanas, los corderos ya pueden ingerir alimentos slidos. Se puede inducir y sincronizar el estro por la administracin, con un intervalo de 10 das, de dos inyecciones de prostaglandina sinttica. Fuera de la temporada de reproduccin, da mejores resultados una primera inyeccin de progesterona seguida de una segunda inyeccin de GSYP (gonadotrofina del suero de yeguas preadas). Macroambiente Se pueden alojar tanto en recintos interiores como exteriores. La eleccin depende de las instalaciones disponibles y del fin para el que se vayan a utilizar. El alojamiento individual en cercados, no es aconsejable, si se mantienen en estas condiciones, al menos se debe posibilitar el contacto entre ellos. Segn las Directrices Europeas, estas jaulas deben medir como mnimo 1.4 m2 1.6 m2, con una longitud mnima de 1.8 m en uno de los lados, para ovejas y cabras respectivamente. Para alojamientos en grupo de 6 a 12 animales, se establecen 0.7 0.8 m2 adicionales, por oveja o cabra, respectivamente. Se debe
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tener en cuenta que los animales se puedan tumbar con facilidad. El suelo puede ser de rejilla o blando, si se cubre con serrn o paja debe cambiarse frecuentemente, para evitar la aparicin de enfermedades podales. Adems se debe vigilar la evolucin del grupo, prestando ms atencin a los animales con cornamenta por ser los ms peligrosos dentro del rebao. Ambas especies se pueden mantener a una temperatura entre 10 y 24C con una humedad relativa del 5510%. La capacidad de ventilacin de los locales debe prevenir la acumulacin de amonaco y del gas metano producido en el rumen, aconsejndose unos 3 m3/hora/kg de pv.
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Se deben alimentar con heno de buena calidad, suministrado en un comedero colocado en la pared o en la parte frontal, con pienso para ovejas como alimento complementario. Deben tener acceso ad libitum al agua por medio de bebederos automticos. Manejo Las ovejas y cabras utilizadas en experimentacin deben estar en contacto directo con personas desde muy jvenes. Son animales tozudos y necesitan largos perodos de adaptacin (al menos 3 semanas). Para inmovilizarlos: los corderos jvenes se sujetan por las patas traseras y se llevan en los brazos del manipulador, mientras que una oveja adulta debe sujetarse con firmeza, y colocarla en posicin sentada o tumbarla sobre su espalda. Para tumbarla, lo mejor es doblarle la cabeza hacia un lado y despus empujarla por el costado. En esta posicin slo se pueden mantener unos minutos, debido a la produccin de gas en el rumen. Los carneros o machos cabros suelen ser ms peligrosos y deben tratarse con cuidado. Con profilaxis es interesante la vacunacin de hembras gestantes con bacterinas para prevenir enfermedades de transmisin vertical como: Brucelosis, Pasteurelosis, o Micoplasmosis.Tambin es conveniente vacunar a las cras frente clostridium y administrarles vitaminas durante los primeros meses de vida. Todos deben ser tratados contra ecto- y endoparsitos. Las pezuas y los cuernos se deben revisar cortndolos siempre que sea preciso. De igual forma, las ovejas deben esquilarse una o ms veces al ao segn se alojen en recintos exteriores o interiores. Armadillo Pertenecen al orden Maldentados, familia Dasipdidos. En investigacin se emplean el Dasypus novemcinctus (armadillo de 9 bandas) y Dasypus mulita (armadillo de 7 bandas), en estudios relacionados con la lepra, tripanosomiasis, fiebre recurrente, tifus exantmico y sfilis. Tambin se recomiendan para llevar a cabo ensayos genticos, transplante de tejidos y estudios de fisiologa corporal por presentar una baja o nula respuesta inmunitaria. Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas Los armadillos comprenden varias especies todas ellas caracterizadas por la presencia de un caparazn rgido formado por un escudo anterior y otro posterior, separado por una serie ms o menos numerosa de bandas, gracias a las cuales la corteza adquiere flexibilidad y patas con garras que utilizan para excavar. Presentan una dentadura sin incisivos, con al menos 7 dientes en cada hemimandbula y son tanto insectvoros como vegetarianos. La cabeza es alargada, terminada en orejas grandes y ovaladas recubiertas de pequeas placas seas con disposicin irregular. En los bordes de las placas y por todo el cuerpo se encuentran una serie de pelos ralos que le confieren un aspecto lampio. Carecen de vagina, que se encuentra remplazada por un seno urogenital que se encuentra comunicado con el exterior

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mediante una larga abertura vestibular. Los testculos se encuentran alojados a la entrada del canal inguinal sin envoltura escrotal. Su gestacin dura unos 270 das y tienen de 4-6 cras por parto. En libertad viven en zonas ridas o semiridas, y construye madrigueras en terrenos que no sufren inundaciones, acumulando la tierra extrada a la entrada de la madriguera. Generalmente son de hbitos nocturnos, las horas de luz las dedican a reposar, enrollndose plegando la cabeza y la cola en la zona ventral de su caparazn. Las actitudes defensivas siempre son de huida frente al agresor, buscando una madriguera o cavando y desapareciendo bajo el suelo si el piso no es muy compacto. Cuando no pueden huir se flexionan protegiendo su parte ventral, la ms vulnerable, dando lugar a un enrollamiento que en los armadillos de 3 bandas transforma al animal en una esfera casi perfecta. Manejo Son fciles de manejar, aunque se debe tener precaucin con las garras de las patas delanteras y con la cola larga y anillada. Para inmovilizarlos: con una mano se debe sujetar por la cabeza y la parte anterior del caparazn y con la otra, abarcar la zona posterior. La acomodacin de las bandas permite la inmovilidad del animal. Tambin se puede sujetar con ambas manos por las bandas hacia la mitad del cuerpo. Murcilago Taxonoma

Orden
Quirptidos

Suborden
Megaquirpteros (zorros voladores del viejo mundo) Microquirpteros (el resto)

Los murcilagos pertenecientes al suborden megaquirpteros se caracterizan por ser animales grandes de alimentacin frugvora, poseedores de ojos grandes bien desarrollados, y un excelente olfato, cuyas especies carecen por completo de mecanismo de ecolocalizacin, a excepcin del gnero Ronsettus que produce ultrasonidos muy simples haciendo vibrar la lengua, mientras que todas las especies del suborden microquirpteros ecolocalizan. Utilizados en estudios biomdicos y etolgicos relacionados con termorregulacin, menstruacin, circulacin sangunea, coagulacin sangunea, hibernacin, y rabia paraltica en bovinos. Peculiaridades anatmicas y fisiolgicas Tras los roedores forman el segundo grupo de mamferos ms numeroso. Generalmente son de talla reducida (micromamferos) presentando una longitud mnima de 3 cm (gnero Coelops) y mxima de 40 cm (gnero Pteropus). Todos presentan un cuerpo recubierto de pelaje ms o menos denso, cuya coloracin vara del negro al rojizo pasando por tonos grisceos y pardos. La cabeza presenta unos pabellones auriculares ms o menos especializados segn el diferente desarrollo de la funcin ecolocalizacin. Este fenmeno se caracteriza por la emisin de ultrasonidos que se originan en la laringe y proyectan al exterior a travs de la boca, salvo la familia Rinolfidos que lo hacen a travs de la nariz. Esta seal se refleja en los cuerpos slidos, volviendo al animal en forma de eco, donde son recibidos por el odo posibilitando la orientacin mediante el sonido. Las especies cazadoras tienen un sistema de ecolocalizacin ms desarrollado. En sus vuelos emiten seales a intervalos relativamente largos (2 cada dcima de segundo) hasta detectar una presa, entonces disminuyen progresivamente la intensidad y el intervalo de la seal (emiten ms de 10 seales en una dcima de segundo) hasta el momento de la captura. La informacin del eco sobre la posicin de la pieza es suficiente para orientar y modificar la trayectoria del vuelo, hasta conseguir el cruce de ambas trayectorias.

