Qumica Forense

Mg. Rinaldi, Diego S.

Tema 6
Delitos contra la integridad
sexual

Aspecto
legal
Delitos contra la Integridad Sexual
(Cdigo Penal- Titulo III del Libro segundoLey 25.087 y modificatorias).
Dentro de este grupo estn los siguientes
delitos:
abuso sexual simple (art. 119 1
prrafo)
abuso sexual gravemente ultrajante
(art. 119 2 prrafo)
violacin -tambin llamado abuso
sexual agravado por acceso carnal
violento (art.119 3 prrafo)
estupro (art. 120).

Delitos
sexuales

Primer Objeto de
estudio:
LA VCTIMA, el
acto delictivo se
realiz sobre ella
y slo sobre ella
se puede probar
sobre ella.

Determinacin de presencia
de semen
De relevante importancia el
informe mdico sobre la vctima,
ya que la sola presencia de semen
en la misma o en los objetos
secuestrados en la causa no
demuestra el delito, sino tan slo la
realizacin del acto.
As como la ausencia
buscado no descarta la
abuso deshonesto o
carnal, sino la falta de
por parte del autor.

del indicio
violencia, el
el acceso
eyaculacin

SE REQUIERE INMEDIATEZ
ENTRE
EL
HECHO,
LA
DENUNCIA,
Y
LA
REVISACIN MDICA DE LA
VCTIMA

EN EL
LABORATORIO

ANLISIS DE INTERS EN
DELITOS SEXUALES:
Determinacin de la
Presencia de Semen
Manchas de Sangre
Drogas de Abuso
Estudios Genticos

TIPOS DE MUESTRAS :
Hisopados vaginales ,
anales y orales.
Ropas, telas.
Pelos, uas.
Sangre.
Hgado para estudio
toxicolgico.

El objetivo principal del examen

biolgico es detectar la presencia
de semen en las muestras
recogidas, como prueba de
actividad sexual.
El semen tiene dos fracciones:
La porcin celular o esperma (5%
del volumen), y la porcin lquida o
plasma seminal (95% de volumen),
el semen en conjunto es de aspecto
lechoso, opalescente, ligeramente
amarillo, posee un ph. de 7.27.3 y
est compuesto por el plasma
seminal y los espermatozoides que
pueden
ser
separados
por
centrifugacin.
El rango de conteo normal de
espermatozoides est entre 20

Plasma Seminal
BIOQUMICAS: Fructosa, ribosa,
inositol, sorbitol, aa, aminas
(colina, espermina y etanolamina)
ANTIGNICAS: Albmina, 2-3
alfaglobulinas, 2 betaglobulinas, 1
gammaglobulina. De los antgenos
descriptos 4 son especficos.
ENZIMTICAS: Fibrinolisina,
aminooxidasa, F.A.P, F. Alcalina, 5nucleotidasa.
LPIDOS: Lecitinas y cidos grasos
MINERALES: Zn Y Ca

Recomendaciones para el
anlisis

La persistencia de semen despus de una supuesta

agresin sexual vara entre vctimas y esta influenciada
por las actividades que realiza la vctima despus del
hecho (ducha, higiene genital, otros). Evidentemente,
constituye solo una evidencia en la investigacin de
agresin sexual.
El semen se puede detectar en muestras vaginales
tomadas hasta aproximadamente cuatro das despus del
coito; En la mayora de los casos, sin embargo, no se
detecta en muestras tomadas ms all de las 48 horas
despus del coito. La literatura refiere que se puede
recuperar evidencia de semen hasta una semana despus
En el recto y la boca el semen se mantiene durante
perodos mucho ms cortos de tiempo. Por lo general, no
se encuentra en hisopados anales despus de 24 horas
del supuesto incidente, pero las muestras se analizan
hasta 72 horas despus.
En las muestras de cavidad oral se raramente despus de
las 6 horas del supuesto incidente. Sin embargo, se

Sitios y tiempo lmite para toma de

muestra en la investigacin de
presencia de Semen
Sitio

Tiempo Limite

Vagina

5 das

Recto

2 das

Boca

1 da

Piel

Puede persistir hasta el lavado

Manchas secas en ropa

Persiste hasta lavado

TOMA DE MUESTRA:
Sobre la
vctima :
EXCLUSIVAMENTE POR UN
MDICO.

