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UNIVERSIDAD DE ORIENTE

NÚCLEO DE BOLÍVAR
ESCUELA DE Cs DE LA SALUD

INTRODUCCIÓN A
LA MICOLOGÍA

MSC. Antonella Antonucci F.


•Mucho antes que se descubriera el
microscopio, los hongos atrajeron la
atención de NATURISTAS, incluyendolos
dentro del Reino Plantarum.

•Antony Van Leewenhoek en el siglo


XVII: Inicia el estudio sistemático de los
hongos.
•El fundador de la micología: Pier A Michelini, quien en
1729, publicó la obra Nova Plantarum.

•A lo largo de la historia, los hongos han tenido un


importante protagonismo en la industria de alimentos
(Champiñones), bebidas (cerveza) y fármacos
(penicilina).

•Agostini Bassi (1773): pionero en el estudio de las


micosis de los animales, quien estudió una enfermedad
de los gusanos, que el agente causal era de origen
fúngico Beauveria bassiana.
•En la edad media y antigua:
se empleaba el término de tinea
a todas las enfermedades de
evolución tórpida en el cuero
cabelludo.
•Remak, Malmsten, Schoenlein, Robin entre otros: quienes
estudiaron sucesivamente nuevos aspectos sobre enfermedades
micóticas y su etiología.

•En 1841 Gruby: propuso la identidad


de las tiñas.

•A finales del siglo XIX Raymond Sabouraud: realizó una


serie de trabajos en los que sistematizó por 1era vez las
enfermedades producidas por hongos y en 1910 publicó la
obra Les teignes.
•Etapa de decadencia de la historia de la
micología: Coincide con el descubrimiento de
la bacteriología presentado por Pasteur, Roux,
Duclaux, Bordet, entre otros, donde se olvida
el origen fúngico de muchas lesiones.

•Virchow en 1856 descubrió en el hombre


la Aspergilosis.

•Schenck 1898 describe por primera vez a la


Esporotricosis.

•El descubrimiento de los antibióticos producido


por los hongos es relativamente reciente: en 1928
Alexander Fleming encontró Penicillium
inhibían estafilococos.
HISTORIA DE LA MICOLOGIA EN
VENEZUELA
•En Venezuela la micología fue inexistente hasta los inicios
del siglo XX. El primer caso de Eumicetoma fue descrita en
1909.

•Es a partir de 1940 cuando se inician los estudios de


micología en Venezuela, con la creación del Primer
laboratorio de Micología por el Dr. Pablo Guerra en el
Hospital Vargas.
•Siguieron destacados investigadores como A. Angulo, Dante
Borrelli, H. Campins, L. Montemayor, entre otros.

•Participaron en las primeras descripciones de micosis


sitémicas como Criptococosis, Coccidiodomicosis,
Paracoccidiodomicosis, e Histoplasmosis.

•Sentaron base sobre la sistematización en el estudio de los


hongos patógenos en el país.

•Se crearon otros laboratorios de Micología, en el Instituto de


Medicina Tropical, Instituto Nacional de Higiene y en varios
hospitales Universitarios del país.
MICOLOGIA

Es el estudio de los hongos. La micología médica es la rama


de la microbiología, interrelacionada con todas las
especialidades de la medicina, y tiene por objeto estudiar las
enfermedades producidas por hongos y los hongos que la
producen.

(Gr. Mykes = seta, sombrero, hongo


+
logos = discurso, tratado)

Al referirnos a los individuos se les denomina con una palabra de origen Latino:Hongo
Al referirnos a la ciencia que los estudia se utiliza un termino de raíz griega: Micología
CARACTERISTICAS GENERALES
DE LOS HONGOS
•Todos son heterótrofos (quimiorganotrofos).

•Son eucariotas, presentan un núcleo diferenciado con membrana bien


organizada.

•Tiene una pared celular formada por quitina, es rígida.

•Absorben nutrientes.

