INMUNOLOGÍA

MODULO 3

ANDRÉS CAMARGO
CONTENIDO
1.) Autoinmunidad:
• Reacción de hipersensibilidad tipo I y alergia
• Reacción de hipersensibilidad tipo II
• Reacción de hipersensibilidad tipo III
• Reacción de hipersensibilidad tipo IV

2.) Pruebas de laboratorio

• Pruebas de inmunidad humoral
• Pruebas de inmunidad celular

3.) Vacunas
AUTOINMUNIDAD
AUTOINMUNIDAD
Reacción del sistema inmune contra los tejidos y células propias del mismo sujeto.

Involucra tanto mecanismos de la inmunidad innata e inmunidad adaptativa (mezclados)

Se llaman reacciones de hipersensibilidad: lesión tisular mediada por el sistema inmunitario

Se dividen en:
• Reacción de hipersensibilidad tipo I (alergia)
• Reacción de hipersensibilidad tipo II (citotóxica dependiente de anticuerpos)
• Reacción de hipersensibilidad tipo III (mediada por inmunocomplejos)
• Reacción de hipersensibilidad tipo IV (mediada por células; retardada)
HIPERSENSIBILIDAD
TIPO I
CONCEPTOS

Anafilaxia
 ALERGIA

en un sujeto previamente sensibilizado contra antígenos específicos llamados

alergenos. Tiene una fase inmediata y una tardía.

Está mediado por:

• Linfocitos Th2
• Plasmocitos -> IgE
• Mastocitos
ALERGENOS COMUNES
SENSIBILIZACIÓN
AL ALERGENO
Da como resultado la atopia

Recordar activación de linfocitos B:

MASTOCITOS
Es un granulocito primo de los basófilos

Se distinguen dos tipos de mastocitos

REACCIÓN INMEDIATA Y TARDÍA
La reacción inmediata esta mediada por los La reacción tardía está dada por eosinófilos
eicosanoides e histamina liberada por los atraídos por las citocinas que liberan los
mastocitos mastocitos y los linfocitos Th2

Histamina -> Contracción del musculo liso IL-5 -> Mantenimiento de los eosinófilos
bronquial y dilatación del ML vascular, CCL5, CCL11 y CCL12 -> Atrae eosinófilos
aumento de permeabilidad vascular y aumento IL-4 -> Aumento de actividad de Th2
de la secreción de moco
IL-1 y TNFa -> Inflamación

Leucotrienos (C4 y D4) -> Lo mismo que la

histamina pero con más fuerte

Prostaglandina D2 -> Broncoespasmo y

liberación de moco
REACCIÓN INMEDIATA Y TARDÍA
RECORDAR
Todas las reacciones de hipersensibilidad tipo I son alergia, pero
no todas las alergias son reacciones de hipersensibilidad
TEORÍA DE LA HIGIENE
lo
disminuye
-
Th1 Vs Th2
IFN-y 12-4

*
 ASOCIACIONES CLÍNICAS DE LA
ALERGIA
• Rinitis
• Urticaria
• Dermatitis (eccema, por
contacto)
• Asma
• Diarrea, vomito
PROGRESIÓN DE LA ALERGIA

En orden de edad

1.) Manifestaciones
gastrointestinales
2.) Eccema
3.) Asma
4.) Rinitis
ASMA
Inflamación crónica de los
bronquiolos que produce
hipertrofia del musculo liso,
hiperplasia glandular e
hipersecreción de moco,
caracterizado por
broncoespasmo

Puede ser fenotipo alérgico o

no alérgico.
CAMBIOS HISTOPATOLÓGICOS EN EL
ASMA
 TRATAMIENTO CRÓNICO DE LA
ALERGIA

2 -> Inyecciones subcutáneas repetidas e inmunoterapia con alérgeno sublingual (por estimulación de otras Ig)
3 -> Omalizumab (anti IgE); cromolin e isoprelina (mastocitos resistentes a la activación)
4 -> Loratadina y fexofenadina (antihistamínicos H1); SABA/LABA (B2 agonista); Montelukast (anti LT)
5 -> Cetirizina (antihistamínico 2°g); corticoesteroides (fluticasona, budesonida); Mepolizumab (anti IL-5)
TRATAMIENTO DE ANAFILAXIA
Adrenalina
HIPERSENSIBILIDAD
TIPO II
REACCIÓN DE HIPERSENSIBILIDAD
TIPO II
Hipersensibilidad citotóxica dependiente de anticuerpos, puede ser IgG o IgM

Recordar funciones de los anticuerpos y del complemento

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo

REACCIÓN DE HIPERSENSIBILIDAD
TIPO II
Hipersensibilidad citotóxica dependiente de
anticuerpos

Se divide en IIa y IIb

IIa -> Citotoxicidad directa

IIb -> Reaccionan contra un receptor

activándolo o inhibiéndolo
REACCIÓN DE HIPERSENSIBILIDAD
TIPO II
 ¿CÓMO SE FORMAN ESOS AUTO
ANTICUERPOS?

