Tema 8: Ciclo celular
1. Generalidades del ciclo de división celular.
El ciclo celular es una secuencia rápida de procesos que garantiza la reproducción de la célula.
Estos procesos son:
1. Duplicación. Consiste en replicar el ADN y aumentar el volumen y contenido celular. Es lo
que conocemos como Interfase.
2. División. En este proceso se reparte la información genética equitativamente mediante los
cromosomas y también el contenido celular. Se trata de mitosis y citocinesis.
Por tanto, el ciclo celular es un ciclo de duplicación y división.
1.1. Ciclo celular en eucariotas
La célula durante interfase trascribe y traduce los genes. Estos procesos son interrumpidos en
la fase M.
El ciclo celular eucariot está dividido en cuatro fases:
A) Fase G1: Crecimiento y duplicación de orgánulos.
B) Fase S: Síntesis, replicación del ADN
C) Fase G2: Crecimiento y duplicación de orgánulos.
D) Fase M: División del núcleo (mitosis) y división de la célula (citocinesis).
La fase G1 + S + G2 forman la interfase
Así es como ocurre normalmente en mamíferos.
Pero en embriones no, en embriones las fases G1 y G2 son eliminadas. La célula solo replica
sus cromosomas y se divide, es decir, solo tiene lugar la fase S y M.
El ciclo celular habitual dura entre 12- 14h mientras que en embriones 8-60 min.
Es necesario que existan mecanismos que coordinen la duplicación de las células y que lo
repartan por igual al dividirse.
1.2. Sistema de control del ciclo celular.
El sistema de control del ciclo celular es una maquinaria
bioquímica, que opera cíclicamente, induciendo y coordinando los
procesos esenciales para la duplicación y división del contenido
celular. Es una estrategia general del sistema de control: Existen
unas proteínas reguladores, una serie ordenada de interruptores
bioquímicos que se encargan de detener y permitir que continúe el
ciclo celular.
Funcionamiento:
1. Cuando se alcanza un determinado punto del ciclo celular se
desencadena un proceso concreto en el que se activan enzimas y
proteínas responsables de que cada proceso tenga lugar en el
momento apropiado y las desactiva cuando acaba el proceso.
2. Retroalimentación: se regula así mismo. La célula se asegura de que cada fase se complete
antes de que comience la siguiente mediante señales internas. Esto sucede con la replicación
del ADN, que debe estar completa antes de que entre en mitosis; en la mitosis, que debe estar
completa antes de la citocinesis y un aumento de tamaño considerable antes de otra
replicación de ADN. El sistema de control también tiene en cuenta condiciones del exterior
(señales externas) de la célula como la disponibilidad de nutrientes o señales de otras células
(a través de hormonas por ejemplo)
Los puntos en lo que se puede detener el ciclo celular atendiendo a señales internas o externas
se les conoce como puntos de control.
El punto de control G1 decide si la célula continúa el
ciclo celular hacia S y para ello tiene que ver si la
célula es suficientemente grande, el entorno es
favorable y que no esté dañado el ADN (complejo
pos-replicativo)
El punto de control G2 permite que continúe el ciclo
celular hacia M y para ello deber ver si esta todo el
ADN replicado y si la célula es suficientemente
grande.
En el punto de control M que tiene lugar durante la
fase M se controla que los cromosomas estén
orientados en el ecuador de la célula formado la
placa ecuatorial durante metafase.
Las correcciones se efectuarán mediante frenos
moleculares.
1.3. Control del ciclo celular.
La estrategia general del sistema de control son complejos proteicos reguladores. Los
generales son los complejos ciclina-Cdk, formados por dos subunidades proteicas.
- Una subunidad reguladora llamada ciclina
- Una subunidad catalítica llamada proteína quinasa dependiente de ciclina (Cdk)
El complejo ciclina- Cdk cuando está activa fosforila proteínas clave, necesarias para iniciar una
etapa concreta del ciclo celular.
Hay diferentes complejos ciclina- Cdk que iniciarán diferentes pasos del ciclo celular. Como
mínimo dos complejos regulan el ciclo celular habitual:
1. Uno en el punto de control G1, antes de la fase S, denominado complejo ciclina- Cdk de la
fase S. Está formado por una ciclina de la fase S y por un Cdk de la fase S.