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Son los nicos mamferos voladores. Las extremidades anteriores se han adaptado al vuelo. Los huesos se extienden en forma de varillas de paraguas, la estructura se completa con la membrana alar o patagio que se extiende entre las extremidades, cuello y cola, y le confiere la caracterstica silueta en V cuando se extiende. Los movimientos del patagio para conseguir el vuelo difieren del mecanismo utilizado por las aves, ya que la membrana alar no describe una lnea en zig-zag sino una trayectoria en forma de elipse, aunque al igual que en las aves exista una relacin entre el nmero de aleteos y el tamao del animal. Son generalmente nocturnos, y muy sensibles cualquier ruido o luz. Los hbitos troglfilos (apetencia por las cavernas) son muy destacados en el grupo, aunque existen especies con formas diferentes de guarecerse (cortezas, hojas de rboles). Las cuevas son los refugios ms idneos por favorecer un microclima particular, temperatura benigna y una alta concentracin de vapores amoniacales originados por la descomposicin de sus heces, prcticamente irrespirables para cualquier otro mamfero, estando a salvo de posibles predadores. Independientemente de su forma de guarecerse, todos forman comunidades ms o menos numerosas. En reposo, se mantienen colgados en posicin invertida sin esfuerzo muscular gracias al mecanismo automtico de incurvamiento de las uas, accionadas mediante un tendn especial. Presentan glndulas odorficas, de inters etolgico que secretan diferentes sustancias, y glndulas mamarias de localizacin pectoro-inguinal. La denticin es de tipo insectvoro I 2/3, C1/1, PM 2/2, M 3/3 alterada segn los distintos regmenes de vida, aunque siempre conserven fijo el nmero de caninos y molares. Algunas especies de murcilagos (murcilagos entomfagos) en ciertas pocas del ao, cuando la temperatura es inferior a 10C, pueden sufrir hibernacin. Este enfriamiento, donde desciende la temperatura corporal a unos 0C, no es un fallo del sistema termorregulador sino una adaptacin. La falta de insectos voladores les producira la muerte en pocas fras, aletargndose disminuyen su metabolismo, ahorran energa, y sobreviven hasta la estacin propicia. Reproduccin Presenta diferentes formas de reproduccin: Los rdenes megaquirpteros y muchos microquirpteros de las regiones tropicales, efectan su apareamiento en una sola poca del ao, siguiendo a continuacin la ovulacin y la fecundacin de un vulo. Los vampiros, se aparean durante todo el ao. El resto, presentan una fecundacin diferida. El celo tiene lugar a finales de otoo prximo al perodo de hibernacin. Tras el apareamiento las hembras no ovulan, sino que conservan los espermatozoides viables hasta la primavera cuando se produce la ovulacin, coincidiendo la fecundacin con la llegada de los primeros calores.

No existe una duracin fija del perodo de gestacin. Normalmente, nace una sola cra aunque existen especies que paren de 2 a 4. Las hembras normalmente paren en posicin invertida en su lugar de reposo. La cra debe sujetarse a la madre para no caer al vaco, trepando hacia las mamas de las que inmediatamente come. Las hembras de murcilago orejudo han mejorado el procedimiento, se suspenden cabeza arriba y recogen a la cra incurvando el uropatagio (parte de la membrana alar situada entre las extremidades posteriores incluyendo la cola), pudiendo remontar la cra el cuerpo de la madre hasta alcanzar las mamas sin dificultad. El comportamiento de las madres con sus cras sigue dos caminos diferentes. Unas especies llevan continuamente a sus cras agarradas al cuerpo. Otras, dejan a todos los pequeos de la comunidad juntos en un lugar resguardado (guarderas) en los perodos de vuelos en busca de alimento. Cuando regresan

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amamantan a sus cras y a las cercanas. Este procedimiento de lactancia comunitaria puede tener un significado de salvaguarda de la comunidad, si una madre muere otras se ocupan de su cra. Alimentacin Presentan diferentes hbitos alimenticios. La mayora de las especies que viven en zonas tropicales son insectvoras, otras frugvoras y polinvoras, siendo de gran importancia para la transmisin del polen y dispersin de las semillas. En cautiverio, las especies insectvoras se alimentan con dietas a base de gusanos de la harina, grillos, moscas de la fruta y para mejorar el nivel de calcio de la dieta se aconseja espolvorear los insectos con calcio y suplementos vitamnicos. A menudo es necesario alimentarlos a mano, aunque algunos pueden ser adiestrados para aceptar insectos de un plato. Las especies frugvoras pueden mantenerse con xito con dietas slidas o lquidas. Las primeras incluyen pltano, pera, meln, uvas, zanahoria cocida y batatas cocidas. La fruta puede mezclarse con leche en polvo, protena en polvo, aceite de maz, vitaminas y minerales. Tambin han dado buenos resultados las mezclas con dietas felinas o caninas enlatadas y huevo picado. Las dietas lquidas deben administrarse en bandejas de plstico poco profundas situadas cerca del alambre o ramas donde los murcilagos puedan posarse mientras comen. La dieta lquida debe retirarse a diario. Las especies predadoras se alimentan de murcilagos ms pequeos, reptiles, aves e incluso peces pequeos. Por ltimo los vampiros (familia desmodntidos) son hematgafos, pudiendo ingerir entre 15-20 ml de sangre, aunque en estas condiciones no pueden levantar el vuelo y deben permanecer en el suelo haciendo la digestin que en estos casos dura ms de 10 horas. Presentan un anticoagulante en su saliva que mantiene abierta la herida de sus vctimas cuando el vampiro ha dejado de chupar. El peligro para sus vctimas no radica en el volumen de sangre succionado, salvo si existen sangras reiteradas, sino en las infecciones que pueda trasmitir por medio de la saliva. Manejo Se puede utilizar una red, una vez dentro de ella, se le sujetan las alas para que no se daen. Se puede inmovilizar manteniendo las alas plegadas sobre el cuerpo rodeando ambos con las manos o mantenindolo en el aire con las alas totalmente desplegadas. Peces Taxonoma Unos 6-8% de los vertebrados utilizados en experimentacin son peces. Los estudios se desarrollan habitualmente en: Guppy (Poecilia reticulata), Pez Cebra (Brachydanio rerio), Truchas y miembros de la familia de las carpas. Se utilizan fundamentalmente en: estudios medioambientales encaminados a la recuperacin de espacios naturales deteriorados; estudios toxicolgicos como valoracin de acumulacin de residuos, control del agua, estudios de oftalmologa al ser modelo de regeneracin del nervio ptico. Generalidades Los peces son animales de simetra bilateral y fusiformes. Presentan apndices especializados para el desplazamiento, que son las aletas. Se pueden distinguir entre aletas pares (pectorales y ventrales) y aletas nicas (dorsal, caudal y anal). Los desplazamientos en el agua los realizan mediante ondulaciones de su cuerpo y movimiento de las aletas pectorales. Estn recubiertos de piel fuerte, revestida de mucus en la que hay implantadas escamas. Las escamas son de forma y tamao diverso y pueden ser seas (colgeno y calcio) o proteicas (queratina), permiten conocer la edad de los peces por los anillos de crecimiento anuales que quedan en su parte interna. El esqueleto puede ser seo o cartilaginoso. El esqueleto forma en

