República Bolivariana de Venezuela

Ministerio del Poder Popular para la Educación

Universidad Nacional Experimental Simón Rodríguez Sección
PNF Medicina Veterinaria 12

Bioquímica
SANGUÍNEA
Facilitador: Alexander Merlo

Participante: Diannellys Reyes

 ¿Qué es un análisis
bioquímico?
Es una prueba con muestra de sangre que se utiliza para
la medir la cantidad de diferentes sustancias químicas en
el organismo.
• Glucosa • Ácido Úrico
• Triglicéridos • Bilirrubina
• Colesterol • Transaminasas
• Creatinina • Electrolitos
• Urea • Minerales
 Determinación de GLUCOSA
La glucosa es la cantidad de azúcar que se encuentra en la sangre y es una fuente de energía para el organismo.
Esta generalmente es de 70-100mg por 100ml en monogástricos y de 30-60mg por 100ml en rumiantes adultos.

La determinación de glucosa se efectúa mediante el Método de Trinder.

 Materiales y equipos

- Centrífuga
- Suero o plasma (obtenido de la muestra recolectada y centrifugada a 3500rpm durante 5 min).
- Micropipetas de 10μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 490-550nm.
- Contenedor de residuos
- Reactivo de glucosa con su respectivo estándar de glucosa.
 Determinación de GLUCOSA
 Procedimiento
Se marcan 3 tubos de ensayo
01 - 1ero con una “B” (Blanco)
- 2do con “st” (estándar)
- 3ero con una “M” (muestra)
02 Se procede a realizar el montaje.
Se le agregan 10μL de muestra en
el tubo marcado con “M”.
Se le agregan 10μL de estándar en
el tubo marcado con “st”.
Se le agregan 1000μL de reactivo
de glucosa en cada tubo.
Se agitan los tubos
03 Se espera 10 minutos
temperatura ambiente.
a
04 Se hacen las lecturas
Primero con el blanco, lo pasamos
a la cubeta de lectura y después se
coloca en el espectrofotómetro y
se le presiona en el botón “Blank”.
Luego en la misma copilla se hace
la lectura del estándar, para
posteriormente hacer la lectura de
muestra
 Determinación de GLUCOSA
05 Se calcula: Glu

Valores normales de
glucosa
Especies Bovino Equino Caprino Ovino Porcino Felino Canino

Glucosa 40-60 60-110 30-60 30-57 65-95 64-84 70-100

(mg/100ml
)
Determinación de TRIGLICERIDOS
Es el tipo más común de grasa que se encuentra en el cuerpo, cuando
se encuentra alto (hipertrigliceridemia) dificulta el paso de la sangre por las
arterias, ya que los triglicéridos engrosas y endurecen las paredes de las
arterias. Los valores son de 25-120mg/dl.

La determinación de triglicéridos se efectúa mediante el Método de Trinder.

 Materiales y equipos

- Centrífuga
- Suero o plasma
- Micropipetas de 10μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 490-550nm.
- Contenedor de residuos
- Reactivo de triglicéridos con su respectivo estándar de triglicéridos.
Determinación de TRIGLICERIDOS
 Procedimiento
Se marcan 3 tubos de ensayo
01 - 1ero con una “B” (Blanco)
- 2do con “st” (estándar)
- 3ero con una “M” (muestra)
02 Se procede a realizar el montaje.
Se le agregan 10μL de muestra en
el tubo marcado con “M”.
Se le agregan 10μL de estándar en
el tubo marcado con “st”.
Se le agregan 1000μL de reactivo
de trigliceridos en cada tubo.
Se agitan los tubos
03 Se espera 10 minutos
temperatura ambiente.
a
04 Se hacen las lecturas
Primero con el blanco, lo pasamos
a la cubeta de lectura y después se
coloca en el espectrofotómetro y
se le presiona en el botón “Blank”.
Luego en la misma copilla se hace
la lectura del estándar, para
posteriormente hacer la lectura de
muestra
 Determinación de TRIGLICERIDOS

05 Se calcula: TG

A Muestra: 0.222 Resultado:

A Estándar: 0.183
C Estándar: 200 mg/dl 242,62 mg/dl
 Determinación de COLESTEROL
El colesterol es un líquido ceroso parecido a la grasa que se encuentra en la membrana plasmática de las células
eucariotas. Y se divide en HDL y LDL, donde la primera es el colesterol bueno que elimina la LDL, ya que el
LDL es el colesterol malo que obstruye las vías sanguíneas cuando se supera los niveles normales se conoce
como hipercolesterolemia.

