La espectrometra de masas (MS) utiliza el movimiento de iones en campos elctricos y magnticos para clasificarlos de acuerdo a su relacin masa -carga.

De esta manera la espectrometra de masas es una tcnica analtica por medio de la cual las sustancias qumicas se identifican separando los iones gaseosos en campos elctricos y magnticos. Los instrumentos usados en estos estudios se llaman espectrmetros de masas bajo el principio que los iones pueden ser desviados a campos elctricos y magnticos. El dispositivo que realiza esta operacin y utiliza medios elctricos para detectar los iones clasificados se lo conoce como espectrmetro de masas. La espectrometra de masas ofrece numerosas ventajas frente a las tcnicas espectrofotomtricas ya que:

Los lmites de deteccin que son, para muchos elementos, tres rdenes de magnitud ms sensibles frente a los mtodos pticos. Espectros notablemente ms sencillos, generalmente nicos y con frecuencia fcilmente interpretables. Capacidad para medir relaciones isotpicas atmicas.

Con la espectrometra de masas somos capaces de proporcionar informacin acerca de:

La composicin elemental de las muestras: de esta se encarga la espectrometra de masas atmico. De la composicin de las molculas inorgnicas, orgnicas y biolgicas. De la composicin cualitativa y cuantitativa de mezclas complejas. De la estructura y composicin de superficies slidas. De las relaciones isotpicas de tomos en las muestras.

Espectrmetro de masas Se demuestra que dos compuestos son idnticos por el hecho de tener propiedades fsicas idnticas: puntos de fusin y ebullicin, densidad, ndice de refraccin, etc. Cuanto mayor es el nmero de propiedades fsicas medidas, ms fuerte es la evidencia. Pues bien, un solo espectro de masas comprende decenas de propiedades fsicas, pues muestra las abundancias relativas de docenas de fragmentos diferentes. Si determinamos el espectro de masas de un compuesto desconocido y encontramos que es idntico al de una sustancia de estructura conocida ya descrita, concluimos- sin la menor duda- que ambos son idnticos. El espectro de masas ayuda a establecer la estructura de una sustancia nueva de varias maneras diferentes: dar un peso molecular exacto, dar una formula molecular o, al menos, reducir las posibilidades a muy pocas. Tambin puede indicar la presencia de ciertas unidades estructurales en una molcula.

El proceso de la espectrometra de masas comprende bsicamente cuatro etapas:

Ionizacin de la muestra. Aceleracin de los iones por un campo elctrico. Dispersin de los iones segn su masa/carga. Deteccin de los iones y produccin de la correspondiente seal elctrica.

Ionizacin de la muestra

En el espectrmetro de masas se bombardean las molculas con un haz de electrones energticos, que las ionizan y rompen en muchos fragmentos, algunos de los cuales iones positivos. Cada tipo de ion tiene una razn particular de masa a carga, o valor m/e. El conjunto de iones se analiza de modo que se obtiene una seal para cada valor de m/e representado; la intensidad de cada seal refleja la abundancia relativa del ion que produce la seal. El pico mayor se denomina pico base. Al eliminar un electrn de la molcula original, se genera el ion matriz o ion molecular cuyo valor m/e es, evidentemente, el peso molecular del compuesto. A veces el pico M+ es el base y puede reconocerse fcilmente, sin embargo a menudo no lo es y se requiere un trabajo considerable para localizarlo. Una vez identificado, da el peso molecular ms exacto que puede medirse. M + e- _____ M+ + 2eIon molecular (ion matriz) M/e = peso molecular Hay que aclarar que el mximo M+ no es el pico ms alto.

fig. No.1 Aspecto clsico de un espectrograma de masas, en el que se sealan su pico base y su in molecular ms importante. La tabla situada a la derecha nos indica la concentracin y la relacin m/z de cada uno de los elementos presentes en el analito.

