ES EL VHI LA CAUSA DEL SIDA? Queda rigurosamente prohibida, sin la autorizacin escrita de los titulares del copyright, bajo las sanciones establecidas por las leyes, la reproduccin total o parcial de esta obra por cualquier medio o procedimiento, comprendidos la fotocopia y el tratamiento informtico. 2011, Carlos Arturo Guerrero Fonseca 2011, Elaleph.com (de Elaleph.com S.R.L.) contacto@elaleph.com http://www.elaleph.com Para comunicarse con el autor: guerra039@yahoo.com Primera edicin ISBN 978-987-1701-35-3 Hecho el depsito que marca la Ley 11.723 Impreso en el mes de diciembre de 2011 en Bibliogrka de Voros, S. A. Bucarelli 1160. Buenos Aires, Argentina.
Guerrero Fonseca, Carlos Arturo Qu implica nacer y vivir con retroelementos y retrovirus endgenos, similares al VIH?: Es el VIH la causa del Sida?: 1 a ed. Buenos Aires: elaleph.com, 2011. 206 p.; 21 x 15 cm. ISBN 978-987-1701-35-3 1. Ensayo. 2. Salud. CDD 614 CARLOS ARTURO GUERRERO FONSECA. MD, MSC, PH.D QU IMPLICA NACER Y VIVIR CON RETROELEMENTOS Y RETROVIRUS ENDGENOS, SIMILARES AL VIH? ES EL VHI LA CAUSA DEL SIDA? elaleph.com A mi hijo, Daniel Alejandro. A los que luchan contra toda opresin intelectual y material. A los que creen en el conocimiento como una forma de entender la naturaleza. A los que no temen defender su verdad, aunque estn en minora. INDICE At+oars.................................................................................................... 13 Patoco ................................................................................................... 15 Ctr++tto Uo....................................................................................... 17 La secuencia de los genes no lo es todo La Epigentica: mucho ms all del determinismo gentico ... 19 Las secuencias de DNA reguladoras: tan importantes como los genes? ...................................................................................... 23 Bibliografa ........................................................................................... 25 Ctr+tto Dos ......................................................................................... 29 Reexiones sobre la evolucinde los retrovirus endgenos Generalidades moleculares de los retroelementos ..................... 30 Los retroelementos tuvieron y tienen inuencia sobre la evolucin de los genomas de las especies ......................... 36 Reexiones sobre la evolucin de los retrovirus endgenos .... 41 Bibliografa ........................................................................................... 46 Ctr+tto Tars ......................................................................................... 53 Consideraciones acerca de la similitud estructural y funcional de los retrovirus endgenos y exgenos, como evidencia de su origen ancestral comn Similitudes estructurales de la secuencia inmunomoduladora de las protenas Env de retrovirus endgenos y exgenos ......................................... 59 El dominio inmunomodulador CKS-17 presente en retrovirus endgenos se encuentra en la protena nef del VIH, sin embargo, no estamos inmersos en inmunosupresin constante. ............................ 69 Bibliografa ........................................................................................... 72 Ctr+tto Ctt+ao ................................................................................... 77 Funciones siolgicas de los retroelementos: de la funcin evolutiva a la funcin celular Retrovirus endgenos, placentacin y proteccin del feto contra el rechazo inmunolgico. .............................. 77 Los retrovirus endgenos compiten con sus contrapartes exgenas protegiendo contra la infeccin. ............................ 81 Los retrovirus endgenos estn implicados en la regulacin de la expresin de genes ....................................... 82 Bibliografa .......................................................................................... 90 Ctr+tto Ctco ................................................................................... 101 Controversia sobre el papel de los retrovirus como causa de enfermedades La asociacin o correlacin matemtica y/o estadstica entre dos variables no implica una causa-efecto ......................... 101 No existe una relacin causa-efecto entre los retrovirus endgenos humanos y la enfermedad ................................. 104 Los retrovirus exgenos tampoco pueden presentarse como la causa directa de enfermedad .................................. 107 El objetivo biolgico de los retrovirus exgenos no es causar enfermedad, y menos an eliminar a su hospedero ......... 112 La relacin entre el entorno medioambiental y el genoma una interaccin ampliamente subestimada para explicar la enfermedad ......................... 114 Bibliografa ......................................................................................... 122 Ctr+tto Srts ....................................................................................... 125 Las drogas psicoactivas de abuso y la malnutricin originan sndrome de inmunodeciencia, sida, sin vih El consumo de drogas de abuso como un factor medioambiental inmunosupresor ......................................... 129 La marihuana, otra droga de abuso inmunosupresora ........... 134 El xtasis: una anfetamina con marcados efectos sobre la funcionalidad del sistema inmune ........................ 136 La malnutricin: otro factor medioambiental con marcados efectos sobre la respuesta inmune .................... 142 El Sida lo utilizan para reprimir la conducta sexual de la sociedad ............................................................................. 146 Bibliografa ......................................................................................... 148 Ctr+tto Str+r ..................................................................................... 169 Retrovirus endgenos humanos y frmacos anti-retrovirales debe replantearse la terapia farmacolgica contra el SIDA? Bibliografa ......................................................................................... 177 Ertoco .................................................................................................. 179 Breve resea de las epidemias ....................................................... 182 Los microorganismos no son lo ms importante en el origen de una epidemia ........................................................... 183 Bibliografa ......................................................................................... 201 AUTORES Carlos Arturo Guerrero Fonseca. Mdico, Msc en Farmacologa, Msc en Gentica Humana, Ph.D en Bioqumica. Profesor titular en el Departamento de Ciencias Fisiolgicas, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Colombia. El enfoque cientco, losco y poltico que se desglosa en cada uno de los captulos es res- ponsabilidad entera del autor. Guillermo Orlando Narvaez intero. Qmico Farmacutico, MSc en Bioqumica, Facultad de medicina, Universidad Nacional de Colombia, Bogot. Di- rector del Centro de Estudios para el Acondicionamiento Bioqumico y Metablico. Bogot, Colombia. Contribuy con la escritura del captulo tres y seis, dise e hizo todas las tablas y guras, adems realiz correcciones de escritura en la mayora de los captulos y el enfoque cientco, losco y poltico del conjunto del libro no lo compromete. Rafael Antonio Guerrero Rojas. Mdico, MSc en Bioqumica, Facultad de medicina, Uni- versidad Nacional de Colombia, Bogot. Contribuy con la escritura del captulo cuatro. 15 PRLOGO Drsrr tt trtatct del primer caso ocial de Sida, hace exactamente treinta aos, se propalan campaas en los me- dios de comunicacin alertando a la poblacin a enfrentar el siguiente dilema: tener o no tener Sida solo depende de la conducta sexual de los individuos. Segn este dictamen, de la monogamia y del condn depende la suerte de las parejas, pues todo aquel que adquiera el virus de la inmunodecien- cia humana (VIH) est condenado a la muerte o al estigma social. Tamao dislate, lejos de tener un propsito educativo, conduce es al pnico generalizado y la aprovechan para inducir a la poblacin al arrepentimiento religioso, al per- dn y a la buena moral, esta ltima desde una perspectiva puramente sexual, y hasta se ha llegado a armar que el VIH y el Sida cayeron como un castigo divino dirigido a los homosexuales y prostitutas, principalmente, pero tambin hacia cualquier persona promiscua que tenga ms de un compaero sexual. Una situacin similar sucede desde el punto de vista cien- tco, donde a partir de modelos creados en los laboratorios, seguidamente publican en reconocidas revistas cientcas del mundo que se est estudiando el virus causante de la epidemia del Sida, y se concluye que son contribuciones a tal conocimiento. A rengln seguido, en los medios de comu- 16 nicacin, se tergiversan las investigaciones asumiendo como generalidad y como verdad algo particular, modelado en un experimento bajo condiciones in vitro, que distan mucho del complejo sistema in vivo. As, se gener el crculo vicioso perfecto: yo repito (los investigadores), t repites (los medios de comunicacin) y, nalmente, toda la poblacin nos con- vencemos de esa verdad. A las multinacionales farmacuticas les preocupa recupe- rar inversiones motivadas por las investigaciones y obtener multimillonarias ganancias por la venta de medicamentos anti-VIH. A los peridicos les interesa avivar el mercadeo de las noticias. A las religiones y a los sectores retardatarios de todos los pases les incumbe la tarea de explotar el miedo al VIH como un arma idnea para conjurar la prdida de las buenas costumbres y tratar de mantener la unidad familiar. De esta forma, lograron imponer, a fuerza de repetirlo, tanto en revistas de divulgacin cientca o popular, la fbula de que el retrovirus denominado VIH y Sida son equivalentes. Recientes investigaciones indican que nuestro genoma est constituido por una importante cantidad de los denomi- nados retrovirus endgenos, virus stos muy similares, desde el punto de vista bioqumico, al VIH, con un papel fundamen- tal para la siologa normal de nuestras clulas. No obstante, en ningn momento se escucha, ni existe el inters, en los medios de comunicacin informar a la poblacin que todo ser humano, as como todas las especies animales y vegetales de nuestro planeta, nacen, viven y mueren con una inimaginable cantidad de retrovirus y genes que codican para elementos mviles, y en contrava se contina haciendo nfasis en el VIH cual si fuese distinto gentica o bioqumicamente a los retrovirus con los cuales nacemos. La proporcin de retrovirus endgenos en nuestro genoma es tan grande, que ningn 17 individuo que se est muriendo de Sida jams alcanzar a tener una carga de VIH de tal proporcin en su genoma. Enfrentados con este panorama, a cualquier cientco o acadmico serio le resulta preocupante concluir o escribir puntos de vista contrarios sobre ciertas verdades aparente- mente demostradas, y en la cuales ya no existe duda. Sin embargo, nosotros creemos rmemente en que la copiosa literatura existente refuta tamaas verdades, y que pese a las presiones polticas, religiosas y sociales sobre el VIH y el Sida, la controversia debe inclinarse cada vez ms con rmeza y decisin hacia el estudio prolijo del signicado cientco de poseer un alto porcentaje de retrovirus end- genos, y a comprender por qu los factores epigenticos, medioambientales y del estilo de vida de nuestra poblacin son los agentes realmente inuyentes y determinantes en el desarrollo del Sida. Reviviendo pocas desgraciadas para la humanidad, du- rante tres dcadas se han centrado en echarle la culpa a un virus, desviando as la atencin de los profundos problemas de malnutricin, drogadiccin y estrs emocional que sufre el mundo moderno, los cuales son la verdadera causa de mul- tiplicidad de enfermedades crnicas metablicas, algunas de ellas con caractersticas de epidemia, tales como obesidad, resistencia a la insulina, diabetes, dislipidemias, cncer y, por supuesto, Sida. Finalmente, recordemos que no hay virus malos ni virus buenos, existen virus y hospederos, y cualquier virus o agente microbiolgico puede matar si encuentra al hospedero apro- piado y en unas condiciones apropiadas. No olvidemos que al ao mueren miles de personas vctimas del tericamente inofensivo virus de la gripe, muertes que superan en nmero a las generadas por el virus AH1HN1, del cual por todo los connes de la Tierra se hizo un despliegue publicitario de 18 proporciones descomunales con protervos nes comerciales y econmicos, avalado desde Ginebra. En el presente libro, deseamos compartir nuestra visin acerca de los elementos mviles, en particular sobre los retrovirus endgenos, su signicado y su relacin con los retrovirus exgenos y el Sida. De igual forma, se analiza cmo determinados factores medioambientales, entre ellos la malnutricin y el consumo de drogas, pueden perfectamente conducir al Sida, sin que est de por medio el VIH, mostrn- dole al lector que la ecuacin VIH=Sida no tiene validez. 19 CAPTTULO UNO LA SECUENCIA DE LOS GENES NO LO ES TODO No es la secuencia gnica la que determina el genotipo o el fenotipo, es la interaccin entre la actividad gnica y los factores medioambientales lo que inuye en la caracterstica genotpica y fenotpica de los individuos. La Epigentica: mucho ms all del determinismo gentico Et rs+trto rr los distintos genomas de animales puso de maniesto que lo considerado como genoma tiene una pobre correlacin con la complejidad de los rasgos fenotpicos de los organismos. Tambin, se evidenci que existen pocas di- ferencias en los genes codicadores de protenas de diversos grupos logenticos, como mamferos, aves y peces, entre otros. As, el humano comparte 99% de los genes con el ratn y muchos de estos genes estn conservados en otros taxo- nes, incluidas las plantas. Igualmente, los genes implicados en los procesos celulares bsicos son compartidos por todos los organismos eucariticos. Se conoce por ejemplo que el nematodo C. elegans, conformado por unas mil clulas, tiene unos diecinueve mil genes, casi un 29 % ms que los insectos, los que tienen unos trece mil quinientos, y cercano al nmero de los seres humanos que se ha estimado en alrededor de veintin mil genes. 20 Con base en lo anterior surgen preguntas inevitables: metablicamente hablando, cmo puede nuestro organismo humano tener billones de funciones con tan solo veintin mil o veinticinco mil genes?, por qu dos organismos morfosio- lgicamente tan diferentes como un nematodo y un humano tienen un nmero de genes cercano?, cmo puede un gen o su producto (RNAs o protenas) tener una o mltiples fun- ciones?, cmo explicar que una enfermedad heredada, con el gen afectado desde el nacimiento, slo se manieste en la edad adulta o en la vejez y no desde el propio nacimiento?, si nacemos y morimos con el mismo nmero e identidad de genes, qu cambia en el genoma para explicar la niez, la adultez y la vejez?, por qu un corazn es tan distinto a un cerebro si las clulas constituyentes de ambos tienen exac- tamente el mismo DNA y los mismos genes? En parte, las anteriores preguntas se contestan a travs de la epigentica, la cual induce a que los genes especcos del corazn se expresen en este rgano y no en el cerebro; o que determinados genes se expresen o se repriman segn mltiples estmulos medioambientales a nivel celular o del individuo en diversas etapas de su vida, desde la fecundacin hasta su muerte. La epigentica es el estudio de la epignesis, es decir, los cambios en un organismo ocasionados por alteraciones en la expresin de la informacin gentica sin modicar el nmero de genes o su secuencia nucleotdica. De tal forma, los cam- bios epigenticos inuyen en el fenotipo sin alterar el geno- tipo. Igualmente, la epigentica involucra las caractersticas heredables que no pueden explicarse nica y directamente a partir de la secuencia del DNA. No existe patologa que afecte al ser humano que no tenga, en parte, una causa o un componente epigentico, y, a diferencia de las alteraciones 21 genticas, los trastornos metablicos de origen epigentico pueden ser revertidos ms fcilmente. Para entender la trascendencia de los mecanismos epige- nticos veamos algunos ejemplos: existen gemelos monocig- ticos (aquellos que son idnticos) en el que uno desarrolla un cncer o una enfermedad neurodegenerativa, mientras que el otro no la presenta cmo se puede explicar este suceso si ambos comparten el mismo DNA? Una explicacin vlida es que aunque comparten los mismos genes, son diferentes epigenticamente, es decir que poseen, entre otros factores, patrones de metilacin del DNA y modicacin qumica de las histonas diferentes, factores stos altamente inuencia- dos por el entorno medioambiental donde se desarroll cada individuo. Un ejemplo adicional para comprender la relevancia de los mecanismos epigenticos es la clonacin. El animal clonado suele presentar problemas de salud de forma tem- prana que no estaban presentes en el original. Aqu, parte de la explicacin es que si bien el clonaje transere el DNA idntico de un individuo a la clula receptora, no sucede lo mismo con sus patrones epigenticos. La oveja Dolly, primer mamfero clonado a partir de una clula somtica mediante transferencia nuclear, present problemas de diabetes, obe- sidad y prdida de la impronta gentica debido a defectos epigenticos. Vale la pena mencionar que un hallazgo tras- cendental de los experimentos de clonaje fue que el ncleo de las clulas somticas, concretamente sus cromosomas, no pierden la capacidad de reprogramarse o de volver a su estado de inespecicidad o totipotencialidad, lo cual signica que el ncleo de una clula somtica no pierde su capacidad de diferenciarse hacia cualquier tipo de clula por el hecho de que ya se haya diferenciado hacia una clula con rasgos fenotpicos caractersticos de uno u otro tejido. 22 Otros mecanismos diferentes a la secuencia nucleotdica que inuyen sobre la actividad biolgica de un gen en particu- lar, ejercida sta a travs de sus productos, los diversos tipos de RNAs o las protenas, est determinada por la actividad de los dems genes, es decir, el contexto donde se expresa el gen, y por las seales del medio ambiente. En trminos loscos, este fenmeno se denomina la relacin entre lo interno los genes en el ncleo celular y lo externo a los genes, es decir, todo aquello externo al ncleo, al rgano y al organismo el citoplasma, lo extracelular y el medio ambiente. Con base en lo anterior, es comprensible que la hipte- sis del determinismo gentico, la cual intent atribuir todos los rasgos fenotpicos de un individuo su conducta, su bioqumica, su salud, su enfermedad, etc. exclusivamente a la secuencia de los genes, no es del todo vlida. Segn el determinismo gentico se naca predestinado a sufrir una enfermedad o a tener una cualidad que no era modicable por el entorno medioambiental donde se desenvolva el indi- viduo. No obstante, hoy en da se sabe que las caractersticas que denen la funcionalidad de una clula estn dadas por las protenas que las constituyen, entre muchas otras mo- lculas, las cuales son el resultado de patrones especcos de la expresin de sus genes, hecho que depende signica- tivamente del medio ambiente al cual sea sometida dicha clula, o el medio ambiente al cual sea sometido el organismo del cual ella hace parte. De esta manera, somos lo que son nuestras secuencias gnicas, pero tambin nuestro ser est determinado por la forma en la cual ellas se transcriben y la forma en que se traducen, siendo absolutamente relevante el orden secuencial de la expresin gnica, la intensidad, la velocidad, la vida media de los RNAs y de las protenas; sus modicaciones post-traduccionales y la interaccin con otras protenas y con multiplicidad de molculas endgenas y ex- 23 genas procedentes de la alimentacin; por lo tanto, nuestros rasgos fenotpicos dependen del contexto molecular donde se encuentren nuestros genes y sus productos. As mismo, el medio ambiente la actividad fsica, el ejercicio, la ali- mentacin, el estrs emocional, entre otros inuye sobre la expresin gnica al modicar multitud de rutas metablicas y, por consiguiente, el contexto molecular. De esta manera, el medio ambiente modica la bioqumica citoplasmtica y sta, a su vez, modica la expresin gnica, es decir, que estamos nuevamente ante eventos reguladores epigenticos. Qeda an por determinar si la epigentica puede explicar por qu hay mnimas diferencias entre el genoma de un chim- panc y el humano. As mismo, surge la pregunta respecto de si la epigentica ser capaz de explicar el desarrollo de diversidad de alteraciones metablicas y enfermedades para las cuales no se han encontrado los genes implicados. Las secuencias de DNA reguladoras: tan importantes como los genes? La complejidad de los fenmenos biolgicos hace suponer que conocer la secuencia de los genes y su ubicacin, piedra angular del desarrollo y funcionamiento de los organismos, no explica qu hace que cada organismo sea lo que es y no otro. Por este motivo, es de trascendental relevancia estudiar los mecanismos que regulan la expresin gnica, pues solo de esta forma podremos explicar que a pesar de compartir genes con los dems animales, cada especie es lo que es. Si bien gran parte de los genes relacionados con la bio- qumica bsica de cualquier clula estn presentes en todos los eucariotas superiores, lo que es tremendamente variable entre ellos es el tipo y la distribucin de las secuencias que regulan los genes, denominadas secuencias de DNA regulado- ras, ponindose de maniesto que, en parte, la complejidad de 24 los organismos radica en las secuencias no codicadoras de protenas, que en el hombre constituyen en su totalidad 98,5% de todo el DNA. Estas secuencias conforman el DNA inter- gnico, es decir, intrones, elementos mviles y una variedad de secuencias repetidas. Desde esta perspectiva, tan solo 1,5% restante de nuestro DNA corresponde a genes codicantes de protenas, estando este pequeo porcentaje regulado y controlado por la vasta cantidad de DNA intergnico. Los cambios en los genes reguladores podra ser uno de los mecanismos implicados en la evolucin de las especies y per- mite explicar que diferentes especies compartan los mismos genes pero, al poseer diferentes mecanismos de regulacin, se generan organismos fenotpicamente diferentes. De esta manera el proceso evolutivo opera sobre las distintas partes funcionales del genoma, por ejemplo sobre los elementos reguladores que determinan cundo, cunto y dnde se ex- presan las unidades de DNA codicantes. As, las diferencias en la actividad de estos elementos reguladores explica el hecho de que grupos tan alejados logenticamente como artrpodos, nemtodos y vertebrados compartan gran parte de los genes directamente implicados en su desarrollo, pese a mostrar morfologas y siologas tan diferentes, implicando esto que los mismos genes pueden tener funciones distintas en diversos contextos moleculares. Como parte de las secuencias de DNA reguladoras se encuentran los denominados elementos mviles y entre ellos los retrovirus endgenos, estos ltimos constituyendo 8% de nuestro DNA, con una estructura bioqumica similar al virus asociado a la inmunodeciencia humana VIH. Pese a que hoy en da se sabe que los retrovirus endge- nos tienen un papel importante en la siologa celular, a este conocimiento no se le ha dado la trascendencia cientca que tiene. Discusiones en torno a la importancia de los retrovirus 25 endgenos en los procesos de la regulacin de la expresin gnica no aparecen en los medios de comunicacin masivos para informarle al pblico en general que todo individuo de la especie humana nace y vive toda su existencia con genes virales que poseen mecanismos moleculares y bioqumicos similares al VIH. Es de esperar que si los retrovirus endgenos, as como otros elementos mviles, tienen relacin o estn implicados directamente con los mecanismos de regulacin de la ex- presin de los genes, una alteracin en ellos, inducida por ejemplo por factores epigenticos provenientes de estmulos medioambientales negativos (estrs emocional, malnutricin, desnutricin, uso de drogas, inactividad fsica, etc.), puede ser el origen de multiplicidad de enfermedades metablicas, entre ellas inmunodeciencias. En el siguiente captulo se plantean los diversos debates acerca del origen y evolucin de los retrovirus endgenos y su relacin con los denominados retrovirus exgenos, como el VIH y otros. Bibliografa 1. Arabidopsis Genome Initiative. Analysis of the genome sequence of the owering plant Arabidopsis thaliana. Nature. 2000;408(6814):796-815. 2. Bartel DP. MicroRNAs: genomics, biogenesis, mechanism, and function. Cell. 2004;116(2):281-97. 3. Bartel DP, Chen CZ. Micromanagers of gene expression: the potentially widespread inuence of metazoan microR- NAs. Nat Rev Genet. 2004;5(5):396-400. 4. Bejerano G, Pheasant M, Makunin I, et al. Ultra- conserved elements in the human genome. Science. 2004;304(5675):1321-5. 26 5. Fonseca CAG. Interpretacin dialctica sobre el origen, el desarrollo y la evolucin de la vida. Buenos Aires; 2004. (Deauno E, ed). 6. Hoeg KP, Heissmeyer V. MicroRNAs grow up in the im- mune system. Curr Opin Immunol. 2008;20(3):281-7. 7. Houbaviy HB, Murray MF, Sharp PA. Embryonic stem cell- specic MicroRNAs. Dev Cell. 2003;5(2):351-8. 8. Iwama H, Gojobori T. Highly conserved upstream se- quences for transcription factor genes and implications for the regulatory network. Proc Natl Acad Sci U S A. 2004;101(49):17156-61. 9. John B, Enright AJ, Aravin A, Tuschl T, Sander C, Marks DS. Human MicroRNA targets. PLoS Biol. 2004;2(11):e363. 10. Lower R, Lower J, Kurth R. The viruses in all of us: cha- racteristics and biological signicance of human endo- genous retrovirus sequences. Proc Natl Acad Sci U S A. 1996;93(11):5177-84. 11. Martinez NJ, Walhout AJ. The interplay between transcrip- tion factors and microRNAs in genome-scale regulatory networks. Bioessays. 2009;31(4):435-45. 12. Mauick JS. Non-coding RNAs: the architects of eukaryotic complexity. EMBO Rep. 2001;2(11):986-91. 13. Mauick JS. Challenging the dogma: the hidden layer of non-protein-coding RNAs in complex organisms. Bioes- says. 2003;25(10):930-9. 14. Mauick JS. RNA regulation: a new genetics? Nat Rev Genet. 2004;5(4):316-23. 15. Mauick JS, Gagen MJ. The evolution of controlled multi- tasked gene networks: the role of introns and other non- coding RNAs in the development of complex organisms. Mol Biol Evol. 2001;18(9):1611-30. 27 16. Matzke MA, Birchler JA. RNAi-mediated pathways in the nucleus. Nat Rev Genet. 2005;6(1):24-35. 17. Pfeer S, Zavolan M, Grasser FA, et al. Identication of virus-encoded microRNAs. Science. 2004;304(5671):734-6. 18. Reinhart BJ, Bartel DP. Small RNAs correspond to centromere heterochromatic repeats. Science. 2002;297(5588):1831. 19. Ridley M. Q nos hace humanos? Madrid; 2005. (Taurus E, ed. 20. Ronemus M, Martienssen R. RNA interference: methyla- tion mystery. Nature. 2005;433(7025):472-3. 21. SanMiguel P, Tikhonov A, Jin YK, et al. Nested retrotrans- posons in the intergenic regions of the maize genome. Science. 1996;274(5288):765-8. 22. Sempere LF, Freemantle S, Pitha-Rowe I, Moss E, Dmi- trovsky E, Ambros V. Expression proling of mammalian microRNAs uncovers a subset of brain-expressed microR- NAs with possible roles in murine and human neuronal dierentiation. Genome Biol. 2004;5(3):R13. 23. Stein LD. Human genome: end of the beginning. Nature. 2004;431(7011):915-6. 24. Vitali P, Royo H, Seitz H, Bachellerie JP, Huuenhofer A, Cavaille J. Identication of 13 novel human modication guide RNAs. Nucleic Acids Res. 2003;31(22):6543-51. 29 CAPTULO DOS REFLEXIONES SOBRE LA EVOLUCIN DE LOS RETROVIRUS ENDGENOS Nada tiene sentido en Biologa si no es a la luz de la evolucin. Ptat ntntta tcract de la evolucin de los retrovirus en- dgenos, necesariamente debemos conocer primero las ca- ractersticas estructurales, moleculares y funcionales de los denominados elementos mviles o elementos transponibles. Estos corresponden a secuencias nucleotdicas de DNA que constituyen aproximadamente 45% del genoma humano, pro- porcin abrumadora si la comparamos con la proporcin de secuencias gnicas que codican para protenas, cuyo valor est alrededor de 1,5%. Los elementos mviles tienen la capacidad de saltar a otros lugares dentro de los genomas, de ah que tambin se les denomine elementos transponibles. Desde su descubrimiento, en 1956, por Barbar McClintock, los elementos mviles se han encontrado en los genomas de casi todos los organismos y, si bien, inicialmente se consider que eran DNA basura debido a la ausencia de investigaciones que soportaran sus posibles funciones, hoy en da se sabe que son secuencias reguladoras de especial trascendencia en los procesos de 30 transcripcin gnica. As mismo, se ha reconocido su papel protagnico en la evolucin molecular de los genomas. Bsicamente existen dos grupos principales de elemen- tos mviles: los transposones y los retroelementos retro- transposones; estos ltimos constituyendo 90% de todos los elementos transponibles. La caracterstica trascendental de los retroelementos es que ellos se mueven mediante un me- canismo de copie y pegue, es decir, inicialmente se efecta la transcripcin del retroelemento a travs de una RNA poli- merasa y, luego, se lleva a cabo una transcripcin reversa del RNA a cDNA, empleando para ello una retrotranscriptasa. El cDNA as obtenido se inserta en una nueva posicin dentro del genoma hospedero. Los transposones, a diferencia de los retroelementos, se mueven mediante un mecanismo de corte y pegue, sin involucrar retrotranscripcin. Generalidades moleculares de los retroelementos Con base en la presencia o ausencia de LTRs (Long Ter- minal Repeats), los retroelementos se dividen en dos grupos principales. El primer grupo, aquellos que contienen LTRs, est constituido por los retrotransposones LTR, los retrotrans- posones tirosina recombinasa y los retrovirus endgenos. El segundo grupo, correspondiente a aquellos retroelementos que carecen de LTRs, incluye a los LINEs (Long Interspersed Nuclear Elements), los SINEs (Short Interspersed Nuclear Elements) y los pseudogenes procesados (Figura 2-1). A los retrovirus endgenos y a los LINEs se les denomina tambin retroelementos autnomos, en virtud de que ellos codican para las protenas que necesitan para su replicacin y trans- posicin. A los SINEs y a los pseudogenes procesados, en cambio, se les denomina retroelementos no autnomos, pues se ha sugerido que ellos requieren de la maquinaria enzim- tica de los LINEs para moverse dentro del genoma. 31 Es importante mencionar que en el argot biomdico gene- ral, los retrovirus se clasican como endgenos y exgenos. Los primeros corresponden a aquel tipo de retroelementos que estn insertos en el genoma y, por lo tanto, se nace con ellos, se vive con ellos y se los transmitimos a nuestros hijos. As, todos los humanos llevamos secuencias de retrovirus endgenos como una parte de nuestro genoma. Figura 2-1. Distribucin del contenido de el ementos transponibles y no transponibles en el genoma humano. Los retrovirus exgenos son aquellos que el individuo puede adquirir en el transcurso de su vida. Por ejemplo el virus linfotrpico de clulas T humano (HTLV) se ha clasi- cado como un retrovirus exgeno; as mismo, se ha incluido en este grupo al denominado virus de la inmunodeciencia 32 humana (HIV). Debe aclararse que exgeno no indica que puedan vivir fuera de la clula; el trmino se acu para indicar que provienen del exterior del organismo del indi- viduo al cual pueden infectar, pero siempre requieren de la maquinaria bioqumica celular y realizan toda su actividad metablica al interior de la clula, es decir, son intracelulares de manera constante. Los retrovirus endgenos pueden poseer marcos abier- tos de lectura para diversas protenas, de forma idntica a los exgenos. Ellos contienen el gen gag que codica, entre otras, para una protena estructural con capacidad de unin a cidos nucleicos; y un gen pol, que codica para una poli- protena con actividad proteasa, retrotranscriptasa, RNAasa H e integrasa. El rasgo caracterstico y fundamental de los retrovirus endgenos que los diferencia de los dems retro- elementos con LTRs, es que ellos poseen un gen adicional que codica para la protena de envoltura env, que les conere la capacidad potencial de llevar a cabo una transposicin entre clulas y entre individuos, es decir, que esta protena permite el empaquetamiento del material gentico y dems protenas necesarias para el virus, formando una partcula viral como tal, que puede salir de la clula donde ha sido generada y conquistar otras. 33 Figura 2-2. Organizacin estructural desde el punto de vista gnico y proteico de los diversos tipos de elementos transponibles autnomos. En la Figura 2-2 se compara el contenido y la funcionalidad de las diferentes protenas constituyentes de los diversos tipos de elementos transponibles autnomos; y en la Tabla 2-1 se especica la funcin de cada protena codicada por el gen gag, pol y env de retrovirus endgenos y exgenos. A simple vista llama la atencin la similitud del contenido proteico entre un retrovirus endgeno y un retrovirus exgeno. 34 Tabla 2-1. Constituyentes proteicos de las partculas retrovirales