Especies C Total C HDL C LDL

(mg/100ml) (mg/100ml) (mg/100ml)

Bovino 50-230 72-90 18-26

Equino 51-236 58-65 25-34

Caprino 80-130 --- ---

Ovino 50-100 --- ---

Porcino --- 38-46 30-35

Canino 125-250 109-125 31-42

Felino 75-151 >100 <60

 Determinación de COLESTEROL TOTAL
 Materiales y equipos

- Centrífuga
- Suero o plasma (obtenido de la muestra recolectada y centrifugada a 3500rpm durante 5 min).
- Micropipetas de 10μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 540nm.
- Contenedor de residuos
- Reactivo de colesterol con su respectivo estándar de colesterol.

 Procedimiento
Se marcan 3 tubos de ensayo
01 - 1ero con una “B” (Blanco)
- 2do con “st” (estándar)
- 3ero con una “M” (muestra)
 Determinación de COLESTEROL TOTAL
 Procedimiento:
02
Se procede a realizar el montaje.
Se le agregan 10μL de muestra en
el tubo marcado con “M”.
Se le agregan 10μL de estándar en
el tubo marcado con “st”.
Se le agregan 1000μL de reactivo
de colesterol en cada tubo.
03 Se agitan los tubos
Se espera 10 minutos a 37°C
Colesterol
04 Se hacen las lecturas
Primero con el blanco, lo pasamos
a la cubeta de lectura y después se
coloca en el espectrofotómetro y
se le presiona en el botón “Blank”.
Luego en la misma copilla se hace
la lectura del estándar, para
posteriormente hacer la lectura de
muestra
05 Se calcula
 Determinación de COLESTEROL HDL
1- Se mezclan 0.2ml (200μL) de
suero problema y 0.5ml (500μL) de
reactivo precipitante de colesterol
HDL.
2- Agitar bien y dejar durante 10
minutos a temperatura ambiente.
3- Centrifugar durante 15 minutos a
un mínimo de 4000rpm.
4-Recoger el sobrenadantes.
5- Pipetar en tubos de ensayo
-Blanco: 100μL de agua destilada
con 1ml de reactivo.
-Patrón: 100μL de patrón de
colesterol HDL.
-Muestra: 100μL de sobrenadante
de muestra y 1.0 de reactivo.
6- Agitar bien e incubar los tubos
durante 30 minutos a temperatura
ambiente o durante 10 minutos a
10°C.
7- Leer la absorbancia del patrón y
muestra frente al blanco a 500nm.
 Determinación de COLESTEROL LDL
1- Se mezclan 0.2ml (200μL) de
suero problema y 0.2ml (200μL) de
reactivo precipitante de colesterol
LDL.
2- Agitar bien y dejar durante 15
minutos a temperatura ambiente.
3- Centrifugar durante 15 minutos a
un mínimo de 4000rpm.
4-Recoger el sobrenadantes.
5- Pipetar en tubos de ensayo
-Blanco: 20μL de agua destilada
con 1ml de reactivo.
-Patrón: 20μL de patrón de
colesterol lDL y 1ml de reactivo.
-Muestra: 20μL de sobrenadante de
muestra y 1ml de reactivo.
6- Agitar bien e incubar los tubos
durante 30 minutos a temperatura
ambiente o durante 10 minutos a
10°C.
7- Leer la absorbancia del patrón y
muestra frente al blanco a 500nm
 Determinación de COLESTEROL
HLD y LDL
HDL HDL

Cálculos
𝐴𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
LDL 𝑥𝐶𝑃𝑎𝑡𝑟ó𝑛𝑥𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛𝑑𝑒𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎=CSobrenadante
𝐴𝐸𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
C LDL
 Determinación de CREATININA
Es una sustancia muy difunsible y distribuida en el agua corporal de manera uniforme, que es parte de los
desechos de los músculos. Sirven para reconocer una alteración en la función renal. En caninos los valores son
de 0,6-1,4mg/dl y en felinos 0.5-1.8 mg/dl.

La determinación de creatinina se efectúa mediante el Método de Jaffé.