2. Otro en el punto de control G2, antes de la fase M, llamado factor promotor de la mase M
(MPF). Está formado por una ciclina mitótica y un Cdk mitótico.
MPF
¿Cómo se descubrió el complejo ciclina- Cdk, MPF? Se realizó un experimento con huevos de
Xenopus (1mm de diámetro). En las divisiones tras la fecundación de este se vio que solo
tenían lugar la fase S y la M, las fases G1 y G2 eran cortas o nulas. Gracias a tamaño se pudo
extraer extractos de proteínas activadas en diferentes etapas del ciclo celular. ¿Qué actividad
tenían dichos extractos? Para conocer la actividad se inyecto los extractos en oocitos
(gametocito de hembra):
Cuando se le inyecta extracto de fase M el oocito entra en la fase M
Cuando se le inyecta extracto de interfase el oocito no entra en fase M.
La conclusión obtenida fue que se necesita un factor para entrar en fase M (MPF).
Métodos bioquímicos permitieron purificar los componentes del MPF: Cdk y ciclina
Métodos genético-moleculares permitieron identificar otros complejos de ciclina-Cdk en
levaduras.
El estudio de mutantes del ciclo celular ha permitido conocer la identificación de los genes del
sistema de control
Se ha observado que los genes de las ciclinas y los de las Cdks han sido muy conservados
durante la evolución tal es el punto que dichos genes de humanos funcionan en levaduras y
viceversa.
1.4. Regulación de la actividad de los complejos ciclina-Cdk.
Los complejos ciclina- Cdk presentan actividad enzimática solo durante una parte del ciclo
celular.
- El complejo MPF se activa al final de G2 y se inactiva durante mitosis.
- El complejo fase S se activa al final de G1 y se inactiva durante S.
La regulación de la actividad del complejo MPF es la mejor conocida. Consta de una fase de
activación y otra de inactivación:
1.4.1. Activación.
La Cdk mitótica se encuentra presente a lo largo de
todo el ciclo celular, mientras que la ciclina mitótica
empieza a sintetizarse inmediatamente después de la
división celular y continua durante toda la interfase
donde aumente gradualmente su concentración (esto
ajusta el tiempo de iniciación de mitosis).
Al terminar la interfase se consigue que la concentración de ciclina sea suficiente para que se
forme el complejo MPF, pero aun es inactivo. La activación se realiza por fosforilación y
desfosforilación.
La Cdk es fosforilada en dos lugares por la acción de dos proteínas quinasas, la MO15 y LA
Wee1. La MO15 fosforila en un lugar necesario para que tenga actividad enzimática, mientras
que la Wee1 fosforila en un lugar que inhibe su actividad enzimática. De esta forma se
consigue que el MPF siga inactivo y que no actúe prematuramente.
Al final de interfase tiene lugar la desfosforilación
(eliminación) del fosfato inactivador llevada a cabo por
la proteína fosfatasa Cdc25. De esta forma el MPF
queda activado al final de la interfase y se desencadena
la mitosis. Una vez activo el complejo, favorece la
activación de la propia proteína fosfatasa,
produciéndose un impulso brusco (explosivo) de G2 a M
debido a una retroalmientación positiva.
El MPF (fosforilación mediada por CdK) de M
desencadena:
-El ensamblaje de complejos de condensina para la
condensación de cromosomas. Lo hacen fosforilando.
-La fosforilación de la lámina nuclear para el
desembalaje de la envuelta nuclear.
-La fosforilación de proteínas asociadas a microtúbulos
para poder formar el huso acromático.
1.4.2. Inactivación.
La concentración de la ciclina mitótica se reduce bruscamente durante metafase. La MPF es
degradada por el sistema proteolítico dependiente de ubiquitina. Se unen varias ubiquitinas a
la ciclina, unión inducida por el propio MPF. Las ubiquitinas marcan su degradación. Al acabar
mitosis ya están inactivados todos los MPF.
inactivación
*Las ubiquitinas o ubicuitinas son proteínas reguladoras, cuya función es dirigir el reciclaje de
proteínas. La ubiquitina puede asociarse a proteínas y marcarlas para su destrucción. Son
destruidas en el proteosoma (complejo proteico).
A través del complejo promotor de Anafase (APC) activado por MPF pero retardado.