Asimismo, es importante enfatizar que los retrovirus endgenos se han encontrado en todos los genomas de or- ganismos vertebrados y constituyen alrededor de 8,3 % del genoma humano, es decir, que nacemos y vivimos con una proporcin altsima de ellos, alrededor de cinco veces ms que las secuencias que codican para protenas. Algunos de estos retrovirus endgenos son biolgicamente activos y multiplicidad de investigaciones han mostrado que, si bien la mayora de los genes de retrovirus endgenos humanos son defectuosos para movilizarse, su secuencia puede ser funcional para la clula; unos pocos de ellos an contienen genes con marcos abiertos de lectura, especialmente los genes env, para los cuales se ha evidenciado un signicativo nivel de transcripcin en diversos tejidos provenientes de indivi- duos sanos (Figura 2-3), lo que sugiri inicialmente, y luego 35 se comprob, que los retrovirus endgenos juegan un papel importante en la bioqumica y siologa celular normal. Figura 2-3. Niveles de transcripcin de los genes de cpside env de retrovirus endgenos en tejidos humanos de 19 individuos sanos. Tcnica: PCR cuantitativo en tiempo real. Cada valor se expresa como el valor promedio con relacin al valor obtenido para un plsmido de control evaluado en cada experimento de PCR. Los valores fueron corregidos con base en el contenido de RNA total de cada extracto de tejido empleando el transcripto 18S como control interno. LSP: linfocitos de sangre perifrica; env: protena de cpside. K, T, W, FRD y R: familias de retrovirus endgenos cuya expresin de la protena env se evalu. Figura construida a partir de los datos publicados en Parseval, N., et al. Survey of human genes of retroviral origen: identication and transcriptome of the genes with coding capacity for complete envelope proteins. Journal of Virology, 77, 10414-10422, (2003). Otros estudios han mostrado que el gen env no solo se transcribe sino que su producto proteico puede jugar un papel importante en diversos procesos siolgicos del hospedero, entre ellos la proteccin contra infecciones por retrovirus ex- genos a travs de la interferencia con receptores; la proteccin 36 del feto contra el sistema inmune materno a travs de un efecto inmunosupresor local; y la morfognesis placentaria. Otras funciones siolgicas importantes de los retrovirus endgenos se describen en el prximo captulo. Los retroelementos tuvieron y tienen inuencia sobre la evolucin de los genomas de las especies Los retroelementos, incluyendo los retrovirus endge- nos, son abundantes en el genoma y generan variabilidad y plasticidad genmica, pues ellos tienen la capacidad de recombinarse entre s gracias a sus homologas parciales. De igual forma, a travs de eventos de retrotransposicin pueden generar retrogenes y retro-pseudogenes, facilitan- do las duplicaciones gnicas. La duplicacin se presenta cuando la retrotranscriptasa, enzima caracterstica de los retroelementos, sintetiza una secuencia de DNA a partir de una secuencia de RNA. La cadena nucleotdica de DNA as formada se integra al genoma, empleando para ello otra enzima caracterstica de los retroelementos, la integrasa. De esta forma hay una duplicacin estructural y funcional, pues estos nuevos genes insertados conservan la informacin de los inicialmente transcritos, pero adicionalmente tienen la posibilidad de adquirir nuevas funciones celulares. Un ejemplo de lo anterior son los SINEs, que ocupan aproximadamente el 15% del genoma. Los SINEs son secuen- cias amplicadas derivadas de RNAs pequeos nucleares o de RNA de transferencia que no se traducen a protenas, pero que tienen propiedades estructurales y enzimticas. Otro grupo de genes procesados proviene de RNAs mensajeros maduros, que se caracterizan por carecer de intrones y de secuencias promotoras, pero mantienen el resto de secuencia que codica para la protena. A pesar de no tener la regin promotora, muchos de ellos se transcriben debido a que su 37 reubicacin genmica los ha colocado bajo el control de otros promotores o de LTRs retrovirales con actividad promotora que estn dispersos por todo el genoma. De este modo los retrogenes a menudo se expresan en distintos tipos de clulas o en diversos momentos del desarrollo celular con respecto a los genes parentales, por lo que pueden tener funciones alteradas o completamente nuevas. Los retro-pseudogenes, son genes aparentemente no operativos, no obstante, a pesar de poseer mutaciones puntuales, inserciones o deleciones, no pueden calicarse de inactivos, pues muchos de ellos se transcriben y en ocasiones se traducen, aunque se desconocen las posibles funciones de sus productos. Inicialmente, se pens que los retrovirus endgenos es- taban presentes a partir de los animales vertebrados y que durante el curso de la evolucin sus progenitores exgenos se insertaron en las clulas de la lnea germinal, convirtin- dose as en retrovirus endgenos. Un inconveniente a esta creencia es la dicultad de la ocurrencia de este hecho a nivel somtico, y que luego infecten la lnea germinal. Otro inconveniente es que la infeccin de la lnea germinal no es un evento frecuente y para explicar su incorporacin all, en proporcin similar a la somtica, debieron ocurrir muchos sucesos de este tipo, a juzgar por la existencia de diversas familias de retrovirus endgenos humanos poco relacionadas entre s. Adems, cada una de ellas presenta secuencias ho- mlogas en otros grupos de animales, incluidos los primates, lo cual es extrao, porque no es fcil que un grupo de retro- virus infecte al mismo tiempo varias especies tan diversas. Igualmente, ya se ha reportado que los retrovirus endgenos estn presentes en otros grupos de animales como Artrpodos y Nematodos. Esto hace suponer que estn en casi todos los organismos eucariotas complejos, constituyendo un grupo monoltico. 38 En Drosophila se ha demostrado que el retrovirus end- geno gypsy y osvaldo producen viriones que pueden infectar, hecho que tambin se ha demostrado en plantas. Una parti- cularidad es que cada especie presenta cantidades y locali- zaciones de retrovirus en sus genomas de manera especca, es decir, es caracterstica de cada especie, sugiriendo que el proceso evolutivo de los retroelementos en general fue tam- bin especco en cada especie. Esto explica la universalidad de estos elementos y a la vez la especicidad, propia de la dinmica evolutiva de cada especie. La especicidad explica que concuerden las comparaciones lognticas de la familia de retrovirus endgenos con la logenia de los organismos que los presentan. Por ejemplo, los primates tienen familias de retrovirus endgenos especcas, y algunos miembros de la superfamilia de retrovirus endgenos humanos K (HERV-K) son nicas de la especie humana. Igualmente los chimpancs y gorilas tienen otros miembros de retrovirus endgenos que no se encuentran presentes en humanos. En trminos generales, la universalidad de los retrovirus se explica porque la retrotranscripcin tiene un origen comn, desde la clula primigenia, lo cual permite comprender por qu se encuentran retrovirus endgenos muy similares en es- pecies muy alejadas evolutivamente. Es la misma explicacin de por qu se encuentran familias de genes codicantes de protenas genes homlogos- en diferentes especies tambin muy alejadas en la evolucin, por ejemplo, la leptoglobina en plantas y la hemoglobina en animales. En el contexto de los retrovirus, el ejemplo caracterstico de este hecho son las 22 familias de retrovirus endgenos identicadas actualmente en los humanos, de las cuales algunas se encuentran en espe- cies muy alejadas logenticamente, aunque la mayora son particulares de los primates. Las familias HERV-I y HERV-E, estn en todos los vertebrados, mientras que HERV-L se 39 encuentra en todos los placentarios, es decir, desde antes de la radiacin de los mamferos. Estos ejemplos nos permiten pensar que la retrotrans- cripcin es un evento inherente a la formacin de la clula, evolucion junto con ella y a la par de ella. Por esta razn, se ha hipotetizado que los virus, como el fusellovirus de Ar- chaea o el virus mycoplasma L3, podran haber participado en el origen de la clula eucarionte. Se cree que estos virus participaron en la unin de bacterias primitivas para formar las primeras clulas eucariotas. Igualmente, los genes rela- cionados con la replicacin en eucariotes pudieron derivarse de genes relacionados con estas funciones en los virus. El proceso bsico de retrotranscripcin ocurre por igual en la lnea germinal y somtica, pues el mecanismo molecular ha sido comn desde los inicios de la vida y es un proceso inherente a la evolucin de las especies. Durante la evolucin, los elementos mviles ligados a la retrotranscriptasa fueron adquiriendo otros elementos funcionales, hasta convertirse en retrovirus endgenos. Solo en etapas avanzadas de la evolucin se convierten en retrovirus exgenos cuando adquieren la capacidad de salir de la clula. La universalidad y la especicidad estructural de estos elementos ha permitido utilizarlos como marcadores evolu- tivos. Por ejemplo, cuando se analizan logenticamente dos especies de animales diferentes y en ambos se encuentra un retrovirus integrado en el mismo sitio dentro del genoma, se ha interpretado el hecho como que las dos especies compar- ten un ancestro comn, pues la probabilidad de integracin independiente y exacta en un mismo sitio genmico es muy escasa. Por esto, los retrovirus endgenos se emplean como instrumentos de investigacin en la separacin evolutiva de los humanos y los grandes primates africanos, pues algunos provirus estn solamente en especies de simios, mientras que 40 otros son exclusivos de humanos. Sin embargo, hay que ser prudente en la interpretacin o en la generalizacin de estos aparentes nicos hallazgos, pues el hecho de que no estn no signica que no estuvieron en el pasado inmediato una secuencia nucleotdica se puede perder a travs de la denomi- nada segregacin allica o a la prdida de locus provirales. Para eliminar un provirus jo del genoma de la poblacin, por ejemplo del ancestro comn de dos especies, deben ocurrir procesos de recombinacin y deleciones intracromosomales. De acuerdo con el anterior concepto, los actuales retrovirus activos que se encuentran en el genoma humano y que estn en un sitio distinto al del chimpanc, pudo deberse a que se movieron despus de la divergencia entre las dos espe- cies. As, al analizar la presencia de los retrovirus endgenos en el genoma, la insercin en sitios diferentes no descarta el que tengan un ancestro comn. En general, la actividad de los retroelementos y retrovirus endgenos responde a las condiciones ambientales. Por esto, el movimiento de estos elementos puede ocurrir de manera brusca en las poblaciones y contribuir a procesos evoluti- vos de las especies de manera importante. Signica que los cambios genmicos generados por ellos no son graduales, sino que aparecen en oleadas, coincidiendo con situaciones ambientales crticas. Por ejemplo, existe una hiptesis que sugiere que los elementos transponibles fueron responsables de la aparicin casi simultnea de diversidad de especies en el Cmbrico. En la as llamada explosin del Cmbrico, aparecieron por primera vez cincuenta grandes grupos de organismos (los), sin que existieran en muchos casos antecesores evidentes. Este fenmeno no puede explicarse exclusivamente con base en la teora de Darwin. La capacidad de responder ante factores del medio ambiente, as como su capacidad de movilidad dentro del 41 genoma y la abundancia relativa de los retroelementos en los genomas de todas las especies, determina que lo carac- terstico del proceso evolutivo sea la inestabilidad gentica. El motor de dicho proceso es la duplicacin, la mutacin y la movilidad de genes o de segmentos el denominado ba- rajamiento genmico que lleva a la activacin, inactivacin o modicacin en la expresin de genes o grupos de genes segn los requerimientos de adaptacin celular en respuesta a los estmulos del entorno. La inestabilidad gentica depende de varios factores, entre ellos, los distintos sistemas de reparacin y/o recom- binacin del DNA y la presencia de elementos mviles. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que cuando los genomas de las especies ya se han estabilizado, es decir, que la especie se reproduce como especie, con caractersticas fenotpicas y genotpicas denidas y constantes, los movimientos in- controlados de los elementos transponibles originarn caos o alteraciones metablicas celulares signicativas, con el desarrollo consecuente de enfermedad, e incluso la muerte para el individuo. Esto hace suponer que el movimiento y la actividad de los diferentes elementos transponibles necesa- riamente tienen que estar namente controlados por meca- nismos desarrollados durante miles de aos de evolucin de los distintos genomas. Estos mecanismos an no se conocen plenamente. Reexiones sobre la evolucin de los retrovirus endgenos El problema del origen y evolucin de los virus ha sido histrica y sutilmente evitado por los bilogos evolucionistas que estudian el origen de la vida. Ha habido multiplicidad de debates acerca de si los virus surgieron antes, durante o despus de la primera clula, hace ms de 3.500 millones de aos. 42 Con respecto al origen de los retrovirus endgenos, han surgido dos hiptesis principales, diametralmente opuestas: una es la opinin de investigadores que sugieren el origen exgeno de ellos, considerando que los virus exgenos infectaron las clulas germinales de cada especie y que, posteriormente, perdieron la capacidad de vivir en forma independiente del genoma humano, es decir, perdieron la capacidad de vivir como virus exgenos, y se convirtieron en elementos indispensables en el genoma, a tal punto que su remocin conducira a la extincin de una especie, incluida la humana. Pero con esta hiptesis, cmo explicar entonces, sin caer en contradicciones, que un retrovirus exgeno invade una especie y de repente se vuelve trascendental para la existencia de esa especie, dado que si se elimina el retrovirus la especie se extingue? Los que deenden esta versin se apoyan en la idea del parasitismo pandmico, sealando que los retrovirus pueden seleccionar a la poblacin husped y evolucionar en conjunto con los sobrevivientes. Consideran que dicha relacin se mantiene gracias a un mutualismo o fuerza evo- lutiva de simbiosis, conocida como simbiognesis. Resaltan como ejemplo el origen de las mitocondrias y los cloroplastos, los cuales permiten a los eucariotas utilizar oxgeno como aceptor de electrones para la obtencin de energa y a las plantas captar energa solar, respectivamente. Consideran que la seleccin natural, al operar a nivel individual en la simbiognesis, acta sobre ambos organismos en los que adapta una estrategia evolutiva estable. Sin embargo, la anterior hiptesis no hace ningn esfuerzo por sugerir por qu los retroelementos existen en todos los organismos a lo largo de la escala evolutiva y los retrovirus en todos los vertebrados, y en todos ellos cumplen funciones 43 vitales para el organismo y la especie cmo es que algo tan complejo como la placentacin y toda su intrincada - siologa depende sbitamente de los retrovirus que invaden un vertebrado en particular? Una segunda hiptesis con respecto al origen de los retro- virus endgenos, la cual tiene mucha ms lgica bioqumica, es aquella que involucra al mecanismo de retrotranscripcin como parte fundamental del origen y la evolucin de la vida. En este proceso evolutivo, la enzima retrotranscriptasa form parte de las molculas complejas que dieron origen a la vida, evolucion junto con esta, y todos los mecanismos derivados de su actividad estn presentes desde los mismos orgenes de la vida hasta nuestros das. As, a travs del tiempo, la enzima fue adquiriendo actividades enzimticas adicionales como RNAasa H y dominios integrasa y proteasa. La evidencia a favor de esta segunda hiptesis es que la retrotranscriptasa de todos los retroelementos tiene cierta homologa aminoacdica y es ubicua en todos los organismos, lo que permite inferir que esta enzima tuvo un origen evolutivo comn. As mismo, la actividad de retrotranscripcin se presenta en todos los organismos vivos y es de resaltar que en el genoma humano existen aproximadamente 350 genes que codican para re- trotranscriptasas; no obstante, muy pocas de ellas han sido ampliamente caracterizadas. Entre las retrotranscriptasas que se han descrito ampliamente en la literatura est la telomerasa, implicada en el alargamiento de los telmeros cromosomales. De tal forma, tiene ms coherencia pensar que la retro- transcripcin es un proceso que siempre ha estado presente en la vida; desde sus orgenes en el denominado mundo RNA, ha evolucionado de lo simple a lo complejo y en este trnsito ha generado diversos retroelementos, igualmente 44 desde simples hasta complejos, es decir, desde los retrones hasta los retrovirus endgenos. El pensamiento antes mencionado es opuesto al descrito al comienzo, pues se apoya en la hiptesis del proceso evolutivo. Inicialmente se origina el gen que codica para la enzima retrotranscriptasa, luego los retroelementos, posteriormente los retrovirus endgenos y, paralelamente, o en un evento posterior, los retrovirus exgenos, cuando los endgenos adquieren la capacidad de ensamblar sus protenas y empa- quetarlas dentro de una cpside proteica codicada por el gen env, formando as partculas virales con plena capacidad de salir de la clula y conquistar otras. Este proceso se da simultneamente con la evolucin de los organismos y de las especies, es causa y a la vez efecto de su evolucin. Slo de esta manera se entiende bien que la seleccin natural acte a nivel de ambos aspectos, relacionndolos en un mutualismo simbitico a nivel molecular: el genoma del organismo y los retroelementos. Incluso, es probable, teniendo en cuenta las hiptesis del mundo RNA, que primero se hubiesen originado virus con genoma RNA y luego los de DNA, antes de la aparicin de los eucariotas. En este sentido, una reliquia evolutiva y evidencia importante del trnsito de virus RNA a DNA es el virus de la hepatitis B. Este virus tiene un genoma DNA, pero conserva el mecanismo de retrotranscripcin para replicarse. Es decir, la evolucin de genes independientes de genomas celulares se ha puesto de maniesto desde los mismos orgenes de la clula procariota, por lo cual los virus son entidades intracelulares obligadas, que evolucionaron junto con la clula procariota, desarrollando funciones vitales para ella. Esto, en parte, explica que 80% de los genes virales no tienen su contrapartida en las bases de datos genticas de eucariotas. 45 Por otra parte, es importante tener en cuenta que la trans- ferencia horizontal de genes, ampliamente desarrollada en el mundo procariota, dependi y depende actualmente del em- pleo de agentes virales como mecanismo de transduccin de la informacin gentica en pro de la adaptacin favorable de las bacterias hacia condiciones adversas medioambientales. As, compartir secuencias gnicas funcionales al incorporarlas en las secuencias gnicas virales acta como un mecanismo de adaptacin rpida y de carcter poblacional, a diferencia de los fenmenos de conjugacin y transformacin, ms es- peccos y limitados. La cantidad de informacin contenida en los genomas vricos es asombrosa, portando todo tipo de secuencias tiles, desde las de produccin de quitina y cido hialurnico hasta aquellas implicadas en procesos fotosintti- cos y de motilidad celular. A este respecto se ha considerado que toda la diversa informacin gentica bacteriana est con- tenida y representada en el conjunto de los viromas, siendo as una informacin completamente transferible. La transferencia horizontal de genes parece haber sido un mecanismo muy activo e importante en la conguracin del mundo procariota. De tal forma, anlisis comparativos de mecanismos de obtencin de energa y otros procesos celula- res revelan una complicada trama logentica generada por reiterados eventos de transferencia horizontal de genes y no tanto con los procesos de divergencia vertical. Este proceso debi ser fundamental para establecer la actual versatilidad de los microorganismos eucariotas y para el establecimiento de las pautas de los ecosistemas, desde el punto de vista biol- gico, funcional, molecular y evolutivo. Desde esta perspectiva es fcilmente observable la trascendental importancia de los retrovirus endgenos y luego de los exgenos, al poder llevar stos la informacin gentica fuera de la clula. 46 En conclusin, la retrotranscripcin es un mecanismo ligado a los orgenes de la vida, a partir de la cual los retro- elementos evolucionaron hasta conformar los retrovirus en- dgenos. Durante este proceso evolutivo, algunos se hicieron independientes en la medida en que adquirieron nuevos elementos bioqumicos que les permiti moverse fuera de la clula para conquistar otros rganos del individuo, y su mxima independencia la adquieren cuando pueden, for- tuitamente, alcanzar otros individuos de la misma especie o de especies diferentes. Es slo en esta segunda etapa de in- dependencia cuando se podran considerar como intrusos genmicos y/o retrovirus exgenos. Todo lo mencionado hasta el momento, permite armar que la visin que enfatiza la relacin de retrovirus endge- nos con los genomas como una simple relacin de parsito- hospedero, no es una hiptesis coherente. Bibliografa 1. Aagaard L, Villesen P, Kjeldbjerg AL, Pedersen FS. The approximately 30-million-year-old ERVPb1 envelope gene is evolutionarily conserved among hominoids and Old World monkeys. Genomics. 2005;86(6):685-91. 2. Altman S. Nobel lecture. Enzymatic cleavage of RNA by RNA. 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Por ejemplo, en los ectodominios de la subunidad transmembranar (TM) de la protena env, existe una secuencia aminoacdica constituida por 17 aminocidos, denominada CKS-17 (Figura 3-1A), alta- mente conservada en retrovirus exgenos como el virus de la leucemia humana (HTLV-1), el virus de la leucemia murina 54 (MoMuLV), el retrovirus de simios Mason-Pzer (MPMV) y muchos otros, al igual que en el retrovirus endgeno humano HERV-FRD (Sincitina-2). Estudios de laboratorio realizados in vitro en cultivos ce- lulares e in vivo con animales, evidenciaron que el fragmento proteico conformado por la secuencia CKS-17 es indispen- sable para la funcionalidad de los retrovirus exgenos. Esta armacin se dedujo porque los resultados experimentales sugirieron que la secuencia CKS-17 no solo participa en la fusin y entrada del virus a la clula blanco, sino que tambin posee funciones inmunosupresoras; permitiendo especular que bajo condiciones celulares propicias inductoras de la replicacin viral (estrs celular, malnutricin, drogadiccin, etc.) esta regin proteica puede favorecer la evasin del ya menguado sistema inmunolgico del individuo infectado. Figura 3-1. A. Estructura gnica del retrovirus de la leucemia murina (MoMuLV). Se muestra el gen env y el dominio CKS-17 ubicado en la regin transmembranal (TM). B. Diagrama esque- mtico de las protenas codicadas por el gen env. SU: protena de supercie; TM: protena transmembranal; DIM: dominio in- munomodulador. El crculo rojo seala la posicin del fragmento peptdico constituido por 30 residuos (FP30) escogido para los anlisis comparativos estructurales. 55 Las anteriores observaciones fueron vistas al inducir la expresin de la protena env en clulas tumorales mediante la transfeccin del gen para que permanentemente su pro- ducto de expresin se ubicara en la membrana; y luego se trasplantaron dichas clulas en animales inmunocompeten- tes alognicos de la misma especie a la que pertenecan las clulas tumorales. En este caso, la expresin de la protena env del virus de la leucemia murina, del virus de simios Mason-Pzer o del retrovirus endgeno humano HERV-H en las lneas tumorales murinas, coincidi con una mejor proliferacin tumoral en los ratones a los cuales se les trans- plant las clulas. Esto se interpreta como si la protena env estuviese interriendo con los mecanismos de defensa del hospedero, explicando la mayor proliferacin respecto a las clulas control, tambin tumorales pero no transfectadas con el gen env. Sin embargo, un inconveniente en este tipo de experimentos es que no se puede correlacionar la cantidad de la expresin de la protena env bajo las condiciones de laboratorio usando vectores de expresin, con la cantidad de protena expresada en un proceso infeccioso natural. Es decir, en las condiciones experimentales descritas, donde se expresa una sola protena, en concentraciones no siolgi- cas, puede interferir con la funcionalidad de la clula o del sistema inmune del hospedero de manera muy distinta que cuando entra el virin completo a la clula. La razn es que los retrovirus tienen en sus genomas secuencias en cis regu- ladoras a las cuales se unen factores celulares para reprimir la velocidad de replicacin viral. Es fundamentalmente importante comprender que los retrovirus en general no cuentan con una maquinaria bio- qumica que los haga autnomos de la clula; en su lugar, se introducen en el genoma celular y se replican junto con la clula en condiciones estables, sin generar viriones. Para que 56 se produzcan viriones o se traduzcan ciertas protenas, se re- quiere que la clula lo induzca, ya sea de manera controlada, como es el caso de expresin de protenas en los retrovirus endgenos para cumplir procesos siolgicos normales, eventos descritos en el captulo Funciones siolgicas de los retrovirus endgenos; o de manera desordenada cuando la clula es sometida a condiciones de estrs como malnutricin, exposicin a xenobiticos por drogadiccin, entre otros. Estas condiciones de estrs son las que conllevan a la expresin de los viriones, su salida de la clula produciendo la muerte de sta y la infeccin de otras clulas. Lo mismo sucede en condiciones de laboratorio, cuando los animales son some- tidos a transplantes celulares como el descrito antes. En el experimento descrito, como slo se expresa la protena env, no se forman viriones y nicamente se le coneren ventajas a la lnea celular tumoral afectando al sistema inmune del hospedero. Este anlisis permite comprender que aunque los virus endgenos y exgenos poseen la protena env con dominios fusognicos e inmunosupresores, la actividad de tales domi- nios es diferente segn las condiciones en que se exprese: si es en la placenta, contribuye a la formacin del sincitiotrofo- blasto, si es en una clula tumoral, probablemente contribuya a la fusin celular y a generar ventajas evolutivas al formar un hbrido celular con mutaciones complementarias. Como se menciona en un captulo posterior, las protenas expresadas por estos virus tienen actividad funcional diferente depen- diendo del contexto en el que ocurra la expresin, pudiendo ser una funcin siolgica normal o siopatolgica. Por esto no es correcto decir que la secuencia peptdica CKS-17 es es- trictamente inmunosupresora, como lo mencionan algunos autores, es preferible denominarla inmunomoduladora dado que las clulas pueden modular la expresin de los retrovirus 57 endgenos con propsitos siolgicos bencos y normales; no obstante, puede haber una desregulacin en su expresin como por ejemplo en cncer y otras enfermedades sistmicas crnicas como la artritis reumatoidea, la diabetes, la obesidad o la hipertensin, favoreciendo el proceso patolgico. Para entender por qu la actividad de los dominios es diferente segn las condiciones en que se expresen, recor- demos que todas las protenas se componen de elementos arquitectnicos, llamados dominios proteicos, que pueden ser identicados por las similitudes estructurales y funcionales entre unos y otros. Los dominios son unidades estructurales independientes en las protenas y muchas de ellas estn compuestas por uno o varios dominios; protenas que realizan tareas biolgicas muy diferentes pueden contener dominios proteicos idnticos. Todos los organismos vivos son similares a nivel molecular, 20 aminocidos con estereoisomera L, y los mismos nucletidos con el azcar, el fosfato y las 4 ba- ses nitrogenadas, sugiriendo que todos poseen un ancestro comn que adquiri esas caractersticas. Se cree que este proceso parte desde los orgenes de la vida misma, en espe- cial cuando se lleg a tener un material gentico funcional. A partir de entonces, su complejidad habra aumentado por el mecanismo de duplicacin de genes existentes, ms que por generacin de nuevo material gentico. Debemos comprender que la funcin de una protena es el resultado de las funciones de sus dominios, cambios en la estructura tridimensional de la protena lleva a cambios en la funcin, pues expone al entorno dominios diferentes los cuales interactuarn con otros dominios de otras protenas realizando as la funcin biolgica. Por esta razn, aunque los virus endgenos y exgenos poseen la protena env con dominios fusognicos e inmunosupresores, la actividad de 58 tales dominios es diferente segn las condiciones en que se expresen. Se considera que la mayora de las protenas que cata- lizan hoy en da las vas metablicas pueden haber surgido de la duplicacin de unos pocos genes. De esta manera, una copia puede proveer la funcin original necesaria, y la