Calorimetría de titulación

isotérmica

Chavana Salcedo Elizabeth

Contreras Ordaz Maximiliano
García Hernández Nadia
 ¿Qué es la calorimetría de titulación isotérmica ?

 Es una técnica que se utiliza en los estudios cuantitativos de

interacciones biomoleculares. Funciona mediante la medición
directa del calor que se libera o absorbe durante un evento de
enlace biomolecular. 

Puede determinar Mide la afinidad de los

simultáneamente componentes del enlace
todos los en sus estados nativos.
parámetros de
enlace en un solo
experimento.
 Principio del método
La calorimetría se basa en dos principios
básicos fundamentales
El principio de las transformaciones
inversas
Establece que las cantidades
de calor intercambiadas al
interior de un mismo sistema
son de la misma magnitud
pero inversas entre sí
El principio de calores intercambiados
Explica que en un sistema aislado
adiabáticamente, la cantidad de calor que
se transfiere a una parte del sistema es
igual a la cantidad cedida por otra y este
efecto es debido exclusivamente a una
diferencia de temperaturas.
Principio del metodo

 Funcionamiento  Realización de la medición

 Instrumentación

Todos los calorímetros constan de los mismos elementos básicos en su diseño y

operan con los mismos principios.

Las diferencias entre ellos están en la cantidad de muestra que requieren y en

su precisión.

El Calorímetro de Titulación Isotérmica consta de 2

celdas idénticas, la de referencia R que se llena de
agua pura y la de la muestra M que se llena de una
solución de proteína P.
En la celda M se coloca una jeringa que contiene
una solución de una sustancia L cuya interacción
con la proteína se desea estudiar. El calorímetro
establece una diferencia de temperatura ΔT entre
ambas celdas que se encuentra aisladas del
exterior por una chaqueta térmica.
Instrumentacion

 En un experimento exitoso, en
las últimas titulaciones esta
energía es muy cercana a
cero, ya que todas las
moléculas de proteína tienen
unido a L. Con un CTI,
entonces, la medición se
realiza a temperatura
constante, variando la
concentración de la sustancia
que esté colocada en la jeringa
 Calibración

La calibración del calorímetro consiste en determinar la

capacidad calorífica que presenta el conjunto de materiales
que forman al calorímetro (vaso calorimétrico, sistema de
agitación, dispositivos de medida de temperatura, recipientes
contenedores de reactivos, etc.) y que van a absorber una
parte de la energía térmica suministrada al sistema.
 Calibración

. En general, el calibrar el calorímetro es una

operación necesaria para poder evaluar los
cambios energéticos de un proceso o las
capacidades caloríficas de los sistemas, toda
vez que los cambios de temperatura asociados
a los procesos vendrán determinados por la
naturaleza y cantidad de materia
 Usos

Es una de las últimas técnicas que se utiliza para caracterizar la afinidad de unión de los ligandos por las proteínas.
Entre sus usos podemos encontrar:

 Cuantificación de la afinidad de enlace

 Selección y optimización de candidatos
 Medición de la termodinámica y la concentración activa
 Caracterización del mecanismo de acción
 Confirmación de objetivos de enlace previstos en el descubrimiento de medicamentos de
pequeñas moléculas
 Determinación de la especificidad y estequiometria del enlace
 Medición de la cinética enzimática
Bibliografía

 Reconocimiento molecular enzimático

http://tesis.uson.mx/digital/tesis/docs/19990/Capitulo1.pdf
 Calor y proteínas-
http://www.revista.unam.mx/vol.16/num1/art02/art02.pdf

 Calorimetría
https://tesis.ipn.mx/jspui/bitstream/123456789/17744/1/25-1-16777.pdf
. Calorimetría de titulación isotérmica -
https://es.qaz.wiki/wiki/Isothermal_titration_calorimetry