La mayora de los elementos se encuentran naturalmente en forma de varios isotopos, por lo general predomina ampliamente el ms liviano, siendo ms escasos los ms pesados. La siguiente tabla relaciona las abundancias relativas de algunos isotopos pesados. Tabla No.1 Abundancia de algunos isotopos pesados Isotopo pesado 2 H 13 C 15 N 18 O 33 S 34 Cl 81 Br Abundancia en relacin con isotopo de peso atmico ms bajo (%) 0.015 1.11 0.37 0.20 0.78 32.5 98.0

Aceleracin de los iones por un campo elctrico

Convertimos una fraccin significativa de los tomos formados en la etapa 1 en un flujo de iones, generalmente positivos y de carga nica. La velocidad que adquieren viene regida por la frmula: V= [2eV/m] Donde V es el potencial aplicado, e la carga del electrn y m la masa. Cuando las partculas aceleradas se someten a la accin de un campo magntico (H) describen una trayectoria circular de radio r alrededor de este campo, desarrollando una fuerza centrfuga mv2/r, la cual es igual a la fuerza de atraccin del campo Hev. De esto deducimos que el radio es igual a: r = (2Vm/H2e) Dispersin de los iones segn su relacin masa/carga

Basndonos en la ecuacin anterior podemos calcular la relacin m/e que es: m/e = H2.r2/2V Dado que la mayora de los iones formados en la segunda etapa tienen una sola carga y que el resto de parmetros se mantienen constantes, la relacin m/e suele ser la masa del in.

La utilidad analtica de un espectrmetro de masas depende de la resolucin del instrumento, o capacidad del mismo para separar dos partculas de diferente masa. Deteccin de los iones y produccin de la correspondiente seal elctrica

El ordenador al que est conectado el aparato recoge las distintas seales y las reproduce en forma de espectrograma, formato de fcil interpretacin. Partes de un espectrmetro de masas Bsicamente un espectrmetro de masas costa esencialmente de las siguientes partes:

Sistema de entrada de muestras. Cmara de ionizacin. Acelerador. Analizadores. Detector.

Fig. No2. Componentes de un espectro de masas

Sistema de entrada de muestras

En el sistema de entrada de muestras, un micro mol o menos de muestra se convierten al estado gaseoso por calentamiento a unos 400C y se introduce lentamente en la cmara de ionizacin.

La finalidad del sistema de entrada es permitir la introduccin de una muestra representativa en la fuente de iones con la mnima perdida de vaco. En los espectrmetros de masas ms modernos encontramos diferentes tipos de sistemas de entrada: Sistemas indirectos de entrada: es el sistema ms clsico y el ms simple, en el cual la muestra se volatiliza externamente y se introduce en la regin de ionizacin que est a baja presin. El sistema de entrada es normalmente de vidrio para evitar posibles prdidas por adsorcin. Entrada por sonda indirecta: los lquidos y los slidos no voltiles se pueden introducir en la regin de ionizacin mediante un soporte para muestra o sonda, el cual se inserta a travs de un cierre de vaco. El sistema de cierre se utiliza para controlar la cantidad de aire que entra despus de la insercin de la sonda en la regin de ionizacin. Las sondas tambin se usan cuando la cantidad de muestra es limitada ya que se pierde mucha menos cantidad. Sistemas de entrada cromatrogrficos y de electroforesis capilar: es un tipo de sistema de entrada especial, est indicado su uso cuando al espectrmetro de masa va acoplado un sistema de cromatografa de gases o de lquidos de alta eficacia o a columnas de electroforesis capilar que permiten la separacin y determinacin de los componentes de mezclas complejas.

Cmara de ionizacin

Las fuentes de iones de los espectrmetros de masas, tienen todas unas caractersticas comunes, pese a la variabilidad de tipos existente y es que todas transforman los componentes de una muestra en iones. En muchos casos el sistema de entrada y la fuente de iones estn combinados en un nico componente. En todos los casos, se obtiene un haz de iones positivos o negativos (normalmente positivos) que posteriormente se acelera hacia el interior del analizador de masas o sistema separador a travs del acelerador. La formacin de iones del analito es el punto de arranque de arranque de un anlisis por espectrometra de masas. El aspecto de los espectros de masas para distintas especies moleculares, depende en gran medida del mtodo utilizado para la formacin de los iones. Estos mtodos los podemos dividir en dos categoras: Fuentes de fase gaseosa: en estas primero se volatiliza la muestra y luego se ioniza. Estn generalmente restringidas a compuestos trmicamente estables que tengan puntos de ebullicin menores de unos 500C. En la mayora de los casos, estos requerimientos limitan la utilizacin de las fuentes de fase gaseosa a compuestos con pesos moleculares menores de unos 103 Dalton. Son aplicables a muestras no voltiles y trmicamente inestables. Normalmente los espectrmetros de masas estn equipados con accesorios que permiten intercambiar ambos tipos