•La estructura fúngica consta de un complejo llamado talo o micelio, que está
constituido por hifas (mohos) o levaduras (blastomicetos).
CARACTERISTICAS GENERALES
DE LOS HONGOS

•Tienen ausencia de clorofila, no realizan fotosíntesis y se nutren


a partir de sustancias orgánicas ya elaboradas.

•Pueden descomponer organismos muertos o sus productos


(saprófitos) y obtener nutrientes de organismos vivos o huésped
(parásito).

•Tienen una ecología estratégica: aerofilia, temperatura y


actividad acuosa.

•Algunos hongos se asocian con otro organismo para nutrirse


mutuamente (simbiosis), combinación de hongos y algas, sirven
para incrementar la absorción de nutrientes del suelo.
CARACTERISTICAS GENERALES
DE LOS HONGOS

•Los hongos patógenos son zootrópicos: requieren de tejido vivo


para el crecimiento, mientras que los hongos oportunistas son
necrotróficos o saprófitos, es decir utilizan componentes
orgánicos de no vertebrados.

•En la ganadería pueden ocasionar grandes pérdidas económicas


por enfermedades digestivas, abortos.
MORFOLOGÍA
1. TALO:

Constituído por dos partes:

a)Talo vegetativo: asegura el desarrollo, nutrición, fijación y


edificación de la parte reproductora.

b)Talo reproductor: donde se forman los órganos de reproducción.


Representada por hifas, levaduras o seudohifas.
Modificaciones del Talo
Los hongos presentan diferencias en su forma y
constitución:

• DILATACIONES O VESICULAS: órganos de resistencia o


clamidosporas.

• ORGANOS DE FIJACION: como rizoides y appressorium.

• HIFAS EN ESPIRAL: espiral o tirabuzón.


4. ORGANOS NODULARES: Formados por hifas torcidas en
forma de nudo, hifas en raqueta, con ensanchamiento en un
extremo, hifas en asta, hifas pectinadas, hifas peridiales y
acululación de muchas hifas.

5. COREMIOS: Agregación micelial, con órganos de fructificación.

6. SINEMAS: Sin órganos de fructificación.

7. PICNIDIOS: Estromas redondeadas fértiles y asexuadas, o


APOTECIO, sexuado, PERITECIO y CLEISTOTECIO, con
ostiolo y sin él.
ESTRUCTURA DE LOS
HONGOS
LEVADURA

Es un hongo unicelular con un único núcleo que se reproduce


de forma asexual por gemación y división transversal o por
reproducción sexual a través de esporas. Pueden ser esféricas
u ovoides.
MOHO

Consiste en filamentos largos, a modo de hilos ramificados, de


células, llamadas hifas, que forman un micelio, masa enredada o
agregado análogo a un tejido.
HIFA

Tubo de longitud variable formado por una pared celular rígida, en el


que fluye el protoplasma. Diámetro varía de 1 a 30 micras, termina en
punta (Región de crecimiento).
NUCLEOS
Tienen membrana doble y nucléolo, los organelos
citoplasmáticos incluyen mitocondrias, retículo
endoplásmico, vacuolas, ribosomas 80S y aparato de
Golgi relacionado con la producción de vesículas
secretoras, cuerpos lipídicos, inclusiones cristalinas.
PARED FUNGICA
Formada por varias capas:

•Polisacáridos como glucanos (polímeros de glucosa).

•Mananos (polímeros de manosa).

•Polímeros de glucosamina.

•Proteínas, lípidos, quitina.


SEPTOS
Los hongos superiores muestran tabiques transversales
denominados septos, y forman el micelio tabicado, tienen
poros que permiten el paso del citoplasma y el núcleo, de ahí
las hifas constan de compartimientos.