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la cabeza el crneo y se extiende desde la cabeza a la cola formando la columna vertebral, en sta se insertan las costillas, que son flotantes. Adems hay otros huesos que constituyen los radios de las aletas. El color de los peces est producido por las irisaciones de las escamas y los pigmentos contenidos en los cromatforos (clulas especializadas de la epidermis). La coloracin de la piel y escamas se debe a pigmentos carotenoides, melaninas, flavinas y purinas. En algunos peces, los msculos tambin poseen coloraciones especficas, como consecuencia de determinados animales que les sirven de alimento. Respiran a travs de las branquias. Las branquias estn constituidas por arcos cartilaginosos, situados en la faringe, de los que parten filamentos que llevan, a su vez, laminillas perpendiculares muy bien irrigadas. En general, los peces seos tienen cuatro arcos branquiales y los cartilaginosos hasta siete. Esta estructura confiere a las branquias una gran superficie de intercambio sangre-agua. Adems del intercambio gaseoso, participan en el intercambio de otras sustancias (macromolculas, sustancias orgnicas, iones) y juegan un papel importante en la regulacin osmtica. Las branquias de los peces se colapsan cuando se sacan del agua, al disminuir la superficie de intercambio, y aunque se conserven hmedas, el pez se asfixia en pocos minutos. El intercambio gaseoso con el agua ocurre en las branquias, aunque en muchos peces exista intercambio gaseoso a travs de la piel (respiracin cutnea). La mayora de los peces seos (excluidos los planos), tienen vejiga natatoria. La vejiga natatoria se llena de gases (45% O2; 4% CO2; 50% N2) que extrae de la sangre, sirve de elemento estabilizador y cumple funciones acsticas (percepcin y emisin de sonido).
B B B B B B

La circulacin sangunea es cerrada, es decir, no se extravasa en su recorrido por el organismo. La sangre es alrededor del 2% del peso del cuerpo. El corazn est constituido por dos cmaras situadas en serie. La sangre bombeada por el corazn pasa por las branquias y es distribuida despus por el cuerpo del pez. La sangre de los peces es coagulable, los eritrocitos son nucleados y poseen leucocitos. Los peces tienen defensas inmunolgicas que les permiten neutralizar las infecciones. No mantienen una temperatura definida, sino que se adaptan a la temperatura del medio. Un aumento brusco de la temperatura, favorece la produccin de burbujas al disminuir la solubilidad de los gases en la sangre (enfermedad de las burbujas). Son capaces de regular su presin osmtica manteniendo su concentracin inica frente a las variaciones ambientales. Este proceso se realiza por las branquias y los riones, donde se produce la filtracin de la sangre. La cantidad de orina excretada depende de la temperatura, salinidad, alimentacin y estado fisiolgico del pez. Los telesteos marinos regulan su presin osmtica manteniendo concentraciones de iones bajas en la sangre con respecto al medio, expulsando activamente sales a travs de las branquias; los de agua dulce, mediante la captacin activa de sales a travs de las branquias manteniendo su sangre a mayor concentracin que el medio, y los cartilaginosos acumulando urea. Existen peces herbvoros y carnvoros. En los herbvoros el intestino es largo y fino, mientras que en los carnvoros es corto y grueso. Poseen un sistema nervioso central con encfalo y mdula espinal (peces deuterstomos), de donde parten ramificaciones motoras que inervan los msculos estriados. El sentido del gusto est localizado en la boca, faringe, barbillas, e incluso por todo el cuerpo (deteccin de sustancias qumicas en el agua). No hay diferenciacin clara entre gusto y olfato. Reproduccin En general, existen sexos separados, aunque suele haber casos de hermafroditismo sucesivo (por ejemplo, las doradas son machos el primer ao y luego son hembras). La mayora de los peces son ovparos y algunos como el guppy son ovovivparos.

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Las gnadas estn alojadas en la cavidad abdominal. Expulsan sus productos mediante un conducto que desemboca detrs del ano (poro genital). La fecundacin es externa y ocurre en el agua. La gametognesis, est determinada principalmente por factores externos: luz y temperatura. Estos factores influyen sobre la pituitaria que libera hormonas (gonadotropinas), que se distribuyen por la sangre e influyen sobre distintos rganos, estimulando la secrecin de hormonas esteroides en las gnadas, que controlan la gametognesis. Durante este perodo, gran parte del alimento se transformar en reservas nutritivas en el vitelo de los huevos. La localizacin de la puesta vara segn las especies, en unas los huevos caen al fondo (huevos bentnicos) y en otras flotan en la superficie (huevos pelgicos). En todas, el desarrollo es directo, de los huevos sale una larva que se alimenta de vitelo (larva I). Cuando se ha desarrollado el aparato digestivo lo suficiente y la larva termina el vitelo, debe encontrar el alimento adecuado para no morir de inanicin. Este cambio se denomina punto crtico, puesto que es un momento delicado para la supervivencia de las larvas (que pasan a ser alevines). Las altas mortalidades naturales hacen que las puestas sean extremadamente numerosas para asegurar la supervivencia de las larvas. El crecimiento del pez es continuo aunque a distintas velocidades, dependiendo principalmente de la temperatura del agua y de la alimentacin, lo que origina anillos de crecimiento en las escamas. La hipfisis y el timo segregan hormonas de crecimiento. Algunas especies se reproducen fcilmente en cautividad, como los guppy. El tamao de las hembras determina el nmero de cras por parto, siendo el perodo medio entre partos de 31 das. Las hembras preadas se colocan en parideras para evitar que se coman a sus cras. La temperatura ptima para que stas se desarrollen es de 25-28C con un pH de 7. La determinacin del sexo puede ser difcil en algunas especies, mientras que otras presentan diferencias notables, los guppy machos, por ejemplo, son pequeos y presentan una aleta dorsal ms larga que la abdominal. Su aleta abdominal es tan larga como su rgano copulador. Las hembras, por el contrario, son de mayor tamao y exhiben una aleta dorsal ms redondeada. Macroambiente La pecera debe tener el tamao apropiado para el nmero, clase y tamao del pez. Los peces agresivos producen problemas sociales y tensin, que se traduce en enfermedades. La pecera debe llevar filtros, un aireador y un calentador (cuando se mantienen peces tropicales). Los filtros pueden ser: los de grava son los que se conservan con mayor facilidad, los ms eficientes y los menos susceptibles a fallas mecnicas, su falta puede conducir a problemas en la calidad del agua; los de caja externos contienen carbn activado, son adecuados para eliminar materiales y color del agua, ayudan en la aireacin, pero tienen muy poca actividad de aireacin biolgica, deben ser adicionales a un filtro de grava; finalmente, los de caja esquineros son econmicos pero insuficientes, a menos que se les limpie con regularidad no filtran en forma adecuada. El aireador garantiza la concentracin de oxgeno en la superficie al circular las burbujas de aire y el agua desde el fondo hacia la superficie. Sin aireador el acuario aguantar una pulgada de longitud corporal del pez por cada siete pulgadas cuadradas de agua. El calentador evita las fluctuaciones de temperatura que pueden causar tensin en los peces y predisponerlos a enfermedades, sobretodo cuando el acuario es pequeo. Adems en los acuarios se pueden introducir ornamentos y raspadores que permitan que los peces se escondan, reduciendo al mnimo la tensin de la cautividad y existencia en la jaula de vidrio. Estos pueden ser: maderas, piedras, plantas, grava mezclada con conchas de ostras o dolomitas para amortiguar el pH. Todos los elementos que se introduzcan deben desinfectarse confirmndose que no son portadores de patgenos.