de fuentes. Son aplicables a compuestos que tienen pesos moleculares superiores de 1000 Dalton. Fuentes de desorcin: en estas la muestra en estado slido o lquido, se transforman directamente en iones gaseosos. Son aplicables a muestras no voltiles y trmicamente inestables. Normalmente los espectrmetros de masas estn equipados con accesorios que permiten intercambiar ambos tipos de fuentes. Son aplicables a compuestos que tienen pesos moleculares superiores de 100000 Dalton. Las fuentes de iones se pueden clasificar tambin en fuentes duras y fuentes blandas. Fuentes duras: comunican suficiente energa a las molculas para que estn en un estado de energa altamente excitado. La relajacin posterior, implica la rotura de las uniones produciendo iones fragmentados. Su espectro da lugar a muchos picos y nos da informacin acerca de la naturaleza de los grupos funcionales e informacin estructural de los analitos. Fuentes blandas: dan lugar a poca fragmentacin y el resultado es un espectro con muy pocos picos dndonos informacin til ya que nos permite la determinacin exacta del peso molecular de la molcula o molculas. Tipos de cmaras de ionizacin Tabla No.2 Muestra los diferentes tipos de cmara de ionizacin
Tipo fase gaseosa Nombre y Acrnimo impacto de electrones EI ionizacin qumica CI ionizacin por campo FI desorcin por campo FD ionizacin por electro nebulizacin ESI desorcin asistida por una matriz MALDI desorcin por plasma PD bombardeo con tomos rpidos FAB ionizacin por termo nebulizacin TS espectrometra de masas de iones secundarios SIMS Agente Ionizante electrones energticos iones gaseosos reactivos electrodo de elevado potencial electrodo de elevado potencial campo elctrico elevado haz de laser fragmentos de fisin del 252Cf haz de tomos energticos elevada temperatura haz de iones energticos

desorcin

FUENTES DE FASE GASEOSA

Impacto de electrones (EI): Se somete a la muestra a una temperatura suficientemente elevada (normalmente mediante un filamento caliente de wolframio o de renio) como para producir un vapor molecular, el cual posteriormente se ioniza bombardeando las molculas originadas con un haz de electrones de elevada energa. Pese a sus desventajas, esta tcnica es la que se ha usado para determinar la mayora de los espectros que componen las colecciones de espectros. Fuentes de ionizacin qumica (CI): En la ionizacin qumica los tomos gaseosos de la muestra (tanto de un sistema de entrada indirecto como de una sonda caliente) se ionizan al colisionar con los iones producidos al bombardear con electrones un exceso de gas reactivo (normalmente metano). Normalmente se utilizan iones negativos, aunque la ionizacin qumica de iones negativos se utiliza ocasionalmente en aquellos analitos que contienen tomos muy electronegativos. Fuentes de ionizacin por campo (FI): En las fuentes de ionizacin por campo, los iones se forman bajo la influencia de un campo elctrico elevado (108 V/cm). Estos campos se producen al aplicar elevados potenciales (10 a 20 kV) a emisores especialmente construidos. Que estn formados por numerosas puntas finas cuyos dimetros son menores a 1 m. A menudo estos emisores adquieren la forma de un fino hilo de wolframio en el cual se han formado dendritas o filamentos microscpicos de carbono por pirolisis de benzonitrilo en un campo elctrico elevado. El resultado de este tratamiento es la aparicin de centenares de microagujas de carbn que emergen desde la superficie del hilo. En este caso el analito adquiere poca energa vibracional y rotacional por lo que tiene poca fragmentacin.