otra acumular las mutaciones que alteran esa funcin. Muchas veces las duplicaciones no dan lugar a nuevas protenas con nuevas funciones, sino que los genes duplicados conservan su funcin y siguen perteneciendo al grupo original in- paralogs mientras que los out-paralogs no. Por ejemplo, en el ser humano hay diversas copias del gen ras, implicado en transduccin de seales. Estas protenas conservan ms o menos la funcin original, aunque cada una se expresa en distintos tejidos, bajo distintas condiciones, son in-paralogs. Por otra parte, las protenas rab son parientes de ras, y son out-paralogs. Todo lo anterior implica que la funcin de los diferentes dominios proteicos depende de la estructura y el contexto bioqumico donde se encuentra la molcula. Con base en este conocimiento, no se puede asignar fun- ciones universales a un dominio cuando se experimenta expresando solamente la protena env retroviral, por ejemplo, a cuando se introduce al organismo el retrovirus exgeno completo. Estos retrovirus se replican activamente, forman viriones y expresan protenas como env para poder fusionar clulas, infectar otras y escapar del control inmunolgico. Sin embargo, estos eventos se ven favorecidos solamente cuando las clulas del individuo estn bajo condiciones de estrs y el retrovirus sensa que la clula donde habita va hacia la destruccin; bajo otras condiciones, ellos no se replican, sino que permanecen silentes, insertos en el genoma, replicando su material gentico solamente cuando la clula se divide y duplica el suyo. 59 Similitudes estructurales de la secuencia inmunomoduladora de las protenas Env de retrovirus endgenos y exgenos Es interesante analizar la asombrosa similitud existente entre la estructura de los retrovirus endgenos y exgenos, especcamente con relacin a sus secuencias inmunomo- duladoras. An cuando la estructura primaria puede tener algunos puntos de divergencia signicativos con respecto a la identidad aminoacdica, la conservacin radica en la alta homologa de la estructura tridimensional; de hecho, esta caracterstica fue la que permiti identicar a travs de experimentos de mutagnesis dirigida la existencia de residuos crticos que coneren las propiedades fusognicas e inmunomoduladoras a esta regin proteica. La longitud de la secuencia aminoacdica para los anli- sis de homologa estructural mostrados a continuacin, se escogi teniendo en cuenta que sta incluyera el dominio inmunomodulador y las cistenas que generan el puente di- sulfuro caracterstico de la regin transmembranal (TM) de la protena env, el cual est presente en todos los retrovirus endgenos y exgenos conocidos, y en virus de otras fami- lias como el virus de la inuenza y el bola. Es importante recordar que el gen env codica para una cadena aminoacdi- ca que se hidroliza en dos protenas: la protena de supercie (SU), que participa en el reconocimiento del receptor; y la protena transmembranal (TM), que ancla todo el complejo env a la membrana de la clula blanco y es la directamente responsable de la fusin y entrada del virus (Figura 3-1B). En la Figura 3-2A se ilustra la alineacin y el anlisis de homologa en la secuencia FP30 y CKS-17 de las protenas env del retrovirus endgeno humano HERV-FRD (sincitina-2), y su equivalente murino (sincitina-B); y entre HERV-FRD y el 60 retrovirus de la leucemia murina (MoMuLV) y el retrovirus de la leucemia humana (HTLV-1). Figura 3-2. MoMuLV: virus de la leucemia murina; FeLV: virus de la leucemia felina; BLV: virus de la leucemia bovina; HTLV-1, virus linfotrpico T humano tipo 1; HTLV-2, virus linfotrpico T humano tipo 2; SRV-1, retrovirus de simio tipo 1; SRV-2, retrovirus de simio tipo 2; MPMV, virus Mason-Pzer de micos; HERV, retrovirus endgeno humano; PERV-C, retrovirus endgeno de cerdo. Sin- ticina-2: retrovirus endgeno humano FRD (HERV-FRD); Sincitina B: retrovirus endgeno de ratn; A. Azul: aminocidos idnticos entre las dos secuencias comparadas; verde oscuro: aminocidos conservados y/o sustitucin que se favorece; verde claro, amino- cidos semiconservados y/o sustitucin neutra. En letra amarilla se han resaltado aminocidos en posiciones importantes que los contienen otros retrovirus exgenos y endgenos con demostradas propiedades inmunosupresoras; en rojo se resalta la presencia de cistenas. A: La alineacin y los anlisis de conservacin se hicieron de manera manual, teniendo en cuenta el contexto de estructura secundaria donde se encuentra el aminocido. La numeracin se indica con respecto al motivo inmunomodulador (CKS-17). El por- 61 centaje de homologa se determin con la sumatoria de residuos idnticos y conservados. B. Azul fuerte indica una frecuencia del aminocido mayor al 80% entre las secuencias comparadas; azul moderado indica una frecuencia mayor al 60% e inferior o igual al 80%; azul claro indica una frecuencia mayor al 40% e inferior o igual al 60%; blanco indica una frecuencia inferior o igual al 40%. Las alineaciones fueron realizadas con el programa COBALT (Pa- padopoulos JS and Agarwala R., Bioinformatics 23:1073-79, 2007). C. Azul: aminocidos idnticos entre las dos secuencias com- paradas; verde oscuro: aminocidos conservados y/o sustitucin que se favorece; verde claro, aminocidos semiconservados y/o sustitucin neutra. La alineacin y los anlisis de conservacin se hicieron de manera manual, teniendo en cuenta el contexto de estructura secundaria donde se encuentra el aminocido. La numeracin se indica con respecto al motivo inmunomodulador (CKS-17). Homologa derivada NEF: azul: residuo aminoacdico comn con uno o ms retrovirus endgenos o exgenos; verde oscuro: residuo aminoacdico conservado o sustitucin favorecida con respecto a uno o ms retrovirus endgeno u exgenos; verde claro: residuo aminoacdico semiconservado o sustitucin neutra con respecto a uno o ms retrovirus endgeno u exgenos. Los residuos aminoacdicos indicados en naranja corresponden a los aminocidos que colocalizan en la estructura tridimensional de las Figuras 5, 6 y 7 paneles C. Los signicativos porcentajes de identidad y homologa en la estructura primaria del pptido analizado sugieren dos cosas fundamentales: primero, que existe un origen ancestral comn entre estos retrovirus; segundo, que este dominio ha de ser importante para la funcionalidad biolgica de estos agentes virales. Esto es probable debido a que un mecanismo importante en la evolucin ha sido la duplicacin de genes, como se mencion lneas arriba. Se debe recordar que todas las protenas poseen un ancestro comn desde los orgenes de la vida, produciendo variabilidad funcional por la duplica- cin de genes, ms que por la generacin de nuevo material gentico. 62 Es con base en este conocimiento que resulta difcil acep- tar que los retrovirus endgenos son parsitos que provienen de virus exgenos ancestrales y que se adaptaron para cum- plir cientos o miles de funciones importantes en organismos complejos como los vertebrados o mamferos. Hay cierta resistencia de algunos cientcos a aceptar la idea contraria, pero lo ms coherente desde el punto de vista bioqumico y evolutivo es que los virus exgenos salieron de la clula primigenia, se formaron junto con sta y han evolucionado a la par con las especies. La retrotranscripcin, presente desde los orgenes de la vida, ha evolucionado junto con la clula, los organismos y las especies. Los retroelementos y retrovirus son causa y a la vez efecto de la evolucin. Deberamos proceder a comparar las protenas de los retrovirus exgenos con los endgenos teniendo en cuenta que lo ancestral es lo endgeno. Signica que la funcin ancestral que realizan los retroelementos y retrovirus end- genos, es la funcin normal; en cambio, la de los exgenos, dado que conservan ciertos dominios similares los pueden utilizar para cumplir funciones necesarias para su replica- cin y conquista de distintos individuos de la especie. As, la funcin qued retenida en el genoma de los retrovirus exgenos y pas a las siguientes generaciones, acumularon mutaciones, generaron variacin y a la vez conservaron los procesos bioqumicos bsicos ya adquiridos. Este proceso se conoce como evolucin divergente variaciones de la misma protena, que tiene la misma funcin biolgica pero diferente secuencia. Qiz por esto, las similitudes en la secuencia o la estructura de una protena reejan la conservacin de toda la funcin o parte de ella; aunque protenas que son muy similares en estructura y secuencia pueden llevar a cabo fun- ciones distintas, y protenas con estructuras distintas pueden tener funciones idnticas. Esto depende fundamentalmente 63 del contexto molecular en que se encuentre la protena y la constante interaccin con las otras molculas. Sin embargo, en trminos generales, se sabe que la funcin y la estructura tridimensional estn ntimamente relacionadas. En la Figura 3-2B se muestra la identidad aminoacdi- ca entre 7 retrovirus endgenos (5 humanos, 1 murino y 1 porcino) y 8 retrovirus exgenos de diferentes especies, que amplan la observacin de este fenmeno y soportan su origen ancestral comn. Adicionalmente, no es suciente encontrar una estructura primaria signicativamente conservada para sugerir una fun- cionalidad biolgica comn. Es necesario tambin que haya homologa en la estructura tridimensional o conformacional. En las Figuras 3-3(1 y 2) se superponen las estructuras con- formacionales secundarias del retrovirus endgeno humano HERV-FRD (sincitina-2) con los retrovirus exgenos MoMuLV y HTLV-1. Como puede observarse, la similitud tridimensio- nal es tambin signicativamente alta, lo que aporta mayor evidencia con respecto a su origen evolutivo comn. Ahora bien, los estudios de relacin estructura-actividad de la secuencia CKS-17 revelaron que en los 10 primeros residuos, ubicados hacia el extremo N-terminal, radicaba la funcin inmunomoduladora; de forma interesante, como puede observarse en la Figura 3-2B, esta es la zona ms con- servada en las estructuras primarias de diversos retrovirus exgenos y endgenos. Estudios adicionales revelaron que un pptido sinttico con la secuencia LDLLFL (posicin 7 a 12) inhiba la linfoproliferacin estimulada con interleuqui- na-2 (IL-2) y ligandos del correceptor CD3, sugiriendo ello que en esta secuencia podra radicar la actividad biolgica mencionada. Otras investigaciones realizadas recientemente mostraron que los residuos en la posicin 14 tambin son importantes: 64 cuando se sustituye la glutamina (Q) por una arginina (R) en la sincitina-2 o en la protena env del virus Mason-Pzer de simios; o se cambia el cido glutmico (E) por una arginina (R) en el virus de la leucemia murina, el efecto inmunomodulador se anula. No obstante, la presencia de un aminocido como la lisina, cargado positivamente al igual que la arginina, no altera el efecto biolgico, tal como lo demostraron los estudios in vivo con la protena env del retrovirus endgeno humano H (HERV-H). Llama la atencin que el cido glutmico, la glutamina y/o la lisina son residuos altamente conservados en esta posicin entre todos los retrovirus endgenos y exgenos. 65 Figura 3-3. Superposicin estructural conformacional del fragmento proteico FP30 del retrovirus endgeno humano HERV-FRD (Sincitina-2) con el: 1. Fragmento FP30 del ret- rovirus exgeno MoMuLV (virus de la leucemia murina). Panel A. Superposicin del esqueleto peptdico. En amarillo la estructura de HERV-FRD y en azul la estructura MoMuLV; Panel B, superposicin del esqueleto peptdico y las cadenas laterales aminoacdicas. Panel C. Superposicin del esqueleto peptdico coloreado segn el contenido de estructura secundaria. Rojo: alfa- hlices; gris: coil. 2. Fragmento FP30 del retrovirus exgeno HTLV-1 (virus de la leucemia humana). Panel A. Superposicin del esqueleto peptdico. En amarillo la estructura de HERV-FRD y en azul la estructura deHTLV-1. Panel B, superposicin del esqueleto peptdico y las cadenas laterales aminoacdicas. Panel C. Superposicin del esqueleto peptdico coloreado segn el con- tenido de estructura secundaria. Rojo: alfa-hlices; gris: coil. 3. Fragmento equivalente de la protena nef del virus de la inmunodeciencia humana (VIH). Se resaltan en color las regiones de alta homologa indicadas en la Figura 3-2 C. Panel A: superposicin del esqueleto peptdico. En amarillo, HTLV-1; en 66 rojo VIH; Panel B: superimposicin del esqueleto peptdico. En azul aminocidos comunes entre las dos estructuras; verde oscuro, residuos aminoacdicos conservados o sustituciones favorecidas; verde claro, residuos aminoacdicos semiconservados o sustitu- ciones neutras. Panel C: superposicin del esqueleto peptdico ms las cadenas laterales de los correspondientes aminocidos. Las convenciones de color son iguales a las del panel B. En naranja se indica la colocalizacin espacial del residuo en posicin 14, in- dicada en la Figura 3-2 C para ambas secuencias. 4. Fragmento equivalente de la protena nef del virus de la inmunode- ciencia humana (VIH). Se resaltan en color las regiones de alta homologa indicadas en la Figura 3-2 C. Panel A: superposicin del esqueleto peptdico. En amarillo, MoMLv; en rojo, VIH; Panel B: su- perposicin del esqueleto peptdico. En azul, aminocidos comunes entre las dos estructuras; verde oscuro, los residuos aminoacdicos conservados o sustituciones favorecidas; en verde claro los residuos aminoacdicos semiconservados o sustituciones neutras. Panel C: superposicin del esqueleto peptdico ms las cadenas laterales de los correspondientes aminoacidos. Las convenciones de color son iguales a las del panel B. En naranja se indica la colocalizacin espacial del residuo en posicin 14, indicada en la Figura 3-2 C para ambas secuencias. 5. Fragmento equivalente de la protena nef del virus de la inmunodeciencia humana (VIH). Se resaltan en color las regiones de alta homologa indicadas en la Figura 3-2 C. Panel A: superposicin del esqueleto peptdico. En amarillo, HERV-FRD; en rojo, VIH. Panel B: superposicin del esqueleto peptdico. En azul, aminocidos comunes entre las dos estructuras; verde oscuro, residuos aminoacdicos conservados o sustituciones favorecidas; verde claro, residuos aminoacdicos semiconservados o sustituciones neutras. Panel C: superposicin del esqueleto peptdico ms las cadenas laterales de los correspondientes aminoacidos. Las convenciones de color son iguales a las del panel B. En naranja se indica la colocalizacin espacial del residuo en posicin 14, indicada en la Figura 3-2 C para ambas secuencias. 6. Superposicin conformacional de aminocidos responsables de la actividad inmunomoduladora de las protenas env del HTLV-1, MoMuLV y HERV-FRD y de la protena nef del VIH. Los aminocidos mostrados son los equivalentes a las posiciones 7 a 12 y 14 del pptido CKS-17 en cada protena. En cada pnel (A,B y C) se muestra la superposicin desde ndulos diferentes. Los 67 aminocidos estn coloreados segn las siguientes propiedades: amarillo: polar; rojo: polar cido, azul: polar bsico; gris: no polar. 7. Superposicin coformacional de aminocidos respons- ables de la actividad inmunomoduladora de las protenas env del HTLV-1, MoMuLV y HERV-FRD y de la protena nef del VIH (segunda regin homloga). Los aminocidos mostrados son los equivalentes a las posiciones 7 a 12 y 14 del pptido CKS-17 para las protenas env del HTLV-1. MoMuLV y HERV-FRD. Para la protena nef del VIH se la secuencia homloga L 110 D 111 L 112 W 113 I 114 Y 115 y Q 114 (numeracin basada en la secuencia que reposa en el PDB, cdigo de acceso 1avv). En cada pnel (A, B y C) se muestra la superposicin desde ndulos diferentes. Los aminocidos estn coloreados segn las siguientes propiedades: amarillo: polar; rojo: polar cido, azul: polar bsico; gris: no polar. Para realizar la superimposicin se empleo el programa Swiss-PDB viewer, V.4.01, 2008. (Guex, N. and Peitsch,M.C. SWISS-MODEL and the Swiss-PdbViewer: An environment for comparative protein modeling. Electrophoresis 18, 2714-2723. (1997). Los cdigos de acceso al PDB RCSC son los siguientes: Para 1: 1mof, 1y4m. Para 2: 1mg1, 1y4m. Para 3: 1mg1, 1avv. Para 4: 1mof, 1avv. Para 5: 1y4m, 1avv. Para 6: 1mof, 1y4m, 1avv, 1mg1. Para 7: 1mof, 1y4m, 1avv, 1mg1. Todo lo anterior evidencia una correlacin importante entre la actividad inmunomoduladora de estas regiones proteicas y su estructura qumica bajo condiciones experi- mentales de laboratorio. Con base en estudios in vivo, se conoce que algunos re- trovirus endgenos humanos como HERV-R, HERV-P(b) y HERV-V poseen actividad inmunomoduladora, a pesar de que sus dominios CKS-17 carecen de algunas de las propiedades estructurales de la sincitina-2. Si bien, los retrovirus HERV-R y HERV-V se expresan en la placenta, no han sido conservados de manera estricta a travs de la evolucin, habindose suge- rido entonces que pueden tratarse de sincitinas degeneradas que conservan la funcin siolgica de sta. 68 Es importante mencionar que el retrovirus HERV-R no solamente se expresa signicativamente en la placenta, tam- bin lo hace en linfocitos de sangre perifrica y en diversidad de tejidos. Probablemente este retrovirus est implicado en funciones siolgicas relacionadas con la proteccin hacia eventos autoinmunes. Se sabe que debido a las limitaciones sicoqumicas y energticas del plegamiento proteico, probablemente hay un nmero limitado de conformaciones en la naturaleza. Qizs esto explique por qu existen, por ejemplo, familias de enzimas evolutivamente diferentes con funciones no relacio- nadas, pero que comparten una estructura comn, aunque la similitud estructural no necesariamente implica una relacin evolutiva. Sin embargo, la mayora de los plegamientos tienen una familia homloga relacionada y se considera bsicamente como un plegamiento funcional. As, determinar los dominios de las protenas de los re- trovirus endgenos y compararlas con la de los exgenos sirve para tener una idea de la funcin de la protena, o una correlacin entre la organizacin de dominios y las distintas funciones. Este tipo de comparaciones en general son muy utilizadas para estudiar la funcin de protenas en la clula eucariota. Por ejemplo, el dominio CARD, presente en di- versidad de macromolculas proteicas, entre ellas quinasas, caspasas y otras, es un dominio de interaccin intermolecular con dominios de otras protenas. As mismo, al analizar la es- tructura de las protenas responsables de almacenar oxgeno o de su transporte (mioglobina, hemoglobina y leghemoglo- bina) se observa una estrecha relacin de su estructura y su funcin biolgica. El dominio inmunomodulador CKS-17 presente en retrovirus endgenos se encuentra en la protena nef 69 del VIH, sin embargo, no estamos inmersos en inmunosupresin constante. El dominio inmunomodulador CKS-17 tambin se en- cuentra en la protena nef del VIH y algunos investigadores la han propuesto como una molcula inmunosupresora implicada en el desarrollo del Sida. Esta apreciacin la basan en correlacionar la infeccin con cepas del VIH que presentan deleciones en el gen nef y la ausencia de signos de Sida en los pacientes infectados. Un inconveniente a esta correlacin es que el gen nef es altamente conservado en los retrovirus de primates y tiene alta homologa en retrovirus endgenos y exgenos de diversas especies (Figura 3-2C). La incongruen- cia radica en que al estar presente en retrovirus endgenos no se correlaciona con eventos siopatolgicos explicados slo por la presencia de esta protena. Igualmente, animales o individuos infectados con retrovirus exgenos no muestran una correlacin directa entre la expresin de la protena nef y la aparicin de los sntomas, aun cuando la protena se pueda localizar en el citoplasma celular, en la membrana o incluso encontrarse en el suero de individuos infectados. Qeda difcil explicar eventos siopatolgicos relacio- nados con la actividad de los retrovirus endgenos u ex- genos slo con analizar la funcin de una nica protena. Eventos tan complejos nicamente se entienden si se analiza el conjunto de las variables implicadas que impactan en los sistemas de defensa de los individuos: malnutricin, estrs celular, drogadiccin, presencia de otros agentes infecciosos, as como las condiciones genticas y epigenticas de la per- sona. Estas variables explican la susceptibilidad individual y la expresin normal o anormal de los retrovirus endgenos o exgenos. Al comparar la estructura tridimensional de la regin FP-30 de la protena nef con las regiones equivalentes de 70 protenas env de retrovirus endgenos y exgenos, se evi- dencia que las regiones de mayor homologa en la estructura primaria (Figura 3-2C) son tambin las de mayor homologa tridimensional, observndose una superposicin entre ellas como se aprecia en la 3-3 (3,4 y 5). Estas regiones son aquellas que resultaron ser las ms relevantes para la funcin inmuno- moduladora en los estudios de relacin estructura-actividad descritos antes. En los paneles C de las Figuras 3-3(3,4 y 5) se resalta la colocalizacin de los residuos de la posicin 14. Con el n de hacer una comparacin mucho ms detallada y observar de cerca la homologa estructural de las regiones aminoacdicas caracterizadas por ser las ms relevantes en impartir una funcin inmunomoduladora, en la Figura 3-3(6 y 7) se superponen los aminocidos equivalentes a las posiciones 7 a 12 y a la posicin 14 del pptido CKS-17 de las protenas env de los retrovirus exgenos HTLV-1 y MoMLV, de la protena env del retrovirus endgeno HERV- FRD (sincitina-2), y de la protena nef del VIH. En el pptido CKS-17 de referencia, estas posiciones corresponden a la secuencia LDLLFL y al aminocido lisina (K). Este ltimo aminocido puede ser reemplazado por cido glutmico (K) o glutamina (Q) sin alterarse la actividad. Como se aprecia en dicha gura, hay una homologa estructural conformacional signicativamente alta. Adicionalmente es importante mencionar que la prote- na nef tiene en su estructura otra regin de alta homologa conformacional con las regiones responsables de la actividad inmunomoduladora, como se observa en la Figura 3-3(7). La regin corresponde a la secuencia L 110 D 111 L 112 W 113 I 114 Y 115 y Q 114
(numeracin basada en la secuencia que reposa en el PDB, cdigo de acceso 1avv). Esta observacin no se ha descrito en la literatura y sugiere que la protena nef puede tener ms de un punto de interaccin con otras macromolculas 71 involucradas en la transduccin de la seal que desencadena el efecto modulador visto sobre clulas inmunocticas bajo condiciones experimentales de laboratorio. Con base en lo anterior y segn la homologa derivada ex- puesta en la Figura 3-2C, se observa una relacin estructural y funcional de la protena nef con otras protenas retrovirales de origen endgeno y exgeno, lo que permite sugerir un origen ancestral comn. Si analizramos las homologas entre otras protenas retrovirales endgenas y exgenas, por ejemplo la retrotranscriptasa, encontraramos tambin altas homo- logas entre ellas, generando importantes cuestionamientos desde el punto de vista evolutivo de los retrovirus endgenos y exgenos: la protena nef, as como otras protenas del VIH, pueden ser de origen retroviral endgeno? Es necesario tener en mente que todas las protenas poseen un ancestro comn y que este proceso parte desde los orgenes de la vida misma a travs del mecanismo de duplicacin de genes, ms que por generacin de nuevo material gentico. Si multipli- cidad de retrovirus endgenos y exgenos tienen dominios estructurales con funciones inmunosupresoras, signica ello que convivimos desde que nacemos y que estamos inmersos en un mar de agentes virales que causan Sida? Es decir, deberan ocurrir eventos de inmunosupresin que conlleven a la muerte como ocurre en un paciente VIH positivo, dado que los retrovirus endgenos y exgenos poseen dominios similares? Es de recordar que los defensores del VIH como agente del Sida basan su hiptesis fundamentalmente en sealar que el desplome inmunolgico se presenta por la destruccin de clulas mediante mecanismos de fusin ce- lular (formacin de sincitios), efecto ejercido por las prote- nas fusognicas del virus. Las comparaciones de secuencia, de estructura y de funcin que sealamos en este captulo motivan a reexionar sobre la incongruencia del intento de 72 asignar toda la siopatologa del Sida a la bioqumica del vi- rus, dado que el VIH no es diferente al HTLV-1 o a cualquiera de sus congneres exgenos o endgenos, siendo vlido el cuestionamiento de por qu los retrovirus endgenos no son tan poderosos inmunosupresores como los exgenos, o cundo podran serlo. Ello depende ms de las condiciones medioambientales, genticas y epigenticas en que est el individuo, que afectan directamente a los sistemas de defensa drogadiccin, malnutricin, estrs, entre otros que de la bioqumica particular del virus. Esta verdad no solo se aplica para el VIH, sino para cualquier otro virus. Bibliografa 1. Benit L, Dessen P, Heidmann T. Identication, phylogeny, and evolution of retroviral elements based on their enve- lope genes. J Virol. 2001;75(23):11709-19. 2. Blaise S, de Parseval N, Benit L, Heidmann T. Genomewide screening for fusogenic human endogenous retrovirus en- velopes identies syncytin 2, a gene conserved on primate evolution. Proc Natl Acad Sci U S A. 2003;100(22):13013-8. 3. Blaise S, Mangeney M, Heidmann T. The envelope of Mason-Pzer monkey virus has immunosuppressive pro- perties. J Gen Virol. 2001;82(Pt 7):1597-600. 4. de Parseval N, Lazar V, Casella JF, Benit L, Heidmann T. Survey of human genes of retroviral origin: identication and transcriptome of the genes with coding capacity for complete envelope proteins. J Virol. 2003;77(19):10414-22. 5. Dukers DF, Meij P, Vervoort MB, et al. Direct immunosu- ppressive eects of EBV-encoded latent membrane protein 1. J Immunol. 2000;165(2):663-70. 73 6. Fujii Y, Otake K, Tashiro M, Adachi A. Soluble Nef antigen of HIV-1 is cytotoxic for human CD4+ T cells. FEBS Leu. 1996;393(1):93-6. 7. Haraguchi S, Good RA, Cianciolo GJ, Engelman RW, Day NK. Immunosuppressive retroviral peptides: immunopa- thological implications for immunosuppressive inuences of retroviral infections. J Leukoc Biol. 1997;61(6):654-66. 8. Haraguchi S, Good RA, Day-Good NK. A potent immu- nosuppressive retroviral peptide: cytokine pauerns and signaling pathways. Immunol Res. 2008;41(1):46-55. 9. Mangeney M, de Parseval N, Thomas G, Heidmann T. The full-length envelope of an HERV-H human endogenous retrovirus has immunosuppressive properties. 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Newman) Retrovirus endgenos, placentacin y proteccin del feto contra el rechazo inmunolgico. E+ar tts rtctors extracromosmicas ms conocidas de los retrovirus endgenos estn aquellas relacionadas con la formacin y funcin de la placenta en mamferos eute- rios. Cabe recordar que la placenta no solo es un rgano de intercambio de nutrientes y metabolitos entre la madre y el feto, tambin tiene funciones protectoras y hormonales importantes. En trminos generales, la placenta de mamferos est for- mada por cuatro estructuras, de las cuales el corion, derivado del trofoblasto, est en contacto directo con la mucosa del tero. A travs del trofoblasto se logra la implantacin del em- brin al endometrio uterino, actuando como una membrana que reviste al neonato al nacer. Se conoce que en la placenta 78 se forman retrovirus completos extracelulares, al igual que en las clulas de la lnea germinal en tejidos embrionarios. Por ejemplo, los retrovirus endgenos humanos de diferentes familias (HERV-K, HERV-F, etc.) se expresan y participaran activamente en la placentacin, sugiriendo que se requiere de la actividad de varios HERVs, junto con otros factores no virales, como por ejemplo, el factor de crecimiento pleiotro- na. Este factor en humanos acta en el trofoblasto al unirse a una regin promotora LTR del HERV-E, contribuyendo a las funciones invasivas y proliferativas del trofoblasto. Igual- mente, la leptina utiliza un LTR retroviral que acta como enhancer especco en la placenta, induciendo una alta tasa de expresin en el sincitiotrofoblasto. Adicionalmente, el gen env del retrovirus endgeno HERV-W codica para una protena fusognica denominada sincitina-1, la cual es responsable de la formacin del sinci- tiotrofoblasto. El trmino sincitio hace referencia a clulas que se fusionan, pierden su membrana celular y presentan en consecuencia caractersticas multinucleadas. Es as como un retrovirus endgeno es el responsable de la fusin y for- macin del sincitiotrofoblasto placentario. La relevancia siolgica de las sincitinas se ha evidenciado experimentalmente bajo condiciones in vivo, pues al inhibir su expresin se generan defectos en el desarrollo placentario. En la placenta humana normal, la concentracin del mRNA de las sincitinas se correlaciona positivamente con la edad gestacional. El producto de expresin proteico se distribuye no solo en la base, sino tambin en la membrana apical del sincitiotrofoblasto en placentas de diversas edades y se ha observado correlacin entre las alteraciones en la expresin de sincitinas y alteraciones morfolgicas y funcionales placen- tarias, especcamente en la pre-eclampsia. A este respecto se ha demostrado que la expresin de sincitinas se reduce 79 notablemente, as como su distribucin zonal, en las muestras de placenta de mujeres con esta patologa o con sndrome de HELLP, caracterizado por hemlisis, enzimas hepticas elevadas y conteo plaquetario bajo. Hasta el momento, no hay ninguna explicacin del por qu se producen estas irre- gularidades en la expresin y distribucin de las sincitinas ni su relacin causa-efecto con las patologas mencionadas. Parte de la funcin de las sincitinas es debida a sus domi- nios de fusin, los cuales no solamente son importantes para la formacin de sincitios, tambin lo son para la fusin de los virus con su clula blanco en el contexto de la infeccin viral. Adicionalmente, tienen actividad inmunoreguladora, donde el ejemplo ms sobresaliente es la protena sincitina-2, codicada por el gen env del retrovirus endgeno humano HERV-FRD. Esta funcin adicional a la fusognica es de es- pecial importancia para mantener la integridad del feto, pues participa en evitar su rechazo por parte del sistema inmuno- lgico de la madre. Cabe recordar que desde el punto de vista inmunolgico, el feto se comporta como un cuerpo extrao. Llama la atencin la conservacin funcional y estructural de esta protena a pesar de tener ms de 40 millones de aos sometida a presin selectiva, sugiriendo ello su importancia biolgica a travs de la evolucin. Para el caso anterior, el papel inmunodepresor no es nocivo, pues cumple una funcin protectora indispensable. Esto no implica que si el retrovirus se expresa en otro tejido su funcin sea la misma, pues el hecho de que una protena posea un dominio inmunosupresor no necesariamente con- lleva a que esta funcin se realice; la funcin o efecto de las diversas protenas constituyentes de un retrovirus endgeno depende del entorno molecular donde ellas se encuentren. Signica que si un individuo tiene retrovirus exgenos como el VIH o el HTLV, no necesariamente generarn in- 80 munodepresin por tener protenas con dominios para esta funcin. Lo mismo ocurre con protenas celulares que tienen dominios de fusin o inmunomoduladores; no por ello su funcin proteica se relaciona con fusin de membranas o con inmunomodulacin. El que