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Si la calidad de agua no es ptima para los peces, stos son ms suceptibles a padecer enfermedades infecciosas. Las mediciones ms importantes de la calidad de agua son las concentraciones de amonaco, nitritos, nitratos y pH. La concentracin de oxgeno disuelto y la temperatura tambin son importantes, pero son problemas menos frecuentes. El amoniaco en el agua existe de dos formas, ionizado (NH4+) y no ionizado (NH3). El amonaco no ionizado es mucho ms importante que la concentracin total de amonaco porque resulta txico para los peces y afecta de forma primaria a las branquias (hiperplasia y fusin de branquias), provocando una respiracin dificultosa. Los peces que sufren una intoxicacin por amonaco presentan signos de hipoxia. Los nitritos tambin son muy txicos para todos los animales incluyendo los peces, hasta una ppm resulta mortal.
B PB P B B

El mecanismo de toxicidad es semejante al del monxido de carbono. El nitrito se fija a la hemoglobina y una vez ah, le impide transportar oxgeno. Por tanto, los peces mueren de asfixia. Los nitratos no son tan txicos para los peces, y se controlan fcilmente cambiando el 25% del agua del acuario cada tres o cuatro semanas. El pH por lo general no provoca una toxicidad directa, en un pH relativamente neutral pueden vivir la mayora de los peces. El pH est directamente afectado por el proceso de nitrificacin, donde se liberan 4 iones (H+) que irn acidificando el sistema, para evitarlo se debe tamponar el sistema incorporando en el acuario, conchas de ostra o dolomita dentro de la grava. Debe recordarse que el amonaco es menos txico a pH bajos, siendo interesante mantener los acuarios con un pH que flucte entre 6.5 y 7.
P P

En los acuarios recin montados es frecuente que aparezca, si no se tiene experiencia, el sndrome de tanque nuevo, donde los peces mueren entre las 2-6 semanas despus de que se instale el acuario, al no haberse establecido el proceso de nitrificacin. La nitrificacin es un proceso natural que ocurre de forma constante en el suelo y en el agua como parte principal del ciclo del nitrgeno. En este proceso el amonaco es convertido en nitratos en dos pasos. Las especies bacterianas de nitrosomas oxidan el amonaco (como amonio NH4+) a nitrito (NO2-), y las especies bacterianas nitrobacter oxidan los nitritos a nitratos (NO3-). El amonaco constituye el 80% de los productos de excrecin nitrogenados del pez. La nitrificacin es el mtodo ms eficaz para extraer el amonaco que es sumamente txico, del medio ambiente del pez. En un acuario establecido, las bacterias nitrificantes pueden oxidar el amonaco a travs de nitritos a nitratos de una forma tan efectiva que aunque la poblacin sea elevada, los niveles de amonaco y nitritos permanecern bajas. Sin embargo, las concentraciones de nitratos se elevarn por no existir plantas suficientes para utilizar el nitrato producido en el sistema. Este problema no es grave, porque el nitrato no es txico para los peces hasta concentraciones de 4.000 ppm.
B PB P B PB P B PB P

El sndrome de tanque nuevo se presenta cuando se colocan muchos peces en un estanque no acondicionado, donde no hay suficientes bacterias nitrificantes para oxidar el amonaco a nitrato tan rpido como lo excretan los peces, cuando esto sucede, las concentraciones de amonaco y nitritos se incrementan y pueden matar a los peces. La prevencin del sndrome del tanque nuevo puede lograrse introduciendo peces lentamente, aadiendo un puado de grava de un acuario acondicionado, o adicionando sales de amonaco y nitrito al nuevo acuario, para estimular el crecimiento de las bacterias nitrificantes antes de introducir a los peces. Manejo Se debe recordar que las branquias se pueden daar si el pez permanece fuera del agua. En general, no deben manipularse bruscamente. Se pueden utilizar: redes de contencin para trasvasarlos sin problemas de una pecera a otra, peceras comunicadas separadas por trampillas, o bolsas con agua y aire para el transporte. Para su inmovilizacin se aconseja el uso de anestsicos disueltos en el agua, como el MS 222, con el fin de producirles menos estrs y minimizar los traumatismos durante su manipulacin.

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Anfibios Fueron los primeros vertebrados que se adaptaron a la vida terrestre. Muchas de las especies pertenecientes al grupo estn englobadas y protegidas por el convenio CITES. En la actualidad, el Xenopus laevis y el Ambystoma mexicanum son los ms utilizados en estudios de desarrollo, embriognesis y organognesis; estudios de toxicologa y obtencin de nuevos frmacos; estudios electrofisiolgicos, por la fcil manipulacin de los oocitos. Taxonoma

Orden Urodelos

Familia Salamandras Tritones

Caractersticas de los adultos


Animales menudos, con cola larga y uno o dos pares de patas. Muchos hacen vida acutica y conservan las branquias. No tienen odo externo No tienen branquias, cuatro extremidades y carecen de cola. Tienen odo externo con tmpano y odo medio con un huesecillo y columnela Carecen de miembros y parecen lombrices

Anuros

2700 especies

Sapos Ranas

podos
Generalidades

Cecilias

La mayora de los anfibios adultos poseen verdaderos pulmones y respiran el aire directamente pero a causa de su piel hmeda y de que es en el agua donde tiene lugar la mayor parte del desarrollo de las cras, deben permanecer en ella o en sus proximidades. La piel de los anfibios es fina, permeable, hmeda y viscosa que impide hasta cierto punto la prdida de agua por evaporacin. Se haya provista de un abundante nmero de glndulas microscpicas que contribuyen a mantenerla hmeda gracias al lquido que segregan. Cada 2-3 semanas renuevan la piel mudando las capas superiores y a menudo se la comen. Las ranas y los sapos adultos presentan un cinturn plvico desarrollado que recibe el impulso de las patas traseras al saltar. Los huesos de la cola se han fusionado en una slida barra amortiguadora dentro del cinturn plvico. La columna vertebral tiene de seis a diez vrtebras libres. La regin torcica est encerrada dentro de un cinturn torcico y carecen de costillas. Las especies acuticas han perdido los prpados y tienen los ojos pequeos, mientras que en la mayora de las especies terrestres stos son grandes y no solamente poseen prpados sino rebordes transparentes inferiores. Reproduccin Para la reproduccin se utilizan animales de entre 2-5 aos. La hembra produce feromonas que estimulan al macho para que deposite los espermatforos. La fecundacin es externa, los machos abrazan a las hembras por la parte dorsal y los huevos slo se fecundan en el momento de la puesta. En la estacin reproductora los machos emiten una llamada de apareamiento, que sirve para atraer a las hembras al rea de reproduccin. Adems de la llamada de apareamiento tienen otra llamada de liberacin que emiten cuando son abrazados por otro macho. Las llamadas se amplifican mediante resonadores sacos vocales que son estructuras blandas en forma de bolsa que salen de la cavidad bucal y se hinchan de aire cuando tiene lugar la llamada.