FUENTES DE DESORCIN

En las dos ltimas dcadas se han desarrollado numerosos mtodos de ionizacin por desercin para tratar muestras no voltiles o termodinmicamente inestables. Estas tcnicas prescinden de la volatilizacin y de la posterior ionizacin y en su lugar se suministra energa a la muestra slida o lquida de diversas maneras, de modo que se provoca la formacin directa de iones gaseosos. Como consecuencia se obtienen espectros muy simplificados. Fuentes de desorcin por campo (FD): Esta fuente de ionizacin usa un emisor con mltiples puntas, similar al usado en las fuentes de ionizacin por campo. En este caso el electrodo se coloca sobre una sonda que puede retirarse y recubrirse con una disolucin de la muestra, despus de reinsertarla la ionizacin se produce tras proporcionar un potencial elevado a este electrodo. En ocasiones es necesario calentarlo hacindole pasar una corriente pero puede ocurrir una degradacin trmica antes de completarse la degradacin.

Desorcin/ionizacin por lser asistida por una matriz (MALDI): Esta tcnica de reciente descubrimiento nos permite calcular pesos moleculares exactos de extractos de biopolmeros polares en un intervalo de masas moleculares de varios cientos de miles de Dalton. En esta tcnica se mezcla una disolucin acuoso/alcohlica de la muestra con un exceso de una sustancia matriz que absorbe la radiacin. La disolucin resultante se evapora en la superficie de una sonda metlica que se utiliza para la introduccin de la muestra. La mezcla slida se expone a la accin de un haz de lser pulsante, provocando la sublimacin del analito a iones que son introducidos en un espectrmetro de tiempo de vuelo para el anlisis de masas. Ionizacin por electronebulizacin (ESI/MS): Esta tcnica se ha convertido en una de las ms importantes para el anlisis de biomolculas de pesos superiores a 100.000 Dalton. Se realiza en condiciones atmosfricas de presin y temperatura. La disolucin de la muestra se bombardea a travs de una aguja capilar de acero inoxidable a un flujo de algunos microlitros por minuto. Las agujas se mantienen a un potencial de varios kV con respecto al electrodo cilndrico que rodea a dicha aguja. La niebla de finas gotitas cargadas resultantes pasa a travs de un capilar de desolvatacin donde se produce la evaporacin del disolvente y de las molculas del analito y donde estas adquieren la carga. Debido a que las gotitas se vuelven ms pequeas por la evaporacin del disolvente, su densidad aumenta producindose la desorcin de los iones en la atmsfera gaseosa. Fuentes de bombardeo con tomos rpidos (FAB): Con este tipo de fuentes, las muestras en un estado condensado, a menudo en una matriz de una disolucin de glicerol, se ionizan por bombardeo con tomos de xenn o argn de elevada energa. Tanto los iones positivos como negativos del analito son expulsados de la superficie de la muestra por un proceso de desorcin. El haz de tomos rpido se obtiene pasar iones acelerados de argn o xenn de una fuente o can de iones a travs de una cmara que contiene tomos de argn o xenn a una presin de unos 10-5 torr. Setos experimentan una reaccin de intercambio de electrones en resonancia con los tomos obtenindose un haz de tomos de alta energa. Desorcin por plasma (PD): El deterioro del 252Cf produce dos fragmentos de fisin que viajan en direcciones opuestas. Un fragmento golpea la muestra anulando entre 1-10 iones analticos. El otro fragmento golpea un detector y desencadena la puesta en marcha de la adquisicin de datos. Este mtodo es especialmente interesante para molculas largas de origen biolgico. Espectrometra de masas de iones secundarios (SIMS): Un haz de luz ionizado primitivo como 3He+,16O+, o 40Ar+ es acelerado y enfocado hacia la superficie de la muestra y chisporrotea entrando dentro de la fase gas. Aproximadamente el 1% del material chisporroteado entra en forma ionizada, el cual ya puede ser analizado. SIMS tiene la ventaja que puede ser continuamente chisporroteado desde la superficie y determinar las concentraciones analticas en funcin de la distancia desde la superficie original.

