Espectrometría de masas

Tomado de “Principios de análisis instrumental” 5a edición

Vean http://www.asms.org/whatisms
 Espectrometría de masas
Unidades de presión: 1 atm = 760 Torr

1 Torr = 1 mm Hg

Dentro de la fuente de ionización, la presión es 10-8 Torr = 1.3x10-11 atm

CONCENTRACION DE PARTICULAS (MOLECULAS + IONES) EN LA

CAMARA DE IONIZACION, ASUMIENDO UNA TEMPERATURA DE 300 K
= (n/V) = P/RT = 5.3x10-12 M = 5.3 pM…

SI EL VOLUMEN DE LA CAMARA DE IONIZACION ES DE 0.1 L,

CANTIDAD TOTAL DE PARTICULAS = 0.53 pmol !!!!
 Espectrometría de masas
SISTEMA DE INTRODUCCION DE MUESTRA – Vaporiza la muestra.

• FUENTE DE IONIZACION – Convierte las moléculas del analito en iones.

Algunas opciones: Impacto electrónico, Ionización química, Bombardeo con átomos
rápidos, desorcion de moléculas de una matriz sólida con luz láser.

• ANALIZADOR DE IONES- Separa los iones de acuerdo a m/z

Algunas opciones: analizador de sector magnético, analizador de cuadrupolo,
analizador de tiempo de vuelo, analizador de trampa de iones, resonancia iónica
ciclotrónica (Transformada de Fourier).

• DETECTOR – Cuenta los iones.

• SISTEMA DE VACIO – Reduce las colisiones entre iones y moléculas en la fase gas.
 Fuentes de ionización:Impacto
de electrones

Electrones emitidos por el filamento impactan las moléculas de la muestra con

energía aproximada de 70 eV. La diferencia de voltaje en la región de aceleración
es de más de 1000 V.
 Energía cinética de los iones
PARA TENER IDEA DE LAS MAGNITUDES:
Carga de un electrón = e = 1.60217653 x10-19 Coulombios
1 electrón Voltio (eV) es una unidad de energía, donde e es la carga de un electrón
(en Coulombios) y V es 1 voltio = 1.60217653x10-19 Julios.

Energía cinética, Ec, de los iones en la fuente de ionización de impacto

electrónico = zeV. Si z = carga neta del ión = +1 y V = 1000 V, entonces, Ec
= 1.6x10-16 J. Ejercicio: Convierta este valor en kJ/mol.

Puesto que Ec = mv2/2, donde m es la masa del ión y v es la velocidad,

entonces, la velocidad que adquiere un ión en la zona de aceleración =
(2Ec/m)1/2 .
Ejercicio: Calcule la velocidad que puede alcanzar en la fuente de
ionización un ión molecular de agua (H2O+., masa = 2.99x10-26 kg) y un
ión molecular de benceno, C6H6+.
 Espectros de masas

Espectro de masas del CO2

Espectros de masas

Espectro de masas de la acetona

Espectros de masas

Espectro de masas del (a) cloruro de

metileno y (b)1-pentanol usando
(a)Fuente de ionización impacto
electrónico.
Observe el efecto de los isótopos
de Cl en (a) y la casi ausencia
total del ión molecular en (b) lo
cual es característico en
alcoholes debido a que, al
ionizarce, se descomponen en
forma rápida.
 Espectros de masas

Espectro de masas del etilbenceno. Fuente de ionización: impacto electrónico

Espectros de masas de alta
resolución

Espectros de alta resolución del CO y del N2.

Fuentes de iones de alta y baja
energía
Espectros de masas

Espectro de masas del 1-decanol

usando
(a)Fuente de ionización de alta
energía (impacto electrónico).

