REGISTRO ELECTROFISIOLÓGICO E HISTOLOGÍA

Los cortes de cerebro se transfirieron a la cámara de grabación en el chip de

neuromodulación de ultrasonido después de 1 hora de incubación y se perfundieron con
ACSF fluyendo a una velocidad de 2 a 3 ml / min y se mantuvieron a 30 ° C mediante un
controlador de temperatura automático (TC -324C, WARNER) durante todo el experimento.

Se realizaron experimentos histológicos para identificar la morfología neuronal.

Se sumergieron cortes de cerebro humano de pacientes con paraformaldehído al 4%

(para morfología neuronal, 15 minutos después de la grabación de parche-
clamp). Las secciones de cerebro se tiñeron para morfología neuronal (biocitina,
Sigma) y evaluaciones patológicas (tinción HE y tinción con plata Bielschowsky). Las
muestras de biopsia total para las preparaciones de cortes se obtuvieron de 15
pacientes con epilepsia del lóbulo temporal y 4 pacientes con glioma sin epilepsia.
RESULTADOS Y DISCUSION
La estimulación por ultrasonido reduce las actividades epileptiformes y las
convulsiones conductuales en monos epilépticos
Aunque el ultrasonido pulsado de baja intensidad no invasivo se
utiliza a menudo para la modulación de diferentes trastornos
neurológicos, así como para la neuromodulación directa, no se ha
dilucidado su alcance y eficacia para la epilepsia en modelos de
primates no humanos. 
La estimulación por ultrasonido
durante 30 minutos suprimió
eficazmente la frecuencia
electrográfica de picos ictales por
minuto en todos los monos
analizados

Simulación: 29,3 ± 3,8; EE. UU .:

12,62 ± 3,9. N = 6
experimentos, P <0,01, prueba t
de muestras independientes
Los valores medios de los recuentos
totales de convulsiones en 16 horas
se redujeron significativamente
(107,7 ± 1,2 en el grupo de
simulación y 66,0 ± 7,9 en el grupo
de ecografía, n = 2
animales, P <0,01, prueba t
de muestras independientes 
La elevación de temperatura relativamente pequeña (0,69 ±
0,044 ° C) y la estructura de la corteza y las neuronas intactas
indicaron que la estimulación por ultrasonido de 30 minutos en
este estudio era segura para el tratamiento en modelos de
monos epilépticos
 El transductor de ultrasonido se
colocó fuera del cerebro del mono y
se controló la actividad epileptiforme
del mono durante 8 h de forma
continua
El resultado mostró que el ultrasonido
no tuvo un efecto significativo sobre
las actividades epileptiformes del
mono epiléptico
 La estimulación por ultrasonido inhibe directamente las descargas
epileptiformes en neuronas de pacientes con TLE

Para investigar si la estimulación por ultrasonido podría suprimir las actividades epileptiformes en cortes
epilépticos humanos y descubrir los mecanismos subyacentes, se utilizó un sistema experimental que
constaba de un chip de neuro-modulación por ultrasonido y sistemas de pinza de parche para la estimulación
de cortes de cerebro in vitro 
Utilizando la grabación adjunta a las células, primero detectamos
las descargas epileptiformes en las neuronas de los pacientes con
TLE, mientras que hubo pocas descargas espontáneas en las
neuronas de los pacientes con glioma 
cortes de cerebro de ratones para
probar el efecto excitador o inhibidor
de la estimulación por ultrasonido con
diferentes parámetros acústicos
muestra que las descargas
epileptiformes de las neuronas
podrían inhibirse eficazmente durante
la estimulación por ultrasonido.
El registro de una población de 13 neuronas de pacientes con TLE
mostró que la frecuencia relativa de descargas epileptiformes
disminuyó rápidamente varias veces y el efecto inhibidor duró 63 ±
4 segundos después de la estimulación por ultrasonido. 
Como se muestra, la estimulación por ultrasonido disminuyó
significativamente la frecuencia relativa de picos en comparación
con antes de la estimulación por ultrasonido (durante EE. UU.:
0.303 ± 0.064 Hz; después de EE. UU.: 0.936 ± 0.041 Hz. P<0.01,
ANOVA unidireccional seguido de LSD)
Además, el análisis de la forma de onda de los picos
individuales reveló que tanto la amplitud como el ancho medio
no cambiaron antes y durante el tratamiento con ultrasonido
(150,16 ± 12,77 pA a 152,45 ± 12,27 pA, P = 0,18 para la
amplitud media de los picos; 0,41 ± 0,015 ms a 0,36 ± 0.011
ms, P = 0.13 para la mitad del ancho medio de los picos)