1. Genitales Femeninos
Se introduce un espculo vaginal apropiado en los dos tercios
inferiores de la vagina, se abre el espculo y con dos hisopos
secos se toman muestras del tercio superior de la vagina,
incluyendo el fondo de saco posterior, los que se rotulan como
Hisopado vaginal superior. Se debe evitar tocar el espculo con
el hisopo con el cual se esta tomando la muestra.
Cuando sea relevante, debe tomarse tambin, muestras del
orificio cervical externo,Hisopado Orificio cervical externo.
Adicionalmente, puede tomarse una muestra, instilando de 2 a
10ml de suero fisiolgico en la cavidad vaginal, y luego aspirando
el contenido vaginal, a esta muestra se etiqueta como lavado
vaginal.
Cuando es imposible, la toma de muestra con espculo
(prepberes, lesiones genitales,etc.), se realizar la toma de
muestra insertando en la cavidad vaginal, secuencialmente, dos
hisopos secos, teniendo cuidado en no tocar con el hisopo la
regin vulvar, a esta muestra se etiqueta como hisopado

2. Cavidad oral
Se recomienda la obtencin de las muestras dentro
de las 24 (veinticuatro) primeras horas posteriores
al suceso sexual. Sin embargo se recomienda seguir
la siguiente secuencia:
Obtener 10ml de saliva como primera muestra.
En seguida, se toma muestras con dos hisopos,
aplicados de manera secuencial, se frotan sobre los
mrgenes interno y externo de las encas, sobre el
paladar duro, el paladarblando, en el interior de las
mejillas y labios, y sobre ambas superficies de la
lengua.
Debe ser rotulado como hisopado bucal.
Finalmente la cavidad oral se enjuaga con 10ml de
agua destilada. Debe ser rotulado como lavado
bucal.

3. Regin Anal
Deben obtenerse dos muestras iniciales de la zona
perianal, si la piel perianal est hmeda, la mancha
debe ser recogida con gasas estriles o hisopos
secos. Sino hay manchas o la mancha est seca,
debe recogerse muestras utilizando la tcnica del
doble hisopado, esta muestra se rotula como
hisopado perianal ohisopado anal externo.
Luego se toman dos muestras del canal anal, se
utiliza dos hisopos de manera secuencial, primero se
pasa un hisopo hmedo, y luego un hisopo seco, los
hisopos se introducen unos 3.0 cm dentro del canal
anal. Esta muestra se rotulacomo hisopado anal.

Extendido
Una vez realizado el hisopado de la regin corporal
correspondiente, se proceder al extendido del mismo en
una lmina porta objeto estril, para lo cual primero deber
etiquetar la lmina, posteriormente tomar el hisopo y
deslizar el algodn del del mismo con movimientos rotatorios
(girarlo) sobre la lamina; una lmina por cada hisopo. Luego,
dejar secar ambos a temperatura ambiente, y colocarlos en
su respectivo sobre de papel para remitir al laboratorio .

SE DEBEN REMITIR AL
LABORATORIO COMO MNIMO
DOS HISOPADOS DE CADA
ZONA Y UN EXTENDIDO.
UNO DE LOS HISOPADOS SE
RESERVA PARA ESTUDIOS
GENTICOS

 Muestras
sobre
soportes absorbentes:
prendas
interiores,
toallitas
higinicas,
sbanas, toallas, etc.
Deben remitirse enteros
al laboratorio ,donde se
realizar el levantamiento
en forma adecuada.
Las manchas hmedas
deben ser secadas al aire
antes de su embalaje.

 Muestras sobre soportes no

absorbentes: adquiere forma de
pelcula o escamas brillosas. Para
distinguirlas se usa Luz UV.
Cuando se encuentra sobre piso u
otras artefactos se debe levantar
con gasas, colocndolas sobre las
manchas,
y
dejando
gotear
solucin fisiolgica presionndola
con una pinza. Luego colocarla en
un frasquito para su remisin.
Si la mancha es seca se puede
raspar con bistur y colocada en
un frasco.

Envo de muestras
TODO DEBE ESTAR:
PERFECTAMENTE ROTULADO
CERRADO PRECINTADO O
LACRADO Y EL SOBRE O
CONSERVADORA DEBE CONTENER
LAS FIRMAS DE QUIEN/ES
ENVIA/N, QUIEN TRASLADA, y LA
HORA DE SALIDA DE LA ESTAFETA

Hisopos secos en tubos

rotulados. Dentro de sobre
de papel
Muestras en soportes
absorbentes secas en sobre
de papel.
Muestras tomadas en de
soportes no absorbentes en
frasco o sobre de papel
segn corresponda.
Dividir segn en que estudio
se requiere: presencia de
semen y/o estudio gentico

Levantamiento de muestras en el
laboratorio:
SOBRE LAS MANCHAS EN
TELAS :
Visualizacin bajo luz de Wood (zona
de fluorescencia caracterstica) Palpado con guantes de ltex
estriles.
Delimitacin con marcador - Corte
de mancha en dos mitades,
guardndose una de las mitades
para posteriores estudios genticos.