una protena en particular tenga un dominio con una actividad asociada no determina obligatoriamente que esto ocurra, todo depende del contexto molecular en que se encuentre la protena. Este hecho es una verdad universal para todas las molculas su comportamien- to qumico o bioqumico depende del medio. Un dominio es funcional slo si est expuesto, o est disponible para que la actividad se realice, hecho que no depende enteramente de la molcula per se. En la implantacin del zigoto al tero y en la embriognesis temprana, el retrovirus HERV3 tiene una funcin importante. Los LTRs de este retrovirus tienen elementos de respuesta a hormonas sexuales; es as como la progesterona regula su actividad durante la implantacin del zigoto y la prolifera- cin del trofoblasto. El incremento en la actividad retroviral contribuye a generar una respuesta inmune hacia retrovirus endgenos maternos o retrovirus exgenos, impidiendo que el zigoto o el embrin sean infectados. Esto se ha deducido porque en estudios donde se trasplantan clulas humanas a ratones se acumulan secuencias xenotrpicas en las clulas humanas, indicando que stas, al ser incorporarlas al ratn, son invadidas por retroelementos del animal. Este hecho es una constante para todos los retrovirus, se activan en las clulas propias cuando ellas son sometidas a estrs, o al estar en un ambiente extrao. Igualmente, en estas condiciones, las clulas del individuo receptor se tornan susceptibles para ser invadidas por retrovirus de la clula incorporada. En resumen, los retrovirus endgenos participan en la placentacin y en la proteccin inmunolgica del feto, 81 evitando no solo su rechazo, sino tambin la infeccin por retrovirus endgenos u exgenos. Adems, es ampliamente conocido que estos elementos mviles se expresan en otros rganos diferentes a la placenta, cuya actividad biolgica es inuenciada por hormonas esteroidales, entre ellos, las gln- dulas suprarrenales, la corteza adrenal, el cuerpo lteo, los testculos, las glndulas sebceas, las clulas inmunocticas y el epitelio bronquial; no obstante se desconoce con certeza cul es su funcin all. Solamente para el caso de la formacin de clulas osteoclsticas clulas multinucleadas generadas por la fusin de dos o ms clulas precursoras en el sistema seo se sabe que la sincitina-1 juega un papel importante, estando relacionada nuevamente con la fusin celular. Los retrovirus endgenos compiten con sus contrapartes exgenas protegiendo contra la infeccin. Se ha sugerido que los retrovirus endgenos participan en la defensa contra infecciones por retrovirus exgenos al competir por los receptores que estos ltimos emplean para identicar e infectar a su clula blanco. Por ejemplo, el retrovirus endgeno de oveja Jaagsiekte (JSRV) bloquea la entrada de un virus exgeno, que tambin utiliza como receptor a la hialuronidasa-2, enzima que se localiza en la su- percie de diversas clulas de mamferos. Hasta el momento, no han sido identicados los receptores especcos de todos los retrovirus endgenos humanos. Por otra parte, se ha intentado explicar la resistencia a ad- quirir el VIH en ciertas poblaciones de trabajadoras sexuales con base en la presencia o no de determinados alelos del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase I en linfocitos T citotxicos. Puesto que existe similitud entre las secuencias peptdicas del VIH presentadas por los linfocitos 82 T citotxicos y pptidos del retrovirus endgeno HERV-K10, se cree que la presentacin previa de determinadas secuen- cias pptidicas del retrovirus endgeno, secuencias stas inuenciadas por el tipo de alelo del MHC, podra inmunizar a ciertos individuos. Igualmente, se ha propuesto que en condiciones sio- lgicas normales, la expresin de protenas de fusin y de inmunosupresin puede actuar como reguladores negativos o frenos de las reacciones inmunes, impidiendo as los procesos inamatorios crnicos, respuestas exageradas o pro- longadas, o incluso eventos autoinmunes. En modelos in vivo con ratones se ha evidenciado que, al silenciar la expresin de genes, env retrovirales endgenos, se potencia la estimulacin inmune al efectuar retos inmunognicos del animal. Los retrovirus endgenos estn implicados en la regulacin de la expresin de genes Entre las funciones de los elementos mviles a nivel de la regulacin de la expresin gnica se encuentran aquellas re- lacionadas con los procesos de corte y empalme para generar diferentes mRNA a partir de una misma secuencia de DNA corte y empalme diferencial o splicing diferencial. Estos sitios de corte ocurren en los denominados intrones y se co- noce que muchos de ellos son de origen retroviral. Para citar un ejemplo, la leptina, protena ampliamente involucrada en la regulacin del metabolismo energtico y la produccin de hormonas sexuales, tiene dos formas alternativas, una corta y otra larga. La forma corta se genera como resultado de corte y empalme alternativo dentro de un LTR del retrovirus end- geno HERV-K. Adems, este LTR codica los 67 aminocidos terminales del receptor de esta protena. Adicionalmente, los LTRs de retrovirus endgenos inu- yen en la actividad transcripcional de genes vecinos, es decir 83 que ellos pueden controlar su expresin, sirviendo ya sea como promotores o como enhancers especcos en diversos tejidos. Los LTRs tambin estn implicados en la termina- cin prematura de la transcripcin de algunos genes y en la recombinacin cromosmica meitica y mittica. As mismo, es posible encontrar en los genomas LTR so- litarios, es decir, sin los dems constituyentes nucleotdicos que conforman a los elementos transponibles. Estos LTRs solitarios pueden constituir promotores que determinan el posicionamiento y el inicio de la transcripcin por parte de las RNA polimerasas, o pueden tambin potenciar el efecto y el uso de promotores alternativos. Por otra parte, se conoce que los retrovirus y LTR solita- rios codican para los denominados RNAs no codicantes, implicados en la regulacin de la expresin transcripcin y traduccin de genes. Estos dos eventos son el fundamento bioqumico que determina la diferenciacin celular, es decir, determina las caractersticas de cada rgano, cada clula y, lo ms importante, la funcionalidad celular bajo condiciones normales o el desarrollo de eventos patolgicos. Tambin es conocido que los RNAs provenientes de la transcripcin de retrovirus endgenos pueden actuar como sondas anti- sentido impidiendo los procesos traduccionales de mRNAs provenientes de retrovirus exgenos, incluso pueden inducir su degradacin. Todo lo anterior sugiere con rmeza que los retroelementos y retrovirus son inherentes a la funcin de la clula, evolucionaron con ella y a la par de ella. En este contexto, otra funcin importante de los retrovi- rus endgenos es la conformacin de redes reguladoras de genes. Una red de regulacin gentica es una coleccin de segmentos de DNA en una clula que interactan entre s indirectamente a travs de su RNAs codicantes o no co- dicantes, con los productos de su expresin protenas y 84 con otras molculas en la clula. As regulan la velocidad a la cual los genes de la red se transcriben y se traducen. Por ejemplo, la protena p53 activa o desactiva selectivamente muchos genes relacionados con la divisin celular, la repara- cin del DNA y la muerte celular programada. La p53 se une a diversidad de secuencias de retrovirus y, debido a que stos se encuentran distribuidos por todo el genoma humano con numerosas copias, permiten a la p53 regular multiplicidad de genes con diversas funciones. Ms de un tercio de los sitios de unin de la protena p53 son retrovirus endgenos. Es por ello que la protena p53 es el guardin del genoma, pues coordina un sistema de vigilancia a travs de la interaccin y regulacin de secuencias retrovirales, manteniendo la integri- dad metablica de la clula. Es tan importante la funcin de esta protena que cuando falla, con frecuencia se desarrolla cncer. Alrededor de la mitad de todos los tumores humanos contienen un gen p53 mutado o defectuoso. Algunos otros ejemplos relacionados con la funcin regu- ladora de la expresin gnica son los siguientes: Se ha encontrado un LTR en el segundo intrn del gen cbf2 (factor de unin a la caja CCAAT). Cbf2 participa en la regulacin de la expresin de muchos genes. Otro LTR se encuentra situado aproximadamente a 6 Kb corriente arriba del inicio de la transcripcin del gen fntb (subunidad de la caja de CAAX-farnesiltransferasa). El producto de expresin de este gen se requiere para la farnesilacin de protenas modicacin postraduccional que facilita la asociacin de protenas a la membrana y tambin promueve la interaccin protena-protena. Este mecanismo es importante en la regulacin epigentica y es una evidencia ms de cmo los retroelementos estn implicados en casi todos los eventos siolgicos celulares. 85 Otros genes que poseen LTRs retrovirales son el gen ppm1G (protena fosfatasa 1G); mmp24 (metaloproteinasa de matriz 24) e il23 (interleuquina 23, subunidad ). Igualmente se ha comprobado que las protenas glucosiltransferasas, ubiquitina, DNA ligasa, ribonucletido reductasa 1, SNF2 global transactivator, inhibidor de la apoptosis, quitinasa, UDP-glucosiltransferasa, entre otras, son codicadas por secuencias pertenecientes a retrovirus o a retroelementos. Los priones, que son protenas de comunicacin celular tie- nen secuencias homlogas a los genes de la cpside (NCp7) del HIV-1. Igualmente, los retrovirus endgenos participan en la regulacin del gen de la apolipoprotena C-1 y del gen del receptor de endotelina-1. Cabe recordar que las apolipopro- tenas son parte del complejo de molculas que transportan lpidos, entre ellos triacilglicridos y colesterol, en el torrente sanguneo; adicionalmente a su funcin transportadora, estas molculas son reconocidas por receptores celulares facilitan- do la absorcin de compuestos lipdicos al interior celular. Por otra parte, la endotelina es un potente vasoconstrictor y estimulante del crecimiento del msculo liso. Esta sustancia es sintetizada por el endotelio vascular en respuesta a una serie de factores como la angiotensina-II, la insulina y las ele- vaciones severas de la presin arterial, entre otros. En el gen de la apolipoprotena-C1 y del receptor de endotelina-1, los LTR son usados como promotores alternativos. Es decir, en la regin promotora hay varias secuencias que pueden ser usa- das para que se una la RNA polimerasa y se inicie el proceso de transcripcin del gen. El que se use una u otra secuencia, depende de qu factores en trans expresa cada tejido para que se oculte un segmento del promotor y se deje abierto otro y sea utilizado por la polimerasa mencionada. Para el caso del ejemplo de la endotelina-1, cuando un tejido u rgano 86 en particular utiliza el LTR, la transcripcin se hace a mayor velocidad el promotor es ms fuerte que en aquellos tejidos donde no se usa la regin LTR. Por otra parte, la transcripcin a partir del promotor de la apoC1 que usa el LTR es igual a la del promotor que no la usa, pero la presencia del LTR en uno de ellos aumenta su actividad, es decir, que en este caso la presencia del LTR desempea el papel de potenciador o enhancer, no tanto de promotor en s. Se han encontrado LTRs cercanos a los genes del complejo mayor de histocompatibilidad, surgiendo la posibilidad de que ellos modiquen la presentacin de antgenos forneos o endgenos. Por ejemplo, se ha tratado de correlacionar ciertas enfermedades autoinmunes, entre ellas la diabetes tipo 1 y la artritis reumatoidea, con la presencia de un LTR del retrovirus endgeno HERV-K en determinadas regiones del MHC. Se cree que muchos genes, aun no se determina si casi todos, tienen secuencias homlogas de retrovirus o de ele- mentos transponibles regulando su transcripcin a travs de la unin de factores de transcripcin. Estos factores pueden ser codicados por otros genes, provenir del medio extrace- lular o del entorno medioambiental del organismo, incluida, obviamente, la alimentacin. Se ha visto que los retrovirus endgenos se activan luego de la infeccin de la clula con otros virus, ya sean Herpesvirus, VIH, retrovirus endgenos provenientes de xenotrasplantes o por trasfusiones sanguneas. Igualmente, se activan cuando hay infecciones bacterianas. Esto explica por qu normalmente los retrovirus exgenos humanos tienen un potencial patognico bajo (caso del HTLV-1), o nulo (como el HTLV-2 y el Espumavirus humano HFV), excepto cuando el organismo presenta otras infecciones o factores que los activen. 87 A nivel del genoma, otra funcin normal de los elementos transponibles es su participacin en el mantenimiento de los telmeros cromosomales. En dicho proceso, es fundamental la participacin de la telomerasa, enzima caracterstica de los retroelementos, que extiende la longitud de los telmeros empleando como molde para la sntesis de DNA su propia molcula de RNA sin necesidad de cebador alguno. La en- zima hibrida su secuencia de RNA con el DNA del telmero y aade las bases una a una hasta completar la secuencia de DNA complementaria a su RNA. Tras esto, se desplaza ms adelante y repite este mecanismo, construyendo as el telmero de forma discontinua. Por los ejemplos antes descritos, se considera que los retroelementos son el instrumento a travs de los cuales el medio ambiente modica la expresin de los genes y los genomas. Por esto, probablemente no solo son el motor de todos los procesos evolutivos, sino tambin son los regulado- res de la vida embrionaria, del paso de la niez a la adultez, a la vejez y expliquen as mismo la muerte natural. Todo ello implica que si se mueven y cambian de lugar dentro del geno- ma modicarn la funcin de un gen o un conjunto de genes, de tal forma que la clula debe tener un estricto control sobre su movimiento y actividad biolgica para evitar consecuen- cias patolgicas. De esta forma, si ocurre una desregulacin masiva en diferentes rganos, conduce inevitablemente a la muerte del individuo. La actividad hormonal del individuo regula la actividad de los retrovirus endgenos, lo cual se debe, entre otros factores, a que multiplicidad de genes retrovirales poseen secuencias en cis correspondientes a elementos de respuesta a hormonas. Los LTRs tienen secuencias que permiten regular la expresin de sus genes, porque unen hormonas (estrgenos, proges- terona, glucocorticoides, otros) y factores de transcripcin, 88 tanto ubicuos como especcos tisulares. Este hecho explica por qu para inducir la expresin de retrovirus endgenos o exgenos bajo condiciones de laboratorio sea necesario adicionar al cultivo celular hormonas de tipo esteroidal, en especial glucocorticoides. Respecto a la actividad hormonal en los retroelementos y retrovirus, llama la atencin que en la edad reproductiva de los humanos, 15-35 aos, con mayor pico hormonal, paralelamente estn ms activos los mecanismos de repa- racin en la replicacin del DNA y proporcionalmente haya menos mutaciones y menor incidencia de cncer, respecto a la vejez. En cambio, cuando descienden los niveles hormo- nales, progresivamente, durante la transicin a la vejez, los animales y humanos se vuelven dependientes de los factores antioxidantes provenientes de su alimentacin y se tornan mas susceptibles al ingerir radicales libres como alcohol, cigarrillo, drogas, etc. Probablemente, estos y otros factores del medio ambiente inuyen en la expresin anormal de los retroelementos y retrovirus, coincidiendo con la disminucin progresiva de las hormonas. En la medida en que envejece- mos, caen ms los niveles hormonales y dependemos ms del medio ambiente, nos hacemos ms susceptibles y basta con un simple resfriado para que la desregulacin masiva de retroelementos y retrovirus ocurra y lleguemos al nal de nuestras vidas. De esta forma, los retroelementos y retrovirus participan en los procesos que nos dan la vida, la mantienen y a la vez son nuestros sepultureros. Su actividad depende de los factores endgenos que los regulan, como los niveles hormonales, y de los factores del medioambiente, sean ali- menticios, infecciosos o psicolgicos. Si se razona ms sobre lo descrito hasta el momento, es posible sugerir que la presencia o no de LTRs puede afectar la actividad promotora de un gen y explicar as las dife- 89 rencias en su expresin entre los individuos de una misma especie. Este hecho tambin explica la susceptibilidad hacia xenobiticos y otros agentes medioambientales. Por lo tanto, es importante dirigir o replantear las investigaciones para determinar cundo y en qu forma los factores endgenos o exgenos modican la expresin o la actividad biolgica de los retroelementos y qu relacin tienen con la patologa con la cual se pretenden asociar, y, especialmente, si la actividad desregulada de un retrovirus endgeno u otros elementos transponibles es causa o es efecto de la enfermedad. Lo anterior se debe tener en cuenta porque una constante de la bioqumica celular es que variando el orden en que se expresan los genes, se generan variaciones en el comporta- miento siolgico celular, capacitando as a la clula para hacer frente a los estmulos medioambientales. Bajo esta visin, los retrovirus endgenos son fundamentales para la siologa celular y, de forma contraria, cuando se desregula su expresin, podran estar implicados en el desarrollo de una patologa, tal como sucedera con cualquier otro gen. Por ejemplo, el cncer es una manifestacin de la alteracin o modicacin en la expresin de los mismos genes que cumplen funciones normales en la clula. Por esto, no se puede asumir mecnicamente que los retrovirus endgenos, e incluso los exgenos, slo estn asociados a patologas, pero tambin sera un error excluirlos totalmente. La dicultad est en establecer si los retrovirus endgenos son la causa de un evento patolgico, o si es el evento patolgico el que modica la actividad de los retrovirus endgenos. En este sentido es que todos los genes se comportan como unidades interdependientes, cuya funcin depende de la actividad de otros genes y de los estmulos medioambientales. Metafri- camente hablando, los genes equivalen a los instrumentos de una orquesta, cada instrumento es independiente, pero 90 tambin interdependiente, y la importancia de cada uno, a su vez, depende de la meloda que se interpreta; en diferentes melodas los instrumentos suenan diferentes, con mayor o menor intensidad, es decir, ocurren cambios en la forma sin que hayan cambios en la cantidad, para el caso, el nmero de instrumentos musicales, o de genes, en nuestro contexto biolgico. En resumen, el contenido mayoritario de los genomas est constituido por elementos transponibles, entre ellos retrovirus endgenos. Estos elementos han contribuido y contribuyen al proceso evolutivo de las especies y al desa- rrollo ontognico y siolgico del individuo. Son inherentes a la funcin de la clula, evolucionaron junto con ella y a la par de ella. Por esto, son fundamentales en la expresin y regulacin de la actividad gnica, actuando como promotores o potenciadores de la transcripcin, inuenciando el corte y empalme diferencial, la poliadenilacin, el mantenimiento de los telmeros y en la conformacin de redes reguladoras de genes. As, conectan la actividad del genoma con los factores del medioambiente, participan en los procesos que nos dan la vida, en su mantenimiento y en la muerte. Su actividad depende de los factores endgenos que los regulan, como los niveles hormonales, y de los factores del medioambiente, sean alimenticios, txicos, infecciosos o psicolgicos. Bibliografa 1. Acosta MJ, Marchal JA, Fernandez-Espartero CH, Bullejos M, Sanchez A. Retroelements (LINEs and SINEs) in vole genomes: dierential distribution in the constitutive he- terochromatin. Chromosome Res. 2008;16(7):949-59. 91 2. An DS, Xie Y, Chen IS. Envelope gene of the human endo- genous retrovirus HERV-W encodes a functional retrovirus envelope. 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La asociacin o correlacin matemtica y/o estadstica entre dos variables no implica una causa-efecto E ratrat ts+tctt, es importante enfatizar que los mtodos de laboratorio con los cuales se intenta evidenciar la actividad transcripcin o traduccin de retrovirus endgenos o ex- genos durante el curso de una patologa se basan en tcnicas de ultramicroscopa, que permiten visualizar partculas vira- les; en tcnicas inmunoqumicas, para detectar y cuanticar protenas; , tambin, se emplean tcnicas de bioqumica de cidos nucleicos como PCR en sus diversas modalidades y Northern blou, entre otras, las cuales evalan la presencia de RNA viral en las muestras de tejidos. No obstante, ninguno de estos mtodos permite atribuir una relacin causa-efecto entre la actividad del retrovirus y el evento patolgico, sien- do posible nica y exclusivamente asociar o correlacionar la actividad del retrovirus con un evento patolgico, ms no, se insiste, como un hecho causal. Adicionalmente, se debe 102 mencionar que las tcnicas de ultramicroscopa, entre ellas microscopa de transmisin electrnica, microscopa crioelec- trnica y microscopa de fuerza atmica, con las cuales se ha tratado de demostrar la generacin de partculas virales a partir de clulas infectadas con retrovirus exgenos, son tcnicas donde hay una interpretacin subjetiva por parte del investigador y la observacin de partculas subcelulares est lejos de probar que sean retrovirus realmente, pudiendo ser ello vesculas, organelos, fragmentos u otro tipo de es- tructuras subcelulares derivadas de la alta complejidad que requiere el procesamiento de las muestras para someterlas a este tipo de anlisis. Ms an, de lograrse una identica- cin microscpica inequvoca de retrovirus en las lesiones citopticas caractersticas, no prueba tampoco su relacin causa-efecto con la patologa, ya que estos pueden ser re- trovirus endgenos presentes en circunstancias normales o manifestarse como consecuencia de la lesin celular. As mismo, la identicacin de retrovirus exgenos o en- dgenos con tcnicas como PCR no es, de ninguna manera, demostracin de que los retrovirus sean los responsables directos de las enfermedades con los cuales se pretenden asociar. Menos an las tcnicas inmunoqumicas, pues se conoce que existe una alta homologa entre antgenos retro- virales exgenos, endgenos y autoantgenos entre los cuales se puede presentar reactividad cruzada con anticuerpos. Por ejemplo, se ha mostrado que pacientes con lupus eritematoso sistmico, sndrome de Sjogren, esclerodermia o artritis reu- matoide presentan con frecuencia anticuerpos que reconocen ciertas protenas, entre ellas, la protena gag del VIH o del HTLV-1 (virus linfotrco humano-1). De forma similar, en los individuos a los cuales se les ha detectado retrovirus, se encuentra que producen cierto tipo de anticuerpos (autoan- ticuerpos) contra protenas propias. 103 La reactividad cruzada con antgenos virales exgenos ha sido demostrada en el lquido sinovial de pacientes con artritis reumatoide, mediante tcnicas inmunohistoqumi- cas, empleando para ello anticuerpos antigag; no obstante, para poder concluir sobre esta observacin, ha de tenerse en cuenta la presencia de retrovirus endgenos transcrip- cionalmente activos. Por ejemplo, el retrovirus endgeno denominado HRES-1, que es similar al HTLV-1 pero que es defectivo y por lo tanto no infeccioso, expresa sus protenas bajo circunstancias normales y patolgicas. As, los pacientes con enfermedades autoinmunes tienen anticuerpos contra estas protenas endgenas propias, aunque retrovirales. Desde este punto de vista, se podra pensar que la homo- loga entre autoantgenos y protenas retrovirales ayudaran a explicar las enfermedades autoinmunes teniendo en cuenta que puede haber reactividad cruzada generada por el mime- tismo molecular entre las protenas de un retrovirus y los antgenos celulares. Como ejemplo de este hecho se ha citado al retrovirus endgeno humano RVEH-W en pacientes con esclerosis mltiple, y al retrovirus exgeno humano RVH-5 en el sndrome de Sjgren. Sin embargo, este mecanismo como relacin causa-efecto no se ha comprobado. A nivel de laboratorio, otra prueba indirecta utilizada en la deteccin de elementos mviles de tipo retroviral o de retrovirus exgenos es la determinacin de la actividad enzimtica retrotranscriptasa en muestras de pacientes con enfermedades autoinmunes, y con otras patologas como Sida. Sin embargo, el signicado de esta observacin no ha sido establecido y hay que tener en cuenta para poder asig- nar la validez de estas pruebas que en el genoma humano existen aproximadamente 350 genes que codican para re- trotranscriptasas, de las cuales slo muy pocas, entre ellas la telomerasa, se han caracterizado y descrito su funcin. 104 Por otra parte, uno de los principales inconvenientes en la evaluacin de la expresin de retrovirus a partir de clulas de pacientes con determinada patologa es que, con frecuencia, es necesario hacer cultivos celulares in vitro, sometiendo a las clulas a situaciones de estrs y a condiciones articiales, he- chos que pueden inducir la expresin de los retrovirus insertos en el genoma celular y por ello no ser una consecuencia real del proceso patolgico en el que se encontraba el paciente. A la fecha, no se conocen todos los factores celulares in- trnsecos o extrnsecos determinantes para que los retrovirus exgenos se expresen, o para que los retrovirus endgenos y otros retroelementos permanezcan quietos o se transcriban y se muevan. Tampoco se conoce las consecuencias bioqumicas que esto deriva. De tal forma, mientras no se esclarezcan los mecanismos moleculares a travs de los cuales los retrovirus y otros retroelementos iniciaran o facilitaran la evolucin de la patologa con la cual se han asociado, es difcil presentarlos como una relacin causa-efecto, siendo posible solamente correlacionarlos positivamente con el proceso patolgico. A este respecto, es probable que las mismas enfermedades sean las que activen a los retrovirus endgenos, siendo su funcin desconocida en este contexto. No existe una relacin causa-efecto entre los retrovirus endgenos humanos y la enfermedad Al presente, son abundantes las publicaciones que asocian ciertos procesos patolgicos humanos con la actividad de retrovirus endgenos. No obstante, como se mencion en el captulo anterior, los retrovirus endgenos humanos cumplen funciones siolgicas importantes y, debido a que nacemos y convivimos durante toda la vida con ellos, es de suponer que su actividad principal no es la de causar patologa. No signica ello que en algunos casos no estn asociados con 105 enfermedades, como cualquier otro gen, pero no existen en el genoma de los organismos con el propsito de causar altera- ciones bioqumicas y conllevar a una patologa especca. Se ha sugerido que cuando los retroelementos se mueven de una manera no controlada dentro del genoma, su inser- cin en un lugar inadecuado del mismo puede conllevar a la interrupcin de genes, alterndolos o anulndolos. As mismo, durante su movimiento, pueden incorporar genes celulares del lugar donde estaban y llevarlos consigo, pero se desconoce qu induce a la alteracin en sus patrones de movimiento, por lo tanto, los retrovirus endgenos probablemente no sean los agentes etiolgicos directos ni los nicos implicados en las enfermedades donde fueron descubiertos o con las cuales fueron asociados. Por s solos no explican la enfermedad. A pesar de lo anterior, existen publicaciones que sugieren un papel patognico, especcamente en cncer, enfermeda- des autoinmunes, diabetes, artritis reumatoidea, esquizofre- nia e inmunodeciencias. Por analoga a lo observado con los retrovirus exgenos, algunos investigadores especulan que la presencia de provirus endgenos integrados en la vecindad de proto-oncogenes son responsables de un signicativo nme- ro de cnceres; igualmente, el retrovirus endgeno humano RVEH-W se ha encontrado en el lquido cefalorraqudeo de pacientes con esquizofrenia aguda, hecho que se presenta en 30 % de los individuos, y en 7% de los pacientes con la forma crnica de la enfermedad. El RNA retroviral no fue encontrado en personas sanas, aunque hay un bajo nivel de expresin de retrovirus endgenos en la mayora de tejidos humanos como se mostr en un Captulo 2. Sin embargo, pese a las asociaciones encontradas, nunca se ha demostrado una relacin causa-efecto y todo lo publicado hasta el mo- mento corresponde a correlaciones positivas entre el evento patolgico y la presencia de actividad retroviral endgena. 106 A este respecto, algunos investigadores han sugerido que la expresin de retrovirus endgenos en procesos patolgicos autoinmunes puede ser un mecanismo de control bioqumico, especcamente a travs de eventos de retroalimentacin negativa que modulan la sobreactivacin inmunolgica. Con relacin a esto, cabe recordar que en la literatura am- pliamente se ha descrito un dominio inmunosupresor en las protenas env de retrovirus tanto endgenos como exgenos, mecanismo este que puede estar mediando, entre muchos otros, el silenciamiento de la actividad linfoctica que el organismo trata de hacer durante el control de procesos siopatolgicos autoinmunitarios. En general, cuando se ha tratado de atribuir un papel causal de los retrovirus endgenos en procesos patolgicos, se ha especulado que los mecanismos a travs de los cuales ellos pueden actuar son el mimetismo molecular, la codi- cacin de superantgenos o la estimulacin o inhibicin directa del sistema inmune; no obstante, como se mencion anteriormente, todas estas especulaciones se basan en ob- servaciones de correlacin entre la presencia de un retrovirus y la patologa. Si bien an no se conoce cmo se activan los retrovirus en- dgenos, ni si son causa o efecto de alteraciones patolgicas, todo lo anterior nos lleva a hacernos la siguiente pregunta: si los retroelementos estn de forma permanente durante el transcurso de nuestras vidas, bajo qu condiciones, cmo y cundo se induce su actividad biolgica? En otras palabras, qu factores internos o externos desencadenan su trans- cripcin, traduccin y movimiento dentro del genoma? Es evidente que la actividad de los retroelementos, entre ellos los retrovirus endgenos, debe estar rigurosamente controlada por la clula, pues de lo contrario, su alta tasa de movimien- to e integracin en el genoma tendra muy probablemente 107 consecuencias negativas para la integridad bioqumica y siolgica de la clula y, por ende, del tejido y del organismo del cual ella hace parte. Las investigaciones actuales han sugerido que en la activacin de los retroelementos estn implicados factores medioambientales, genticos y, tambin, factores epigenticos. Los retrovirus exgenos tampoco pueden presentarse como la causa directa de enfermedad Existen retrovirus exgenos en diversas especies de ani- males que inicialmente se identicaron por estar asociados con enfermedades especcas, por lo cual el nombre que les fue asignado es el de la enfermedad con la que se asociaron, por ejemplo, el virus de la leucemia bovina, el retrovirus causante de la anemia infecciosa equina, el retrovirus cau- sante de la artritis de las cabras, etc.; no obstante, no se ha comprobado que el agente viral per se sea el responsable de la patologa. Con el n de ilustrar al lector acerca de la complejidad que implica asignar una relacin directa causa-efecto entre un agente infeccioso exgeno y una enfermedad puntual, se expone a continuacin el caso del retrovirus de la leucemia de clulas T del adulto (HTLV). Se debe recordar que la infeccin por cualquier retrovirus exgeno requiere para su establecimiento permanente en el individuo de la integracin como provirus en el genoma celular. Posterior a su infeccin, su diseminacin depende de la capacidad replicativa de la clula infectada. Generalmente, la infeccin se produce en un nmero variable de clulas, las cuales se dividen para dar como resultado diferentes poblaciones de clulas infectadas. Este proceso se denomi- na expansin clonal y es una caracterstica de la infeccin retroviral en clulas con proliferacin activa. 