(b)Fuente de ionización de baja

energía (desorción). Note que los
espectros son mas simples.
Fragmentación de la 2-hexanona
C=O:

C=O:
: +.
+e- + 2e-

CH3CH2CH2CH2 CH3 CH3CH2CH2CH2 CH3

.. m/z
CH3CH2CH2CH2. + +O=C-CH3 Ruptura homolítica 43
..
CH3CH2CH2CH2C=O+ + .CH3 Ruptura homolítica 85
..
CH3CH2CH2CH2.C=O: + +CH3 Ruptura heterolítica 15
H
CH3CH=CH2 +
C=O+

:
Rearreglo de McLafferty 58

.
CH2 CH3
Ionización química
Ionización química
 Ionización química
Usa un reactivo iónico (por ejemplo, CH5+ , C2H5+) que reaccionan con las moléculas
del analito(MH) para producir iones por transferencia de protones o de hidruros:
MH + C2H5+ --> MH2+ + C2H4
MH + C2H5+ --> M+ + C2H6

Los reactivos iónicos son producidos introduciendo un exceso de metano (> 1000
relativo al analito) en una fuente de impacto electrónico.

Las colisiones de los electrones con el metano producen CH4+ y CH3+ los cuales
reaccionan luego con otras moléculas de metano para formar: CH5+ y C2H5+:
CH4+ + CH4 --> CH5+ + CH3
CH3+ + CH4 --> C2H5+ + H2
Impacto electrónico vs. Ionización
química
Espectros de masas de efedrina:
Con dos fuentes de ionización:
Impacto electrónico (arriba) e
ionización química con metano
(abajo)
Desorción de iones de una fase
condensada
MALDI
MALDI
 MALDI
IONIZACION CON LASER ASISTIDA POR UNA MATRIZ.
SUMARIO: El analito se mezcla con un material que sirve de matriz.
Usualmente, la mezcla se hace por co-cristalización de una solución.

La mezcla se irradia con un laser (de luz UV o IR) de energía entre 10-5y
10-4 J.
Los iones que resultan son analizados tipicamente en un analizador de
tiempo de vuelo.
En esta página encontrarán un modelo sobre formación de iones en MALDI
con laser UV.
http://www.rknochenmuss.ch/maldi.html

En esta sección encontrarán varias películas en formato QUICKTIME

simulando el fenómeno MALDI.
http://www.rknochenmuss.ch/MALDI/MALDIpage_MD.html
 MALDI
Simulacion de dinámica
molecular de la excitación láser
de un total de 255255 moléculas
(matriz + analito) con un pulso de
laser de 355 nm. Duración total
aproximada del pulso = 6 ns.

El pulso láser produce varios

estados excitados S1 (línea
rosada) y Sn (línea verde) en la
matriz asi como iones positivos
(línea roja) y negativos (línea
azul) en la matriz y en el analito
(por transferencia de carga).
http://www.rknochenmuss.ch/MALDI/MALDIpage_MD.html
Simulación de las
moléculas excitadas y de
los iones formados a los 3
ns, justo en el pico del pulso
láser.
MALDI
El pulso incide desde el
lado derecho. Observe la
dilatación de la matriz que
contiene la muestra
Posición Z > 0.
Los puntos grises son
moléculas de la matriz en
estado fundamental (S0).
Los puntos verdes y
rosados son estados
excitados (S1) y (Sn).

Las cruces rojas son iones positivos. Los diamantes azules son iones
negativos. Los círculos amarillos son subunidades de moléculas de analito
(polímero de 10 elementos).

http://www.rknochenmuss.ch/MALDI/MALDIpage_MD.html
 MALDI

Simulación de las moléculas excitadas y de los iones formados a los 5 ns,

cuando el pulso láser está decayendo. Observe la explosión de la matriz dentro
de la cámara de ionización del espectrómetro.
http://www.rknochenmuss.ch/MALDI/MALDIpage_MD.html
 MALDI

Simulación de las moléculas excitadas y de los iones formados a los 7 ns,

cuando el pulso láser ha finalizado.

http://www.rknochenmuss.ch/MALDI/MALDIpage_MD.html
Espectros de moléculas gigantes

Los métodos de ionizacion suave (por ejemplo usando un láser para desorber
moléculas de una muestra sólida -MALDI) permiten analizar compuestos de mas
de 100000 Daltons.
Espectros de moléculas gigantes

Los métodos de ionizacion suave (por ejemplo usando un láser para desorber
moléculas de una muestra sólida -MALDI) permiten analizar compuestos de mas
de 100000 Daltons.
 Analizadores de iones: Sector
magnético