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Los huevos se depositan en el agua y dependiendo de la temperatura de sta, variar el tiempo en que aparezcan las larvas acuticas (renacuajos), que oscila entre un da y tres semanas. Los huevos generalmente estn incluidos dentro de una cpsula gelatinosa. El tamao del huevo y de las cpsulas, la forma de la cpsula, el color de los huevos y forma de la puesta (en grupos pequeos o grandes, en cordones, separadamente o adheridos a plantas o piedras) son rasgos importantes para el reconocimiento de la especie. De los huevos nacen los renacuajos voraces que crecen con gran rapidez, y respiran por medio de branquias hasta la metamorfosis, tras sta adquieren pulmones, su sistema circulatorio pasa de ser sencillo y completo como el de los peces a doble e incompleto como el de los reptiles y adquieren el aspecto de sus progenitores. En esta poca se desarrolla igualmente las mandbulas y el anfibio comienza a comer insectos y otros animales minsculos. Como resultado de la diferente alimentacin, el aparato digestivo disminuye enormemente de tamao. El proceso de madurez en algunas larvas requiere pocos meses y en otras se prolonga durante varios aos. Las larvas de tritn y salamandra tienen el cuerpo largo con branquias plumosas y desarrollan sus patas anteriores antes que las posteriores. En contraste, los renacuajos de ranas y sapos tienen el cuerpo redondeado, las branquias no son visibles externamente excepto en fases tempranas del desarrollo y sus patas posteriores se desarrollan antes que las anteriores. Presentan una boca bastante especializada con un pico crneo bordeado por varias hileras de dientes labiales. Como las branquias son internas deben ser aireadas por una corriente de agua que entra por la boca y sale por el espirculo. Los Xenopus sufren el proceso de metamorfosis a los 4 meses, aunque no terminan su desarrollo completo hasta el ao. El macho es de menor tamao y presenta en la parte interior de las patas delanteras unas callosidades de color negruzco cuando es maduro sexualmente, ms evidentes en perodos reproductivos, que le sirven para asirse a la hembra durante la cpula. Pueden vivir hasta 25 aos. Se puede inducir la puesta de huevos de manera experimental, inyectando gonadotropina a ambos sexos. Existen diferentes protocolos, uno de los ms sencillos, consiste en la inyeccin de 300 UI en el saco linftico dorsal durante dos das consecutivos al macho, y 600 UI el segundo da a la hembra. Tras la inyeccin se dejan los animales en oscuridad, observando los huevos a la maana siguiente. La temperatura del agua se debe mantener entre 18-22C, para que stos se desarrollen correctamente. Debe construirse una plataforma perforada para proteger a los oocitos fecundados de sus padres. La dieta es importante en los procesos reproductivos, hembras deficientemente alimentadas generan oocitos con problemas de viabilidad. Macroambiente Se debe saber de qu tipo de animal se trata para facilitarle un ambiente similar al de su hbitat natural. En estas especies se debe controlar: Temperatura: son animales poiquilotermos, es decir, el calor producido por la actividad metablica (digestin de los alimentos) no es suficiente para producir homeotermia como en el caso de los mamferos. En anfibios la temperatura ptima del agua es aproximadamente entre 1822C. Fotoperiodicidad: se basa en los requerimientos de actividad diarios y anuales. Para mantener un funcionamiento normal de la corteza suprarrenal es necesario un ciclo de doce horas de luz y doce horas de oscuridad. Agua: Las especies acuticas necesitan agua en cantidad suficiente para permitir la inmersin completa. La alimentacin, la reproduccin y la interaccin social se realizan en el agua. La calidad del agua debe mantenerse por medio de filtracin y aireacin para impedir el acumulo de desechos orgnicos txicos y el desarrollo excesivo de microorganismos patgenos. Los anfibios son muy sensibles al cloro, los metales pesados y al pH cido.

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El tamao de la pecera debe ser el adecuado y a prueba de escapes. Para disminuir el estrs y la falta de seguridad en cautiverio, se colocan en el recinto artefactos o escondites, los materiales utilizados no sern traumticos ni txicos y se podrn autoclavar. Las piedras de carbonato clcico adems de tamponar el pH del agua a niveles ms bsicos ayudarn a desprenderse de los restos de piel tras las mudas. Hay que renovar el agua con frecuencia, evitando el cloro y sustancias qumicas nocivas. Igualmente se debe comprobar que el pH sea el adecuado para cada especie. En anfibios se recomienda incrementar la salinidad hasta un 0.6% como acondicionador. Los utensilios utilizados para retirar los excrementos, restos de comida y manipular a los animales se desinfectan entre pecera y pecera con compuestos de amonio cuaternario para evitar posibles transmisiones de enfermedades. Los animales deben alimentarse dos veces por semana con pellet especiales para anfibios o una mezcla de hgado y corazn ad libitum. La falta de apetito es sntoma de malestar ambiental o infeccin. Las larvas deben alimentarse diariamente a partir del cuarto o quinto da despus del nacimiento, cuando se han acabado sus reservas del saco vitelino, mediante pellet desmenuzados, al comer en funcin del tamao de la partcula, y es necesaria la eliminacin posterior de los restos de comida para evitar patologas. Manejo Para manipularlos: si se agarra algn anfibio ha de hacerse con la mano hmeda o mejor con guantes humedecidos previamente para evitar destruir la capa de mucus protector de la piel. La mayora de los anfibios son sensibles al calor excesivo, por lo que no debe sujetrseles mucho tiempo. Si deben manejarse durante un perodo prolongado, se recomienda mantenerlos en un ambiente hmedo o envueltos en un pao hmedo, lejos de focos de luz o de calor, para no daar la capa de mucus protector. Las ranas y sapos son ms fciles de sujetar durante un corto perodo, manteniendo el pulgar y el ndice alrededor de su cintura y apretando ligeramente las piernas con los restantes dedos y la palma de la mano (Figura 2-7). Personas con poca experiencia pueden utilizar redes de peces. Para inmovilizarlos: agua con hielo, al disminuir la temperatura se disminuye el metabolismo y con ello los movimientos, o anestsicos disueltos en el agua, como el MS 222. Debe tenerse en cuenta que al disminuir la temperatura nicamente se reducen los movimientos al animal, para realizar intervenciones quirrgicas debe administrarse anestesia y analgesia, para evitar el sufrimiento. Si el agua contiene demasiado hielo puede provocar el cambio de la piel.

Figura 2.7. Vista dorsal y ventral de Xenopus leavis. Forma de inmovilizacin

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Reptiles Taxonoma La mayora de las especies mencionadas estn englobadas y protegidas por el convenio CITES. Se utilizan en investigacin en el rea de zoologa, inmunologa y endocrinologa.