 Materiales y equipos
- Centrífuga
- Suero o plasma (obtenido de la muestra recolectada y centrifugada a 3500rpm durante 5 min).
- Micropipetas de 100μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 490-550nm.
- Contenedor de residuos
- Reactivo de creatinina con su respectivo estándar.
 Determinación de CREATININA
 Procedimiento
Se marcan 3 tubos de ensayo
01 - 1ero con una “B” (Blanco)
- 2do con “st” (estándar)
- 3ero con una “M” (muestra)
02 Se procede a realizar el montaje.
Se le agregan 100μL de muestra
en el tubo marcado con “M”.
Se le agregan 100μL de estándar
en el tubo marcado con “st”.
Se le agregan 1000μL de reactivo
de creatinina en cada tubo.
Se agitan los tubos
03 Se espera 10 minutos
temperatura ambiente.
a
Se hacen las lecturas
04 Primero con el blanco, lo pasamos
a la cubeta de lectura y después se
coloca en el espectrofotómetro
con el estándar y se le presiona en
el botón “Blank”.
Luego se hace la lectura de la
muestra.
La primera lectura de la muestra y
el estándar se hace a los 30
segundos y la segunda a los 90
segundos.
 Determinación de CREATININA

05 Se calcula A2-A1

A2 st – A1 st A2 Muestra – A1 Muestra

∆ 𝐴 𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝑥 𝐶 𝑃𝑎𝑡𝑟 ó𝑛=Creatinina mg/dl
∆ 𝐴 𝐸𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
 Determinación de UREA
Es el residuo resultante de la descomposición de proteínas, principalmente es producido por el hígado, y sirve
para saber si los riñones están funcionando bien. En caninos los valores son de 20-50 mg/dl, en felinos 30-60
mg/dl, en bovinos son de 20-40 y en equinos30-50mg/dl.

La determinación de urea se efectúa mediante el Método Ureasa-GLDH. Cinético UV.

 Materiales y equipos
- Centrífuga
- Suero o plasma (obtenido de la muestra recolectada y centrifugada a 3500rpm durante 5 min).
- Micropipetas de 25μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 490-550nm.
- Contenedor de residuos
- Reactivo de urea con su respectivo estándar.
 Determinación de UREA
 Procedimiento
Se marcan 3 tubos de ensayo
01 - 1ero con una “B” (Blanco)
- 2do con “st” (estándar)
- 3ero con una “M” (muestra)
02
Se procede a realizar el montaje.
Se le agregan 25 μL de muestra en
el tubo marcado con “M”.
Se le agregan 25μL de estándar en
el tubo marcado con “st”.
Se le agregan 1000μL de reactivo
1 y 1000μL de reactivo 2 de urea
en cada tubo.
Se agitan los tubos
03 Se incuban durante 15 minutos
a 37°C.
04 Se hacen las lecturas
Primero con el blanco, lo pasamos
a la cubeta de lectura y después se
coloca en el espectrofotómetro y
se le presiona en el botón “Blank”.
Luego se hace la lectura del
estándar y posteriormente la
muestra la muestra.
05(𝐴)𝑀
Se calcula
𝑥𝐶 𝑃𝑎𝑡𝑟 ó𝑛=Urea
(𝐴)𝑆𝑡
 Determinación del ÁCIDO ÚRICO
El ácido úrico es el producto final del catabolismo de las purinas y pirimidinas en mamíferos y es el resultado
del catabolismo de las proteínas en aves y reptiles. Este producto sirve para verificar que se está dando de
manera correcta la función hepática (excepto en el hombre, pequeños primates y en los dálmatas), ya que el
ácido úrico se convierte en alantoína por el hígado en la mayoría de las especies.

La determinación del ácido úrico se efectúa mediante la Prueba enzimática Trinder.