Los hongos inferiores tienen un micelio continuo o cenocítico,


carecen de tabiques (aseptados).
CORPUSCULO DE WORONIN

Cada septo se encuentra relacionado con un corpúsculo de


Woronin, que actúa como obturador de los poros para aislar los
compartimientos cuando éstos envejecen o se diferencian.
ESTRUCTURAS REPRODUCTORAS

1. ESPORANGIOS: Forman esporas asexuales.

2. GAMETANGIOS: Forman los gametos sexuales.


CLASIFICACION TAXONOMICA
DE LOS HONGOS

Dominios o Imperios
Archea Eucarya
Bacterias primitivas Bacteria Algas, hongos,
Bacterias actuales vegetales y animales
CLASIFICACION TAXONOMICA DE
LOS HONGOS

Dominio

Eucarya
Animalia
Arqueobacterias Plantae
Eubacterias
Fungi
Arquezoa Protozoa
Phylum:
•Ascomycota
Acrasiomycota Myxomycota •Basydiomycota
•Mitosporica
•Zigomycota
CLASIFICACION DE LOS
HONGOS
Deuteromicota
UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NÚCLEO DE BOLÍVAR
ESCUELA DE Cs DE LA SALUD

FISIOLOGIA DE
LOS HONGOS

MSC. Antonella Antonucci F.


FISIOLOGIA DE LOS HONGOS

•Crecen en medios de cultivo que contengan los siguientes


sustancias:

a)Materias nitrogenadas como peptona.


b)Azúcares como glucosa o maltosa. Medio de cultivo
c)Soporte sólido como gelosa. Sabouraud
d)pH ácido (de 5 a 6).
FISIOLOGIA DE LOS HONGOS

•Para obtener la esporulación sexuada o asexuada es se utiliza


medios naturales gelosados como papa-zanahoria o extracto de
malta.

•La forma de levadura de los hongos filamentosos se obtienen en


medios de sangre o huevo.

•La temperatauta ambiente de 20 a 30°C, permite el desarrollo de


casi todos los hongos.

•La fermentación de azúcares es una característica para diferenciar


las levaduras.
REPRODUCCION DE LOS
HONGOS
PLEOMORFISMO

Fenómeno donde el hongo sufre una mutación irreversible, pierde


sus órganos de reproducción y se transforma en un hongo velloso
de micelio estéril.
MICOSIS

Enfermedades
causadas por
los hongos.

Se clasifican en:

Asintomáticas Subcutáneas o
Oportunistas
Superficiales Intermedias

Cutáneas Sistémicas o
Dermatofitosis Profundas
FACTORES PREDISPONENTES
•Edad.

•Sexo.

•Ocupación.

•Condiciones higiénicas y sociales.

•Alteraciones del estado general.


• MODOS DE TRANSMISION:
• Hombre a hombre.

• Vegetales a hombre.

• Suelo a hombre.

• Animales a hombre.

• Uso de ropa, utensilios de hombre a hombre.


CARACTERISTICAS GENERALES:

• Tienen distribución mundial.


• Constituyen 70 a 80% de todas las micosis.
• Micosis cosmopolitas que predominan en zonas tropicales.
• Pueden afectar: pelo, piel, uñas, conducto auditivo externo,
córnea, zonas mucosas y cutaneomucosas del cuerpo.
• Son contagiosas.
• Relativa facilidad con que se puede establecer diagnóstico.
MODOS DE TRANSMISION:
• Por traumatismos.

• Por inhalación de las formas infectantes.


M. Furfur
M. ovale
1. Historia clínica:

• Sexo del paciente.


Nombre y apellido.
Edad.
C.I.
• Edad del paciente.
Fecha de Nacimiento.
Ocupación.
Antecedentes. • Procedencia.
Enfermedades de base.
Tratamientos previos.
• Ocupación.
Se agradece la realización
de cultivo de Hongos, para
paciente, de la zona • Antecedentes del individuo de
xxxxxxxxxxxx. enfermedades.