Ionizacin por termonebulizacin (TS): La ionizacin por termonebulizacin se usa para elementos reflectantes. Una muestra es depositada encima de una cinta metlica, que puede ser de Pt o Re y una corriente elctrica calienta el metal a altas temperaturas. La cinta es revestida de grafito que reduce la desfragmentacin. Sistema acelerador

En el sistema acelerador las partculas ionizadas producidas por el impacto de los electrones son obligados a atravesar una primera ranura aceleradora por una pequea diferencia de potencial. Entre esta primera y una segunda ranura existe una diferencia de potencial muy elevada que imprime a las partculas su velocidad final. Una tercera ranura acta como colimador del haz de partculas.

Analizadores de masa

Para la separacin de iones con diferente relacin m/e se dispone de varios dispositivos. Lo ideal es que el analizador fuera capaz de distinguir entre diferencias muy pequeas de masa. Adems, los analizadores deberan de permitir el paso del nmero suficiente para producir corrientes inicas fciles de medir. Al igual que sucede con los monocromadores pticos, a los que los analizadores son anlogos, estas dos propiedades no son compatibles y se debe de llegar a un equilibrio que est regido por la resolucin del espectrmetro de masa. Existen diferentes tipos de analizadores de masas: Analizadores de sector magntico: los analizadores de sector magntico utilizan un imn permanente o un electroimn para hacer que el haz procedente de la fuente de iones se desplace con una trayectoria circular de 180, 90 o 60. Estos analizadores tambin son llamados de enfoque simple. Espectrmetros de doble enfoque: este trmino se usa en los espectrmetros en los cuales las aberraciones direccionales y las aberraciones de energa de una poblacin de iones se minimizan simultneamente. El doble enfoque se consigue utilizando combinaciones de campos magnticos y electrostticos cuidadosamente seleccionados. Espectrmetro de masa cuadrupolar: son normalmente menos caros y ms robustos que los de sector magntico, adems tambin ofrecen la ventaja de emplear tiempos de barrido pequeos (<100ms), lo cual es particularmente til para realizar barridos de picos cromatrogrficos en tiempo real. Son, con diferencia los ms utilizados hoy en da. Analizadores de masas de tiempo de vuelo (TOF): en estos aparatos se producen los iones positivos peridicamente por bombardeo de la muestra con impulsos de electrones, de iones secundarios o de fotones generados por lser. Los iones producidos de esta forma son acelerados

en un tubo analizador libre de campo mediante un campo elctrico pulsante de 103 a 104 V. La separacin de los iones en funcin de la masa se produce durante su recorrido hacia el detector, situado al final del tubo. Estos aparatos presentan ventajas como la robustez, simplicidad, fcil acceso a las fuentes de iones y el virtualmente ilimitado intervalo de masas, pero tienen no obstante una sensibilidad y una resolucin limitadas. Analizadores de trampa de iones: es un dispositivo en el que los cationes o aniones gaseosos pueden formarse y quedar confinados durante largos periodos de tiempo por la accin de campos elctricos y/o magnticos. Los espectrmetros de trampa de iones son ms robustos, compactos y ms econmicos que los anteriores. Transformada de Fourier (FT): Como sucede con los instrumentos de infrarrojo y de resonancia magntica nuclear, los espectrmetros de masas de transformada de Fourier proporcionan mejores relaciones seal/ruido, velocidades mayores y sensibilidad y resolucin ms elevadas. La parte fundamental de un instrumento de transformada de Fourier es una trampa de iones en la cual los iones circulan en rbitas bien definidas durante largos periodos. Tales cavidades se construyen aprovechando el fenmeno de resonancia inica ciclotrnica. La resolucin es espectrometra de masas de transformada de Fourier est limitada por la precisin en la medida de la frecuencia ms que por las rendijas o las medidas de campo. Es posible alcanzar una resolucin extremadamente elevada (superior a 106) dado que las medidas de frecuencia se pueden realizar con elevada precisin.