Resumen regulación de la actividad de los complejos ciclina-Cdk
1. Subida gradual de la concentración de ciclina
2. Formación del complejo ciclina-Cdk inactivo
3. Activación del complejo por fosforilación y desfosforilación
4. Degradación rápida de la ciclina por la vía de la ubiquitina.
La lenta acumulación de una ciclina hasta su nivel crítico permite a la célula “medir” los
intervalos de tiempo entre una etapa del ciclo celular y la siguiente. De esta forma se activa la
maquinaria de replicación cuando se alcanza la máxima concentración de ciclina de la fase S y
cuando se alcanza la máxima concentración de ciclina de la fase G2 se inicia la maquinaria de
mitosis.
1.5. Regulación del paso de la fase G1 a la fase S
Durante todo el ciclo el complejo pre-replicativo formado por el complejo de reconocimiento
del origen (OCR; Origin recognition complex) y la proteína Cdc6 (necesaria para comenzar la
replicación) se encuentra unido al origen de replicación.
En la fase G1 aumenta la concentración de la proteína Cdc6.
Una vez montado el complejo pre-replicativo comienza la fase S. En la fase S la Cdk- S
desencadena el ensamblado de la ADN-polimerasa en el que intervienen otras proteínas que
formaban parte del complejo pre-replicativo y también desencadena la degradación de la
proteína Cdc6 por la desfosforilación de esta para que no vuelva a repetirse la replicación. Es
ahora cuando se forman las horquillas de replicación…
La fase S termina cuando la replicación del ADN se ha completado.
Regulación mediada por S-Cdk: La replicación debe comenzar en el momento adecuado y no
repetirse más de 1 vez por ciclo. Hay diversos métodos para detener el ciclo celular si algo no
va bien:
• Proteínas inhibidoras de la Cdk. Son proteínas que bloquean el ensamblaje o la actividad de
uno o más complejos ciclina-Cdk.
Si en el punto de control G1 el ADN está dañado se sintetiza una proteína inhibidora de la Cdk
de la fase S (p21). Esta proteína detiene el ciclo celular en la fase G1 para reparar el ADN antes
de que comience la fase S.
Para producir la proteína inhibidora p21 primero se ha de activar la proteína p53 que regula la
expresión del gen p21. Se activa cuando el ADN está dañado. Mutaciones en el gen del p53 dan
lugar a cáncer puesto que es un oncogen.
No todas las células realizan lo mismo en la fase G1. Las células del epitelio gástrico completan
el ciclo celular, las células hepáticas descansan transitoriamente, y células muy especializadas
como las neuronas o las células del musculo esquelético se retiran definitivamente del ciclo
celular. Las células que se quedan en la fase G1 se les dice que están en estado de reposo o
quiescencia (G0).
La fase G0 tiene lugar por la desorganización del sistema de control (algunos componentes
como ciclinas, Cdk’s… dejan de ser sintetizados) y por inhibidores de la proliferación.
2. Factores de crecimiento y estimulación de la proliferación celular
Los organismos unicelulares tienen una alta velocidad de proliferación. La proliferación en
unicelulares vienen delimitada por la disponibilidad de nutrientes, cuando hay poco nutrientes
la célula lo capta como una señal negativa y detiene el ciclo celular en algún punto de control.
En organismos pluricelulares las células obedecen a controles superiores los cuales limitan su
proliferación. La mayoría de las células de un organismo adulto se encuentra en estado de
reposo (G0), es decir, que ya no realizan el ciclo celular, sino que se dedican a la realización de
sus funciones específicas. Cuando una célula que está en estado de reposo capta una señal
positiva retorna al ciclo celular y se divide.
Por tanto, la diferencia entre organismos unicelulares y pluricelulares en cuanto a proliferación
es que los unicelulares siempre están realizando el ciclo celular hasta que captan una señal
negativa a diferencia de los pluricelulares que solo proliferan cuando reciben una señal
positiva.
2.1 Factores de crecimiento.
Los factores de crecimiento son esas señales extracelulares positivas que hacen que una célula
se divida.
Son proteínas que estimulan la proliferación celular. En animales hay sobre 50 diferentes de
las cuales la mayoría son mediadores locales y otras señales endocrinas. Son requeridas en
concentraciones muy bajas (10-9-10-11 M). Ej: PDGF (proliferación del tejido conjuntivo), EGF
(proliferación células de la piel), FGF (proliferación de fibroblastos), HGF (proliferación células
del hígado), Eritropoyetina (proliferación glóbulos rojos).
