PROYECTO DE

FERMENTACIÓN
ABE CON
CLOSTRIDIUM
ACETOBUTYLICUM EQUIPO 3

PARA LA INTEGRANTES:
 ORTEGA JUAREZ JAZMIN ANNEL
OBTENCIÓN DE  RODRIGUEZ QUINTERO MAYUMI
 VIVEROS AGUILAR ARELI
BUTANOL  MOLINA JARAMILLO IVAN
VLADIMIR
El propósito del proyecto es GENERALES ESPECÍFICOS
proporcionar una alternativa de
Proponer un
modificación y optimización de la ruta proceso de
metabólica ABE para mejorar la mejoramiento  Diseñar y
producción de butanol con clostridium para la Relacionar la Investigar, desarrollar un
obtención de producción de comprender y proceso de Proponer un
acetobutylicum ATCC824, incluyendo butanol, a partir butanol con la producción, proceso para la
analizar la ruta
estrategias como la variación y/o del estudio y regulación metabólica de la donde la recuperación de
apagado de nodos, genes u operones análisis genético genética del fermentación mayoría del butanol.
y metabólico de microorganismo ABE producto sea
para así reducir o eliminar la toxicidad clostridium butanol.
del producto y de esta manera acetobutylicum
obtener un mejor rendimiento del ATCC824
producto de interés.
 ELECCIÓN DEL MICROORGANISMO
La cepa productora de disolventes C. acetobutylicum ATCC 824 se
utilizó en esta investigación.

CONDICIONES DE FERMENTACIÓN
El medio de cultivo seleccionado es el conocido como el numero 2
compuesto por:

COMPUESTO CONCENTRACIÓN (G/L)

Glucosa 80
Extracto de levadura 5
Extracto de carne 10
En el medio de cultivo
KH2PO4 0.6
seleccionado se le adicionara
acido butírico para facilitar la ruta K2HPO4 0.6
metabólica hacia la acidogénesis MgSO4•H2O 0.05
y solventogénesis
FeSO4 0.001
Acetato de Amonio 1.1
ZnSO4 0.001
 Cultivar ambas
Extracción de Aislamiento del
cepas
ADN. plásmido
anaeróbicamente
PROPUESTA DE
MODIFICACIÓN
GENÉTICA
Amplificación por Cultivar con Construcción del
PCR antibióticos vector
Nuestra propuesta para el
mejoramiento en la
producción de butanol
será la adición del gen
acrB el cual proviene de
E. coli k-12 con el fin de
hacer una cepa capaz de
tener una mayor
tolerancia a butanol
 Selección y ajuste de diferentes modelos cinéticos para el
modelamiento de la producción de butanol y ácido butírico en
Clostridium Acetobutylicum YM1

PRODUCTO.
BIOMASA. Se considero los siguientes modelos cinéticos:
Para el modelamiento de biomasa se empleó un Ec. 3
modelo basado en Monod durante las primeras Ec. 4
24 horas Ec. 5
Ec. 1 Ec. 6
Ec 2 Donde:
Donde : Β=Que tanto de producto se genera durante la
X: biomasa fase de crecimiento
µm: velocidad máxima de crecimiento Α=parte del producto ligada al crecimiento
S: sustrato Kp= Constante de inhibición por producto (Ug
Ks: constante de saturacion del sustratro h ó h.').
β: constante del término de inhibición
α: constante de formación de metabolitos
SUSTRATO.
Se optó por una modificación de las ecuaciones, ya que se
observa una mayor afinidad del modelo a los parámetros
abarcados:
Ec. 7 ÁCIDO BUTÍRICO
Ec. 8  
Ec. 9 Ec. 15
Ec. 10 Ec. 16
Ec. 11 Ec. 17
Ec.12 Ec.18
Ec.13 Ec. 19
Ec.14
Donde:
Yps=rendimiento del producto sustrato cuantos gr de
producto generado por cada g de sustrato consumido
Yxs=rendimiento biomasa sustrato cuantos gr de biomasa
generado en cada gr de sustrato consumido
Balance de materia de la evolución del inoculo y el medio de
cultivo hasta la generación máxima de producto (butanol).
 18 60

16 50
X, S, BUTANOL, AC. BUTIRICO Y CALCULADOS

14 40

12 30

10 20

8 10

6 0

4 -10

2 -20

0 -30
0 20 40 60 80 100 120 140 160

TIEMPO

BIOMASA BUTANOL ÁCIDO BUTIRICO BIOMASA CALCULADA

BUTANOL CALCULADO ÁCIDO BUTIRICO CALCULADO SUSTRATO SUSTRATO CALCULADO
 SEPARACION SÓLIDO- SEPARACION
CENTRIFUGACIÓN DESTILACIÓN SIMPLE
LÍQUIDO LÍQUIDO-LÍQUIDO
El destilado simple se realizó ya que la mezcla
que se obtuvo contiene un porcentaje muy
bajo de butanol (4%). La mezcla contenía
308496.677 g totales de los cuales
12339.86708 son de butanol y 296156.809 g
del 2 etil 1-hexanol. Obteniendo en el
destilado 10468.6966 g de butanol y
568.8685289 g de 2 etil-1- hexanol. En los
fondos se obtuvo 1871.17039 g de butanol y
295587.941g de 2 etil-hexanol. Mediante los
datos obtenidos se determinó que el
porcentaje de recuperación fue de 80%, por lo
cual, es factible que darnos con la parte
destilada ya que se obtiene una mayor
recuperación de butanol. De igual manera se
observó que el solvente 2 etil-1-hexanol es el
mejor para arrastra el butanol dejando atrás
los subproductos.
MEJORA DEL CULTIVO
 Aumentar el porcentaje de fosfatos ya que
estudios en cultivo continuo sugieren que bajos Mejora de genes en C. acetobutylicum
niveles de ATP y altos niveles de la relación
NADH/ NAD in vivo, mejoran la producción de El mejoramiento en la producción de
butanol. butanol puede darse por la inserción del
 Administrar peptona como fuente de nitrógeno gen acrB, con el fin de hacer capaz al
ya que las fuentes orgánicas de nitrógeno,
peptona y extracto de levadura inducen mayor microorganismo de tener una mayor
producción de solventes, los niveles tolerancia al butanol, prolongando la
recomendados para estas fuentes se encuentran
entre 3 y 4 g/L( (Sierra, 1987). iniciación de la fase de esporulación.
 Incentivar el medio acido, para garantizar un
mayor porcentaje de butanol.