Pretratamiento
de las muestras

El hisopo o una fraccin de la

supuesta mancha de semen es
macerada en unos ml de
solucin fisiolgica y luego de
centrifugado, con el lquido
sobrenadante se determina
FAP, SPA Y COMPONENTES
DEL PLASMA SEMINAL y el
culot se extiende sobre porta y
cubre para mirar la presencia
de ESPERMATOZOIDES por
microscopia ptica ( en caso
que no se haya remitido el
extendido correspondiente)

Mtodologa de anlisis

El culot del tubo se procesar para

microscopa ptica:
Con tincin (Ej: May-Grunwald)
Fresco - directo

Al lquido del macerado:

Electroforesis a Ph=3,9: separamos colina y

espermina
Se revelan con Dragendorff en CCD
Pruebas enzimticas colorimtricas: FAP
Pruebas serolgicas: PSA

Estas pruebas no tienen sentido

si ya se encontraron
espermatozoides
intactos por microscopa

Observacin por MO
Se realiza por observacin microscpica
directa o con una coloracin adecuada.
La presencia de un espermatozoide completo
es la prueba irrefutable de semen. Es muy
comn encontrar en las muestras fragmentos
de espermatozoides, ya sean cabeza o cola,
pero debido a la contaminacin con la que
generalmente se encuentran estos restos,
muchas veces estos fragmentos pueden ser
confundidos con esporas y bacterias.
Hay laboratorios que establecen un VALOR DE
CORTE PARA INFORMAR POSITIVO este
anlisis, lo cual es muy complicado ya que se
trabaja con una muestra de tamao
totalmente arbitrario, y la sola presencia de la
enzima buscada es reveladora de su origen.

No encontrar espermatozoides enteros no

significa AUSENCIA DE SEMEN, puesto que
existen casos de oligospermias (ej: en
alcoholistas crnicos) o bien puede tratarse de
manchas viejas o expuestas a condiciones
extremas donde no queden estas clulas, pero
si puede determinarse la PRESENCIA DE SEMEN
an cuando no se observen espermatozoides,
por las reacciones antignicas y de FAP.

Fosfatasa cida Prosttica

Producida por la prstata, tiene una
concentracin 400 veces mayor que
en otros fluidos corporales. La FAP
cataliza en medio cido la hidrlisis
del alfa naftil fosfato. El alfa naftol
producido, reacciona con una sal de
diazonio formando un cromgeno
prpura. Tiene una sensibilidad de
67%, sin embargo a las 48h su
sensibilidad disminuye a 40%, puesto
que a partir de las 14 horas
desaparece
progresivamente.
Constituye una prueba presuntiva.

Metodologa
Visualizacin directa o
espectrofotometra visible
Se siembra en paralelo con testigos:
positivo y negativo
Se trabaja con el sobrenadante de la
maceracin de los hisopados.
Se prepara una solucin de Fast Blue
B (reactivo de color) en el da.
Se debe tener cido tartrico diluido.
El sustrato es alfa-naftil fosfato de
sodio.
Se divide en reactivo A y reactivo B. A
uno se le agrega reactivo color y
sustrato y a la otra mitad lo mismo
ms el agregado de cido tartrico.

Interpretacin de resultados
POSITIVO:

SI SE COLOREA EL
QUE NO TIENE EL C.TARTRICO Y NO
SE COLOREA EL DEL C.TARTRICO

NEGATIVO:

SI NINGUNO DE LOS 2

SE COLOREAN

DUDOSO (O INVLIDO):

SI

DA COLOR EN AMBOS POCILLOS.

LA FAP INHIBE SU ACTIVIDAD

CON CIDO TARTRICO

Antgeno Prosttico
Especfico

Glicoprotena producida por las clulas

epiteliales prostticas. Slo esta presente en
muy bajas concentraciones en algunos fluidos
corporales como: orina, suero, leche materna y
lquido amnitico Se utiliza como marcador para
semen a travs de inmunoensayo que ofrece un
mtodo alternativo rpido y fiable de deteccin
de PSA. Tiene una sensibilidad de 99.4%, y a las
48h su sensibilidad disminuye a 96%, puesto
que a partir de las 27 horas desaparece
progresivamente.
Es
una
prueba
confirmatoria.

Kit Comerciales

Otras tcnicas
Estudios de componentes del plasma seminal (espermina,
colina, otros) por cromatografa en capa delgada .
Semenogelina
I
y
II:
Son
los
principales
componentes proteicos en el semen y se producen
principalmente en las vesculas seminales. Representan la
consistencia gelatinosa del semen recin eyaculado
debido a interacciones a travs de puentes disulfuro. La
presencia de Semenogelina ha sido demostrada en
msculo esqueltico, colon, riones, y la retina, as como
en el carcinoma de pulmn. Su concentracin es 10 veces
ms que el PSA (19 mg /mL 1.92 mg/dL). La
identificacin de Semenogelina humana mediante la
prueba de tira reactiva esta disponibles en la forma de la
RSIDsemen test, con resultado en 10 minutos, con una
sensibilidad y especificidad del 100% con resultados
positivos hasta las 72 horas de hecho. Es una prueba
confirmatoria.