Orden
Rhynchocephalia Crocodilia

Especie
Tuatara Caimanes Cocodrilos Gavilanes Tortugas terrestres Tortugas acuticas Lagartos Ofidios

Chelonia Squamata Generalidades

Son animales poiquilotermos. Estructuralmente tienen un tabique ventricular incompleto y, sin embargo, el corazn presenta funcionalmente cuatro cavidades. Adems del sistema porta-heptico presentan un sistema porta-renal. Pueden conocerse fcilmente por su integumento crneo o escamoso. Salvo algunas excepciones la piel carece de glndulas. A diferencia de los anfibios no sufren metamorfosis. Reproduccin En las especies de zonas templadas, las variaciones de fotoperiodicidad sirven de seal ambiental para sincronizar los ciclos reproductivos con las condiciones ambientales ptimas. En las especies tropicales, son menos importantes, mientras que otros factores (humedad, alimento, densidad de poblacin) adquieren mayor importancia. Los cambios estacionales de la intensidad de la luz han demostrado ser beneficiosos para la reproduccin en cautiverio. Se recomienda una luz de espectro completo (luz normal + rayos ultravioleta) porque mejora la conducta alimentaria y la reproduccin. La fertilizacin es interna y el apareamiento tiene lugar a menudo con muy pocos preliminares, el embrin se desarrolla dentro de un huevo amnitico, ya sea externo (ovparo) o interno (ovovivparo/ vivparo). Los huevos de las tortugas terrestres y de agua dulce, y de las salamanquesas tienen la cscara dura y son depositados a menudo en lugares secos, mientras que los huevos de las especies restantes, tienen cscaras blandas y flexibles y son depositadas en arena, tierra o vegetacin muerta siempre que est hmeda. Los jvenes que eclosionan son versiones diminutas de sus padres completamente independientes y que no reciben cuidado por parte de sus progenitores. Algunas especies de lagartos presentan dimorfismo sexual, puede forzarse la salida del hemipene mediante presin caudal a la cloaca y palparlo rodando el pulgar en sentido ceflico. En otras especies puede determinarse por sonda. El extremo de la sonda debe ser liso y redondeado para evitar lesiones. Previa lubrificacin la sonda se inserta en la cloaca y se dirige en direccin caudal un poco hacia un lado de la lnea media. En los ofidios, la sonda progresar en la hembra entre 2-4 escamas y entre 8-12 escamas si es macho. En el resto de las especies es ms complicado y hay que recurrir a ultrasonografa o a laparoscopa. En cocodrilos es necesario recurrir a la inmovilizacin del animal para realizar la palpacin digital profunda de la cloaca. El macho tiene un pene palpable.

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Las tortugas macho tienen la cola ms larga que las . Adems, en las especies semiacuticas, el es ms pequeo, tiene garras ms largas y a veces presentan un espoln en las patas traseras. En las tortugas terrestres, se observan diferencias en la forma de la concha inferior, siendo cncava en el y plana en la . Algunos machos tambin poseen un par de escamas guturales de mayor tamao. Macroambiente Temperatura: la jaula debe tener un gradiente de temperatura adecuado para la especie: animales que habitan en la zona tropical entre 27-38C; en la zona templada entre 20-35C y las tortugas acuticas a temperaturas ms bajas. En algunas especies temperaturas superiores a cinco grados de los lmites superiores establecidos pueden ser letales. Es necesario evitar las temperaturas extremas y sus cambios bruscos. A temperaturas inferiores los reptiles se vuelven inactivos, lo que constituye un fenmeno estacional normal en las especies de la zona templada. Fotoperodo: lo habitual es mantener un ciclo de doce horas de luz y doce horas de oscuridad. Pueden utilizarse lmparas incandescentes para suministrar iluminacin y calefaccin a las jaulas, pero debe evitarse el contacto directo para evitar quemaduras trmicas. Si se utilizan lmparas trmicas deben estar protegidas y colocadas a unos 45 cm del animal. Agua y humedad: las especies semiacuticas necesitan agua en cantidad suficiente para permitir la inmersin completa. En muchas especies la alimentacin, la reproduccin y la interaccin social se realizan en el agua. La calidad del agua debe mantenerse por medio de filtracin y aireacin, los restos deben retirarse para impedir el desarrollo de microorganismos patgenos. En las especies de puerto debemos tener en cuenta la salinidad del agua, y en algunas especies de tortugas acuticas un pH similar al de su ambiente natural. La falta de humedad (< 35%) causa sequedad excesiva, especialmente en las especies no adaptadas ambientes ridos, y la excesiva (> 70%) facilita la aparicin de hongos y bacterias que predisponen infecciones cutneas. Las exigencias de agua estn relacionadas con su biodisponibilidad en su ambiente natural. Las especies acuticas o semiacuticas tienden a ser ureotlicas (excretoras de urea) y las de ambientes ms secos ureocotlicas (excretoras de cido rico) que tiende a conservar ms agua. En muchas especies se producen prdidas de agua a travs de la piel (en el orden cocodrilia sta puede llegar hasta el 20%), mientras que en otras especies, se ha demostrado su absorcin transcutnea. El diseo de los recintos se hace en funcin de la especie alojada, las especies arbreas deben contar con una orientacin ms vertical mientras que las terrestres necesitan una ms horizontal. Las especies terrestres y excavadoras necesitan escondites (cajas, troncos de rboles, rocas, tubos) dentro o debajo de los cuales puedan refugiarse. Para disminuir el nerviosismo y la falta de seguridad en cautiverio, se deben colocar en el recinto artefactos y escondites. Para algunas especies un reborde negro de unos 20 cm en el fondo de la jaula aade seguridad. El albergue comunitario de especies diurnas muy sociables, exige colocar varias estaciones para tomar el sol, alimentarse, descansar fuera de los individuos dominantes de la misma especie y de todo observador humano. Debe evitarse el hacinamiento para reducir el sufrimiento por competencia exagerada, siendo conveniente la separacin durante la alimentacin en las especies agresivas para evitar lesiones. Todos los materiales que se utilicen en el diseo del recinto deben ser desechables, baratos, no txicos ni abrasivos y no deben favorecer el desarrollo microbiano sino facilitar la limpieza de la jaula. El papel, viruta, arena, musgo, csped artificial se han utilizado como cama con xito. La viruta no debe llevar sustancias voltiles que puedan ocasionar irritacin en las mucosas. No se aconseja alimentarlos sobre viruta porque puede acumularse sobre las fauces produciendo estomatitis o impactacin intestinal si son

