Análisis microscópico

de la célula
LABORATORIO 1
PROFESORA: DRA. GERALDINE DENNETT
COMPOSICIÓN DE LA MEMBRANA PLASMÁTICA
COMPOSICIÓN DE LA MEMBRANA
PLASMÁTICA

Ácidos grasos

• Fosfolípidos glicosilados
• Fosfatidilserina tiene carga
negativa
MEMBRANA DE UNA BACTERIA GRAM -
CELULA EUCARIONTE CELULA PROCARIONTE
TIPOS DE MICROSCOPIA

Microscopia de fuerza atómica ATF (Atomic force

microscopy)
Bacterias presentes en un biofilm encontrado en un
bowl con agua de un perro

La imagen se genera por repulsión entre una

micropunta y la superficie atómica de la muestra
que la micropunta recorre
Microscopia de campo claro Microscopia de contraste de
fase

Microscopia de campo oscuro
Levadura (Sacharomysie
cervisiae) (8-10µm)
Objetivo 100X
Microscopia de fluorescencia
Escherichia coli (2-0,5µm)
teñido con DAPI
Objetivo 100X
 IMÁGENES CON MICROSCOPIA TEM (Transmission Electron Microscopy)

Levadura

Septum
IMÁGENES CON MICROSCOPIA TEM (Transmission Electron Microscopy)

Adipocito
(triglicéridos) Células de raíz de cebolla
IMÁGENES CON MICROSCOPIA SEM (Scanning
Electron Microscopy)
 CORTES HISTOLÓGICOS DE TEJIDO

Pared celular
celulósica
Núcleo

Pared celular
(xilema)
Matriz lignificada
extracelular

Raíz de planta juvenil, teñida con

Ducto urinario del riñón, teñido con safranina y “fast green”
hematoxilina y eosina
 Microscopia de fluorescencia

Microtúbulos marcados con anticuerpos

fluorescentes verdes
Centrómeros marcados con anticuerpos
fluorescentes de color rojo
DNA de los cromosomas condensados con
DAPI

Célula en mitosis
PARTES DE UN MICROSCOPIO ÓPTICO

Objetivos:
4X, 10X, 20X, 40X, 100X (aceite de inmersión,
aumenta índice de refracción)
Existen objetivos que no necesitan aceite de
inmersión y que se pueden embeber dentro de la
muestra sin cubre objeto.
También existen otro tipo de objetivos que nos
permiten visualizar muestras inertes solidas que no
permiten el paso de la luz, estos se utilizan en
microscopios de reflexión

Permite enfocar la imagen

 PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

• Se deposita la muestra
• Se fija
• Se adiciona el colorante
• Se coloca el cubre objeto
• Se seca el exceso con papel
absorbente

Tinción: Azul de metileno

FIJACIÓN DE LA MUESTRA

Metodologías de Fijación de la
muestra:
• Calor
• Solventes químicos
• Glutaraldehído
• Formaldehido
Cianobacterias Chroococcus sp
Microscopio de
contraste de fase

Mucilago
(exapolisacaridos)

Objetivo utilizado 100X

Tilacoides, Clorofila
Levaduras (Saccharomyces cerevisiae)

Citoplasma

YEMACION HAPLOIDE Y
DIPLOIDE Objetivo utilizado 100X
Hoja de Elodea sp.
Objetivo utilizado 100X

Cloroplastos

Citoplasma

Pared celular
PREPARACION DE LA MUESTRA
Epidermis de cebolla (Allium cepa)
Tinción con TBO (Toluidine blue stain)

Tinción con azul de

metileno
Núcleo

Citoplasma

Pared celular
Objetivo utilizado 40X
Tinción de Epidermis de cebolla Objetivo utilizado 100X
 Células de papa (Solanum tuberosum)

Corte de menos de 1 mm aprox.

Citoplasma
Tinción con Lugol

Objetivo utilizado 100X

Amiloplastos
PREPARACION DE LA MUESTRA

Tinción: Azul de metileno

 Células escamosas de la mucosa bucal Tinción con azul de metileno

Citoplasma
Objetivo utilizado 100X Núcleo
RESUMEN
• Las diferentes macromoléculas que componen la membrana plasmática de
la células eucariontes como procariontes le confieren la carga neta a esta.
• Existen diferentes tipos de microscopia que nos permiten visualizar los
diferentes componentes de la célula dependiendo el poder de resolución
de cada uno de estas.
• Las diversas tinciones que existen nos permiten colorear las diferentes
estructuras de una célula dependiendo de su carga neta y del tipo de
microscopia se utilice.