Effectiveness of PARP inhibition in

enhancing the radiosensitivity of 3D

spheroids of head and neck squamous cell
carcinoma
Ricardo Oyarzún Silva
MIR Oncología Radioterápica HUPM, Cádiz

Effectiveness of PARP Inhibition in Enhancing the Radiosensitivity of 3D Spheroids of Head

and Neck Squamous Cell Carcinoma, Zhou et al.
 Factores de Riesgo y Pronóstico en
HNSCC
• Factores de Riesgo Principales:
• Consumo de alcohol y tabaquismo
• Infección por el Virus del Papiloma Humano (VPH), tipos 16/18
• Aproximadamente el 60% de los casos de carcinoma de células escamosas de orofaringe están asociados a
VPH (2–4)
• Impacto del HPV en el Pronóstico Clínico:
• Pacientes con OPSCC HPV Positivo:
• Mejor pronóstico clínico
• Mayores tasas de supervivencia:
• Responden mejor a la radioterapia y quimioterapia (5–8)
• Avances de Investigación:
• Estudios in vitro muestran una radiosensibilidad incrementada en líneas celulares HNSCC
positivas para el VPH cuando se cultivan como monocapas, en comparación con modelos
celulares negativos para el VPH (9-12)
Effectiveness of PARP Inhibition in Enhancing the Radiosensitivity of 3D Spheroids of Head
and Neck Squamous Cell Carcinoma, Zhou et al.
 Mejor Pronóstico en HNSCC VPH Positivo y Radiosensibilidad

• Estudios in Vitro y Radiosensibilidad:

• Las líneas celulares HNSCC VPH positivas cultivadas como monocapas muestran una radiosensibilidad mejorada
frente a modelos celulares VPH negativos (9-12).
• Daño del ADN y Respuesta al Tratamiento:
• La radioterapia (radiación ionizante; IR) es efectiva gracias a la inducción de daño en el ADN.
• Se sugiere que la mayor radiosensibilidad en HNSCC HPV positivo se debe a defectos en la respuesta al daño del
ADN celular (DDR) (13).
• Retraso en la Reparación del ADN:
• Se ha observado un retraso en la reparación de roturas de doble cadena del DNA (DSB) en células HNSCC VPH
positivas, tanto directamente como a través de marcadores sustitutos como gH2AX y 53BP1, tras la irradiación con
fotones.
• Influencia de la Infección por VPH en la Reparación de DSB:
• Aunque la influencia precisa de la infección por HPV en la capacidad de reparación de DSB no está clara, se ha
demostrado que hay una expresión y actividad reducidas de enzimas involucradas en la recombinación homóloga
(HR) y la unión de extremos no homólogos (NHEJ), que son las dos principales vías de reparación de DSB (9, 10).
• El Papel del DDR:
• El DDR juega un papel crucial en determinar la radiosensibilidad de las líneas celulares HNSCC in vitro.
Effectiveness of PARP Inhibition in Enhancing the Radiosensitivity of 3D Spheroids of Head
and Neck Squamous Cell Carcinoma, Zhou et al.
Methods and materials
• Cell lines and culture conditions:
• (A, B) Larynx
• (C) Salivary Gland
• (D, E) Hypopharynx (Detroit 562 and FaDu)
• Spheroid growth assay
• PARPi: Olaparib , Talazoparib
• Poly (ADP-ribose) polymerases (PARPs)
• DDR play immediate roles in DNA strand
break binding and aid in the processes of base
excision repair (BER) and DSB repair by HR
and NHEJ
• Photons, Protons
Effectiveness of PARP Inhibition in Enhancing the Radiosensitivity of 3D Spheroids of Head
and Neck Squamous Cell Carcinoma, Zhou et al.
 Olaparib - Fotones
A, B : HPV-negative
C, D : HPV- positive
 Olaparib - Fotones

Olaparib
A, B: laringe
C: glándula
salival
D,E:
hipofaringe
 Olaparib - Fotones

Olaparib
A, B: laringe
C: glándula
salival
D,E:
hipofaringe
Talazoparib - Fotones
Talazoparib - Fotones
Olaparib - Protones
Olaparib - Protones
Talazoparib - Protones
Talazoparib - Protones
**Rad51: Reparación
Homologa
Discussion
1.Diferencia en Respuesta al Tratamiento Basada en el Estado de HPV:
Se destaca que los pacientes con carcinoma escamoso de orofaringe (OPSCC) positivo para el virus del
papiloma humano (HPV) muestran una mayor respuesta a la radioterapia, lo que mejora el pronóstico y
la tasa de supervivencia. Esto se ha observado también en líneas celulares cultivadas, donde la mayor
radiosensibilidad en OPSCC positivo para HPV se debe a defectos en la reparación de roturas de doble
cadena (DSB) en el ADN.
2.Utilización de Inhibidores de PARP en OPSCC Positivo y Negativo para HPV:
Se sugiere que los inhibidores de PARP pueden ser utilizados para aumentar la radiosensibilidad en
células OPSCC positivas para HPV debido a la persistencia de DSB. Sin embargo, los datos también
indican que esto puede ser un enfoque efectivo en células OPSCC negativas para HPV, que son
competentes en la reparación de DSB.
3.Efectividad de los Inhibidores de PARP en Diferentes Modelos de HNSCC:
Se evaluó el impacto de los inhibidores de PARP olaparib y talazoparib en la sensibilización de un panel
extendido de modelos HNSCC negativos para HPV y resistentes a la radiación, tanto a fotones como a
terapia de haz de protones.
1.Resultados Clave y Observaciones:
1. Se encontró que, en general, el crecimiento de dos modelos separados de esferoides 3D de OPSCC
HPV+ se inhibía más con la irradiación de rayos X que dos modelos respectivos HPV-. Esto demuestra
su mayor radiosensibilidad.
2. Se observó que talazoparib, en combinación con protones, llevó a una inhibición más profunda y
sinérgica del crecimiento de los esferoides HNSCC negativos para HPV que lo logrado con olaparib,
especialmente en los derivados del hipofaringe (FaDu y Detroit 562).
2.Implicaciones y Direcciones Futuras:
1. Se sugiere que el perfil de daño del DNA y la eficiencia de la respuesta celular al daño del DNA (DDR)
mediada por las vías de reparación de DSB, NHEJ y HR, así como la dependencia de una de estas vías,
pueden ser responsables de la diferencia en la efectividad de talazoparib frente a olaparib en
combinación con protones.
2. Se están realizando experimentos adicionales para examinar el impacto de la inhibición de PARP, tanto
sola como en la radiosensibilización de organoides HNSCC derivados de pacientes, con el fin de
proporcionar más evidencia preclínica de que esta es una estrategia que podría avanzar para el beneficio
futuro de los pacientes con HNSCC
Results
• HPV-positive are more radiosensitive than HPV-negative OPSCC
spheroids to x-ray radiation
• Olaparib enhances the radiosensitivity of selective HPV-negative
HNSCC spheroids
• Talazoparib additively enhances the radiosensitivity of HPV-negative
HNSCC spheroids
• Olaparib and talazoparib enhance the radiosensitivity of HPV-negative
HNSCC spheroids to proton beam therapy
• Enhanced sensitivity of HPV-negative HNSCC spheroids to PARP
inhibition appears to correlate with HR deficiency