Se realiza con la finalidad de obtener información detallada que


nos puede ayudar al diagnostico .
2. Muestra clínica:
Depende de la historia clínica del paciente:

Escamas epidermolíticas:
• Cinta adhesiva, raspado. • Sangre, médula ósea, hisopados de
• Cabellos y pelos. mucosas.

• Uñas. • Tejidos: biopsias, autopsias, piezas


quirúrgicas.
• Pus y exudado.
• Muestra de oídos, ojos.
• Esputo.
• Heces, orina.
• Lavado gástrico, bronquial.
REQUISITOS PARA UN
LABORATORIO DE MICOLOGIA
1. Sala adecuada para la recolección de muestras.

2. Poseer herramientas para realizar exámenes directos, cultivos,


estudios histopatológicos e identificación de hongos.

3. Implementación de técnicas inmunológicas.

4. Contar con un laboratorio de biología molecular.


MATERIAL REQUERIDO:

•Pinzas de depilar, tijeras finas y fuertes.


•Hoja de bisturí.
•Placas de petri.
•Portaobjetos y cubreobjetos.
•Asa de platino o aluminio.
•Matraces elenmeyer.
•Tubos de ensayo.
•Hisopos estériles, espátulas, torundas.
•Cepillos.
•Frascos, solución salina, formol y alcohol al 70%.
TOMA DE MUESTRA
•La muestra debe ser transportada en envases estériles,
húmedos y sellados.

•No utilizar medios de transportes, excepto cuando el agente


fúngico pueda ser recuperado fácilmente del medio.

•La muestra debe ser llevada al laboratorio, si no va a ser


procesada inmediatamente, se recomienda refrigerarla a 4°C,
con las siguientes excepciones: sangre y líquido cefalorraquídeo
se almacenará 30 a 37°C (temp ambiente) y dermatológica entre
15 y 30°C.
PROCESAMIENTO DE LA
MUESTRA
1. EXAMEN DIRECTO: Permite observar al hongo sin
modificaciones y cuantificar la cantidad de elementos.

a) AL FRESCO: Los exudados se observan directamente o con


una gota de agua destilada o solución fisiológica, solución de
lugol.

SSF Lugol
b) POR ACLARAMIENTO: Se deben utilizar sustancias para
aclarar la muestra.
• KOH del 10 al 40%.

c) COLORACION:
• Gram.
• Giemsa.
• Grocorr.
• Hematoxilina y eosina.
• Tinta China.

GRAM
Tinta China
2. CULTIVO: Siembra de los productos anatomopatológicos en
los medios idóneos. Las muestras pueden tomarse con asa
de platino o hisopos estériles, incubados a tempertaura
ambiente (26 a 27°C). Inoculados con técnica de zig zag.

• Levaduras: se desarrollan de 24 a 48 horas.


• Hongos patógenos: se desarrollan de 1 a 2 semanas.
3. AUXONOGRAMA: Utilización de alimentos con carbono
o nitrógeno. Se usa el medio sin carbono para estudiar alimentos
que contienen este último y sin nitrógeno para alimentos
nitrogenados.

4. ZIMOGRAMA: Es la fermentación de azúcares. Se cultiva la


levadura en medio líquido con glúcido y un indicador coloreado.
5. INOCULACION EXPERIMENTAL: Se
emplea en investigación, puede tener utilidad diagnóstica.
Se usan conejos, ratas, ratones, cobayos, hámsteres
dorados. Los hongos pueden ser inoculados por vía
subcutánea, intravenosa, intraperitoneal, intratesticular e
intracraneal.
6. REACCIONES INMUNOLOGICAS:
• Pruebas de sensibilidad cutánea: con
estas pruebas se investiga la inmunidad celular. Se lleva
acabo con la inoculación de antígenos obtenidos de filtados
o extractos de polisacáridos.
•Serodiagnóstico y determinación de
antígenos: Ponen de manifiesto la presencia de
anticuerpos.

•Reacción de precipitación: utilizan antígenos


celulares de cultivos o filtrados.