 Materiales y equipos
- Centrífuga
- Suero o plasma (obtenido de la muestra recolectada y centrifugada a 3500rpm durante 5 min).
- Micropipetas de 25μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 520nm.
- Contenedor de residuos
- 2 Reactivos de ácido úrico con su respectivo estándar.
Determinación del ÁCIDO ÚRICO
 Procedimiento
Se marcan 3 tubos de ensayo Se agitan los tubos
01 - 1ero con una “B” (Blanco)
- 2do con “st” (estándar) 03 Se incuban durante 15 minutos
a 37°C en baño maria.
- 3ero con una “M” (muestra)

02 04 Se hacen las lecturas

Primero con el blanco, lo pasamos
a la cubeta de lectura y después se
Se procede a realizar el montaje.
coloca en el espectrofotómetro y
Se le agregan 25 μL de muestra en
se le presiona en el botón “Blank”.
el tubo marcado con “M”.
Luego se hace la lectura del
Se le agregan 25μL de estándar en
estándar y posteriormente la
el tubo marcado con “st”.
muestra la muestra.
Se le agregan 1000μL de reactivo
total de ácido úrico en cada tubo.
Se calcula
05
Acid. U
Determinación del ÁCIDO ÚRICO
Especies Ácido Úrico
(mg/100ml)

Equino 1.0

Bovino 0.05 - 2.08

Caprino 0.3 – 1.0

Ovino 0.05 – 1.93

Porcino 0.05 – 1.95

Canino 0 – 1.0

Felino 1 – 1.9
 Determinación de la BILIRRUBINA
La bilirrubina es un pigmento biliar de color amarillo-anaranjado resultado de la degradación de hemoglobina
por la acción del bazo, se conjunta en los hepatocitos (que son células encontradas en el hígado), para después
ser almacenada en la vesícula biliar para formar parte de la bilis. La cantidad aumentada de la bilirrubina en la
sangre es conocida como una afección denominada Ictericia.

La determinación de bilirrubina se efectúa mediante el Método Colorimétrico.

 Materiales y equipos
- Centrífuga
- Suero o plasma (obtenido de la muestra recolectada y centrifugada a 3500rpm durante 5 min).
- Micropipetas de 50μL, 100μL, 500μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- 4 Tubos de ensayo (2 para bilirrubina total y 2 para bilirrubina directa).
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 520nm.
- Contenedor de residuos
- Reactivos de bilirrubina.
- Acelerador.
Determinación de la BILIRRUBINA
 Procedimiento
Se utilizaran 2 tubos en cada tipo de Se ajusta el equipo
01 bilirrubina.
Uno será blanco de muestra y el otro
04 Hasta que aparezca blanco de
muestra
será muestra

Fórmulas:
02 Se ajusta el espectrofotómetro con
agua destilada 05 - Con Calibrador

( 𝐴 ) 𝑀− ( 𝐴) 𝐵𝑀
03 Se procede a realizar el
𝑥𝐶𝐶𝑎𝑙𝑖𝑏𝑟𝑎𝑑𝑜𝑟=B
( 𝐴 ) 𝐶𝑎𝑙− ( 𝐴 ) 𝐵𝐶
montaje.
Se coloca 1.5ml de determinado
reactivo en cada tubo. - Con Factor
Solamente al tubo de muestra se
le coloca acelerador (50μL). (A) M – (A) BM
Y se 100μL de suero en cada
tubo
 Determinación de TRANSAMINASAS
Son también conocidas como aminotransferasas, son enzimas que se encuentran en el hígado, los músculos, los
riñones y corazón que se encargan de transferir amino desde un metabolito a otro. Cuando las transaminasas se
encuentran altas puede ser indicio de patologías hepáticas y cuando están bajas puede ser por falta de vitaminas o una
infección urinaria. Normalmente se encuentra entre 7-56 u/litro de sangre.

 Materiales y equipos
- Centrífuga
- Suero o plasma (obtenido de la muestra recolectada y centrifugada a 3500rpm durante 5 min).
- Micropipetas de 50μL, 100μL, 500μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 340nm.
- Contenedor de residuos
- Reactivos GTP y GOT
- Agua destilada
- Cubetas
Determinación de TRANSAMINASAS
 Procedimiento
01
Se ajusta el espectrofotómetro con
agua destilada
Tomamos una tableta de sustrato del
02 reactivo 2 y se coloca en el reactivo
1 para ser agitada posteriormente.
Se pasa al espectrofotómetro
04 Al primer minuto se toma la
absorbancia inicial, después en un
transcurso de 3 minutos se va
haciendo lecturas en cada minuto
Se calcula el promedio de
05 adherencia por minuto.
- Cuando va en aumento:

03 Se procede a realizar el
montaje.
A1-AI, A2-A1, A3-A2.
-Cuando va disminuyendo:
Se coloca 1.0ml de reactivo en AI-A1, A1-A2, A2-A3.
el tubo de muestra con 100μL.
Se deja incubar por 1 minuto a
temperatura ambiente.
∆(A)/minuto U/L de AST
 Determinación de ELECTROLITOS
Especies Sodio (meq/l) Potasio (meq/l) Cloruro (meq/l)

Equino 149 3.3 102

Bovino 142 4.8 104
Caprino --- 3.6 118
Ovino 153 4.8 103
Porcino 155 3.9 103
Felino 151 4.3 120
Canino 143 4.4 114
 Determinación de SODIO
Es el catión extracelular más importante, cualquier descontrol puede indicar un trastorno de balance de líquidos.

La determinación del ácido úrico se efectúa mediante el Método enzimático colorimétrico.

 Materiales y equipos
- Centrífuga
- Suero o plasma
- Micropipetas de 20μL, 200μL y 500μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 520nm.
- Contenedor de residuos
- Los reactivos (4) y su estandar
- Agua destilada
 Determinación de SODIO
 Procedimiento

01
Se ajusta el espectrofotómetro con
agua destilada 03 Se incuban los tubos a 37°C
durante 5 minutos e
inmediatamente se pone el R2
(200μL)
Se preparan los reactivos de trabajo

02 y los tubos:
Todos los tubos tendrán 500μL de
R1. 04 Se realiza la primera lectura a
los 60 segundos y la segunda a
El estándar tendrá además 20μL de los 120 segundos. Y se realizan
estandar. los cálculos
La muestra tendrá además 20μL de
muestra.
A=A2-A1
El control tendrá además 20μL de
control

∆ 𝐴 𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎− ( 𝐴 ) 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
𝑥 𝐶 𝑃𝑎𝑡𝑟 ó 𝑛=mmol/
∆ 𝐴 𝐸𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 − ( 𝐴 ) 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
 Determinación de POTASIO
Es el principal catión intracelular que participa en la osmoralidad. Se produce hiperpotasemia en las enfermedades renales
agudas y crónicas, en infecciones graves, insuficiencia adrenocortical, y después de grandes traumatismos; y la
hipopotasemia se produce por la poca ingestión de potasio, diarrea persistente o durante la alcalosis.

La determinación del potasio se efectúa mediante el UV. Test.

 Materiales y equipos
- Centrífuga
- Suero o plasma
- Micropipetas de 20μL, 250μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 520nm.
- Contenedor de residuos
- Los reactivos y su estándar
- Agua destilada
 Determinación de POTASIO
 Procedimiento

01
Se ajusta el espectrofotómetro con
agua destilada 03 Se incuban los tubos a 37°C
durante 5 minutos.

02 Se preparan los reactivos de trabajo

y los tubos:
Todos los tubos tendrán 720μL de 04 Se realiza la primera lectura a
los 120 segundos y la segunda a
R1 y 290μL de R2. los 240 segundos. Y se realizan
El estándar tendrá además 20μL de los cálculos
estandar.
La muestra tendrá además 20μL de
A=A2-A1
muestra.

∆ 𝐴 𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎− ( 𝐴 ) 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
𝑥 𝐶 𝑃𝑎𝑡𝑟 ó 𝑛=mmo
∆ 𝐴 𝐸𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 − ( 𝐴 ) 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
 Determinación de CLORO
Es el anión principal del líquido extracelular que juega un papel muy importante en la relación ácido base. . La
hipercloremia se da cuando el animal es privado de agua o por la ingesta excesiva de sales. La hipocloremia por depresión
de la respiración (por medicamentos, por enfermedad pulmonar o por una depresión en el sistema nervioso central), por
enfermedades renales crónicas, en hipo- o hiperactividad adrenocortical y en la alcalosis metabólica por vómito excesivo.

La determinación del cloro se efectúa mediante el Método Tiocianato – Hg. Colorimétrico..

