Es un conjunto de técnicas diagnósticas que recurren al uso de
sustancias fluorescentes, fluorocromos, que permiten detectar la presencia de un antígeno o anticuerpo en células o tejidos.
Se realiza un acople a un anticuerpo de un fluoroforo o una enzima
que cataliza una reacción por la cual se emite fluorescencia. J
FLUOROFORO
Un fluoró foro es la parte de una molécula responsable de crear
una emisión fluorescente en el espectro de luz visible. Conocidos como cromóforos, los fluoróforos absorben diferentes longitudes de onda de luz, creando la luz que es visible. g
INMUNOFLORECENCIA INDIRECTA
Es una técnica de doble capa en donde se aplica el
anticuerpo sin marcar directamente sobre el sustrato de tejido y se visualiza por tratamiento con un suero anti inmunoglobulina conjugado con fluorocromo. FUNDAMENTOS DE LA IFI
La inmunofluorescencia secundaria, o indirecta (también
conocida por sus siglas IFI) hace uso de dos anticuerpos; el anticuerpo primario es el que reconoce y se une a la molécula diana, mientras que el secundario que es el que se encuentra marcado con el fluoróforo, reconoce al primario y se une a él. CELULAS TUMORALES EN LINEA IFI
La inmunofluorescencia indirecta (IFI) es una de las técnicas más utilizadas en
los estudios de autoinmunidad debido a su fácil manejo y estandarización. CONSTA EN 2 ETAPAS PRIMERA ETAPA
El anticuerpo primario no marcado se une con
el antígeno.
SEGUNDA ETAPA
El anticuerpo secundario lleva el fluoro foro
identifica al anticuerpo primario y se une a el. IFI: PRIMERA ETAPA
IFI: SEGUNDA ETAPA
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TRYPANOSOMA CRUZI
La técnica se resume en la marcación de un anticuerpo Ani-inmunoglobulina
con la sustancia fluorescente siendo Ac-ani-Ac del paciente chagasico la fluorescencia aparece cuando es llevado al microscopio adecuado.
1. Se coloca una muestra de eritrocitos sensibilizados en una placa tipo Kline.
2. Añade el suero a ser investigado se homogeniza la mistura resultante . 3. Se espera 10min.. Enseguida se procede ala lectura.
Uso de la inmunofluorescencia indirecta en el diagnóstico histológico del cancer y en qué técnica utiliza. Que marcadores se utiliza en el cancer de mamá y que mide cada uno de ellos. Interpretación de resultados.