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ingeridas accidentalmente. La arena, tierra vegetal y hojas secas son adecuadas para muchas especies de lagartos y tortugas. Los cocodrilos y las tortugas acuticas pueden mantenerse con una combinacin de arena, gravilla y cemento si disponen de arena para tomar el sol. Las jaulas deben mantenerse libres de excrementos y los alimentos no ingeridos deben retirarse diariamente. Los utensilios utilizados para retirar los excrementos deben desinfectarse entre jaula y jaula con compuestos de amonio cuaternario para disminuir la posibilidad de transmisin de enfermedades. Se renovar el agua siempre que sea necesario. Se evitar el cloro y sustancias qumicas nocivas. Se comprobar que el pH sea el adecuado para cada especie. Tanto los ambientes acuticos como los terrestres deben desarmarse y desinfectarse totalmente al menos cada 6 meses. La alimentacin de estos animales requiere un nivel de macronutrientes, protenas, hidratos de carbono y grasas en la dieta cuantitativamente similar a las necesidades de los mamferos. Existen dietas comerciales especficas pero no gozan de gran aceptacin, ya que la mayora de los reptiles cogen directamente el alimento con las mandbulas, siendo mejor toleradas cuando se administran animales jvenes. Es esencial mantener los animales en un ambiente apropiado. Para que la alimentacin y la digestin sean las adecuadas deben controlarse cuidadosamente la temperatura y la humedad ambiente. El fotoperodo, el substrato y los componentes de las jaulas tambin pueden afectar el comportamiento alimenticio. La pulverizacin de agua en el ambiente proporciona mayores posibilidades de ingestin. En el caso de los reptiles, en las especies a las que se les ofrecen presas vertebradas, es aconsejable matar o aturdir a los animales de alimento justo antes de ofrecerlos, para reducir la posibilidad de lesin por mordeduras y golpes contra las paredes del recinto. En el caso de tortugas acuticas y de algunos lagartos herbvoros el color de los alimentos puede tener importancia prefiriendo las dietas de color rojo o amarillo. A pesar de tener en cuenta los puntos anteriormente descritos, los animales pueden presentar el sndrome de mala adaptacin, que se utiliza al describir la incapacidad del reptil para adaptarse a su ambiente en cautiverio. Se caracteriza por: letargia, anorexia, caquexia y muerte. La modificacin del entorno puede mejorar al animal. Se recomienda la pulverizacin del recinto con agua antes de la comida, para estimular el apetito, el aumento de la temperatura ambiental, el aumento de la luz de espectro completo y/o la inyeccin de vitamina B-12. En individuos que rehusan los alimentos durante largos perodos en ambientes ptimos, conviene reducirles la temperatura a 15-18C y elevarla lentamente hasta el nivel deseado, simulando un ayuno invernal de 3 semanas, tras el que suelen alimentarse con normalidad. Esta prctica no debe utilizarse con animales caqucticos porque mueren, recomendndose la alimentacin forzada. Manejo La mayora de los reptiles pueden ser sujetados manualmente para su examen. El animal debe sujetarse cerca de la cintura escapular, rodeando al cuerpo con suavidad. El procedimiento se facilita cubriendo los ojos con una tela (Figura 2-8).

Figura 2-8. Inmovilizacin y manejo de un reptil y una iguana adulta.

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Los lagartos ms grandes deben apresarse sujetndolos por detrs de la cabeza y alrededor de la cintura pelviana. Si se les sujeta por detrs de la cintura plvica la cola puede desprendrseles. Algunas especies ms pequeas de lagartos son demasiado delicadas para ser examinadas visualmente, siendo recomendable la induccin qumica para su reconocimiento. Los ofidios pequeos no venenosos pueden sujetarse apresando el cuello inmediatamente detrs de la cabeza y sosteniendo el cuerpo con la otra mano. Sin embargo, la inmovilizacin adecuada de los ofidios constrictores exige la participacin de ms de una persona. La cabeza se envuelve en un trapo hmedo para impedir la visin y el animal se apresa por detrs de la cabeza mientras otra persona sujeta el resto del cuerpo. Hay que evitar la tensin excesiva del cuello. Muchas serpientes pueden trasladarse por medio de un gancho colocado cerca del centro del cuerpo, no siendo necesario el contacto fsico. Las serpientes venenosas deben ser tratadas con cuidado, por personal con experiencia y nunca por una persona sola. Puede recurrirse a tubos transparentes plexigls con un extremo cerrado. Se coloca al animal frente a un tubo de calibre adecuado y sujeto por unas pinzas. Cuando la serpiente tiene medio cuerpo dentro se apresa el extremo abierto y el animal simultneamente. As podemos efectuar el examen, administrar medicamentos y procedimientos terapeticos menores. Los Quelonios se inmovilizan apresndolos por el caparazn. Varias especies muerden y han de ser tratadas con cautela. Los miembros de mayor tamao pertenecientes al orden Crocodilia exigen inmovilizacin qumica, mientras que los ms pequeos pueden inmovilizarse usando una red provista de mango. La red se coloca alrededor de la cabeza y el mango se trae hacia atrs sobre la pelvis del animal sujetndolas juntas, para evitar que el animal se vuelva. Los ojos se cubren con una tela y las fauces se mantienen cerradas con esparadrapo. Debe advertirse que tanto la cola como las fauces pueden ser peligrosas. Invertebrados. Artrpodos Taxonoma y generalidades Los artrpodos constituyen el tipo de organizacin ms numeroso de todos los animales. Estn formados por anillos o metmeros, provistos de una cutcula quitinosa articulada exterior. En cada segmento puede encontrarse un par de apndices formados por artejos articulados. Su primer par de apndices puede ser prensil (quelceros) o sensitivo (antenas). Para crecer necesitan mudar peridicamente su exoesqueleto. Muchas veces las mudas van acompaadas de metamorfosis. El esqueleto condiciona su anatoma interna. El celoma forma una cavidad nica, los msculos se unen a la quitina, casi no existe tejido conjuntivo y necesitan rganos respiratorios. Los insectos tienen un cuerpo dividido en tres regiones, cabeza, trax y abdomen; el segundo dividido en pro, meso y metatrax. En la cabeza tienen un par de antenas, ojos simples y compuestos y tres pares de apndices bucales. En cada segmento del trax, tiene un par de patas formadas por cadera, trocnter, fmur, tibia y tarso, este ltimo con 1-5 artejos y en general con un par de uas en el extremo. La mayora de los insectos presentan dos pares de alas en meso y metatrax. El abdomen, primitivamente formado por 10-11 segmentos, no suele tener apndices, aunque puede quedar alguno modificado para la reproduccin. La respiracin es traqueal abrindose pares de estigmas en cada segmento del abdomen, y generalmente uno en el trax. Interiormente tienen una organizacin muy simple. Su sistema nervioso es de tipo anlido, siendo los invertebrados que realizan las acciones ms complejas.

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Orden

Quelicerados

Grupos importantes Escorpiones Araas Opiliones caros

ms

Caractersticas Son terrestres, respiran por pulmones o por trqueas. Seis pares de apndices: quelceros, pedipalpos y cuatro pares de patas Su cuerpo se compone de cefalotrax y abdomen. Casi todos son carnvoros y cazadores.

Antenados

Crustceos: filpodos coppodos malacostrceos Miripodos: quilpodos diplpodos Insectos 1.000.000 de especies

Son acuticos. Poseen dos pares de antenas y respiran por branquias. Tienen cabeza trax y abdomen. En la cabeza se encuentra la boca provista de un par de mandbulas y dos pares de maxilas Son terrestres, respiran por trqueas y tienen un solo par de antenas. Su cuerpo tiene cabeza y una serie de segmentos iguales, con un par de patas cada uno. Se clasifican en numerosos rdenes principalmente atendiendo a la forma de su boca, la morfologa de sus alas y el tipo de metamorfosis