Antgenos del sistema ABO

Un alto porcentaje de individuos presenta antgenos del
sistema ABO en otros lquidos biolgicos adems de la
sangre, son denominados secretores.
Se diferencian del material antignico de los GR, porque no
se hallan unidos en la membrana, son solubles en agua y
son glicoprotenas.
Este anlisis en viable cuando vctima y victimario poseen
diferente grupo, vctima preferentemente no secretora y
agresor secretor.
Se aconseja buscar los antgenos ABO en saliva
previamente, tomando muestra de la mucosa bucal.
Si la vctima es AB secretora, no ser til realizar el anlisis
del semen extrado de la misma.
La determinacin se realiza por el mtodo absorcinelucin.

ADN
Utilidad como herramienta
vinculante.

Determinacin en muestras
biolgicas

Este examen se realizar en todos los

casos que se encuentre signologa de
un hecho reciente y a solicitud de la
autoridad
fiscal
/
judicial
correspondiente, el cual contribuir a
identificar al probable agresor.
Para el estudio, se utilizarn muestras
biolgicas
obtenidas
durante
el
examen, mediante el hisopado de
cavidad vaginal, anal u oral, as como
de otras regiones del cuerpo en donde
se sospeche haya restos de las
mismas; adems se puede tomar la
muestra de la ropa que se solicit a (al)
la agraviada (o).

Determinacin en ropas
Las prendas de vestir con manchas
sospechosas (sangre fresca, semen
u otros) debe procurarse que
sequen
perfectamente
a
la
temperatura del ambiente (evitar la
humedad
y
la
contaminacin
microbiana), antes de empacarlas.

Colocarla en un sobre, de
preferencia que sea ms grande que
la prenda para evitar la posibilidad
de daar los elementos que deben
servir de prueba.
Las prendas de vestir, del presunto
agresor y/o de la presunta vctima,
deben ser empaquetadas en forma
separada.
Rotular el sobre especificando el tipo

Toma de muestra en casos de

agresin sexual
Dos tomas bucales mediante hisopos, pasando por
debajo de la lengua, encas y dientes.
Bsqueda de manchas de semen, saliva o
mordeduras.
Dos tomas cervicales, dos tomas vaginales, y una de
genitales externos, con hisopos estriles limpiando
cuello uterino, cavidad vaginal y la regin vulvar.
Lavado vagina, empleando 10 ml de suero fisiolgico
que se recoger en tubo de plstico.
Dos tomas anales, con hisopos estriles limpiando el
conducto ano rectal y el margen anal.
Ropas que portaba la vctima.

Empaquetado y conservacin de
las muestras
Muestras secas enviar sin refrigeracin.
Muestras hmedas: Mantener refrigerada.
Identificacin de la muestra: Tipo,
Procedencia y /o pertenencia, N de
referencia.
Custodia: Identificacin y firma de la
persona que recoge la muestra, fecha y
hora.
Empaquetado: emplear cajas de cartn o
sobre de papel, cada muestra en

La prueba del ADN en la Justicia

A partir del descubrimiento de las zonas variables
en el ADN (microsatlites), y la posibilidad de
emplearlas para las identificacin humana, la
certeza de los estudios de paternidad y de
identificacin de criminales se increment a ms del
99,99%.
Cada fragmento variable de ADN se denomina
marcador y los mtodos actuales incluyen 15
marcadores variables ubicados en cromosomas no
sexuales y otros 12 a 17 ubicados en el cromosoma
masculino.
En los casos de identificacin el resultado de todos
los marcadores debe coincidir exactamente para
que dos muestras, tales como una mancha en la
escena del crimen y un hisopado bucal de un
imputado, correspondan al mismo individuo.
Este conjunto de resultados numricos obtenidos
para un individuo o para una muestra forense se
denomina patrn gentico y se detalla en el
Informe pericial.

 La nica situacin compleja, y

que genera controversias, es
aquella en que se observan
mezclas de fludos biolgicos
correspondientes a ms de dos
individuos.

Bibliografa
-ASPECTOS Y TCNICAS DE EVALUACIN MDICO LEGALES EN
MENORES / VCTIMAS DE DCLSExmenes Complementarios de
Laboratorio y Uso de la Tecnologa Forense: Lmpara de
Wood, Tonmetro, Colposcopio, Frontoluz, Registro fotogrfico
y/o video- Instituto de Medicina Legal- Repblica de Per.
-MANUAL DE QUIMICA FORENSE- Caro Patricia M.
- LOS ANALISIS DE ADN EN LA JUSTICIA_ Gustavo A. Penacino