108 En la literatura cientca ampliamente se ha descrito la asociacin entre el virus humano T-linfotrpico (HTLV) y la leucemia de clulas T del adulto. Este virus se aisl por primera vez en 1978, a partir de un cultivo de linfocitos T procedentes de un paciente con leucemia. Hoy se conoce que la presencia de este virus en la poblacin es endmica, pero no as la leucemia, lo cual deja al descubierto, en primera instancia, que un virus puede ser necesario pero no suciente para que la enfermedad ocurra. Para que este tipo de asociacin virus-enfermedad se pueda determinar de una forma cientca rigurosa, debe constatarse que la integracin del provirus en el genoma celular sea la misma en todas las clulas tumorales y que el provirus sea igual o, por lo menos, con alta homologa estructural. Cuando este es el caso, es posible sugerir que el provirus progenitor dio un origen clonal a la descendencia celular y que la infeccin ocurri antes del primer evento de transformacin tumoral. Este procedimiento debera ser obligatorio en todo anlisis de esta clase de asociacin, pero generalmente nunca se cumple. As mismo, cada tumor, en cada individuo, debera presentar una integracin similar en el genoma, si lo que se quiere es asociar etiolgicamente al retrovirus con la enfermedad en la poblacin. Si el sitio de integracin proviral vara, en la misma clase de tumor y en diferentes individuos, sugiere que el retrovirus no es la causa directa del proceso patolgico, aunque no se descarta que pueda estar inuyendo indirectamente. Como se mencion antes, este tipo de estudios nunca se lleva a cabo o rara vez los resultados de ellos cumplen con lo expuesto. El HTLV infecta principalmente a las clulas CD4 + y est ampliamente esparcido en la poblacin, especialmente en regiones tropicales y subtropicales. La infeccin se asocia con el uso de drogas endovenosas y con la migracin de 109 individuos hacia reas endmicas. En las zonas endmicas, la seroprevalencia es decir las personas HTLV+ con base en la deteccin de anticuerpos mediante tcnicas inmuno- qumicas vara desde 0.1 % hasta 30% y, al da de hoy, no se ha esgrimido una hiptesis coherente que explique este porcentaje de seroprevalencia y a la vez de seronegatividad, la cual oscila entre 70 y 99,9% en las zonas endmicas y menos an que correlacione el porcentaje de individuos seropositivos con la enfermedad asociada y que explique los seropositivos sin la enfermedad. Igualmente, este virus se ha correlacionado con enferme- dades inamatorias crnicas como la artritis reumatoidea y el lupus eritematoso. Dicha asociacin se fundamenta en encontrar en los pacientes anticuerpos contra el HTLV-1 con porcentajes que oscilan entre 12 % en individuos con artritis reumatoidea y 16% en aquellos con lupus eritematoso. No obstante, nunca se discute en la literatura cientca si lo rele- vante es el bajo porcentaje de asociacin (12% 16%) o el alto porcentaje de no asociacin (88% y 86%, respectivamente); as como tampoco se discute que en aquellos individuos infecta- dos que desarrollan la enfermedad, el tiempo de infeccin y el desarrollo de la misma es de aproximadamente 2 a 3 dca- das. Tampoco se hace un esfuerzo por discutir la homologa estructural entre el HTLV-1 y los retrovirus endgenos hacia los cuales los anticuerpos empleados para detectar protenas del HTLV-1 pudiesen generar reactividad cruzada debido al mimetismo molecular. La mayora de los retrovirus infecciosos humanos exge- nos tienen un potencial patognico bajo, caso del HTLV-1, o nulo, como el HTLV-2 y el espumavirus humano. Dicha patogenicidad cambia cuando se presentan concomitante- mente varias infecciones virales, especialmente con el virus 110 del herpes. Cabe mencionar que el HTLV-2 es endmico en la poblacin nativa de Amrica y en tribus pygmy del frica. El retrovirus exgeno HTLV-1 comnmente se ha aso- ciado con patologas que se pueden agrupar en 3 categoras: la primera, enfermedades que se han establecido como en- tidades clnicas causadas por el virus, a saber, leucemia de clulas T del adulto, ms comn en hombres; la paraparesia espstica tropical/mielopata, ms comn en mujeres; y la uvetis. Hay que aclarar que la asociacin no es experimental, bioqumica o molecular, sino por correlacin epidemiolgica. La segunda categora corresponde a enfermedades que si bien muestran una asociacin con la infeccin por HTLV-1, no se ha aceptado su papel causal, entre ellas la dermatitis infec- ciosa, el sndrome de Sjogren, la artritis y la miositis. Estas enfermedades no poseen caractersticas clnicas nicas, ni soporte correlacional epidemiolgico. Y, nalmente, la tercera categora incluye a un grupo de enfermedades sobre las cuales se ha sugerido la posible asociacin con la infeccin debido a la seropositividad para el HTLV-1; no obstante, tampoco tienen soporte epidemiolgico ni caractersticas clnicas ni- cas. Entre stas se encuentran la polimiositis, neumopata, linfoadenitis y el linfoma de clulas T cutneo. Como puede observarse, a lo sumo hay una fuerte aso- ciacin epidemiolgica, pero no es una causa-efecto, lo cual implica que puede no ser suciente la presencia del agente asociado; todos los esfuerzos por establecer una relacin causal de los retrovirus exgenos y ciertas enfermedades han resultado inconcluyentes. Por ejemplo, en el caso de la paraparesia esptica tropical/mielopata, se ha intentado establecer una relacin entre las sustituciones nucleotdicas ubicadas en algunas posiciones dentro de los LTRs virales y ciertos genes en personas con la enfermedad. Sin embargo, los estudios comparativos del DNA retroviral efectuados 111 tanto en pacientes con leucemia de clulas T del adulto como con paraparesia, no arrojaron resultados que permitieran correlacionar estas mutaciones con un eventual desarrollo del proceso patolgico. Resulta sorprendente que los retrovirus exgenos no se puedan establecer como agentes causales de las enferme- dades con las cuales se asocian, en especial cuando, como para el caso del HTLV-1, se ha descrito un bajo grado de variacin gentica. Para este retrovirus, la variacin gentica oscila entre 0,5% y 3% para las cepas procedentes de frica, Japn, la cuenca del Caribe, India y Suramrica, esta ltima con un registro de variacin de 0,5%. An las cepas virales ms divergentes procedentes de Zaire poseen un grado de similitud tal que su variabilidad se ha estimado en 3%. Los aislados virales procedentes de Tumaco, Colombia, presentan un comportamiento similar, con un grado de conservacin entre s de 96% a 100%. Lo anterior sugiere que los retrovirus por s solos no ex- plican la enfermedad; si hay poca variacin genmica resulta difcil asociar la aparicin de enfermedades al surgimiento de cepas virulentas. Otra opcin sera tener en cuenta la varia- cin gentica entre individuos, lo cual resulta tambin difcil de aceptar porque la secuencia y la composicin gentica humana, en trminos generales, es muy similar. Adicionalmente a lo anterior, hay pobre correlacin entre individuos con variantes del complejo mayor de histocompa- tibilidad, HLA, y portadores del HTLV-1. An si la hubiese, esto no explica molecularmente la patologa asignada con la presencia del retrovirus. 112 El objetivo biolgico de los retrovirus exgenos no es causar enfermedad, y menos an eliminar a su hospedero Es claro que el objetivo biolgico de los retrovirus en- dgenos no es causar enfermedad, todo lo contrario, son indispensables para multiplicidad de procesos bioqumicos y siolgicos celulares. Pero, qu sucede entonces con sus contrapartes exgenas? es su objetivo desencadenar un evento patolgico? Un retrovirus exgeno se integra al genoma del hospe- dero y se replica, pero no busca producir una patologa per se. En otras palabras, no genera un estado siopatolgico para beneciarse o replicarse ms rpido; no saca provecho evolutivo de la siopatologa; no ha evolucionado causando enfermedad como mecanismo de xito replicativo. Causar enfermedad, un estado siolgico particular, no es la mane- ra como los retrovirus exgenos se propagan como agentes infecciosos. Lo anterior quiere decir que los virus lentos, como lo son los retrovirus exgenos, para tener xito como agentes infecciosos dependen de la replicacin celular y por consiguiente de la supervivencia del hospedero, de tal forma que causar enfermedad no es su n, ni una consecuencia de su infeccin; la enfermedad es solo azar y depende, entre otros, de los factores medioambientales, y no solamente del genoma retroviral o de su actividad bioqumica al interior de la clula que lo hospeda. De forma contraria, existen virus cuya forma de propa- garse es causando enfermedad. Por ejemplo, los virus lticos como el rotavirus son exitosos en la medida en que su re- plicacin destruye a la clula hospedera, no obstante, algo muy importante es que su patologa se restringe a un rgano especco el intestino para nuestro ejemplo y la infeccin es por un periodo corto, pues de lo contrario acabara con el hospedero y se autoeliminara. De hecho, cuando sur- 113 gen agentes infecciosos altsimamente agresivos, su propia agresin los autolimita al morir junto con el hospedero. Un comportamiento similar al del rotavirus sucede con los vi- rus que colonizan el tracto respiratorio superior, el virus del sarampin, la varicela, la viruela y la tos ferina. Todo este anlisis no resulta trivial, pues debera traer consecuencias importantes en cuanto a cmo controlar la enfermedad en una zona endmica. Especcamente ha de generar cuestionamientos acerca de si debe darse toda la atencin al agente retroviral exgeno, o si igualmente se deben modicar las condiciones medioambientales de los individuos. De tal forma, es necesario distinguir entre la causa principal y aquellas que se derivan de ella, o aquellas secundarias, y considerar a su vez si todas ellas tienen la misma importancia. Cuando se lee en la literatura respecto a los retrovirus exgenos, se descubre que muchos investigadores se esme- ran por mostrar una asociacin entre la presencia de anti- cuerpos o de antgenos y la enfermedad, mas no se esfuerzan por analizar los casos en los cuales se encuentran dichos anticuerpos y antgenos en pacientes que no han desarrollado por mucho tiempo la enfermedad. Evidentemente, algo debe alterar la homeodinmica celular para dar paso al desarrollo de la enfermedad, hasta el momento controlada. As mismo, con mucha frecuencia, la mayora de los investigadores de retrovirus en su intento por explicar las enfermedades asociadas a stos, se concentran en el agente infeccioso o en el genoma del husped, descuidando total- mente los factores medioambientales como causa principal de la enfermedad. Qiz esto ocurre porque consideran que estos son factores que no pueden manipular o que la solucin no les compete. El problema es que si no se menciona y no se hace un anlisis de su importancia, el investigador no se 114 comporta como un cientco integral, sino que manipula slo unas variables, intencionalmente o no, ocultando la verdad y tergiversando la posible solucin a un problema que atae a toda una poblacin. Otros investigadores cuyos resultados les sugieren que el genoma y la bioqumica retroviral no explica por s sola la patologa en la poblacin, se centran en analizar y darle peso a las pocas variaciones genticas existentes en la poblacin polimorsmo gentico. As, se dedican a enfatizar que de acuerdo con el polimorsmo gentico existente en un indi- viduo, ste procesa un antgeno y despliega una respuesta caracterstica que favorece el desarrollo o no de la enferme- dad. Sin embargo, hay que preguntarse si este enfoque es necesario y suciente para explicar el proceso siopatolgico en una poblacin en particular en una poblacin malnu- trida o consumidora de drogas inmunosupresoras como la marihuana y el opio, ser realmente relevante el polimorsmo gentico de los individuos para explicar el desarrollo de una enfermedad asociada a un agente infeccioso retroviral ? La relacin entre el entorno medioambiental y el genoma una interaccin ampliamente subestimada para explicar la enfermedad Algunos investigadores han sugerido que en determinadas circunstancias, los retrovirus endgenos pueden activarse anormalmente y, una vez activos, pueden causar dao en las vecindades gnicas, tal vez alterando la expresin de ge- nes. Se cree que dicha activacin anormal es lo que origina la susceptibilidad para generar enfermedades. Mientras el genoma de todas y cada una de las clulas que constituyen al individuo no est afectado por la activacin retroviral en- dgena incontrolada, el individuo permanece sano, pero la activacin masiva y sin control de los retroelementos puede 115 desencadenar una serie de eventos en el genoma que llevan a la enfermedad o, incluso, a un desenlace fatal. Tericamente, a primera vista, la versin anterior parece razonable, pero el problema es que an no sabemos cmo, cundo y en qu grado se expresan estos retrovirus endge- nos, lo cual depende de seales intracelulares y extracelulares. Cualquier clula, en un determinado momento, responde a estmulos activando e inactivando multiplicidad de genes de manera simultnea; as, la expresin de cada uno de ellos es inuenciada por lo que est sucediendo no slo en el interior de una clula, sino tambin por lo que est sucediendo en el tejido del cual ella hace parte, en el rgano, en el organismo entero y, tambin, por lo que est sucediendo en el entorno donde el organismo habita. La relacin medioambiente-genes es una realidad desde el momento en que ingresa el espermatozoide al vulo, y es lo que se conoce como informacin epigentica; est en el citoplasma del oocito que programa e indica cmo y cules genes deben empezar a expresarse. Pero a su vez, la actividad gnica inuye sobre la informacin citoplasmtica. En la mutua y constante interaccin entre la actividad gnica y los factores medioambientales, se generan estructuras embriona- rias, rganos y dems, cuya actividad a su vez inuye sobre la actividad gnica. Esto signica que en cada organismo existe un plan de desarrollo que es heredable y que se concreta en la medida y en la forma en que el ambiente lo permite. Esto equivale a decir que lo que se transmite de una generacin a la siguiente a travs de los gametos son los genes, mas no sus genotipos ni sus fenotipos. Lo anterior implica que si dos o ms individuos presentan en su genoma los mismos retrovirus endgenos, su expresin no es idntica durante toda su realidad biolgica, pues en ello inuyen muchos factores, incluyendo su genotipo y su fenotipo, que a la vez 116 depende de la interaccin entre los genes y el medio ambiente. Esta interaccin entre los genes y el medio ambiente es tan relevante, que los estudios realizados en gemelos con y sin antecedentes familiares de cncer mostraron que un factor determinante en el desarrollo de la enfermedad es el entorno en el que habita cada uno de los individuos. No se conoce an el patrn de transmisin hereditaria de los retrovirus endgenos, cundo es dominante, cundo recesiva, o si tienen un patrn amplio. Algunos rasgos o caractersticas se heredan siguiendo un patrn autosmico dominante, mientras que otros lo hacen siguiendo un patrn autosmico recesivo, o un patrn relacionado con el cromo- soma X y el cromosoma Y, ligado al sexo. Los rasgos o carac- tersticas son dominantes o recesivas, pero se debe tener en cuenta que los genes no lo son. Si bien es comn referirse a genes como dominantes o recesivos, estrictamente hablando es un concepto errneo y debe dejar de usarse. Los provirus endgenos que suelen ser transcripcional- mente silenciosos lo son por efectos epigenticos asociados a la metilacin de sus secuencias nucleotdicas. Este mecanis- mo depende de multiplicidad de factores, incluidos los niveles de diversas hormonas en la madre durante la gestacin, el nmero de embarazos previos, el sexo del feto, etc. Otra causa del silenciamiento es debido a la presencia de deleciones o mutaciones puntuales que los incapacitan para generar virus infecciosos. Sin embargo, muchos virus endgenos son com- petentes para su replicacin, pero se mantienen silenciosos en sus propios hospederos. Estas caractersticas permiten especular que la presencia de los provirus endgenos no in- volucra, salvo contadas excepciones, efectos patognicos. Todo lo mencionado hasta el momento en este captulo su- giere que debe cambiarse la perspectiva desde la cual se desea determinar una relacin causa-efecto entre los retrovirus y la 117 enfermedad. As, un factor importante ha de ser el entorno medioambiental donde se desarrollan los individuos, el cual ha tenido un drstico cambio en las ltimas dcadas. Dentro del entorno est el estrs emocional y fsico, el estado nutri- cional, la exposicin a la radiacin electromagntica y, por supuesto, la exposicin a agentes qumicos de reconocido y potencial impacto toxicolgico. Con un panorama como este, los retrovirus, tanto endgenos como exgenos, pudieran ser necesarios pero no sucientes para explicar la enfermedad, tal como se observa en los estudios epidemiolgicos. Ampliamente se ha intentado asociar a los retrovirus en- dgenos y exgenos con ciertas patologas sobre la base de su movilidad o insercin en determinados sitios del genoma. Respecto a esto existe controversia acerca de si la integracin es al azar o si hay cierta preferencia por algunos sitios dentro del genoma. Por ejemplo, se ha encontrado alguna prefe- rencia en el sitio de integracin del HTLV-1 hacia regiones nucleotdicas ricas en guanina y citocina. No obstante, una secuencia genmica rica en dichas bases nitrogenadas no indica mucho e incluso puede no indicar nada, pues debe tenerse en cuenta que no solo son importantes las secuencias en cis, tambin cuentan los factores en trans que se ubiquen en cada segmento del DNA celular, alterando as la topologa molecular e impidiendo o facilitando el acceso del virin; igualmente cuentan los factores en cis y los factores en trans que porta el propio virin; peroqu relacin tendra esto con el entorno del individuo? La hiptesis de la integracin en determinados sitios del genoma puede servir para explicar casos aislados de algunos individuos en los cuales se correlaciona la ubicacin con la sobreexpresin o interferencia de alguna actividad gnica en particular. Sin embargo, esta hiptesis no explica el con- junto de enfermos de una regin, indicando que no existe 118 una correlacin entre una integracin dirigida, es decir, una integracin preferencial de los retrovirus y la enfermedad. Al contrario, en la mayora de los casos lo que se encuentra en la poblacin son sitios de integracin variables. As, se sabe que el movimiento de los retrovirus endgenos o la insercin en el genoma de retrovirus exgenos no posee una secuencia nucleotdica nica para la integracin proviral en el genoma, sino regiones con ciertas caractersticas fsicas y qumicas compartidas que facilita su integracin, sugiriendo que dicha integracin es casual o aleatoria. No obstante, al decir que la integracin de los retrovirus es aleatoria, debe aclararse que no es al azar puro, es decir, no es una inespecicidad absoluta. Adems, el azar absoluto ni la especicidad absoluta existen. Con frecuencia se confunde el no azar con intencionalidad y el azar con la falta de direccin, el caos absoluto. El azar depen- de de factores intrnsecos y extrnsecos a la situacin o cosa en cuestin. En el caso del virus y el genoma del husped, lo intrnseco incluye los factores nucleares como las secuencias en cis del hospedero y del virus, los factores en trans de uno y otro, y la formacin topolgica del cromosoma. Los factores extrnsecos estn dados por las condiciones bioqumicas, tanto citoplasmticas como extracelulares, como las condi- ciones hormonales, nutricionales y aquellas que modican las caractersticas genticas celulares del individuo: frmacos, drogas de abuso, alteraciones oxido-reductivas, radiaciones electromagnticas, entre otros, es decir estmulos de origen medioambiental. Estos factores extrnsecos al propio organismo, es decir, aquellos provenientes del hbitat del individuo, inuyen so- bre el genoma a medida que modican la expresin gnica y contribuyen a modicar las vas metablicas al alterar la transcripcin por ejemplo de factores en trans, incremen- tando o disminuyendo su concentracin y todos los eventos 119 traduccionales y post-traduccionales de la clula. Esto, en ltimas, modicar sin lugar a dudas la actividad de los re- trovirus endgenos y su disposicin para integrarse en uno u otro lugar del genoma. De la misma forma suceder con los retrovirus exgenos. Un ejemplo adicional para ilustrar la relacin entre el medio ambiente, el genoma del hospedero y del virus agresor son los virus Coxackievirus. Su infeccin en el hombre produ- ce enfermedad slo en un 10 % de los casos. Desde el punto de vista experimental, estos virus han sido ampliamente estudiados. As, la cepa CVB3 induce en ratones miocarditis, mientras que la cepa CVB4 genera pancreatitis, entre otras enfermedades. Al inocular ratones con una variante no vi- rulenta del CVB3, denominada CVB3/0, se comprob cmo una dieta deciente en selenio las selenoprotenas actan como antioxidantes- produca a los 10 das de la inoculacin la aparicin de un tipo nico de CVB3 extremadamente virulento en distintos ratones. El estudio del genoma de las cepas virulentas generadas demostr que haban sufrido seis cambios de nucletidos en las mismas seis posiciones. Estu- dios adicionales mostraron que existe un nmero limitado de cambios nucleotdicos asociados con el carcter virulento. Aunque la interpretacin del fenmeno en el citado estudio radic en que se habran producido mltiples mu- taciones aleatorias, y que lo observado posteriormente en los diferentes ratones era el resultado de la seleccin natural que condujo a virus con exactamente las mismas mutaciones, una interpretacin adicional razonable es que los cambios en el medio ambiente, para este caso nutricionales, producen cambios en la expresin gnica de los individuos, y esto los torna susceptibles o no a los agentes infecciosos que, de no patgenos, se tornan virulentos o viceversa. Otra explicacin es que estos cambios en la expresin gnica, as como en 120 ciertas caractersticas metablicas del individuo, facilitan la replicacin y mutacin de los retrovirus insertos en el genoma del hospedero. Las variaciones en la secuencia y en la expresin gnica individual, inuenciada en gran parte por el medio ambiente, son las responsables de la variabilidad molecular y metablica de los individuos, que a su vez cuenta para explicar en parte la diferencia en la respuesta ante las infecciones. Las variaciones en la expresin de un gen son principalmente el resultado de la interaccin entre los genes y el medio ambiente donde se desempea el individuo, y dicha interaccin vara en forma y cantidad a lo largo del tiempo, siendo ello un proceso de adaptacin al entorno. Si bien en algunos individuos y para algunas enfermedades lo gentico es ms importante que determinados estmulos medioambientales, en otros indivi- duos los aspectos medioambientales son determinantes para explicar su fenotipo y su siopatologa. Desde 1984, Barbara McClintock, descubridora de los elementos mviles en 1940 y Premio Nobel por ello en 1983, propuso la hiptesis de que los factores medioambientales pueden estimular la actividad y el movimiento de los ele- mentos transponibles en el genoma. Desde entonces, esta hiptesis se ha venido conrmando experimentalmente. En la Tabla 5.1 se ejemplican algunas investigaciones que han evidenciado el incremento en la actividad de retroelementos por estmulos asociados con factores medioambientales Debe insistirse en que la accin de los factores ambientales puede interferir con el desarrollo normal de una patologa, generando distintas versiones de la misma enfermedad en diferentes individuos, pues una especie est compuesta por una poblacin de individuos nicos, los cuales varan en sus rasgos fsicos, su metabolismo, sus respuestas inmunes, su estructura y su comportamiento. Todas estas cualidades, 121 perladas por el entorno, modicarn la expresin de la enfermedad de cada individuo. Tabla 5-1. Inuencia de factores asociados con el entorno medioambiental sobre la actividad de retroelementos (1). El-Sawy M, Kale SP, Dugan C, et al. J Mol Biol. 2005;354: 246-57; (2). Kale SP, Moore L, Deininger PL, Roy-Engel AM., Int J Environ Res Public Health. 2005;2: 14-23.; (3) Morales JF, Snow ET, Murnane JP. Mutagenesis. 2003;18: 151-8.; (4).Stribinskis V, Ramos KS., Cancer Res. 2006;66: 2616-20.; (5).Rudin CM, Thompson CB. Genes Chromosomes Cancer. 2001;30: 64-71.; (6).Muotri AR, Zhao C, Marcheuo MC, Gage FH., Hippocampus. 2009;19: 1002-7 En los procesos patolgicos infecciosos humanos siempre se deben tener en cuenta tres aspectos: las secuencias gnicas del agente infeccioso y del individuo infectado; las caracters- 122 ticas de expresin gnica del agente infeccioso y del individuo infectado; y, nalmente, el medioambiente donde cohabitan los dos, prestando especial atencin al estado nutricional, las condiciones de estrs fsico y psicolgico, la exposicin a txicos y a frmacos, as como la cultura y las costumbres del individuo o de la poblacin de la cual l hace parte. En conclusin, hoy en da es posible armar que la activi- dad de los retroelementos hace parte de la homeodinmica metablica celular que permite su integridad bioqumica y, por ende, funcional. La desregulacin de la actividad de estos elementos mviles, entre ellos los retrovirus endgenos, ya sea por incremento o inhibicin en su actividad como con- secuencia de estmulos medioambientales, es lo que puede conducir al desarrollo de una patologa en particular, siendo lo realmente importante determinar qu causa la desregu- lacin de estos elementos genmicos. Por ejemplo, la alta inestabilidad genmica generada por una tasa incrementa- da de retrotransposicin se ha propuesto como uno de los mltiples mecanismos moleculares que puede conducir a la transformacin cancerosa de una clula; o, por el contrario, una signicativa inhibicin de la actividad de los retroelemen- tos puede generar problemas que van desde la inadecuada placentacin en el desarrollo embrionario, hasta alteraciones en la plasticidad neuronal del individuo adulto. De la misma forma que sus contrapartes endgenas, la actividad de los retrovirus exgenos depende no solo de sus caractersticas moleculares, sino de los estmulos externos a los cuales es sometida la clula, el tejido, el rgano y el individuo en el que ellos habitan. Bibliografa 1. Alcantara Moreno G. La denicin de salud de la Orga- nizacin Mundial de la Salud y la interdisciplinariedad. 123 Sapiens. Revista Universitaria de Investigacin, 2008; ao9 (1):93-107. 2. Carmona L, Rozo C, Mogolln A. La salud y la promocin de la salud: una aproximacin a su desarrollo histrico y social. Revista Ciencias de la salud. 2005;3:62-67 3. Castellanos P. Los modelos explicativos del proceso salud enfermedad: los determinantes sociales. En Martnez F, Castellanos PL, Navarro V. Ciudad de Mxico: Mc Graw- Hill. Salud Pblica. 1998:81-102. 4. CausMercSost. 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ARBOR 2002;CLXXII:135-166. 