Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Fermentacion Industrial
Fermentacion Industrial
Componentes:
- Macronutrientes: Fuentes de C, N, S, P, K y Mg, en g/l.
- Micronutrientes: Elementos traza. Sales de Fe, Mn, Ca, Zn,
Co, en mg/l.
- Factores de Crecimiento:vitaminas, aminoácidos, acidos
grasos, etc.
Medio de Cultivo:
Conjunto de nutrientes, factores de
crecimiento y otros componentes que crean las
condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos.
Por su composición:
- Medios Generales: Desarrollo de gran variedad de MO.
- Medios de Enriquecimiento: Favorecen el desarrollo de
determinado grupo de MO.
- Medios Selectivos: Crecimiento de un tipo de MO e inhiben el
desarrollo de los demás.
- Medios Diferenciales: Énfasis en alguna propiedad que un
determinado MO posee.
Diseño del Medio
Elegir los componentes necesarios para lograr el crecimiento
y formación de productos en el proceso.
Conocer los proceso y operaciones previos y conocer los
mecanismos bioquímicos que regulan la formación de
productos.
Requerimientos Nutricionales:
Tipo de metabolismo celular:
Autótrofos: Algas, bacterias que obtienen C del CO2
Heterótrofos: Requieren compuestos orgánicos como
fuente de C.
Condiciones de Cultivo:
Aerobio: oxigeno como aceptor de electrones
Anaerobio: N, SO4, NO3 como aceptor de electrones.
Fuentes de nitrógeno:
Inorgánica u Orgánica, síntesis de proteínas, ácidos nucleicos,
pared celular
Macronutrientes:
P y S en forma de PO4 y SO4, para formar ADN, ARN, ,
aminoácidos azufrados.
K y Mg, ligados al RNA. K actúa como coenzima y Mg es
estabilizador de organelos y es cofactor.
Micronutrientes:
- Esenciales: Ca, Mn, Fe, Cop, Cu, Zn.
- Poco esenciales: Na, Al, Si, Cl, Cr, Ni, Se, Mo
Difíciles de cuantificar y sus requerimientos aumentan cuando
el cultivo se somete a “stress”.
Factores de crecimiento:
Aminoácidos, tiamina, riboflavina, niacina; la mayoría son
constituyentes de coenzimas
Disponibilidad de los Componentes:
Componentes susceptibles de ser usados por la célula.
Concentración de iones metálicos modificada por
quelación, para controlar el fenómenos se usa agentes
quelantes, EDTA.
Se debe tener en cuenta la naturaleza de los
compuestos orgánicos que pueden actuar como
ligandos y sobre todo del ion metálico considerado, es
necesario controlar su concentración.
Materias Primas:
Se debe considerar costos, disponibilidad y estabilidad
en su composición química.
Las materias primas fundamentales son las fuentes de C
y N.
Formulación.
- Carbono: 46 – 48%
- Nitrógeno: 7-12
- Fósforo: 1–3
- Azufre: 0.5 – 1
- Mg: 0.5 – 1
COMPONENTE ELEMENTO/FUNCION MASA. gr
Glucosa C, energía 22.7
NH4Cl N 4.37
KH2PO4 P+K 1.13
MgSO4.7H2O S + Mg 0.232
CaCl2.2H2O Ca 0.011
FeSO4.7H2O Fe 0.007
MnS.4H2O Mn 0.002
ZnSO4.7H2O Zn 0.002
CuSO4.5H2O Cu 0.0004
CoCl2.6H2O Co 0.0004
EDTA Quelante 0.394
Agua destilada 1 ml
5
6
4
Log X
3
2
T
Microbiología Industrial
Comportamiento de microorganismo es el
resultado de la interacción entre el MO y el
medio ambiente por los efectores: internos y
externos.
Efectores
Expresión Producto
Químicos
(metabolitos)
(nutrientes)
Efectores Físicos
(temperatura, agitación, viscosidad, etc.)
Selección, Mantenimiento y Mejoramiento
de MO.
SELECCIÓN:
- Cepa genéticamente estable.
- Velocidad de crecimiento alta.
- Cepa libre de contaminantes
- Requerimientos nutricionales bajos.
- Fácil conservación por periodos largos de tiempo
- Fermentación completa en corto tiempo.
- Alto rendimiento de producto y de fácil extracción
AISLAMIENTO:
S
Porque y para que conservar los
cultivos?
Inversión
Patente
Conveniencia logística del almacenamiento
centralizado
Seguridad de abastecimiento del material ante
pérdidas eventuales
Adecuada información de los riesgos ambientales y
para la salud
Seguridad en la conservación
Esquema del proceso de conservación y sus etapas
críticas
Aislamiento primario
Microorganismo
viable Reactivación 3
(genética/fenotípo)
cultivo 1 Almacenamiento
Tipo de propágulo
Estado fisiológico Proceso de conservación 2
Métodos de conservación de cultivos
1. con crecimiento
transferencia seriada
2. con metabolismo limitado
agua destilada
bajo aceite mineral (control por O2)
3. con metabolismo detenido
3.1 Congelamiento (crioconservación)
3.2 Deshidratación
L-drying: secado desde la fase líquida,
silicagel, celulosa (papel), suelo, perlas de porcelana
Liofilización (freeze-drying)
CRIOCONSERVACIÓN
Crioconservación es la conservación de
material biológico a muy bajas temperaturas
Rango -20 ºC a -196 ºC (nitrógeno líquido)
El nitrógeno líquido es la temperatura práctica
mas baja disponible. A la temperatura de
equilibrio, la difusión molecular es
extremadamente lenta y la probablilidad de
que ocurran reacciones químicas es
prácticamente nula
CRIOINJURIA
muestra +
vacío 30-60 militorrs
protectores
en ampollas
manifold
-70 ºC - 5 ºC
trampa de agua Bomba de vacío de aceite
congelamiento
etilenglicol + hielo seco (- 40 ºC)
etanol + hielo seco (-70 ºC)
La muestra colocada en una ampolla estéril con un plug de algodón, se congela entre
- 40 ºC y -70 ºC. Una vez colocada la muestra en el manifold del equipo se comienza
con el vacío y se retira el enfriamiento. La temperatuyra sube hasta -5 ºC. A esta
temperatura y con un vacío entre 30 y 60 militorrs, el secado es rápido. El tiempo es
variable y depende del volumen de muestra. Al finalizar el proceso se sella la ampolla
al vacío
L-Drying
Impregnación en
Muestra soporte
Secado sobre silicagel
Almacenamient
Método Ventajas Desventajas
o (años)
Secado del agar, baja
Simple, bajo costo,
Agar 0.5-2 estabilidad genética, riesgo
equipamiento requerido bajo
contaminación
• Texto Base:
• Textos Complementarios:
Ingeniería de la fermentación.