•Doble difusión en agar: en placas de petri que


contengan gelosa.

•Técnica de Ouchterlony. DIBUJO PAG 50


•Electrodifusión: pueden ser electroforesis y
electrosineresis.
•Aglutinación de las partículas de látex.
•ELISA, Western Blot, RIA, Electroforesis,
Contrainmunoelectroforesis.
BIOLOGIA MOLECULAR
•Permiten estudiar características estables y no modificables por
el ambiente, como DNA del gen y el RNA molecular.

•Reacción en cadena polimerasa.


•Polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción.
•Análisis del polimorfismo en la longitud de fragmentos de
restricción de regiones amplificadas por PCR.
IDENTIFICACION DE LOS
HONGOS
Morfología macroscópica:

•Forma y tamaño.

•Color en la superficie.

•Difusión del pigmento.

•Coloración: blanca, rosada, gris, anaranjada, verde,


rojiza, negra.

•Textura: glabra, terrosa, granulosa, vellosa, lanosa,


cremosa, cérea.
•Superficie: elevada o plana, levantamiento central.
•Aspecto: plegado, radiado, cerebriforme, crateriforme.
•Consistencia: dura, suave, firme, membranosa.
•Rapidez de crecimiento: por ejemplo las
levaduras y los oportunistas crecen de 24 a 48 h, y los
dermatofitos en 5 a 10 días.
•Morfología microscópica:

•Examen a través del tubo.

•Examen de un fragmento del cultivo.

•Método de la cinta adhesiva transparente (Rush-Munro).

•Cultivo en lámina o microcultivo.


•Aspectos que se deben estudiar:

•Talo: filamentosos o levaduras, grosor, bifurcaciones,


presencia o ausencia de septos, color.

•Esporas asexuadas y aparato conidiógeno.

•Esporas sexuadas y estructuras donde se forman.

•Cualquier formación anexa (ornamentaciones).


PRESERVACION Y
MANTENIMIENTO DE LOS
CULTIVOS
•Preservar su viabilidad, sin degeneración, variación o mutación.

•Se pueden mantener en agar, transfiriendo periódicamente a


medios frescos inclinados.

•Para hongos filamentosos se puede usar Sabouraud simple,


agar, papa, extracto de malta, harina de maíz y para levaduras,
Sabouraud y extracto de malta, para fase levaduriforme infusión
cerebro-corazón.

•El método de agua destilada sirve para preservar durante más


de un año.
•Se puede congelar en refrigeradores de menos de 70°C en agar o
glicerol, se mantiene más de un año.

•Congelados en nitrógeno líquido hasta 5 años.

•La técnica más eficiente es la liofilización, los mantiene durante


30 a 40 años.
RIESGO BIOLOGICO
1. Riesgo de infección mínima: no existe enfermedad
causada por ellos, hongos de clase superior.

2. Riesgo moderado para el trabajador: resulta de


autoinoculación, ingestión o exposición de membranas
mucosas. Ejemplo: C. neoformans.

3. Agentes que presentan riesgo elevado para el


trabajador y producen enfermedad seria o
potencialmente mortal: H. capsulatum.

4. Agentes que presentan riesgo elevado de infección


para el trabajador como para la comunidad: se
transmite por vía aérea y no se dispone de tratamiento.

5. Agentes con riesgo mayor para el medio ambiente que


para el ser humano.
MEDIDAS DE SEGURIDAD
• En un laboratorio de micología se debe actuar con
responsabilidad.

• Para la realización de cultivos se recomienda campana de


flujo laminar.

• Se deben evitar corrientes de aire y plantas naturales.

• No se debe fumar, comer ni beber y evitar personas


extrañas en el laboratorio.

• Existen productos biológicos que deben ser manipulados


con cuidado.

• El material que se desecha se debe esterilizar en autoclave


antes de su incineración.

• Si hay roturas accidentales de tubos se deberá agregar


fenol al 5%.

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