125 CAPTULO SEIS LAS DROGAS PSICOACTIVAS DE ABUSO Y LA MALNUTRICIN ORIGINAN SNDROME DE INMUNODEFICIENCIA, SIDA, SIN VIH Gttttrao Oattro Ntavtrz Qtt+rao, QF, M.Sc La epidemiologa es como un bikini, lo que deja ver es inte- resante, lo que esconde es fundamental (Peter Duesberg) Pr+ra Dtrsnrac, ros+tttro a Premio Nobel de Medicina y actual profesor de Biologa Molecular y Celular en la Uni- versidad de California, es uno de los muchos investigadores alrededor del mundo que ha criticado desde la dcada de los 80 cuanto han publicado con respecto al Sida en las revistas cientcas del mundo, entre ellas Proceedings of the National Academic of Sciences, Nature, Science, New England Journal of Medicine, Journal of Virology, The Lancet, etc. En todas estas publicaciones, la conclusin es: VIH = Sida = muerte. Desde ese entonces, Duesberg ha defendido la hiptesis de que lo que se conoce como Sida, no es ms que una consecuencia de ciertos factores medioambientales, que alteran de manera signicativa la capacidad de defensa de un organismo frente a agresores biolgicos regulares. De igual forma, tambin en Colombia, unos pocos cientcos desde hace ya casi dos 126 dcadas hemos cuestionado la validez de los argumentos que atribuyen como agente causal del Sida al denominado virus de la inmunodeciencia humana, VIH. En el presente captulo se pretende mostrarle al lector cmo los factores medioambientales agresivos, especca- mente el consumo de drogas de abuso y la malnutricin, pueden conducir a Sida, sin que est de por medio el VIH. Para iniciar nuestro anlisis, necesariamente debemos partir desde un enfoque epidemiolgico. Bajo esta perspec- tiva, la epidemiologia molecular sugiri que el VIH humano se deriv del virus de la inmunodeciencia de simios, SIV; sin embargo, en primera instancia, llama la atencin que los simios no sufran de epidemia por el SIV, y que sola- mente cuando los animales son sometidos a condiciones medioambientales agresivas, por ejemplo estrs social, se incrementa signicativamente la replicacin viral y el pro- greso de la enfermedad en aquellos individuos infectados y, asombrosamente, los no infectados desarrollan un cuadro clnico similar. Es necesario tener presente, que tanto el SIV como el VIH no tienen mecanismos moleculares distintos que permitan explicar que en el simio no haya epidemia y en el humano s; de hecho, el comportamiento bioqumico a nivel celular es similar. Entonces, la diferencia se explica no por el virus propiamente dicho, sino por las condiciones medioambien- tales que inciden en cada especie. Ahora bien, ha sido claro a travs de la historia de la humanidad que, en general, las epidemias se asocian a unas condiciones socioeconmicas y culturales particulares. Por ejemplo, en las epidemias de la viruela, la peste, el clera, entre otras, cada una de ellas se present en diferente poca, donde las caractersticas socioeconmicas y culturales facili- taban o incidan signicativamente para que ocurriesen. As 127 mismo, tambin fue claro que una cosa era la presencia del agente biolgico agresor en la poblacin y otra, bien distinta, el origen y la persistencia de la epidemia, de tal forma que para que sta se presentase era necesario que existiera una poblacin con caractersticas de susceptibilidad denidas. Los factores han sido distintos en los diferentes tiempos y en los diversos continentes para cada una de las epidemias. A la vez, cada una de ellas tena un patrn clnico comn y unas caractersticas socioeconmicas y culturales tambin comunes. Con base en lo anterior, es curioso que en la denominada epidemia del Sida, las caractersticas clnicas no coincidan entre los diferentes grupos poblaciones de pacientes que la padecen Por qu algunos de ellos desarrollan sarcoma de Kaposi, mientras que en otros la tuberculosis es lo dominante, o las afecciones gastrointestinales o las respiratorias? Hoy en da es claro que las caractersticas de las poblaciones son diferentes, en unas, la epidemia del Sida se asocia con el consumo de drogas de abuso intravenosas, mientras que en otras poblaciones, como la homosexual, se asocia con am- bientes farmacolgicos agresivos poppers, psicoactivos y un signicativo estrs psicolgico. As mismo, hay poblaciones malnutridas que desarrollan cuadros clnicos caractersticos complejos con inmunodeciencias de base. Al razonar sobre lo que es sobresaliente respecto a los diferentes factores en cada poblacin susceptible, salta a la vista que stos se pueden agrupar como factores del medio ambiente. La variacin de estos factores incide de manera diferente sobre el sistema inmunolgico, tornando suscepti- ble al individuo en el momento de infectarse con cualquier agente biolgico, es decir que las variables determinantes en el desarrollo o no de la epidemia del Sida son las caracte- rsticas socioeconmicas y culturales de la poblacin, pero 128 tambin, de forma especialmente trascendental, son los fac- tores medioambientales directos a los cuales cada individuo de la poblacin es sometido. De esta manera, cuando un individuo adquiere un retro- virus exgeno, este se integra como un provirus al DNA celular y de all en adelante pueden suceder diferentes cosas: si el retrovirus censa que se encuentra en un entorno celular estable, cuyo organismo no recibe agresiones medioam- bientales tales que lo pudiesen llevar a su destruccin, el retrovirus encausa su bioqumica para ser un provirus inte- grado al genoma, replicndose solamente cuando la clula lo hace. Por el contrario, si el virus censa que la clula donde habita se encuentra bajo condiciones de estrs o factores que, por ejemplo, induzcan a la apoptosis, el virus encausar su bioqumica hacia generar nuevas partculas virales y salir de la clula para conquistar otras que se encuentren bajo condi- ciones de supervivencia ms favorables. Este comportamiento es propio no solo de los retrovirus exgenos, tambin de los retrovirus endgenos y otros elementos mviles. Lo anterior indica que si un individuo agrede constante- mente a su sistema inmunolgico mediante la exposicin a factores medioambientales deletreos para ste, obviamente la funcionalidad celular particular se debilita drsticamen- te, hacindolo susceptible al ataque de agentes biolgicos, pero tambin se induce a que aquellos retrovirus exgenos o aquellos elementos transponibles, entre ellos retrovirus endgenos, insertos en el genoma de estas clulas y que se encontraban hasta el momento como huspedes silenciosos o con actividad siolgicamente benca, se tornen activos y salgan a conquistar nuevos hospederos preservando as su propia existencia un primitivo impulso bioqumico, base del denominado instinto de supervivencia. Multiplicidad de enfermedades de hoy en da, entre ellas todas las enferme- 129 dades crnicas metablicas/degenerativas como la artritis reumatoidea, el alzheimer, las esquizofrenias, el cncer, etc., se correlacionan rmemente con una expresin y un movi- miento alterado de los elementos transponibles. El consumo de drogas de abuso como un factor medioambiental inmunosupresor Hoy en da existe la suciente evidencia bioqumica que soporta cmo las drogas de abuso, entre ellas los opiceos, la marihuana y las anfetaminas, son factores medioambien- tales inmunosupresores que conllevan a un desplome de los sistemas de defensa generales y especcos del individuo expuesto a ellas, conduciendo a que cualquier ataque por una entidad biolgica infecciosa, en otras condiciones inofensiva, sea exitosa. Por ejemplo, desde el siglo XIX y comienzos del siglo XX ya eran reconocidas las serias complicaciones microbiolgicas que traa consigo la adiccin al opio y, de hecho, hoy aoran controversias acerca del empleo de opiceos morna y co- dena en el contexto clnico, debido a sus efectos depresores sobre el sistema inmune. Entre los principales efectos deletreos inducidos por la administracin de opiceos sobre el sistema inmune, cuyos mecanismos de accin bioqumico se encuentran ampliamen- te estudiados, se tienen: Inhibicin signicativa de la actividad citotxica de las clulas asesinas naturales (NK). Inhibicin significativa de la proliferacin linfocitaria y expansin clonal. Alteracin signicativa en el balance de citocinas reguladoras de la respuesta inmune celular Th1-dependiente, humoral 130 Th2-dependiente y reguladora Tr- dependiente, inhibiendo la primera y estimulando las dos ltimas. Por otra parte, es relevante para nuestro anlisis mencio- nar que, desde el ao 1993, se propuso la hiptesis acerca de que la progresin hacia Sida de individuos VIH positivos es- taba mediada por una alteracin en las caractersticas inmu- nes del individuo, declinando la respuesta Th1-dependiente y favorecindose una respuesta inmune Th2-dependiente y reguladora Tr-dependiente. Los balances de estos compo- nentes del sistema inmune se modulan a travs de una red de factores solubles denominados citocinas. Desde entonces, multiplicidad de estudios han aportado evidencia que sopor- tan esta hiptesis. Las citocinas corresponden a un conjunto de molculas sealizadoras, las cuales son sintetizadas principalmente por las clulas del sistema inmune y tienen como funcin regular toda la respuesta de defensa antes, durante y despus de una agresin por algn organismo infeccioso. De tal forma, las citocinas inmunoestimulantes son crticas en las primeras etapas de la agresin, pues de ellas depende la activacin de clulas efectoras quienes harn frente al patgeno invasor; no obstante, las citocinas inmunosupresoras o reguladoras son igualmente importantes, pues durante la infeccin es necesario impedir una activacin excesiva de las clulas efec- toras, evitando as la agresin al propio cuerpo. As mismo, luego de que el agente agresor ha sido eliminado, las citocinas inmunosupresoras debern coordinar tambin el regreso del sistema activado a sus condiciones basales. Llama mucho la atencin que los opiceos morna y herona generan una alteracin asombrosamente similar en los patrones de secrecin de citocinas, al compararlas con las observadas en los individuos VIH positivos que progresan 131 hacia Sida, en la cual se inhibe una respuesta inmune de tipo celular Th1 y se favorecen aquellas respuestas Th2 y las respuestas reguladoras o inmunosupresoras (Tabla 6-1). Con relacin a estas ltimas, los opiceos inducen a la secrecin masiva de interleucina-10 (IL-10), siendo esta citocina am- pliamente inmunosupresora. Desde un punto de vista patolgico, se ha sugerido que la IL-10 puede ser la responsable de que las clulas T CD8 + , crticas para hacer frente a clulas infectadas con patgenos intracelulares, pierdan su capacidad funcional y efectora, convirtiendo una infeccin aguda que bajo circunstancias normales se resuelve fcilmente, en una infeccin crnica persistente. Tabla 6-1. Parmetros inmunolgicos alterados en adictos a la herona, VIH negativos, con relacin a individuos no consumidores del alcaloide Datos tomados de Govitrapong P, et al., J Pharmacol Exp Ther 1998;286:883-9; Sibiryak SV, et al., Russ J Immunol 2001;6:281-290; Azarang A, et al., , Eur Cytokine Netw 2007;18:210-4. Experimentalmente se ha encontrado que la supresin de la sealizacin inducida por la IL-10 conduce a una agresin 132 severa, altamente nociva y con frecuencia fatal por parte del sistema inmune hacia el propio organismo. Por otro lado, una produccin excesiva o una produccin en un momento no adecuado durante la infeccin, especialmente en etapas tempranas de ella, inhibe la movilizacin y propiedades efectoras de los inmunocitos, hasta el grado de que el pat- geno escapa a los mecanismos de defensa, conduciendo as a una rpida y compleja infeccin, o a una infeccin crnica sostenida que no se resuelve. A este respecto, se han corre- lacionado polimorsmos del gen de la IL-10, que inducen a una sntesis incrementada de la citocina, con una mayor susceptibilidad hacia la infeccin crnica con el virus de la hepatitis humana C y a una mayor severidad de la infeccin crnica con el virus de la hepatitis B. Por otra parte, estudios recientes han mostrado una correlacin positiva entre clu- las T CD8 + especcas para antgenos del VIH productoras de IL-10 y la carga viral en individuos que progresan hacia Sida. Igualmente, se ha observado una asociacin positiva entre la concentracin plasmtica e intracelular en clulas perifricas mononucleares de IL-10 y el avance de individuos VIH
positivos hacia Sida. El desbalance producido por el consumo de opiceos en la red de citocinas que regulan las respuestas inmunes celu- lares, se correlaciona signicativamente con el incremento en las infecciones oportunistas en los adictos a este tipo de sustancias; y sumado a ello, otro aspecto que inuye nega- tivamente sobre la funcionalidad del sistema inmune de los drogadictos son los denominados sndromes de abstinencia, cuando por una u otra causa el individuo no se puede admi- nistrar la droga regularmente. Se ha demostrado en modelos in vitro y ex vivo con clulas humanas que la abstinencia, a travs de mecanismos bioqumicos an poco claros, inhibe 133 tambin la respuesta inmune y potencia la expresin de virus como el virus de la hepatitis C al interior celular. Ahora bien, un factor de trascendental importancia para comprender por qu un individuo consumidor de opiceos es altamente susceptible al ataque exitoso por agentes in- fecciosos, radica en el hecho de que la morna hace parte del sistema de sealizacin opioide endgeno. Hasta nales de los aos 90 del siglo pasado, slo se conocan los pp- tidos opioides endgenos, pero entre los aos 2004 y 2005 se descubri que las clulas del sistema inmune y otras clulas humanas son capaces de sintetizar morna de novo, la misma molcula encontrada en la amapola. Igualmente, se comprob que los inmunocitos no solamente sintetizan morna, sino que la secretan al medio, emplendola como molcula sealizadora. De hecho, se ha llegado a catalogarla como una citocina. Hasta el momento, los estudios han demostrado que la morna endgena est implicada en aquellos eventos bioqumicos que regresan al sistema inmune activado a sus condiciones basales, proceso que es tan importante como la activacin misma del sistema, es decir que tendra una funcin similar a la IL-10. Esta accin es opuesta a la indu- cida por los pptidos opioides, los cuales han mostrado ser ampliamente estimulatorios, actuando a travs del receptor . Ahora bien, si la morna sintetizada por las clulas del sistema inmune acta como una molcula sealizadora involucrada en la modulacin negativa de la actividad del sistema inmune, cules seran las consecuencias a este nivel cuando se administra al organismo morna exgena, ya sea en concentraciones teraputicas para lograr efectos analgsi- cos, o cuando se administra el alcaloide de forma crnica en dosis signicativamente superiores a las teraputicas, como sucede en los individuos adictos a los opiceos? Es obvio 134 que las consecuencias sern el desarrollo de una inmunode- ciencia adquirida inducida por factores medioambientales, en este caso por la exposicin del organismo a una droga inmunosupresora, evento ste que no tiene nada que ver con la presencia del VIH. La marihuana, otra droga de abuso inmunosupresora Adicionalmente a todo lo anterior, es muy interesante comparar los efectos inmunosupresores ejercidos por los opiceos con aquellos ejercidos por la marihuana. De forma similar a la morna y a la herona, la marihuana modica la expresin y secrecin de citocinas, alterando negativamente la proliferacin linfocitaria y la respuesta inmune medida por clulas Th1-dependiente, estimulando a su vez aquellas respuestas inmunosupresoras o reguladoras. En la Tabla 6-2 se ilustran algunos estudios in vitro y ex vivo, empleando clulas humanas, que evidencian este comportamiento. De forma equivalente a lo encontrado con los estudios in vitro y ex vivo con clulas humanas e in vivo con animales, los estudios con humanos han arrojado resultados similares, encontrndose que en individuos consumidores de marihua- na, la respuesta proliferativa de linfocitos y su produccin de IL-2 se encuentra signicativamente disminuida, mostrando paralelamente un incremento drstico en las concentraciones sricas de IL-10 y TGF-, citocinas inmunosupresoras. 135 Tabla 6-2. Efecto del tetrahidrocanabinol sobre algunos pa- rmetros funcionales inmunes de clulas dendrticas y ma- crfagos alveolares humanos. Estudios in vitro y ex vivo
Datos tomados de Roth MD, et al., Chem Phys Lipids 2002;121:229- 39; Baldwin GC, et al.,. Am J Respir Crit Care Med 1997;156:1606-13; Shay AH, et al., J Infect Dis 2003;187:700-4. As mismo, se ha evidenciado que la accin de la mari- huana como agente inmunosupresor se lleva a cabo a travs del agonismo sobre los receptores de canabinoides endge- nos CB2, presentes en las clulas del sistema inmune, aun cuando no se descarta la participacin de los receptores CB1 ubicados en el sistema nervioso central. Con base en lo anterior, es claro hasta el momento que en los individuos consumidores de marihuana, los sistemas de defensa se encuentran signicativamente alterados, no solo a nivel sistmico, sino tambin a nivel local en tracto respiratorio donde, debido a la forma de administracin de la droga, las concentraciones de canabinoides alcanzan 136 niveles elevados, alterando la funcionalidad de diversas c- lulas inmunocticas que deenden contra virus y bacterias que ingresan por va respiratoria. Todos estos estudios, rea- lizados fundamentalmente en la ltima dcada, aportaron importante evidencia bioqumica que explican los hallazgos epidemiolgicos observados desde los aos 70 y 80, que aso- ciaron el consumo de marihuana con inmunodeciencias, el incremento en las infecciones oportunistas, la susceptibilidad al VIH y la posible progresin hacia Sida. El xtasis: una anfetamina con marcados efectos sobre la funcionalidad del sistema inmune Las anfetaminas, cuyo principal representante es la me- tilendioximetanfetamina (MDMA) o ms conocida como xtasis, corresponden a drogas de abuso cuyo consumo en la poblacin se ha incrementado en los ltimos aos. Al igual que para los opiceos y la marihuana, hoy en da hay suciente evidencia bioqumica que demuestran los efectos inmunosupresores de estas sustancias. Entre los principales mecanismos a travs de los cuales las anfetaminas alteran la respuesta inmune, se encuentra la activacin excesiva del eje hipotalmico-pituitario-adrenal, con el consecuente incremento en la concentracin srica de cortisol. La administracin de 100 mg de MDMA por va oral en humanos conduce a las 2 horas luego de la administracin del frmaco a una elevacin en la concentracin srica de cor- tisol de 500 nM (18 g/dL) por encima de los niveles basales, concentracin que permanece signicativamente elevada luego de 4 horas. Otros reportes indican que una dosis de 1,5 mg de MDMA/kg de peso conlleva a concentraciones de cortisol de 772 nM (28 g/dL). Cabe mencionar que la concen- tracin basal de cortisol circulante en sangre, ampliamente inuenciada por ritmos circadianos, se encuentra entre 138 137 y 635 nM (5-23 g/dL) entre las 8 a.m. y el medio da; entre 138 y 414 nM (5- 15 g/dL) entre el medio da y las 8 p.m.; y entre 0 y 276 nM (0-10 g/dL) entre las 8 p.m. y las 8 a.m. Es importante tener en mente que el consumo de MDMA en forma recreacional o como droga de abuso puede oscilar entre 100 y 1000 mg al da, con lo que las concentraciones sricas de cortisol podran estar muy por encima de las obte- nidas en los estudios clnicos, siendo ampliamente conocido que concentraciones superiores a los 500 600 nM ejercen potentes efectos inmunosupresores. Con relacin a lo anterior, son interesantes las observa- ciones de que el avance de individuos no drogadictos VIH positivos hacia Sida y el aumento en su carga viral se correlacionan con un incremento signicativo en las con- centraciones circulantes de cortisol. De hecho, hace ya ms una dcada que se haba propuesto que el imbalance en la secrecin de esta hormona tena un posible rol en el desarrollo de la enfermedad, hiptesis que se soport adicionalmente con el hallazgo de que el genoma del VIH posee un elemento de respuesta intragnico para glucocorticoides en la posicin +5002 del marco abierto de lectura del gen que codica para protena retroviral vif, explicando as en parte las observa- ciones clnicas y los estudios in vitro con lneas celulares linfocticas y monocticas infectadas con el virus, las cuales al ser estimuladas con cortisol o dexametasona incrementan la expresin gnica y la sntesis proteica del virus. Este hecho supone que aquellos individuos con activacin signicativa crnica del eje hipotalmico-pituitario-adrenal, ya sea por consumo de anfetaminas, estrs emocional u otros factores medioambientales, seran individuos altamente susceptibles a que cualquier retrovirus exgeno inserto en su genoma encause su bioqumica hacia la replicacin masiva y salida de la clula que va hacia la destruccin. Sumado a lo ante- 138 rior, es importante recordar que los mismos mecanismos bioqumicos de respuesta a corticosteroides los poseen los retrovirus endgenos, de tal forma que los individuos droga- dictos tambin se exponen a sufrir de enfermedades si estos retrovirus endgenos comienzan a expresarse y movilizarse de forma incontrolada dentro del genoma debido a la agresin medioambiental. Pero las anfetaminas no solamente ejercen su efecto in- munosupresor a travs de la induccin de concentraciones elevadas de cortisol circulante, ellas tambin alteran el ba- lance de citocinas inmunosupresoras e inmunoestimulantes, efectos muy similares a los descritos para los opiceos y la marihuana, como se ejemplica a continuacin. En estudios clnicos empleando individuos sanos a quienes les fue administrado 100 mg de MDMA va oral, se obtu- vieron muestras de sangre perifrica antes del tratamiento con el frmaco y luego a los tiempos 1, 1.5, 2, 6 y 24 horas. Para cada tiempo se aislaron las clulas mononucleares, se cultivaron y se estimularon ex vivo con el mitgeno tohe- maglutinina, cuanticndose la secrecin de citocinas al medio. Se encontr que la secrecin de IL-2, TNF- e IFN-, citocinas inmunoestimulantes, se redujo aproximadamente en 83, 73 y 40 %, respectivamente, con respecto a los resulta- dos obtenidos con los mismos individuos, pero tratados con placebo. Este efecto fue observado entre 1,5 y 2 horas luego de la administracin del frmaco, tiempo que coincide con su concentracin mxima plasmtica. Paralelamente, en el mis- mo intervalo de tiempo, las concentraciones de las citocinas inmunosupresoras o reguladoras TGF- e IL-10 se incremen- taron aproximadamente en 249% y 133%, respectivamente. En este mismo estudio se evalu el posible efecto de la MDMA sobre las diversas subpoblaciones linfocitarias cir- culantes en plasma, encontrndose que, si bien el nmero 139 total de leucocitos no se modic, el nmero de clulas T CD4 + luego de una hora del tratamiento con el frmaco haba disminuido en 35% aproximadamente (450 clulas T CD4 + /L menos que antes del tratamiento); mientras que el nmero de clulas T CD8 + y CD19 + (linfocitos B) circulantes no tuvo modicaciones. De forma contraria, en este mismo intervalo de tiempo, se observ un incremento de 212%, aproximada- mente, en el nmero de clulas asesinas naturales (250 clulas NK/L ms que antes del tratamiento). Los conteos de las subpoblaciones celulares alteradas comenzaron a regresar a los valores basales luego de 24 horas de la administracin del frmaco. Resultados similares han sido reproducidos empleando diferentes cohortes de individuos. Con base en lo expuesto hasta el momento, es lgico pen- sar que en un individuo que consuma opiceos, marihuana o anfetaminas, se pueda generar un sndrome de inmuno- deciencia adquirida completamente independiente de la presencia del VIH. Cabe enfatizar que la polifarmacia, es decir, el consumo simultneo de drogas de abuso, perfectamente puede conllevar a sinergismos de suma o de potenciacin en los efectos inmunosupresores de estas tres drogas, ello sin tener en cuenta otros factores asociados al individuo droga- dicto como la malnutricin y el estrs psquico, que inciden signicativamente en la respuesta inmune, acarreando como consecuencia el desplome en los sistemas de defensa observa- do en estas personas, catalogado clnicamente como Sida. A este respecto, vale la pena mencionar que se han de- sarrollado estudios transversales y longitudinales con con- sumidores de marihuana y MDMA, simultneamente. En el primer caso, al comparar individuos no consumidores de drogas con aquellos consumidores de las dos drogas mencio- nadas, se ha encontrado una disminucin signicativa en el nmero de clulas T CD4 + y clulas NK, drstica alteracin 140 en la proliferacin linfocitaria estimulada por mitgenos, as como un importante aumento en la secrecin de la citocina inmunosupresora TGF-, luego de la estimulacin linfocitaria ex vivo. En estudios longitudinales realizados por un ao, se ob- serv que los consumidores ocasionales y regulares de estas dos drogas tienen una disminucin en el conteo de clulas T CD4 + de 27%, con respecto al grupo control de individuos no consumidores. De forma similar, el conteo de clulas NK des- cendi drsticamente entre 71% y 77% para los consumidores ocasionales y regulares, respectivamente. Al comparar estos resultados con la administracin aguda de la droga sugieren que la respuesta inicial es elevar el conteo de clulas NK, pero un consumo crnico ejerce un efecto opuesto. Desde el punto de vista clnico, se observ una incidencia signicativamente mayor en infecciones leves para los indi- viduos consumidores regulares de las dos drogas de abuso. Es de resaltar el descenso signicativo en las clulas ase- sinas naturales NK. Clnicamente se acepta como valores de referencia entre 50 y 400 clulas/L, encontrndose en el estudio anterior que en el grupo que es consumidor regular de marihuana y MDMA, los valores promedio fueron de 44 clulas/L. Hoy en da se sabe que la marihuana ejerce este efecto y que la estimulacin crnica simptica excesiva gene- rada por las anfetaminas tambin conduce a la disminucin de la poblacin de clulas NK. Adicionalmente a la alteracin de las concentraciones circulantes de cortisol y a la disrupcin de la red de citocinas que regulan las caractersticas de una respuesta inmune en particular, estas drogas de abuso ejercen una accin inmuno- txica directa especcamente en clulas que han sido infec- tadas con un patgeno intracelular, alterando su capacidad de respuesta innata. Las investigaciones mostraron que el 141 tratamiento in vitro de macrfagos humanos previamente infectados con VIH y tratados con 10 M de metanfetamina, una concentracin siolgicamente alcanzable, increment la actividad transcriptasa reversa de los sobrenadantes de los cultivos en 165%, con respecto a macrfagos infectados no expuestos a la sustancia. Estudios posteriores revelaron que sta accin se correlacionaba con la capacidad de deprimir la sntesis de IFN- intracelular, una potente citocina antiviral implicada en los mecanismos de defensa innata al interior de la clula. Observaciones similares fueron hechas empleando hepatocitos humanos infectados con VHC, en los cuales la metanfetamina induce la expresin del virus (mRNA y protenas virales) y, al mismo tiempo, deprime la sntesis de IFN- intracelular. El tratamiento de los cultivos con IFN- recombinante humano exgeno que normalmente reprime la expresin del virus al interior celular, se vio antagonizada con el tratamiento simultneo con metanfetamina. De forma interesante, se ha observado que los consu- midores VIH positivos de metanfetamina muestran unas cargas virales incrementadas con relacin a individuos tambin VIH positivos pero no consumidores, hecho que obviamente no puede ser explicado por una falla en la efectividad de los medicamentos antirretrovirales, como lo argumentan algunos autores. En general, todos los efectos y las acciones de las anfeta- minas ilustradas hasta el momento son coherentes con las observaciones epidemiolgicas que asocian el consumo de anfetaminas con la infeccin con el VIH, el VHC y el des- plome inmunolgico observado en este tipo de pacientes. 142 La malnutricin: otro factor medioambiental con marcados efectos sobre la respuesta inmune Existe una compleja relacin entre la malnutricin, el sistema inmune y la infeccin. La malnutricin inuye negati- vamente sobre la funcionalidad de los sistemas de defensa del individuo, hacindolo vulnerable a la infeccin y, este ltimo estado patolgico, intensica a su vez la severidad de la mal- nutricin, convirtindose en un crculo vicioso. Por ejemplo, las infecciones gastrointestinales pueden conducir a diarrea, vmito y anorexia, alterando as la obtencin y absorcin de nutrientes, lo que agrava la situacin nutricional; otro tipo de infecciones crnicas causan anemia y caquexia. Es interesante observar que desde la dcada de los no- venta, las disfunciones inmunolgicas asociadas con la mal- nutricin se agruparon bajo la denominacin Sndrome de Inmunodeciencia Adquirida de origen Nutricional, (NAIDS, por sus siglas en Ingls), sin embargo, llama la atencin que a este tipo de Sida, as como al de origen toxicolgico antes discutido, no se le dio el despliegue publicitario que mereci el Sida de origen viral en los aos 80. El sndrome de inmunodeciencia adquirida de origen nutricional involucra la alteracin de todos los mecanismos de defensa, incluyendo las barreras anatmicas y otros mecanismos innatos, la inmunidad mediada por clulas, la inmunidad humoral mediada por anticuerpos y factores del complemento, as como las funciones fagocticas y citolticas, entre muchas otras (Tabla 6-3). Si bien, este tipo de Sida es ms comn en nios y en ancianos, la malnutricin es una causa importantsima de morbimortalidad en adultos, an cuando ello es raramente mencionado debido a la forma con- vencional en que las causas de morbilidad o mortalidad son reportadas y analizadas. Generalmente, el deceso se atribuye, por ejemplo, a una infeccin de cuadro clnico complicado, 143 pero no a la causa y a la complicacin de la infeccin. Adicio- nalmente en el contexto clnico, el Sida de origen nutricional es un factor de riesgo para el desarrollo de complicaciones en procedimientos medicoquirrgicos y en lesiones traum- ticas importantes. Es as como se ha estimado que entre 6 y 10% de las muertes intrahospitalarias se deben a estados de malnutricin de los pacientes, los cuales son altamente susceptibles a contraer infecciones nosocomiales. Tabla 6-3. Efectos de la malnutricin debida a dcit energtico, proteico y de micronutrientes sobre algu- nos parmetros inmunolgicos s inmunolgicos. Hoy en da es ampliamente aceptado que la malnutricin es la principal causa de inmunodeciencia adquirida se- cundaria, la cual cobra cientos de miles de muertes al ao desde siglos atrs entonces, por qu en los ltimos 20 aos se volc toda la atencin y se cataloga como la causa ms importante de inmunodeciencias secundarias a un agente biolgico en particular, el VIH? No ser ms relevante el hecho de que la malnutricin, al alterar las caractersticas inmunolgicas, hace que cualquier entidad biolgica, llmese bacteria, hongo o virus, aproveche la situacin de indefen- 144 sin inmune en un individuo y lo infecte? Por ejemplo, la infeccin por el hongo Pneumocystis carinii, frecuentemente diagnosticado en pacientes con VIH/Sida, fue identicado en nios malnutridos, VIH negativos, luego de la Segunda Guerra Mundial, siendo atacados simultnea o posterior- mente por otros microorganismos oportunistas. As mismo, en Kenia, se encontr una asociacin signicativa entre la infeccin por VIH y parmetros antropomtricos y bioqu- micos marcadores de malnutricin por qu no se hizo el despliegue publicitario para el Pneumocystis carinii u otros microorganismos oportunistas comunes en la malnutricin, pero s para el VIH?. Ahora bien, al analizar las bases bioqumicas de la malnutricin como causa principal de las inmunodeciencias secundarias, es necesario recordar que, en respuesta a una infeccin, se involucran procesos de activacin y propagacin de clulas inmunocticas y la sntesis de una gran cantidad de molculas, entre ellas DNA, RNA, y multiplicidad de protenas reguladoras citocinas, por ejemplo, requiriendo as una cantidad de energa adicional que no se aporta en casos de malnutricin. Es tan fundamental el estado nutricional del individuo para el desarrollo de una infeccin, que la tuberculosis, enfermedad histricamente ligada a la especie humana, cobra ms de 2 mi- llones de muertes al ao, y se ha calculado que la tercera parte de la poblacin mundial est infectada por el bacilo, pero solo un porcentaje signicativamente bajo desarrolla la enfermedad, siendo especialmente susceptibles aquellas personas malnutridas. De hecho, hay reportes que indican que la nutricin adecuada es un factor absolutamente esencial en el tratamiento, sumado al empleo de agentes quimioteraputicos especcos. Se ha evidenciado en modelos animales que las consecuencias negativas de la malnutricin hacia la inmunidad contra Myco- bacterium tuberculosis, se deben a una alteracin de los balances de las respuestas inmunes Th1/Th2. De esta forma, la activacin linfocitaria, as como la produccin de las citocinas IL-2, IFN- y 145 TNF-, involucradas en el control de la bacteria, estn signicati- vamente reducidas en los animales con dcit proteico y calrico. Adicionalmente, los macrfagos de estos animales muestran una produccin incrementada de TGF-, citocina que inhibe a las clu- las T. Otro hallazgo importante en estos estudios es que la ecacia de una vacunacin contra la tuberculosis se reduce profundamente en los animales mal nutridos en relacin con aquellos que reciben un aporte nutricional adecuado, situacin que se atribuye a la alteracin en la funcin linfocitaria. Mltiples estudios en humanos han mostrado tambin la alte- racin del balance Th1/Th2, inducido por la nutricin inadecuada. En nios con diversos tipos de infecciones, la malnutricin estimula la produccin de las citocinas IL-10 e IL-4, a partir de clulas T CD4 + y T CD8 + , citocinas caractersticas de respuestas Th2; e inhi- be signicativamente la produccin de las citocinas IL-2 e IFN-, propias de respuestas Th1, con relacin a nios infectados pero con estados nutricionales adecuados. As mismo, se ha observado que la capacidad de activacin de las clulas T CD4 + y T CD 8 + est signicativamente disminuida en aqullos con dcits dietarios. Adicionalmente, las investigaciones han mostrado que la malnutricin, proteica y calrica, induce a la activacin del eje hipotalmico-pituitario-adrenal, incrementando los niveles de cortisol circulante, con los ya reconocidos efectos de esta hormona sobre la funcionalidad inmune. De igual forma, es importante mencionar que la mal- nutricin severa en el neonato conduce a alteraciones en el desarrollo de rganos linfoides primarios conllevando a poblaciones linfocitarias reducidas a largo trmino y a la susceptibilidad incrementada hacia patgenos infecciosos durante toda la vida. 146 El Sida lo utilizan para reprimir la conducta sexual de la sociedad Con base en lo anterior, cualquier agente infeccioso, por ms inofensivo que sea, al encontrar un sistema de defensa signicativamente debilitado, con clulas asesinas naturales en la mitad de su capacidad de respuesta, con linfoprolifera- cin drsticamente reducida y con una capacidad alterada en su secrecin de citocinas, ser un microorganismo que fcilmente conquistar a su husped. Se considera que entre 15 y 40% de las personas que se infectan con el virus de la hepatitis C (VHC), su sistema inmune lo elimina; porcenta- je que cae a niveles muy inferiores cuando se trata de una poblacin de individuos con un sistema de defensa drstica- mente alterado, como es el caso del drogadicto y del indivi- duo con malnutricin. Probablemente, la alta prevalencia de infeccin con VHC entre drogadictos que emplean opiceos por va parenteral se debe a las prcticas no estriles de su administracin, como suele argumentarse; pero tambin, cobra especial importancia la alteracin en los sistemas de defensa del individuo que hace que una vez el virus ingresa al organismo, ste no pueda ser eliminado. Llama la atencin la similaridad en la alteracin del patrn de secrecin de citocinas para los individuos que progresan hacia Sida y aquella observada en los individuos consumi- dores de drogas, VIH negativos. Dado que las estadsticas no siempre discriminan a los individuos VIH positivos no drogadictos, de los drogadictos, es vlido cuestionar si la propaganda, intencionada o no, sobre el avance del Sida obra como distractor sobre el agelo de la drogadiccin, sus causas y consecuencias. La estadstica de individuos VIH positivos sin discriminacin de factores adicionales, incluyendo obvia- mente la malnutricin, es usada para generar pnico en la poblacin, sealando unilateralmente al virus como nico 147 responsable de la epidemia. De esta manera, sugieren que la responsabilidad del Sida depende nicamente de la conducta sexual del individuo y que si se contamina con el virus ya est condenado a morir de Sida. Sutilmente, se deja entrever que padecer de Sida es el precio a una conducta libertina, algo as como un castigo merecido a los descarriados sexuales y homosexuales. No obstante, nunca se ha concientizado a la poblacin que la drogadiccin y la malnutricin son causas fundamentales del Sida, independientemente de la presencia del VIH. Segn lo expuesto hasta el momento, la premisa que arma que es posible desarrollar Sida sin la presencia del VIH es completamente vlida; y, por lo tanto, es necesario llamar la atencin de los profesionales de la salud en el sen- tido de que cuando se hable acerca de las drogas de abuso, no slo se deben mencionar sus efectos txicos a nivel del sistema nervioso, sus propiedades adictivas y la incapacidad mental que genera en el individuo; tambin es imperativo enfatizar sobre los efectos txicos en otros sistemas, como el inmunolgico, y decirle a las personas que un sndrome de inmunodeciencia puede ser adquirido sin que est de por medio un agente infeccioso que ataque los sistemas de defensa, tal como sucedera con un consumidor crnico de drogas de abuso VIH negativo. Un enfoque serio, profundo y riguroso, no raqutico, merece de igual manera, el tema de la malnutricin, por parte de los trabajadores de la salud. De tal forma, los factores causales de la alteracin del sis- tema inmune son ampliamente corregibles y controlables, si dejamos de enfocar los esfuerzos hacia el tratamiento farmacolgico del VIH. Las campaas gubernamentales a nivel mundial hacen esfuerzos para disminuir la incidencia de VHC y VIH, re- calcndole a la poblacin que lo que causa Sida es el uso de 148 jeringas no estriles o compartidas entre drogadictos, o no usar condn. Pero no hacen ningn esfuerzo por informar a la poblacin que la gran mayora de enfermedades crnicas metablicas, como obesidad, resistencia a la insulina, diabetes tipo 2, alzheimer, y, por supuesto, Sida, entre muchas otras, tienen un origen medioambiental de base y unos factores sociales y culturales particulares, en los cuales tambin tiene una responsabilidad mayscula la poltica gubernamental. 