Avance de resultados

Efecto de AMPs sobre L. salmonis

GUSTAVO NÚÑEZ A.
31 – 03 -2017
Objetivos de la pasantía
• Evaluar la respuesta de copepoditos de L. salmonis a nivel conductual
(comportamiento del nado), después de ser expuestos a péptidos antimicrobiano
de salmones.

• Evaluar si los AMPs de salmón pueden activar el sistema quimiosensorial de L.

salmonis (análisis neurofisiológico).

• Evaluar el efecto de AMPs sobre copepoditos de L. salmonis a nivel molecular

(análisis transcriptómicos).

• Evaluar el efecto de RNAi de genes quimiosensoriales de piojo de mar a nivel

conductual y electrofisiológico
Análisis conductual
(comportamiento del nado)
Análisis conductual
(comportamiento del nado)
Diseño experimental:
◦ 6 tratamientos: control negativo, Cath1, Cath2, Hep, WFX, 6-methyl-5-hepten-2-one
◦ Grupos experimentales de 150 – 200 copepoditos
◦ Estímulo: luz solar – ciclo de 13/47 (luz/oscuridad)
◦ Concentración de AMPs: 700 ppb
◦ 20 minutos de registro (video 60 fps – 2 campos)

Resultados esperados mediante análisis de imágenes de siluetas:

◦ Proporción de animales que responden al estímulo
◦ Distancia de nado después del estímulo
◦ Velocidad de nado después del estímulo
◦ Trayectoria de nado (movimiento líneal, no líneal, caótico, estocástico, etc)*
Análisis conductual - punto más estable de la respuesta
Análisis conductual - respuesta a los 16 min
100

Copepodids responding to stimuli (%) 90

80

70

60

50
Control Cath1 Cath2 Hep WFX 6m-5h-2one
Tareas pendientes (Abril – Mayo)
 Análisis de distancia y velocidad a 16 minutos después del estímulo
 Control de péptidos (péptido comercial – Sigma)
 Análisis electrofisiológico (David Fields 13-25 abril)
 Ensayos RNAi