 Materiales y equipos
- Centrífuga
- Suero o plasma
- Micropipetas de 10μL y 100μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 520nm.
- Contenedor de residuos
- Los reactivos y su estándar
- Agua destilada
- Celdas
 Determinación de CLORO
 Procedimiento
Se marcan 3 tubos de ensayo Se agitan los tubos
01 - 1ero con una “B” (Blanco)
- 2do con “st” (estándar) 03 Se incuba a 37° durante 5
minutos.
- 3ero con una “M” (muestra)

02 Se procede a realizar el montaje.

04
Se le agregan 10μL de muestra en
el tubo marcado con “M”.
Se le agregan 10μL de estándar en
el tubo marcado con “st”.
Se le agregan 1000μL de reactivo
de cloruro en cada tubo.
Se hacen las lecturas
Primero con el blanco, lo pasamos
a la cubeta de lectura y después se
coloca en el espectrofotómetro se
le presiona en el botón “Blank”.
Luego se hace la lectura del
estándar y la muestra. Después se
hacen los cálculos:

∆ 𝐴 𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎− ( 𝐴 ) 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
𝑥 𝐶 𝑃𝑎𝑡𝑟 ó 𝑛=
∆ 𝐴 𝐸𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 − ( 𝐴 ) 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
 Determinación de HIERRO
Si los niveles de hierro están demasiados altos pueden indicar envenenamiento con plomo, enfermedad en el
hígado o hemocromatosis. Y si están bajos puede ser talasemia o anemia. En caninos los valores son de 84-233
μg/dl y los felinos 65-233 μg/dl.

 Materiales y equipos
- Centrífuga
- Suero o plasma
- Micropipetas de 1000μL y 500μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 520nm.
- Contenedor de residuos
- Los reactivos
- Agua destilada
- Celdas
 Determinación de HIERRO
 Procedimiento

01
Se ajusta el espectrofotómetro con
agua destilada 03 Medimos la primera absorbancia
y tomamos el resultado. En ese
mismo tubo se le añade el
reactivo B y se mide de nuevo la
(A) en 6 minutos.

02 Se coloca: 500μL de suero en el

tubo de muestra con 2ml de reactivo
04 Se calcula

A y se agita.

Hierro Sérico=(A2-A1) x Factor de conversión

 Determinación de CALCIO
La concentración media de todas las especies es de unos 10.0mg/100ml (5.0meq/litro). A niveles elevados se le conoce
como hipercalcemia, que es muy común en cuanto al consumo elevado de vitamina D o por afecciones neoplásicas
(adenoma paratiroideo o hiperparatiroidismo primario, algunos carcinomas óseos, bronquiales endometriales, mieloma
múltiple y sarcoidosis). Se le conoce como hipocalcemia cuando el calcio se encuentra a niveles bajos de los normales; la
hipocalcemia leve (9mg/100ml) es señal de hiperparatiroidismo secundario, raquitismo y osteomalacia; la hipocalcemia
grave (6mg/100ml) suele ser por tetania o paresia (que ocurre en la lactancia y al final de la preñez).

La determinación del calcioo se efectúa mediante el o-Cresoltelaína- Colorimétrico.

 Materiales y equipos
- Gotero
- Suero o plasma
- Micropipetas de 20μL, 250μL y 1000μL.
- Puntas para micropipetas
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas de 570nm.
- Contenedor de residuos
- Los reactivos y su estándar
- Agua destilada
 Determinación de CALCIO
 Procedimiento
Se marcan 3 tubos de ensayo
01 - 1ero con una “B” (Blanco)
- 2do con “st” (estándar)
- 3ero con una “M” (muestra)
02 Se procede a realizar el montaje.
Se le agregan 20μL de muestra en
el tubo marcado con “M”.
Se le agregan 20μL de estándar en
el tubo marcado con “st”.
Se le agregan 2000μL de reactivo
de calcio en cada tubo.
Se agitan los tubos
03 Se incuba a 37° durante 10
minutos.
04 Se hacen las lecturas
Primero con el blanco, lo pasamos
a la cubeta de lectura y después se
coloca en el espectrofotómetro se
le presiona en el botón “Blank”.
Luego se hace la lectura del
estándar y la muestra. Después se
hacen los cálculos:
 Determinación de CALCIO
∆ 𝐴 𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎− ( 𝐴 ) 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
05 Se calcula:
𝑥 𝐶 𝑃𝑎𝑡𝑟 ó 𝑛=mg/ L
∆ 𝐴 𝐸𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 − ( 𝐴 ) 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
Valores normales de
Calcio
Especies Bovino Equino Caprino Ovino Porcino Felino Canino

Calcio 5.4 6.1 5.4 5.7 5.6 4.1 4.9

(meq/L)
¡GRACIAS!

POR SU ATENCIÓN