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No se debe caer en el determinismo gentico del hospedero o del agente infeccioso, la desviacin implica dar demasiada importancia a la secuencia gnica del individuo infectado o a la del agente que infecta; tampoco caer en el determinismo ambiental. Es cttao qtr 8% de nuestro genoma corresponde a ge- nes que codican para retrovirus endgenos, 5 veces ms de los que codican para protenas, y estn presentes en nuestro genoma desde que nacemos, heredados de nuestros padres y abuelos. Igualmente estn en todos los organismos vertebrados. Muchos de estos genes son activos, se transcri- ben y se traducen en multiplicidad de tejidos con un papel importante en la regulacin de la expresin gnica y en la siologa celular, desde la placentacin hasta la proteccin contra agentes virales exgenos. Otra caracterstica signica- tiva de los retrovirus endgenos es que son asombrosamente similares desde el punto de vista molecular y bioqumico a sus contrapartes exgenas. Con base en este conocimiento cabe preguntarse: qu consecuencias tiene, a la luz del co- nocimiento de la funcin siolgica de los retrovirus end- genos, utilizar frmacos que inhiban no solo la expresin del 170 VIH, sino tambin la de todos los retrovirus endgenos?; si las principales causas de la actual epidemia de Sida son la malnutricin y la drogadiccin, por qu atacar el problema tratando de inhibir la expresin de un virus cuya maquinaria bioqumica no est diseada para destruir la clula, y slo se replica cuando la clula es sometida a las condiciones medioambientales adversas sealadas? Se ha cuestionado mucho sobre la inadmisible toxicidad de los frmacos antirretrovirales, lo cual puede soportarse con decenas de publicaciones al respecto, pero tambin puede in- ferirse por sentido comn: un virus, para expresarse, depende enteramente de la bioqumica celular, por consiguiente, los tratamientos antivirales que inhiban la transcripcin, la sntesis de DNA y/o la traduccin viral, necesariamente son txicos porque son anticelulares. La mayora de los medicamentos anti-VIH contienen anlogos de nuclesidos, cuyos mecanismos de accin se fundamentan en interrumpir la elongacin de la cadena de DNA que est siendo sintetizada por una enzima especca, sea una retrotranscriptasa viral o una DNA polimerasa celu- lar. All radica su supuesto efecto benco pero tambin su amplia toxicidad; por su mecanismo de accin, se afecta no solo al virus sino tambin a la clula hospedera. An cuando este tipo de sustancias no eran nuevas, habiendo sido de- sarrolladas en el ao 1960 con el propsito inicial de matar clulas malignas en quimioterapia contra el cncer, en 1987 se registraron como frmacos anti-HIV, y se continan comer- cializando, a pesar de que los efectos txicos para las clulas del sistema inmune y otro tipo de clulas fueron reconocidos inmediatamente luego de su salida al mercado. Otros frmacos anti-retrovirales ampliamente empleados son los inhibidores de proteasas. Estos fueron diseados para inhibir especcamente el procesamiento autoproteoltico 171 de las protenas del VIH, proceso necesario para su ensam- blaje. Cabe recordar que los retrovirus endgenos tambin poseen proteasas para el procesamiento de sus protenas y muchas de las protenas celulares se procesan a travs de proteasas. Debido a que este tipo de frmacos no discrimina, afecta tanto la funcin normal de las proteasas celulares como las de retrovirus endgenos, cuya funcin se requiere para la respuesta siolgica normal del individuo. De all que estos frmacos tambin sean txicos. Con base en lo anterior, se deduce que los medicamentos antirretrovirales se asemejan farmacolgicamente a anti- biticos de amplio espectro, pues su toxicidad general les imparte esta caracterstica, afectando signicativamente la funcin celular de cualquier microorganismo, patgeno o no, incluida la ora normal benca del individuo. An no est claro por qu a estas sustancias se les considera de benecio teraputico. Hay que tener en cuenta que los retrovirus, sean end- genos o exgenos, se encuentran insertos en el genoma, y slo son activos desde el punto de vista de su transcripcin cuando las condiciones medioambientales los inducen a expresarse, sea con propsitos siolgicos normales o - siopatolgicos. Por tal motivo, cuando el virus se encuentra transcripcionalmente inactivo, silente, inserto en el genoma, no hay ningn blanco farmacolgico para atacar con los medicamentos antirretrovirales; no obstante, de forma irra- cional y por inuencia de las casas farmacuticas, hoy en da se prescribe terapia antirretroviral por el simple hecho de ser seropositivo, conducta teraputica que fue infundida a los mdicos desde 1995, cuando se public en la revista The New England Journal of Medicine el eslogan Time to hit HIV, early and hard. 172 Como era de esperarse, 6 aos luego de publicitada esta consigna, y tras los devastadores efectos sobre miles de personas a las cuales se las indujo a tomar medicamentos antirretrovirales, slo despus de 6 aos, el gobierno de los Estados Unidos emiti una comunicacin publicada por el inuyente diario The New York Times, el 4 de Febrero de 2001, alertando que el tratamiento para el virus del Sida debe ser postergado tanto como sea posible para aquellas personas sin sintomatologa debido a las implicaciones toxicolgicas de la terapia Por qu no se hicieron estudios pre-clnicos y clnicos que hubiesen evidenciado la toxicidad de estos medicamentos?; , cuestionamientos an ms graves si se hicieron los estu- dios toxicolgicos, por qu no se detuvo la comercializacin y venta de estos medicamentos?, por qu se hizo caso omiso a las publicaciones de reconocidos bioqumicos y bilogos moleculares a nivel mundial sobre las consecuencias de este tipo de farmacoterapias? Entre las alternativas que tenemos para prevenir y tratar las alteraciones de los sistemas de defensa que conllevan al desplome inmunolgico de un individuo, se deben considerar los factores medioambientales que inciden en el Sida y en todas las dems enfermedades crnicas metablicas. Si un individuo es infectado por un retrovirus, cualquiera que ste sea, lo primero y ms importante es suspender todos los facto- res de agresin provenientes del medio ambiente. Con mucha probabilidad, si se restauran sus condiciones nutricionales, se retira el consumo de drogas de abuso inmunotxicas, se disminuye la ingesta de sustancias altamente oxidantes o generadoras de ellas, se regula el sueo, se controla su nivel de estrs psquico y se practica actividad fsica, el individuo podr vivir una vida absolutamente normal, sin necesidad de 173 frmacos cuya efectividad y su balance riesgo/benecio ha sido siempre muy cuestionado. De acuerdo con lo que se ha consignado a lo largo de este libro, un retrovirus endgeno o exgeno se replica masiva- mente y participa en la desregulacin metablica celular slo si es inducido a hacerlo debido a las condiciones adversas a las cuales es sometida la clula. Si estas condiciones agresivas no estuviesen presentes, el retrovirus exgeno debera perma- necer como un provirus, inserto en el DNA, replicndose slo cuando la clula lo haga, sin destruirla; y el retrovirus end- geno ejercera su funcin estando all, inserto en el genoma, y slo se expresara bajo condiciones altamente reguladas y en benecio de la clula. La drogadiccin, la malnutricin, el estrs emocional, inuyen en la expresin de los genes provirales y, si esto es lo predominante, se vuelve el aspecto principal a tener en cuenta en la prevencin y el tratamiento de un individuo; mientras que lo interno los genes del virus y del individuo se tornan en el aspecto secundario. Lo anterior obedece a que las seales externas no modi- can el nmero de genes, pero s el orden o la forma como ellos se expresan, lo cual inuye sobre la funcin celular y, por lo tanto, sobre el desempeo bioqumico y siolgico del tejido, rgano, sistema y, nalmente, del individuo ntegro; en otras palabras, el orden y la forma como se expresen los genes incide directamente sobre las caractersticas de salud o enfermedad. La respuesta individual depender de su infor- macin gentica, pero tambin de la epigentica, es decir, de la plasticidad que tiene su genoma para variar la expresin y hacer los ajustes necesarios a los constantes cambios que le plantea el medio. Cuando se quiera relacionar a un retrovirus exgeno con la enfermedad, debe tenerse en cuenta que en algunas circunstancias, ste puede ser necesario pero no suciente 174 para desarrollar el evento patolgico; en otras ocasiones, ni necesario ni suciente, y por lo tanto no ser responsable de nada. De igual forma sucede con los retrovirus endgenos, donde su sola presencia no es ni necesaria ni suciente para desarrollar una patologa; solamente cuando se desregula su expresin, ms all de los requerimientos siolgicos norma- les para la clula, es cuando el individuo se hace propenso al desarrollo de una enfermedad. La relacin est entre los genes del individuo, los genes de los retrovirus endgenos y exgenos insertos en su genoma, el medio ambiente donde cohabitan y la plasticidad epigentica; as, el medio externo direcciona el metabolismo del individuo, lo adapta a las condiciones existentes. Por tal motivo, el ver- dadero desafo para la ciencia y para los profesionales de la salud que estn en directa interaccin con el paciente, est en descubrir para cada individuo y para cada enfermedad o caracterstica siopatolgica, cul es la situacin que est predominando y evitar cometer el error de asignarle la causa a un solo factor. En este sentido, la educacin de nuestros profesionales de la salud se esmera en describir muy bien la bioqumica de los microorganismos, pero descuida en sealar la importancia de las condiciones genticas de los hospederos y del hbitat donde se desenvuelven los dos. Por ejemplo, no ha desaparecido la bacteria Yersinia pestis que arras con la poblacin del Medioevo (siglo XIV); pero las condiciones sociales actuales son diferentes a las que fueron propicias para el ataque de la bacteria en aquel entonces. La bacteria persiste hoy en da slo en aquellos casos donde los humanos conviven en la miseria con las ratas y las pulgas que transmiten la Yersinia pestis. Debemos tener en cuenta que al modicar los factores del entorno, no se producirn los mismos efectos en todos los individuos afectados. Si agrupsemos a los individuos 175 infectados respecto a cmo los afectan las condiciones medio- ambientales, nos encontraramos con dos grandes grupos: aquellos en los cuales cambios medioambientales moderados inciden de una manera drstica en sus condiciones de salud/ enfermedad, y aquellos que requieren cambios mucho ms pronunciados para lograr los mismos efectos. En la actualidad se ha correlacionado el desarrollo de multiplicidad de enfermedades crnicas metablicas con la desregulacin en la expresin de retrovirus endgenos y ex- genos, siendo el entorno medioambiental un factor decisivo para que esto ocurra. De tal forma, si los profesionales de la salud nos dedicsemos a investigar cules son los determi- nantes medioambientales decisorios qu debemos comer y no comer, a qu sustancias txicas nos estamos exponiendo diariamente y cmo actan, cmo es nuestro patrn de ac- tividad fsica, cmo responde la epigentica ante cambios adversos medioambientales, etc., podramos hacer un impacto drstico en la salud pblica desde el punto de vista preventivo y teraputico, con un riesgo mnimo para cada individuo y, especialmente, aportndole calidad de vida a la persona a travs de una intervencin integral. No podemos caer en el determinismo gentico del hos- pedero o del agente infeccioso, la desviacin implica dar demasiada importancia a la secuencia gnica del individuo infectado o a la del agente que infecta; tampoco caer en el determinismo ambiental. Al respecto, es preciso tener en cuenta que el estudioso de la virologa o de la microbiologa ha de ceirse al anlisis gentico para entender el proceso puramente bioqumico del evento infeccioso as como para entender algunas de sus manifestaciones en el individuo. No obstante, tratar de reducirlo todo a la actividad gentica del agente infeccioso o del hospedero sera sencillamente un despropsito. El conocimiento de la actividad gentica no 176 basta para aprehender y calcular la complejidad del proceso infeccioso ni de sus manifestaciones celulares, ni mucho menos del individuo en su conjunto. Durante el proceso infeccioso por un retrovirus exgeno o durante el movimiento de un retrovirus endgeno, ocurre diversidad de interacciones moleculares dictaminadas no solo por los actores involucrados en el proceso el retrovirus y el hospedero, sino tambin por las inuencias del medio ambiente, el cual modica la bioqumica extracelular e in- tracelular. Todos estos aspectos contribuyen a la funcionali- dad celular como un todo y a la siopatologa que pudiese desarrollarse en el individuo. Lo anterior quiere decir que en el inagotable interactuar molecular, la actividad gentica del agente infeccioso y del hospedero es la que determina la bioqumica de la patologa infecciosa, ah radica su carcter absoluto; mientras que su relatividad est en que no escoge ni el cundo, ni el cmo, ni el individuo que ser afectado, por- que esto depende de muchos factores del medio ambiente. En este punto debemos entonces hacernos el siguiente cuestionamiento: es el VIH, los retrovirus endgenos y los dems retroelementos, o es el medio ambiente donde habita el individuo drogadiccin, frmacos antirretrovirales cito- txicos, malnutricin, estrs psquico, etc. el responsable de la alteracin crnica de la funcionalidad del sistema inmune denominado Sida? Cualquier retrovirus exgeno no debe replicarse por igual en un individuo drogadicto, en un malnutrido o en quien recibe constantes transfusiones debido a problemas en la coagulacin, con respecto a quienes no consumen drogas in- munotxicas o a aquellos que se transfunden ocasionalmente por algn evento traumtico. As mismo, las trascendentales funciones que cumplen los retrovirus endgenos no sern las mismas en uno u otro caso. Ms an, un individuo que no est 177 infectado, pero que est sometido a estos mismos factores del medio ambiente, expresar sus genes de manera diferente a quien no lo est. En este sentido es que los genes son agentes del entorno, y la epigentica se vuelve decisiva; por lo tanto, la intervencin medioambiental tambin se vuelve decisiva, antes, durante y despus del desplome inmunolgico de un individuo. Mientras estos factores no se tengan en cuenta, nunca ser posible superar la alta incidencia de enfermedades crnicas metablicas, entre ellas el Sida. Hoy en da se conoce el efecto y la accin moduladora de diversidad de nutrientes sobre la expresin de genes, de hecho este conocimiento dio origen a lo que se conoce como la nutrigenmica; as mismo, es ampliamente reconocido el efecto y la accin de multiplicidad de sustancias txicas, fac- tores fsicos y otros estmulos medioambientales deletreos sobre el genoma, la toxicogenmica. A este respecto, el auge de las micas nos abre una perspectiva hacia la prevencin y el tratamiento de multiplicidad de alteraciones bioqumi- cas, centrndonos en comprender y modicar los factores medioambientales que impactan sobre nuestra epigentica, atacando as realmente la causa del problema. Esta ser la nica forma en que podremos evitar caer en el reduccionismo y el facilismo del uso de medicamentos anti-retrovirales, con sus devastadoras consecuencias para los pacientes. Bibliografa 1. Blankson JN. Primary HIV-1 infection: to treat or not to treat? AIDS Read. 2005;15(5):245-6, 249-51. 2. 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Producida por obra de los cuerpos superiores, o por nuestros inicuos actos, fue enviada por Dios para corregirnos, y tras haber comenzado algunos aos atrs en Oriente, en que arrebat innumerable cantidad de vidas, fue extendindose inexorablemente hacia Occidente. (Giovanni Boccacio, El Decamern) Ntcros \ vtvtos con una cantidad inimaginable de retro- virus endgenos cinco veces ms de los genes que codi- can para protenas-. Nacer y vivir con retrovirus endgenos tiene profundas implicaciones para el mantenimiento de la hemodinmica celular y, por consiguiente, para el adecuado funcionamiento bioqumico del individuo como un todo. De ninguna manera el objetivo biolgico de los retrovirus end- genos es causar enfermedad. Solo en aquellos casos donde se desregula su expresin es que podran estar implicados en procesos patolgicos, de la misma forma en que lo estara cualquier otro gen. En el caso de un retrovirus exgeno, se integra el genoma del hospedero pero tampoco busca producir una patologa per se. Los virus lentos, como los retrovirus exgenos, para tener xito como agentes infecciosos dependen de la repli- cacin celular y, por consiguiente, de la supervivencia del hospedero, de tal forma que causar enfermedad no es su n, ni una consecuencia de su infeccin. Es as como los retrovi- 180 rus, sean endgenos o exgenos, por s solos no explican la enfermedad, pudiendo ser necesarios pero no sucientes para generar un evento patolgico, o incluso no ser ni necesarios ni sucientes, como es el caso del individuo drogadicto o malnutrido que desarrolla un cuadro clnico similar al Sida sin ser VIH positivo. Entonces, para explicar las enfermedades infecciosas o crnicas metablicas como el Sida, necesariamente se debe involucrar a los factores medioambientales en los que se desenvuelve el individuo, los cuales inuyen directamente en su epigentica, y sta modica la expresin de los genes, incluyendo la expresin de los retrovirus endgenos o ex- genos. As, se modican las vas metablicas, alterando la transcripcin y todos los eventos postraduccionales en la clula. Todo esto explica en parte la diferencia en la sus- ceptibilidad hacia las infecciones y hacia el desarrollo de patologas crnicas. Si bien nos hemos enfocado en analizar las implicaciones que tiene nacer y vivir con retrovirus endgenos y exgenos similares al VIH y argumentar por qu el VIH no es la cau- sa fundamental del Sida, el interrogante que planteamos en el libro es: por qu todo este conocimiento acerca de los retrovirus endgenos y su funcin biolgica no sale a la luz pblica? Por qu est vedado a las grandes masas? Para contestarla, tenemos que partir del hecho de que las multinacionales farmacuticas, concentradas en pocos mo- nopolios, son las ms interesadas en impulsar y mantener la falacia de que el denominado virus VIH es la causa de la epidemia de Sida. Para tamaas enormidades, gratican a ciertos cientcos prestigiosos, o bien patrocinan proyectos u ofrecen ddivas a todos aquellos que, conscientemente o no, aventuren al buen tuntn, a contrapelo de la evidencia cientca, que el nico y efectivo tratamiento para el Sida 181 son los medicamentos que, multiplicando vampirescamente sus capitales, dichas compaas venden, a precios altos y con ganancias exorbitantes. La estrategia global de mercadeo, una verdadera guerra meditica de baja intensidad, incluye patrocinar un alud de campaas, congresos y todo tipo de publicidad que apoye la lucha contra el Sida, dejando en claro que los medicamentos son la nica opcin. A esto se pliegan polticos reaccionarios, sectores religiosos e intelectuales moralistas que sacan pro- vecho para llamar a la unidad familiar como nica va de salvamento, atribuyndole a la promiscuidad y a la prdida de valores lo que acarrea la epidemia. Como se puede ver, todos a una conuyen en desviar los avances cientcos que desmitican la epidemia, unindolos intereses malsanos y egostas en ocultar la verdadera madre del cordero: el hambre, la desnutricin, el desempleo, la drogadiccin y cuantas ms miserias, genuino producto del presente sistema econmico rapaz que arroja al desamparo a miles de habitantes y favo- rece slo a un puado de ladrones. Adicional a esto, quienes controlan el poder imponen, con la complicidad de intelectuales bien remunerados que estn a su servicio y mediante la prensa corporativa que dominan, la patraa generalizada de que la causa principal y nica de las epidemias son los virus u otros microorganismos. A pesar de que dicha nocin impera desde el feudalismo, y aunque la burguesa revolucionaria la aclar a su debido tiempo, el capitalismo en su fase imperialista volvi a reto- marla. Para entender esto, vamos a analizar las epidemias que histricamente ha padecido la humanidad. 182 Breve resea de las epidemias Enfermedades virales emergentes: nuevos virus?, anti- guos agentes patgenos que solo ahora se identican? O alteraciones en los sistemas de defensa de los individuos? En el desarrollo de una epidemia, los factores de mayor importancia son los socioeconmicos, los salubres y los de tipo medioambiental. Aquella infeccin nueva que aparece en una poblacin la denominan emergente, y si ha existido pero est aumentando en incidencia o rango geogrco la denominan reemergente, porque ha estado silente en la naturaleza y reaparece en forma de epidemias y brotes. Con el avance de la ciencia y la tecnologa se han identicado nuevos virus, incluso algunos que al parecer no se asocian a enfermedades en humanos o animales. Es de aclarar que el calicativo de nuevos hace alusin a que, si bien su existencia es antiqusima, no se ha- ban caracterizado o encontrado en una especie en particular. As mismo, incluye la identicacin de brotes o epidemias causadas por agentes biolgicos ya conocidos, es decir, in- fecciones reemergentes como la ebre amarilla, el dengue y la inuenza. Entre los factores que inuyen signicativamente en su aparicin se cuentan los sociales y econmicos, entre ellos pobreza, hambrunas, drogadiccin, estrs fsico y psicol- gico, guerras y crecimiento no planicado de la poblacin. Sumados a estos, encontramos aquellos relacionados con los aspectos salubres que golpean a los ms pobres y des- poseidos del planeta falta de acueducto y alcantarillado, carencia de atencin mdica igualitaria, menoscabo de los programas de salud, inadecuada vigilancia epidemiolgica, ausencia de personal tcnico entrenado, trasplante de rga- nos y tejidos, utilizacin de medicamentos inmunosupresores y uso indiscriminado de antibiticos. Adicionalmente, otras 183 condiciones que inciden en la reaparicin de infecciones son aquellas relacionadas con alteraciones del medio ambiente, a saber: la deforestacin y reforestacin de nuevas variantes ecolgicas, el caos de los ecosistemas hdricos, las sequas o inundaciones, el calentamiento global, la exposicin a txicos industriales y a la radiacin electromagntica. Eventualmente, en el desarrollo de una epidemia podran inuir los cambios evolutivos en los microorganismos que llevan a adaptacin, reejndose ello en un incremento en la virulencia, la produccin de toxinas, el desarrollo de resisten- cia natural y resistencia adquirida. Sin embargo, este punto no es el ms relevante. Entre todos los factores mencionados, los de mayor importancia son los socioeconmicos, salubres y los de tipo medioambiental, puesto que impactan de manera importante en la epigentica de los individuos, con la con- secuente alteracin en sus sistemas de defensa, hacindolos propensos al ataque exitoso de microorganismos. Los microorganismos no son lo ms importante en el origen de una epidemia Vamos a describir algunos ejemplos de enfermedades infecciosas comunes, con el objeto de comprender por qu no son los microorganismos lo ms importante en el ori- gen de una epidemia, como s lo son las condiciones antes descritas. La ebre amarilla, que afectaba a monos, atac al humano cuando ste se adentr en la selva virgen y adquiri la enfer- medad como una zoonosis infecciones de animales trans- mitidas al hombre-. Tras el desarrollo industrial, el trco de esclavos y el comercio martimo, en suma, el propio desarrollo de la sociedad capitalista, se contribuy a diseminar el virus causante de la enfermedad y del mosquito Ades aegyti su vector- desde el frica a otras reas tropicales. Dado que el 184 mosquito se adapt a las ciudades, apareci ebre amarilla urbana y de esta manera se cre el ciclo humano-humano. El dengue, descrito desde nes del siglo XVIII, presenta ciclos de infeccin humano, mosquito y otros animales, como lo hace la ebre amarilla. Igualmente, las espantosas condi- ciones salubres, econmicas, nutricionales, de hacinamiento y dems, que aoraron durante el desarrollo de la Segunda Guerra Mundial, provoc el resurgimiento de la epidemia a partir de individuos infectados en zonas del Pacco y Asia. El mosquito Ades aegyti puede transmitir tanto el virus del dengue como el virus de la ebre amarilla. Otro vector es el Ades albopictus, que lleg al frica y las Amricas desde Asia, a nales del siglo pasado (dcada de los 80). De nuevo, las condiciones de intercambio comercial entre los pueblos motivaron la expansin del vector, que antes estaba restrin- gido a una zona. Tambin, el cambio climtico puede inuir en el compor- tamiento de los vectores. El incremento de la temperatura entre 1 a 2 puede intervenir en la migracin de mosquitos vectores de virus a nuevas reas geogrcas. As mismo, crece la posibilidad de transmisin del agente infeccioso si se tiene en cuenta que el periodo de incubacin extrnseco del virus dengue a 30 es de 12 das, pero si se incuba entre 33 y 34 , disminuye a 7 das. La manipulacin de las condiciones naturales, por el desa- rrollo econmico no planicado inherente al capitalismo, en el cual solo importa el inters de un individuo, una empresa o una nacin, ha ido devastando selvas y hospederos naturales, redireccionando el proceso infeccioso de los virus hacia el hospedero ms comn y abundante: el humano. Por eso no sorprende que desde la segunda mitad del siglo XX se haya acelerado la aparicin de nuevas enfermedades causadas por agentes biolgicos virales y bacterianos. 