Hibridación in

situ.
 ¿Qué es la
hibridación in
situ?
Es aquella técnica que permite detectar la
presencia de una secuencia de
nucleótidos en una célula. Esto se consigue
mediante otra secuencia de nucleótidos
denominada sonda que es complementaria a
la secuencia que queremos identificar
¿En que se basa esta tecnica?

 Se basan en la utilización de una sonda, un pequeño

fragmento de ADN complementario a la región del
genoma que se desea estudiar, que ha de ser detectable
de manera visual mediante el marcaje de ésta. 
 Un poco de
historia…
La técnica se desarrolló en 1969 por dos grupos
de investigación, Gall y Pardue e
independientemente por Jonh et al, en el mismo
año. Gall y colaboradores describieron una
técnica en la cual se formaban híbridos
moleculares entre RNA y DNA, por medio de los
ovocitos de Xenopus laevis.
 Pasos generales.
1. Pretratamiento
2. Tratamiento
3. Hibridación
4. Astringencia
5. Visualización
Marcaje
indirecto.
Las sondas empleadas están marcadas con una molécula
que por si sola no puede detectarse de manera visual
requiriéndose de una reacción secundaria para la
detección de ésta, existen de 2 tipos:
• Hibridación in situ cromogénica (CISH)
• Hibridación in situ con plata (SISH)
Marcaje indirecto

Las sondas empleadas están directamente marcadas

con un fluorocromo,  la técnica que emplea este tipo de
marcaje es la hibridación in situ fluorescente (FISH).
Bases de la metodología FISH.
 Tipos de sondas

• Sondas centromericas
• Sondas de locus especifico
• Sondas de pintado cromosómico
.
¿Dónde se puede
usar esta técnica?
1. Detección de infecciones virales como
VPH, EBV, VIH, bacterianas y fúngicas.
2. Detectar el RNAm de péptidos, cadenas
ligeras de inmuglobinas, albuminas y
transcritos.
3. Detección de aneuploidías.
4. Traslocación de genes.
 Bibliografia
Megías, M., Molist, P., & Pombal, M. Á. (n.d.). Técnicas Hitológicas. 5. Tinción. Hibridación in situ. Atlas de Histología
Vegetal y Animal. Uvigo.es. Retrieved May 29, 2023, from https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/5-hibridacion.php

¿Qué es el FISH? (n.d.). Sysmex.es. Retrieved May 29, 2023, from

https://www.sysmex.es/academia/centro-de-conocimiento/sysmex-blog/oncologia/que-es-el-fish.html

Uv, S. [@SFPIEUV]. (2017, November 29). 3.4. Hibridación in situ. Youtube.

https://www.youtube.com/watch?v=h5fFMxHIaOc

De Medicina, F., Maura, D., & Cayetano, R. (n.d.). UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO. 9.195.
Retrieved May 30, 2023, from http://132.248.9.195/ptd2013/agosto/0699765/0699765.pdf

Erre, C. E. C. E. [@SAS000KE]. (2021, June 12). Hibridación in situ. Técnica, tipos y aplicaciones. Youtube.
https://www.youtube.com/watch?v=-6ye1r61Z0w