Suelen actuar de forma combinada: un tipo celular determinado se divide si es estimulado por
una combinación concreta de factores de crecimiento.
Mecanismo de acción.
El factor de crecimiento es una señal extracelular, y como tal interacciona específicamente con
un receptor transmembrana, la tirosina quinasa, activando en las células en G0 una cascada de
fosforilación que produce cambios en la expresión génica que induce la expresión de ciertos
genes silenciados durante G0.
En G0 el sistema de control se encentra desmantelado y hay mecanismos que inhiben la
proliferación. Al capatar el factor crecimiento se restablece el sistema de control y se eliminan
los mecanismos inhibidores de la proliferación (retinoblastoma)
• Retinoblastoma (Rb).
Proteína inhibidora de la proliferación celular presente en el núcleo de todas las células de
mamíferos. La Retinoblastoma se une a otras proteínas para modificar su actividad, algunas
son importantes reguladores de genes. La capacidad de unión del Retinoblastoma depende de
su estado de fosforilación.
o Mecanismo de acción:
En Retinoblastoma en una célula en estado G0 se encuentra desfosforilado por lo que se
encuentra activo y unido a proteínas reguladoras de genes que inducen la proliferación de la
célula. Como no se pueden transcribir estos genes la célula no prolifera.
Cuando hay una señal positiva, es decir, si la célula capta algún factor de crecimiento se
produce la fosforilación del Retinoblastoma y libera las proteínas reguladores de genes que
inducen la proliferación permitiendo que se transcriban y tenga lugar la proliferación.
3. Senescencia celular.
Una célula no se divide indefinidamente, tiene un número de divisiones definido. Dicho
número varía dependiendo del tipo celular y la edad del individuo.
Ejemplo:
- fibroblastos fetales 80 veces
- Fibroblastos adulto 40
Por tanto, la senescencia celular es la limitación programada del número de divisiones. No se
conoce muy bien los mecanismos que llevan a cabo la senescencia pero se cree que tiene
influencia la acumulación de proteínas inhibidoras de ciclinas.
4. Apoptosis.
Apoptosis es la muerte programada de una célula. Las células animales requieren señales no
solo para proliferar sino que también para sobrevivir, dichas señales son los factores de
supervivencia. Si falta algún factor de supervivencia se activa un mecanismo intracelular de
suicidio. Este mecanismo garantiza la existencia de la célula solo y cuando sea necesaria.
Apoptosis no es lo mismo que necrosis. Con necrosis nos referimos a la muerte de las células
por daños en los que las células vierten su contenido y se produce una respuesta inflamatoria.
La muerte celular programada no daña a las células vecinas.
La apoptosis tiene lugar tanto durante la etapa adulta de una célula como en el desarrollo
embrionario. En la etapa adulta una célula sufre apoptosis para compensar la proliferación
celular y así mantener constante el tamaño de los órganos. En el desarrollo embrionario tiene
varias funciones como la eliminación de la cola de renacuajos, responsable de la morfología de
las manos y los pies en mamíferos y de equilibrar el número de células nerviosas y de sus
células diana.
4.1. Proceso de apoptosis
La célula se encoge y condensa, el citoesqueleto se colapsa, la envuelta nuclear se
desensambla, el ADN nuclear se fragmenta y la superficie celular se altera lo que facilita la
fagocitosis.
4.2. Mecanismo de apoptosis
La apoptosis es ejecutada por una familia de proteasas que se encuentran desactivadas y son
activadas por señales. Se activan por la ruptura proteolítica.
Si hay factores de supervivencia se unen a un receptor transmembrana específicamente
activándolo. Al activarlo este activa una proteína reguladora de transcripción de genes
haciendo que dichos genes se expresen dando lugar a proteínas que bloquean la apoptosis.
Si no hay factores de supervivencia las proteasas quedan desactivadas en forma de proenzima
inactiva y se activan por escisión proteolítica mediante otra proteasa.
4.3. Cascada proteolítica durante apoptosis.
La apoptosis se autoamplifica de manera que una vez iniciada es irreversible.