Los iones que salen de la cámara de ionización entran al espacio entre

dos polos magnéticos y el campo magnetico (B) hace que la trayectoria
de los iones sea curva (radio de curvatura = r) y los conducen al detector.
 Analizadores de iones: Sector
magnético
•La ecuación principal es:
•[m/z ]= [B2r2e/(2V)]
•B es la intensidad del campo magnético (variable), m es la masa del ion, r es el radio
de curvatura del electroimán (fijo), e es la carga del electrón (1.60x10-19 Coulombios) y
V es el voltaje de aceleración de los iones (> 1000 V).

Calcule la masa de un ion acelerado por un V = 2490 V y que pasa un sector

magnético de B = 0.24 Tesla (1 T = 1W/m2) y radio de curvatura = 0.127 m. Asuma que
la carga del ion, z = +1.

Respuesta: m/z = 2.99x10-26 kg.

Calcule la masa molar de este ion.

 Analizadores de iones: Sector
magnético
[m/z ]= [B2r2e/(2V)]
•SUMARIO: Variando la intensidad del campo magnético o el voltaje de aceleración
de los iones, es posible logar que iones de diferente masa pasen en forma secuencial
por el canal curvo formado entre los dos polos del iman y puedan ir a parar al
detector.
 Analizadores de iones: Tiempo de
vuelo (TOF)

•Los iones acelerados que salen de la fuente de ionización pasan a a lo largo

de un tubo que contiene una serie de rejilas que sirven para enfocar a los iones
hacia el detector y mejorar la resolución.
• Los iones que salen de la zona de aceleración de la fuente de ionización
tienen la misma energía cinética, Ec = zeV.
•Sin embargo…
 Analizadores de iones: Tiempo de
vuelo (TOF)

Puesto que la velocidad que adquiere un ión en la zona de aceleración =

(2Ec/m)1/2 , entonces el tiempo de vuelo de cada ión (t) a lo largo del tubo (L)
depende de la masa del ión. Si todos los iones salen de la fuente de ionización
al mismo tiempo, los iones mas livianos llegan mas rápido al detector.
m/Z = 2Vt2/L2
Analizadores de iones: Cuadrupolo
Consiste de cuatro electrodos
metálicos cilíndricos. Electrodos
opuestos tienen potencial del
mismo signo.

Dos electrodos opuestos tienen

potencial aplicado =
[U+Vcos(ωt)].

El otro par de electrodos tiene

potencial aplicado =
-[U+Vcosωt]

U= Voltaje DC.
V= Voltaje AC.
- ω= 2f =velocidad angular del
+ + Vista lateral
voltaje alternante, donde f es la
- frecuencia.
 Analizadores de iones: Cuadrupolo
Los voltajes aplicados a los electrodos afectan la trayectoria de los iones
(dependiendo de la relacion m/z) a medida que los iones viajan oscilando en
el centro de los cuatro cilindros.

Bajo los voltajes aplicados, solo los iones

que tienen una relación m/z apropiada
logran trayectorias estables en el campo
de alta frecuencia y pasan en la cavidad
entre los cilindros.

Valores típicos
Radio de separación entre cilindros, ro < 1
cm
 = 2.5 MHz
L = longitud de los cilindros: 30 cm
Diametro de los cilindros: 4 mm, 8 mm, 16
mm
Analizadores de iones: Cuadrupolo
Los voltajes aplicados a los electrodos afectan la trayectoria de los iones
(dependiendo de la relacion m/z) a medida que los iones viajan oscilando en
el centro de los cuatro cilindros.

Dos métodos de variación de los voltajes:

Variando ω, manteniendo U y V constantes.
Variando U y V pero manteniendo el radio U/V constante.
Valores tipicos de la relacion U/V < 0.1678

Bajo un determinado grupo de valores de U, V y ω, solo iones de un cierto

m/z pueden viajar entre los tubos y llegar hasta el detector, al otro lado.

Los demás iones se saldrán de la ruta y chocarán contra los cilindros y

eventualmente saldrán por el drenaje del sistema, succionados por el vacio.