Detectores

Los iones procedentes del sistema acelerador llegan al detector el cual generalmente est constituido por un ctodo emisor que al recibir el impacto producido por las partculas cargadas emite electrones. Estos electrones son acelerados hacia un dnodo el cual emite varios electrones ms al recibir el impacto de cada electrn. Este proceso se repite varias veces hasta obtenerse una cascada de electrones que llega al colector logrndose una corriente fuertemente amplificada, por un procedimiento muy similar al que se utiliza en los tubos fotomultiplicadores. La corriente obtenida puede amplificarse de nuevo por procedimientos electrnicos y se lleva a un sistema registrador.

Aplicaciones de la espectrometra de masas Las aplicaciones son tan numerosas y abarcan tantos campos que resulta complicado citarlas todas, a continuacin veremos las ms caractersticas:

Elucidacin de la estructura de molculas orgnicas y biolgicas. Determinacin del peso molecular de pptidos, protenas y oligonucleicos. Identificacin de los compuestos de cromatogramas en capa fina y papel. Determinacin de secuencias de aminocidos en muestras de polipptidos y protenas. Deteccin e identificacin de especies separadas por cromatografa y electroforesis capilar. Identificacin de drogas de abuso y sus metabolitos en sangre, orina y saliva. Control de gases en enfermos respiratorios durante los procesos quirrgicos. Pruebas para confirmar la presencia de drogas en sangre de caballos de carreras y en atletas olmpicos. Datacin de ejemplares en arqueologa. Anlisis de partculas en aerosoles. Determinacin de residuos de pesticidas en alimentos. Control de compuestos orgnicos voltiles en el agua de suministro

UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR FACULTAD MULTIDISCIPLINARIA DE OCCIDENTE DEPARTAMENTO DE QUIMICA

ESPECTROMETRIA DE MASAS

ESTUDIANTE: GLENDA MAZZALLY GUILLEN LUNA CATEDRATICO: LIC. SALVADOR LOPEZ CATEDRA: QUIMICA ORGANICA III

FECHA DE ENTREGA: 24-MAYO-2011.

Bibliografa

Holler,James F.; Nieman, Timothy A.; Skoog, Douglas A.. Principios de Anlisis Instrumental, Ed. McGraw Hill, 5ta 2001.

Boyd, Robert Neilson; Morrison, Robert Thornton. Quimica organica, Ed. Pearson Addison Wesley, 5ta 1998.

Ejemplos de espectros de masas

Fig. No.3 Espectro de una roca patrn obtenida por ablacin por lser. Componentes mayoritarios (%): Na 5.2, Mg 0.21, Al 6.1, Si 26.2, K 5.3, Cu 1.4, Ti 0.18, Fe 4.6.

Fig. No.4 Espectro de masas de ICP de 10 ppm de Ce

Fig. No. Espectro de masas del n-decano

Fig.No. 6 Espectro del alcohol benclico

Tabla No. 2 Ejemplos de fragmentacin de molculas

Iones pequenos comunes m/z 15 amu 17 18 19 26 27 28 29 30 31 33 34 35(37) 36(38) 39 41 42 43 44 46 56 57 60 79(81) 80(82) 91 127 128 CH3 OH H2O H3O, F C2H2, CN C2H3 C2H4, CO, H2CN C2H5, CHO CH2NH2 CH3O SH, CH2F H2S Cl HCl C3H3 C3H5, C2H3N C3H6, C2H2O, C2H4N C3H7, CH3CO C2H4O NO2 C4H8 C4H9 CH4CO2 Br HBr C7H7 I HI Composicin Fragmentos neutros comunes Masa composicin perdida 1 amu 15 17 18 19 20 27 28 30 31 32 33 33 35(37) 36(38) 42 43 44 45 55 57 59 60 64 79(81) 80(82) 127 128 H CH3 OH H2O F HF C2H3, HCN C2H4, CO CH2O CH3O CH4O, S CH3 + H2O, HS H2S Cl HCl C3H6, C2H2O,C2H4N C3H7, CH3CO CO2O, CONH2 C2H5O C4H7 C4H9 C2H3O2 C2H4O2 SO2 Br HBr I HI