Se reproducen por medio de huevos y los sexos estn separados. Segn la especie, los huevos pueden generar insectos que no sufren metamorfosis (ametbolos), insectos con metamorfosis sencillas (heterometbolos) o insectos con metamorfosis complicadas (holometbolos). Su biologa es variadsima, desarrollando organizaciones muy complejas, siendo notables las especies que viven en sociedad. La cra de insectos en cautividad est relacionada con el aprovechamiento industrial de alguna de sus fases evolutivas, como la cra del gusano de seda Bombix mooris, para aprovechamiento textil; el mantenimiento de cultivos masivos de predadores, utilizados en luchas biolgicas; el cultivo masivo de algunas especies como el Tenebrio molitor, utilizadas como alimentos apropiados para peces y ranas; el cultivo de algunas especies como Calosoma, Coccinlidos o Coccidfagos, por ser material de ensayo en investigaciones bio-ecolgicas; la seleccin de especies como Desmontes y Silotroga, para el desarrollo de estudios farmacolgicos; seleccin de especies para estudios genticos, moleculares, bioqumicos, fisiolgicos, y docentes como la especie Drosophila melanogaster. Precisamente Drosophila permite combinar diferentes enfoques experimentales en un contexto multidisciplinario. La gran ventaja de trabajar con este organismo, al igual que con otros modelos invertebrados (langosta, saltamontes, abeja), radica en su relativa simplicidad. Los cultivos de Drosophila dentro del laboratorio, precisan unos cuidados mnimos. Las moscas pueden mantenerse en tubos de vidrio rellenados parcialmente de comida, una papilla autoclavada compuesta por: agar, azcar, harina y levadura y cubiertos por algodn graso envuelto en gasa a modo de tapn. Los tubos se mantienen en incubadores a una temperatura de 25C y con una humedad relativa de 60%. En general, las formas evolutivas (huevos, larvas, pupas y crislidas) apenas necesitan aire para evolucionar. La ventilacin en cambio s es necesaria en adultos para evitar malos olores y proliferacin de hongos y bacterias. La temperatura de los incubadores y el grado de humedad varan segn la especie a crecer. Habitualmente, la falta de humedad o una dieta inadecuada dificulta el desarrollo de las fases de metamorfosis.

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IDENTIFICACION ANIMAL Y MARCAJE Cualquiera que sea el procedimiento utilizado, la identificacin animal debe ser: cmoda de realizar, fcil de interpretar, difcil de falsificar, persistente en el tiempo y bien tolerada por el animal. Adems de identificar correctamente al animal, se deben llevar registros adicionales donde se recoja la historia completa del mismo. Hay distintos tipos de identificacin: Marcas: signos, nmeros o muescas intrnsecas al animal. Se incluyen: Resea: caractersticas fenotpicas de los animales. Se utiliza en grandes animales. Marcaje con sustancias colorantes temporales: soluciones cidas (azul tripano, verde metilo, violeta de metilo), rotuladores, tinta indeleble. Todas estas sustancias son solubles en alcohol y precipitan con el tiempo, siendo conveniente utilizarlas en fresco. Este tipo de marcaje se aconseja en animales albinos, de piel clara, que presenten superficies lisas, exentas de pelo, fcilmente accesibles. Se usan en experimentos de corta duracin para evitar su repeticin (rotuladores 1-2 semanas, soluciones cidas 6-7 semanas por el crecimiento del pelo), por ser indoloros para el animal. Marcaje con sustancias colorantes permanentes: las impresiones se realizan con tinta, en regiones anatmicas de cmodo acceso, desprovistas de pelo, limpias y desengrasadas, de color claro, como las orejas en conejo y roedores, los costillares o la cola en bvidos y vidos, el pecho en los primates. Las tintas ms utilizadas son la tinta india (negro), cinabrio (rojo), xido crmico (verde), utilizando 2 tipos de tcnicas: las escarificaciones en la piel con agujas: muy rudimentario, superadas por el tatuaje. el tatuaje propiamente dicho (composiciones numricas fijas puestos con pinzas o escritas con la tatuadora).

Los animales deben ser inmovilizados previamente, aconsejndose la tranquilizacin, por ser un proceso ligeramente doloroso. Marcas o hierros: se produce una quemadura sobre la piel del animal, ya sea: por fuego: aplicacin de hierros candentes, puede utilizarse en grandes animales (bvidos, vidos, caballos) o en anfibios. por fro: utilizando alambres sumergidos en nitrgeno lquido o nieve carbnica, en anfibios. por sustancias qumicas, como el nitrato de plata: tambin se utiliza en anfibios.

Con el tiempo puede ser necesario remarcar. Amputaciones, incisiones o taladros: los cortes presentan distinta forma, dimensin y posicin. Todas estas marcas estn codificadas para obtener mltiples combinaciones numricas (el corte de orejas permite marcar hasta 99 animales, el de dedos hasta 1000). Debe tenerse en cuenta la vascularizacin de la zona para evitar las hemorragias. Si se elige este tipo de marcaje es aconsejable realizarlo cuanto antes, para reducir los efectos traumticos sobre el animal. Las peleas pueden distorsionar el marcaje y conducir a errores. Es bastante utilizado por ser econmico, aunque su uso tiende a reducirse. Autotransplantes de piel: no suelen estar muy extendidos, se pueden observar en anfibios, donde se injerta un botn de piel oscura en la porcin ms clara del abdomen y viceversa en el dorso.

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Apliques: todos los signos extrnsecos al animal. Se incluyen: Grapas, marchamos, autocretales: muy usados como medio de identificacin zootcnica en rebaos. Sus formas y materiales son variados (plstico, aluminio, acero), llevan un valor numrico fijo. Reciben diferentes nombres segn el lugar donde se coloquen: pendientes en el pabelln auricular; brazaletes en los radios distales de las extremidades; tarsianos en tarsos de aves y conejos; digitales rodeando uno de los dedos en anfibios o patagiales en el patagio del ala, uno de los apndices en las aves (Figua 2-9). Pueden presentar varios inconvenientes, el de engancharse y perderse o el infringir dao al animal si se coloca muy prieto o a una edad muy temprana al impedirle un crecimiento correcto de la zona.

Figura 2.9. Marca alar (patagial) para identificacin en condiciones de libertad, en Cralo (Clamator glandarius). Foto Jess M. Ziga.

Cinturones, cadenas y bandas: los materiales de elaboracin son diversos: cuero, metal, plstico y pueden llevar o no un nmero fijo. Se utilizan fundamentalmente en grandes animales: primates, vidos, perros, gatos. No producen dao al animal, aunque en ocasiones se pierden. Microidentificadores: se estn imponiendo como sistema de eleccin en todas las especies tanto domsticas como salvajes. Los chips se implantan subcutneamente y no provocan reaccin inflamatoria en el punto de inoculacin. La zona de eleccin en la mayora de las especies es la zona dorsal o el cuello. En bvidos, vidos y cerdos se pueden implantar en la zona de la grupa. Existen dos tipos de microidentificadores, los pasivos con un cdigo fijo, o los activos sin cdigo fijo. Ambos pueden acumular informacin adicional si se combinan con un ordenador. En la CEE es obligatorio este tipo de marcaje, en perros desde 1995 y en caballos desde 1999. RESUMEN En muchas ocasiones el investigador novel cuando inicia o participa en una investigacin desconoce las caractersticas biolgicas de la especie utilizada como modelo experimental. En este sentido, se aporta una visin general de la biologa de los principales animales utilizados en experimentacin, con especial mencin a sus peculiaridades fisiolgicas, anatmicas y reproductoras, sin olvidar sus requerimientos y necesidades etolgicas. En una primera parte se tratan estos aspectos para las especies incluidas en el Anexo .I. de la Directiva de la UE. En la segunda parte del captulo se tratan estos aspectos para grupos o especies menos usuales pero tambin importantes en la experimentacin animal. En todos los casos se tratan aspectos de sus necesidades ambientales, mantenimiento, manejo y cuidado en condiciones de cautividad. La bibliografa de consulta permite profundizar en aspectos especficos de especies concretas en el caso de ser utilizado en investigaciones especficas. Igualmente las tablas aportadas suponen una detallada recopilacin de parmetros y variables propias de cada especie a menudo indispensables para comparar con los datos registrados durante e proceso experimental.

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