185 Algunas veces, se aduce que estos brotes obedecen a mutaciones ocurridas en los virus o bacterias. Sin embargo, son pocos los ejemplos bien documentados en los cuales la aparicin o reaparicin de una enfermedad viral sea el re- sultado de cambios en el material gentico del virus. Qizs la inuenza es el virus con el mejor testimonio de que la continua evolucin del virus es responsable de epidemias anuales. Las cepas pandmicas portan nuevas hemaglutini- nas y neuroaminidasas que se adquieren por recombinacin gentica de cepas presentes en los animales, entre ellos patos y cerdos. Sin embargo, estos virus solo ocasionalmente pueden producir pandemias cuando, nuevamente, los factores so- ciales, econmicos, salubres y medioambientales sealados inducen a una susceptibilidad de la poblacin. Fue as como el holocausto del Primera Guerra Mundial (1914-1918), pro- pici las condiciones adecuadas para que ocurriese la gran pandemia de 1918, causada por el virus de la inuenza A subtipo H1N1, que cobr ms de 25 millones de muertos. Las condiciones de insalubridad que haba dejado la guerra eran perfectas para la distribucin del virus. La comida y el agua escaseaban, los soldados estaban fsicamente exhaus- tos, corra el invierno y arreciaban vientos. Primero atac los pases de Europa, y cuando la guerra culmin, los soldados al retornar a sus hogares diseminaron el virus por Amrica, frica, Australia y Asia. La gripe espaola mat a 17 millones de personas en India y a 200 mil, en Inglaterra. Uno de cada cuatro norte- americanos tena el virus durante la epidemia, muriendo 675 mil de ellos. Este agente fue reconocido como inuenza H1N1, de origen porcino. En el ao 1957, estalla otra pandemia producida por el virus H2N2 y, en 1968, la H3N2 cepa Hong Kong. Siempre 186 ha ocurrido que se requieren ciertas condiciones como des- nutricin, estrs fsico y/o psicolgico que incida a su vez en un desplome inmunolgico, generando una condicin de sus- ceptibilidad propicia para la explosin de epidemias virales. En parte, esto explica que la inmunidad preexistente contra las infecciones por virus inuenza sea inefectiva. As mismo, un factor adicional que tambin inuye signi- cativamente para adquirir nuevos virus est relacionado con el hacinamiento de animales y su convivencia con el humano. Este tipo de interaccin facilita la infeccin por agentes que normalmente no infectan a humanos. El hacina- miento de animales de diferentes especies en las granjas, la generacin de razas puras con catastrca disminucin del polimorsmo gentico la alta variabilidad permite variedad en la respuesta inmunolgica- y la presencia del trabajador humano facilita el intercambio de virus o microorganismos entre especies distanciadas evolutivamente. Esto explica la aparicin de nuevos patgenos para humanos, que antes estaban restringidos a ciertos animales y a determinadas regiones geogrcas. Por ejemplo, los patos silvestres son el reservorio natural de varios subtipos del virus de la inuenza A, habiendo estado all por siglos, sin que se extinguieran los patos. En stos, se replica en el intestino y se excreta en las heces en elevadas concentraciones y, debido a ello, se trans- miten por contaminacin fecal del agua a los patos jvenes, antes de migrar. Se calcula que las aves acuticas son reservorios de 15 subtipos del virus. Cuando ocurre contaminacin cruzada hacia otras especies por convivencia obligada, se genera una va de transmisin hacia stas, incluyendo la especie humana. No se ha observado grandes cambios en los ltimos 60 aos en los virus de la inuenza aviar, sugiriendo que tienen tasas evolutivas bajas, segn los estudios logenticos. Qiz ha 187 alcanzado un nivel evolutivo donde los cambios nucleotdicos no representan una ventaja evolutiva. Al parecer, la frecuencia de los cambios nucleotdicos es similar en aves y mamferos; pero, en aves los cambios son en general silentes, mientras que en los de origen mamfero son acumulativos y se ree- jan como cambio de aminocidos. Los virus ancestrales que causaron la pandemia del ao 1918 se mantienen circulando en aves salvajes, con poco o ningn cambio aminoacdico. Es decir, no es que ocurra un cambio genmico propiamente dicho del virus, y como consecuencia quede apto para infectar organismos de especies diferentes a la natural. Esto sugiere que no se debe explicar el resurgimiento de epidemias por inuenza solo por los pequeos cambios de unos cuantos aminocidos; en cambio, lo que surge o reaparece son las condiciones del medioambiente, que hacen susceptible a una poblacin. Por ejemplo, en el ao 2006 y 2007, la epidemia de clera que afect a casi toda Angola, con ms de 2 mil muertes, se origin por las deciencias de sus infraestruc- turas, relacionadas con el agua potable y las aguas fecales. Recordemos que 35% de las vctimas angoleas fueron nios menores de cinco aos. Otro ejemplo, es lo ocurrido con la cepa H5N1 (Hong Kong), en 1997, aislada de un nio de tres aos que fallece con un cuadro respiratorio, y fue identicado como un virus patognico de pollos, con una tasa de mortalidad de 70%. Por primera vez en esa fecha, tal cepa se aisl en el hombre y se reconoci que haba tres aminocidos cambiados en la cepa aislada del humano, respecto a la procedente del pollo. Posteriormente, ese mismo virus se reconoci en 18 pacientes ms, de los cuales cinco fallecieron. El virus Menangle, aislado en Australia en 1997 y cla- sicado como un Paramyxoviridae, es capaz de producir defectos congnitos o muerte en cerdos pequeos y se asla 188 en el pulmn, cerebro y corazn de estos animales. Se han detectado anticuerpos neutralizantes en trabajadores de granjas donde se encontraron animales enfermos o muertos con un cuadro respiratorio tipo inuenza, sugiriendo que este tipo de interaccin facilita la infeccin por agentes que normalmente no infectan a humanos. El virus Hendra en Australia y la encefalitis (encefalitis equina del este, EEE; del oeste, EEO; y venezolana EEV), son sendos ejemplos de virus, transmitidos por mosquitos capaces de producir brotes en animales y que solo ocasionalmente afectan al hombre. Normalmente, se mantienen circulando en la naturaleza en un ciclo silvestre entre vertebrados y vectores (mosquitos del gnero Culex, Aedes, Psorophora, Mansonia). Un ejemplo adicional es el parvovirus, un virus propio de gatos que salt a los perros. Aunque se encontraron cambios en el material gentico del virus (unas pocas mutaciones en genes estratgicos), esto no es suciente para explicar la nue- va epidemia en perros. Se necesit la facilidad del contacto directo entre dos especies distintas y la susceptibilidad en la nueva especie. El Sndrome Agudo Respiratorio Grave (Sars, por sus si- glas en ingls), lo produjo un virus que se cree pertenece a la familia coronavirus, procedente de un animal no humano. Al igual que muchas enfermedades virales, 96% de los enfermos de Sars se curan gracias al sistema inmunolgico propio del paciente, y mediante la administracin de tratamiento sinto- mtico con antiimamatorios y esteroides. Solo unos pocos necesitan de respiracin asistida y el porcentaje de muertes, alrededor de 4%, es ligeramente ms alto que el de las neumo- nas ms habituales. No se ha determinado con certeza, pero se cree que para el desarrollo de la enfermedad se requiere de las condiciones sociales propicias, antes mencionadas, 189 y la asociacin de agentes infectivos (dos virus o virus con bacterias), o incluso un factor gentico de los individuos. Estos ejemplos permiten comprender que el salto de un virus, propio de una especie a otra, no es fcil, ni es sbito. Se requieren condiciones propicias: contacto directo humano- animal, grandes cantidades de virus para que ste logre evadir las barreras naturales de defensa del hospedero (toser, secrecin de moco, la no presencia de todas las molculas receptoras, entre otros), susceptibilidad inmunolgica (dadas generalmente por la desnutricin clnica o subclnica, o por condiciones genticas particulares). Aun as, estos brotes se restringen a los individuos susceptibles. Solamente en caso de grandes desastres geogrcos, de clima, hambrunas o desnutricin subclnica crnica y guerras, se tornan suscep- tibles a naciones enteras. A pesar de conocerse desde hace mucho tiempo la rela- cin estrecha entre husped-hospedero-medioambiente, para todas las epidemias, emergentes y reemergentes, se insiste, sin embargo, en la visin sesgada de darle ms importancia al microorganismo que a los otros dos aspectos. De esta tergiversacin no se ha escapado la nueva epidemia deno- minada Sida. Apoyados por poderosos grupos econmicos, polticos y religiosos, algunos investigadores aducen que el VIH evolucion en primates y luego pas a un nuevo hus- ped: el hombre. Seguramente no es falsa la armacin, lo falso es slo resaltar se aspecto, y no decir ms. Descuidan o minimizan la importancia de los factores socioeconmicos y medioambientales ya enumerados. Desde esta perspectiva no es correcto, no es cientco y se falta a la verdad cuando se hace nfasis en un solo aspecto de los tres implicados: el genoma del virus o el genoma del hospedero, descuidando, de manera intencional o no, el factor medioambiental y su impacto sobre el genoma del hospedero. 190 Es decir, para que el humano tenga una susceptibilidad a la infeccin se requiere, por supuesto, de los aspectos biolgi- cos caractersticas genticas y epigenticas del individuo y del microorganismo- pero cobra especial importancia el medio ambiente donde habita y los factores socioeconmicos relacionados. Para justipreciar cmo lo social impacta directamente en la respuesta de los individuos ante las infecciones, es necesario entender que los capitalistas, y las naciones de capitalistas, amos de prerrogativas econmicas y educativas tienen, en promedio, mejores nociones cientcas de la salud y la enfermedad, su estilo de vida semeja al de los profesio- nales de la salud, estn ms atentos a los sntomas y signos de enfermedades o cambios en sus cuerpos, sobrados con frecuencia en hbitos preventivos y, en especial, por su acau- dalada condicin econmica, acceden fcilmente a los servi- cios hospitalarios de ms alta gama. Las clases desposedas, por el contrario, se debaten en condiciones de inferioridad social, econmica y educativa. En promedio, poseen poco o ningn conocimiento sobre las causas y tratamiento de las enfermedades y, en su lugar, cargan con ideas no cientcas o mitos sobre la posible enfermedad. Esta poblacin se gua por observaciones directas de la comunidad o grupo al cual pertenecen, no cuentan con informacin ni fcil acceso a los servicios mdicos de manera oportuna, muchos viajan a grandes distancias y les niegan o les incumplen las citas, sienten timidez para consultar al mdico y, por lo general, lo buscan cuando experimentan gravedad de la enfermedad, despus de agotar las alternativas no cientcas. Para los humanos, las condiciones sociales son determi- nantes para la aparicin de enfermedades, incluidas las vira- les. Dichas condiciones varan segn el modo de produccin y la estructura social de cada poca histrica, por el dominio del 191 hombre sobre la naturaleza y por la forma en que se distribu- ya la riqueza social. Con base en la historia de la humanidad, es interesante observar que la aparicin de las epidemias en la Edad Media estaban relacionadas directamente con la crisis del sistema econmico feudal, incapaz de satisfacer la mni- ma supervivencia de la poblacin y rezagado para generar ciencia y tecnologa. Sucedi en el feudalismo y acontece de nuevo en el sistema capitalista, pues para sostener o justicar un sistema poltico y econmico, se retrasa el desarrollo del conocimiento, se oculta el ya existente, o se monopoliza y slo lo usan quienes detentan el poder; en cambio, se arropa tras el manto de la supersticin y lo religioso y se da vuelo a lo mtico para infundir miedo y pnico en la poblacin. Por ejemplo, ocultan o escamotean el hecho de que en la mayora de las enfermedades ms recientes, los respectivos virus han existido por mucho tiempo en la naturaleza y han estado bien establecidos en sus hospedadores habituales. Es cierto que el aumento de la poblacin mundial produjo asentamientos humanos en zonas antes deshabitadas, que actividades como la agricultura y la deforestacin, entre otros factores, hicieron ms probable el contacto entre hombres y animales infectados y, por lo tanto, promovieron el trco viral. Pero esto es solo una explicacin parcial. Debera enfa- tizarse que son las condiciones de insalubridad, desnutricin, drogadiccin, etc., que padecen quienes son obligados a desplazarse hacia esas zonas, mientras que en los pases subdesarrollados por el imperialismo, grandes latifundios ociosos pertenecen a una minora. En la medida en que el humano, o cualquier otro animal, entra en un nuevo hbi- tat, se expone a introducir sus propios microorganismos ya adaptados a l, e introducir la enfermedad en los animales susceptibles; o se expone a recibirlos, y se enfermarn solo los individuos susceptibles. Pero para que esto ocurra son deci- 192 sivas las condiciones en que se establece esa nueva relacin. Si la poblacin crece en condiciones salubres, con nutricin adecuada, sin un signicativo estrs crnico laboral, fsico o psicolgico, entre otros, las condiciones para que surjan esas nuevas enfermedades y epidemias son poco probables. La peste bubnica, que produjo estragos en el feudalismo, reapa- rece actualmente en las poblaciones miserables condenadas a vivir en las alcantarillas de las grandes ciudades, al lado de los roedores; pero no es que la bacteria haya evolucionado para hacerse ms virulenta, simplemente las condiciones hacen asequible y propenso al individuo. Cuando los factores sociales no son propicios para una epidemia, si una enfermedad emerge, concluye rpidamente; las vctimas no tienen demasiado tiempo de infectar a otros antes de sanar o morir. En estos casos, la enfermedad toma la forma de brotes ms o menos localizados. Un ejemplo son las infecciones producidas por arenavirus y hantavirus que se hospedan en determinadas especies de ratones y constituyen su reservorio natural. Sucedi alrededor de 1940 en Argen- tina con el virus llamado Junn, perteneciente a la familia Arenaviridae, cuando se cultivaron grandes reas de maz y proliferaron los ratones, incrementndose el contacto entre el hombre y los roedores portadores del patgeno. Igualmente, con el virus denominado el Machupo un arenavirus asociado con ebre hemorrgica- en aldeas de Bolivia hacia el ao de 1960, produciendo otros brotes en los aos setentas, y en 1994. Otro ejemplo es el virus Guanarito, responsable, en 1991, de varios brotes en zonas tropicales de Venezuela. Los brotes de estos virus est ligados directamente a las condiciones socioeconmicas de la poblacin, que permiten el contacto humano-animal reservorio. Los arenavirus y los hantavirus establecen infecciones crnicas en determinadas especies de ratones, los cuales mantienen el virus en la naturaleza; el 193 hombre se infecta principalmente por aerosoles que contie- nen deposiciones de ratones infectados, cuando aumentan las poblaciones de roedores y se establece contacto con el humano. Estos virus no son nuevos, pues se sabe de textos de me- dicina tradicional china con ms de 1000 aos que describen enfermedades tpicas a las causadas por los hantavirus, como la ebre hemorrgica con sndrome renal. Sin embargo, cuando las condiciones reaparecen, como ocurri entre 1951 y 1953 en la invasin a Corea, ms de 2000 soldados de los paises agresores sufrieron de esta afeccin. Aunque el virus es antiguo, slo se aisl hasta 1976, a partir de los tejidos de un ratn y recibi el nombre de Hantaan, por un ro de Corea. Luego, en Europa se aisl en ratas otro hantavirus, el virus Puumala y el virus Sel, asociados con una forma generalmente benigna de esa dolencia. Tambin en la zona de los Balcanes, el virus Dobrava. Otra muestra es el bola, virus identicado en 1976 y el responsable de brotes de ebres hemorrgicas en diversos pases del frica. Su diseminacin fue consecuencia de la poca higiene en los hospitales y tambin de prcticas locales de inhumacin que requieren la remocin manual de las vs- ceras del cadver. An no se conoce el husped que permite al virus bola sobrevivir en la selva. Estos ejemplos sugieren un aspecto comn a todos o a la mayora de los virus, incluido el VIH: solo causan enferme- dad y muerte en unos pocos animales susceptibles, la trans- misin a otra especie no es fcil, slo ocurre en circunstancias que le son propicias, y cuando lo hace en la nueva especie la infeccin es limitada. nicamente se presentan epidemias si las condiciones de susceptibilidad son generales en una poblacin, pero ello depende ms de las condiciones de vida de la poblacin que 194 de las caractersticas per se del virus. Las supervivencia del virus depende de la adaptacin en los reservorios que le permitan expandirse sin afectar al hospedero. Es la lgica evolutiva, si el hospedero muere rpidamente, el virus no pue- de expandirse; y si se expande en demasa muere la especie y tambin el virus. Es por esto que no hay virus buenos ni malos, solo virus y hospederos. El que ocurra enfermedad o no depende tambin del otro componente: las condiciones medioambientales descritas con anterioridad. El impacto de las enfermedades diere segn la zona afectada. En los pases condenados al subdesarrollo, la po- blacin pobre y explotada est expuesta constantemente a microorganismos, observndose casi una seleccin natural a la antigua. En cambio, en los pases ricos el desarrollo tecno- lgico y cientco les ha permitido aumentar el nmero de individuos potencialmente susceptibles a virus, bacterias o parsitos comunes en los pases pobres. La lista de enferme- dades infecciosas que azotan a las mayoras expoliadas del planeta se multiplica, igual que sus consecuencias, porque la pobreza y el brutal desamparo conllevan mayor probabilidad de contraer enfermedades y propagarlas. Son las enormes y despiadadas desigualdades econmicas en el mundo las que sustentan las desigualdades sanitarias y explica las susceptibilidades poblacionales, de grupos en un pas o de pases enteros. Los medios de comunicacin son cmplices en ocultar o tergiversar la verdadera causa de las epidemias. La manera irresponsable, sensacionalista y ligera como se tratan estos temas cruciales, de vida o muerte, repercute perniciosamente en la poblacin en su forma de interpretar las enfermedades y sus causas. Cuando se menciona que hay un nuevo virus en determinada poblacin, abiertamente se les dice a los ciudadanos que el nico responsable es el virus, cuando lo 195 correcto es mencionar que no hay virus nuevos, y que son las condiciones en que vive la poblacin las responsables del brote o epidemia. Nada resulta ms excitante y atractivo para llamar la atencin de las audiencias, que los problemas que afectan al bienestar fsico de la sociedad. En este sentido, las hiptesis de epidemias exticas o la aparicin de enferme- dades desconocidas las utiliza el periodismo al servicio del capital para vender noticias y, en los pases desarrollados, atizan el racismo con miras a discriminar a la poblacin inmigrante que proviene de los pases miserables. A estos seres humanos los pintan con los colores ms infames como los promotores de las nuevas plagas, siempre ms fantsticas que reales. Dicha visin es promovida de manera solapada por desalmados nancistas y reconocidos grupos ultrarreac- cionarios de religiosos y polticos, interesados en culpar de las crisis econmicas, inherentes al capitalismo, a sectores poblacionales inmigrantes o grupos raciales. Con el manejo sesgado de la informacin lo que se busca es desviar la atencin de la crisis real que vive el sistema capitalista; en este sentido, se recurre a la vieja artimaa utilizada por el feudalismo en la Edad Media, que recurri a la religiosidad, y crearon mitos. Atrincherados con estas armas, perpetuaron el sistema feudal durante muchos siglos y allanaron el combate contra la ideologa burguesa naciente, por entonces revolucionaria. La Inquisicin se convirti en- tonces en el ms cruel y sanguinario instrumento represivo contra los cientcos que, contra viento y marea, impulsaban nuevas ideas contra aquellos que sealaban que las epidemias y las enfermedades predominantes estaban relacionadas con el modo de vida y las condiciones propias del feudalismo. Re- cordemos el heroico sacricio de Miguel Servet y de Giordano Bruno, amn de Galileo Galilei, entre otros. 196 Estos valientes cientcos unan su voz con aquellos que pedan cambios para un sistema nuevo, y apoyaban los al- zamientos campesinos contra el sistema poltico imperante. Hoy en da sucede exactamente lo mismo cuando Peter Duesberg mencion que el VIH no era el causante del Sida y public sus planteamientos, anlisis y evidencias, lo ridicu- lizaron e intentaron acallarlo, incluso impidindole publicar en ciertas revistas cientcas. Lo mismo ha ocurrido con otros cientcos alrededor del mundo, y tambin en la Colombia neocolonial y semifeudal. El decrpito sistema econmico capitalista, por esencia explotador y depredador, esgrime el garrote de la tica y la utiliza como arma poltica para controlar y empantanar investigaciones trascendentales, como la generacin de teros articiales, el trasplante de cabeza y la manipulacin de em- briones. Elevan a aspecto trascendental el respeto a la indivi- dualidad para frenar investigaciones bsicas, pero avalan que las multinacionales farmacuticas eludan las normas ticas y avasallen esa misma individualidad que aducen defender, con el engao a pueblos enteros cuando lanzan al mercado productos que a la postre resultan txicos, mas con ganancias exticas. Bien deca Marx que el obrero lucha por su salud y el capitalista por su ganancia. Igualmente, generan noticias de peligros inexistentes o sesgan la informacin, para, as, despejarle el camino a las mismas multinacionales para ven- der el frmaco apropiado. Peor an, sin escrpulos esparcen microorganismos en la poblacin para ganar una guerra. Estos mtodos no son nuevos. La historia da cuenta que los colonos estadounidenses blancos regalaban mantas con- taminadas con el virus de la viruela a la poblacin indgena, con el n de diezmarlos y reducir la resistencia de los nativos, que luchaban para no dejarse robar sus tierras. Similar con- ducta sucedi cuando brot la Peste Negra de mediados del 197 siglo XIV. Dado que los judos eran prestamistas usureros y buena parte de la economa estaba en su poder, la clase feudal los acus deliberadamente de ser la causa de la epidemia. Centenares de comunidades judas fueron arrasadas por los ataques de turba, infamias toleradas o alentadas por la autoridades. De esta manera, los feudales solucionaban sus deudas y, al tiempo, desviaban la atencin de la poblacin inconforme. En Alemania, fueron exterminadas unas 350 co- munidades judas en dos aos, mientras que solo en Baviera fueron asesinados diez mil pobladores. Otro aspecto a tener en cuenta es que los grupos huma- nos tienen, y han tenido a los largo de su historia, distintas susceptibilidades a enfermedades infecciosas, y estas sus- ceptibilidades han variado dependiendo de su situacin so- cioeconmica, de la frecuencia del contacto con otros grupos humanos y la interaccin con animales que son portadores de estas enfermedades. Entre estas historias, se destaca la de poblaciones que han permanecido aisladas, que permiten la reproduccin y existencia de individuos susceptibles a de- terminadas infecciones. La susceptibilidad es inmunolgica, porque no cuentan con los mecanismos de defensa bsicos que se desarrollan a temprana edad y son necesarios para responder a futuras reinfecciones en la edad adulta. Por ejemplo, se sabe que las poblaciones indgenas de Amrica tenan una mayor susceptibilidad a enfermedades que eran endmicas entre los europeos. Incontables ciudades indgenas fueron devastadas por plagas presumiblemente tradas por los espaoles y dems conquistadores a Amrica. En su papel de heraldos del Imperio espaol, los narradores de la Con- quista relievaron la superioridad militar, el valor y la decisin de los invasores, generando un racismo implcito. De esta manera minimizaron la importancia de la interaccin entre la sociedad y la naturaleza. Las enfermedades que trajeron 198 los europeos incluyeron la viruela, sarampin, tifus, gripa y resfriado comn. En Mxico, a la llegada de los espaoles el censo era de alrededor de 30 millones, pero las enfermeda- des introducidas, junto con las locales como tuberculosis, salmonelosis, amebiasis, leishmaniasis y mal de Chagas, diezmaron drsticamente la poblacin y contribuyeron, en parte, a allanarle el camino a la conquista espaola. Tambin se registraron epidemias en Per en el siglo XV, y entre los aztecas en los siglos XIII y XV. Entre los europeos existan enfermedades, como la viruela, pero las tasas de mortalidad estaban entre 20 y 40%. Ninguno de estos casos tuvo proporcin de epidemias que asolaran a la mayor parte de la poblacin en pocos aos. En cambio, en Cuba, La Espaola (actualmente Hait y Repblica Dominica- na), Mxico y Amrica Central s tuvo efecto de epidemia. En menos de cincuenta aos, la poblacin del centro de Mxico cay a tres millones. La gripa se difundi en Guatemala en el ao 1520; el sarampin por Centroamrica en 1531; la viruela mat a un milln de habitantes slo en Santo Domingo; el tifus a dos millones en Panam. En cuanto al Per, se estima que la poblacin antes de la llegada de los europeos oscilaba entre los 9 y los 16 millones. Para todos los casos mencionados, se tergiversa la historia porque no son explcitos en sealar que estas epidemias se presentaron porque los conquistadores impusieron traba- jos forzados a la poblacin nativa, los obligaron a vivir en condiciones infrahumanas, y sucumbieron, nalmente, de- bilitados por una alimentacin miserable y una explotacin despiadada. La historia ensea que para que una epidemia ocurra, el microorganismo es necesario pero no suciente. Se requiere de la susceptibilidad poblacional, la cual est dada no slo por las caractersticas genticas de la poblacin, sino por las 199 condiciones socioeconmicas en que sta se encuentra, como ya los sealamos. Es por esto, que las masas ms empobreci- das del planeta son las ms afectadas con epidemias viejas o nuevas, y aparecen en lugares que antes no ocurran, como en Rusia, donde el amante orden capitalista ha empujado a un sector de la poblacin a irrisorias condiciones de salud pblica, antes desconocidas. Adicional a lo expuesto, debemos tratar otro punto impor- tante: Existen riesgos para las poblaciones ricas? Qeda claro que los pobres viven en constante riesgo, como lo son Asia, frica y Amrica Latina. La verdad es que existen importantes barreras sociales y ecolgicas que hace poco probable que se desaten epidemias catastrcas por un agente infeccioso alo- jado en el cuerpo de un viajero. La mayor amenaza proviene de factores relacionados con el estilo de vida drogadiccin, alcoholismo, desnutricin, el hbito de fumar o las dietas insucientes- y no de las selvas tropicales. La creencia de que a mayor circulacin poblacional, mayor riesgo inminente de epidemias altamente contagiosas, es poco verosmil. Si la armacin anterior es cierta, por qu se promueven ideas apocalpticas constantemente? Unas veces, se recurre a infecciones, en otras, se saca provecho de los desastres natura- les, o se recurre a profecas. Pareciera que intencionalmente se busca mantener a la poblacin aterrorizada. Para comprender por qu sucede esto, se debe enfatizar que la clase dominante, en su intento por defender el sistema econmico capitalista imperante, y en su lucha contra las ideas nuevas, recurre a todo lo que est a su alcance, por inmoral que parezca. Un sector ultrarreaccionario, agazapado en partidos, religiones y dems sectas, con fuerte inuencia en las revistas cientcas y medios de comunicacin importantes, difunde la especie de que lo esencial es mantener los valores de la familia, tal y como se conocen en la actualidad, porque consideran que la 200 familia es el ncleo bsico de la sociedad actual. Creen que si se altera, la sociedad entera se derrumba. Basados en esta sospecha, en la dcada de los 70-80 del siglo pasado, a travs de novelas y del cine hicieron nfasis en la unidad familiar y la delidad sexual. El chico malo era el promiscuo, el galn o la ms bonita era el. Cuando apareci la noticia acerca de un virus de transmisin sexual que estaba causando una epidemia de muertes inexplicables, especialmente en comunidades homosexuales, era lo que necesitaban para colmar su propsito. Pelculas y noticias daban cuenta de que un solo acto sexual con un desconocido era motivo suciente para contagiarse. Expusieron carteles sealando que un solo contacto tena la posibilidad de infec- tar a cientos de personas, y que nadie escapaba aunque ese contacto pudiese haber ocurrido meses o aos atrs. El miedo y el terror fueron las armas esgrimidas. Solo se salvaban los eles, aunque insinuaban atrevidamente, Usted est seguro de su compaero? Invitaban al dilogo y la reconciliacin con su pareja, a estar unidos como dios manda. Dejaron entrever que la homosexualidad era el mayor riesgo, eran pecadores y se lo merecan, igual que los ineles heterosexuales. Aunque la industria fabric el condn, el Vaticano lo prohibi de in- mediato, porque daaba el propsito poltico: controlar con el miedo la sexualidad social. Si bien, a la luz de hoy, se tiene el conocimiento de que un virus por s solo no puede explicar la aparicin de una epidemia, intencionalmente se ocultan los dems factores. Se entrevista a cientcos reconocidos para que enfaticen dicho aspecto y con cuestionarios acomodaticios se dirige un mensaje educacional a la poblacin. En el caso del Sida, ocultaron que todo ser humano, as como todas las especies animales y vegetales de nuestro planeta, nacemos y vivimos con una cantidad inimaginable de retrovirus y genes que co- 201 dican para elementos mviles, y, a pesar de ello, continan haciendo nfasis en el VIH, como si fuese distinto gentica o bioqumicamente a los retrovirus con los cuales nacemos. Nadie, en la prensa hablada o escrita, le da trascendencia a las implicaciones evolutivas y de salud que eso implica. Se celebra el Da Mundial de la Lucha contra el Sida, pero se oculta, se enmascara la causa central: la pobreza, la desnu- tricin evidente o subclnica, la drogadiccin, el desempleo, el alcoholismo y dems plagas que alimentan y sostienen el actual sistema de explotacin econmico y social. Es por esto que frica, Hait y dems pueblos similares empobrecidos, son los ms afectados histricamente con epidemias emer- gentes o reemergentes. Por increble que parezca, durante tres dcadas, toda una generacin!, se ha mantenido la falsa armacin de que el virus VIH es el principal responsable de la epidemia del Sida. Hoy en da, abunda la literatura en sentido contrario, y la controversia, tal como se plante en este libro, debe centrarse en estudiar el signicado de poseer un alto por- centaje de retrovirus endgenos, y comprender por qu los factores medioambientales y el estilo de vida de la poblacin son los agentes realmente inuyentes y determinantes en el desarrollo de Sida. Tal como se menciona en el prefacio, es importante tener siempre en mente que no hay virus malos ni virus buenos, existen virus y hospederos, y cualquier virus o agente micro- biolgico puede matar si encuentra al hospedero apropiado, en unas condiciones tambin apropiadas. Bibliografa 1. Crosby AW. Inuenza. In: Kiple KF, editor. The Cambridge history of human disease. Cambridge: Cambridge Univer- sity Press; 1993. Chapter VIII.73. p. 807-11. 202 2. Cunha BA. Inuenza: Historical aspects of Epidemics and Pandemics. Infect Dis Clin North Am. 2004;18:141-156 3. Dieterlen P. La pobreza: un estudio losco. Fondo de cultura econmica, instituto de Investigaciones Filoscas, UNAM, Mxico. 2003. 4. Domingo-Carrasco C, Gascn-Bustenga. Dengue y otras ebres hemorrgicas virales. J. Enf Infec Microbiol Clin 2005; 23: 615-26 5. Evans R, Barer M, Marmor T. Por qu alguna gente est sana y otra no?. Madrid, Espaa. Editorial Daz de Santos. 1996. 6. Franze-Fernandez MT. 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