1.) Genético

2.) Ambiental (infecciones):

• Inducción de coestimulación
• Mimetismo molecular
EJEMPLOS

Reacción hemolítica inmune postransfusión

HIPERSENSIBILIDAD
TIPO III
 REACCIÓN DE HIPERSENSIBILIDAD TIPO III

Hipersensibilidad
mediada por
inmunocomplejos

Inmunocomplejos =
antígeno + anticuerpo

Es mediada por IgG

Riñón-Articulaciones
Ranas
Filtración
EJEMPLOS

Neumonitis por hipersensibilidad

HIPERSENSIBILIDAD
TIPO IV
 REACCIÓN DE HIPERSENSIBILIDAD
TIPO IV

Hipersensibilidad mediada por células

n
Se divide en:
• Tipo IVa1 -> mediada por linfocitos Th1
• Tipo IVa2 -> mediada por linfocitos Th2
• Tipo IVb -> mediada por linfocitos T CD8+
REACCIÓN DE HIPERSENSIBILIDAD
TIPO IV

Reacción tipo IVa2

es la misma
respuesta tardía a la
alergia
EJEMPLOS
Tipo IVa1 -> Prueba de tuberculina, lepromina
(lepra tuberculoide), reacción de Montenegro
(Leishmania), sarcoidosis, inflamación
granulomatosa
Tipo IVa2 -> Alergia crónica
Tipo IVb -> Rechazo a trasplantes, diabetes
mellitus tipo 1a, infecciones virales (hepatitis B)
 RESUMEN DE
HIPERSENSIBILIDAD
 IgG / IgM mediada por cerlas , no por A

solu en la tip-& -

I se llama alergenc

Y
Recepture
~ >
-

Ig)

-
~

Sorandomas
C as
Galergia ksval sanguineas .
4Glomerulonetritis Generati .

Postestrepto
 PRUEBAS DE
L A B O R AT O R I O
BASADAS EN
INMUNOLOGÍA
PRUEBAS DE
INMUNIDAD
HUMORAL
 INMUNIDAD
HUMORAL
¿Por qué se dice que es humoral?
Soluble —> ac
La reacción antígeno-anticuerpo que se mide en
el laboratorio se llaman pruebas serológicas.
Cuando se usan pruebas serológicas para
identificar microorganismos se llama
serotipificación.
 SANGRE
La sangre se divide en:
• Hematocrito 45% -> eritrón
(eritrocitos + reticulocitos)
• Plasma 55% -> agua +
electrolitos + proteínas

Si la sangre se deja coagular y se

extrae el líquido resultante se
obtiene el suero

[Proteínas en el suero] = 6-8 g/dL

La principal proteína es albumina
La segunda es la IgG
CONCEPTOS
Especificidad -> la región Fab es especifica para un epítope
Afinidad -> fuerza de interacciones moleculares entre el anticuerpo y el epítope
Avidez -> suma de las afinidades de cada región Fab del anticuerpo
Reacción cruzada -> capacidad de un anticuerpo para reconocer diferentes
antígenos no relacionados
 SEROLOGÍA
La reacción antígeno-anticuerpo da
como resultado 4 reacciones
identificables en el laboratorio:

• Precipitación si el antígeno es
soluble
• Aglutinación si el antígeno es
una partícula unida a membrana
celular
• Neutralización de toxinas
• Activación del complemento Reacciones de aglutinación y precipitación - YouTube
SEROLOGÍA
Con las pruebas serológicas se puede evaluar:

+ vieja más avidez

Cadena pesada
SEROLOGÍA
La evaluación de las pruebas serológicas sirven para:

Importante
¿QUÉ HA PERMITIDO EL DESARROLLO DE
LAS PRUEBAS HUMORALES?
-
Son más desarrolladas que
las celulares
~

Importante para el ~
examen
~

~
lisinola +c.
ANTICUERPOS MONOCLONALES

• Solo son producidos en ratones

• Anticuerpos humanos se pueden producir cuando
los linfocitos B se infectan con EBV pero no son
aptos para terapia
• Los anticuerpos humanizados son recombinantes
TIPOS DE ANTICUERPOS
MONOCLONALES

EBV
PURIFICACIÓN DE ANTICUERPOS
MONOCLONALES

* Con proteína A de S. aureus

Se une a Fc
de AC
 PRUEBAS SEROLOGICAS
Anticuerpos totales

Se puede evaluar con:

• Concentración de
inmunoglobulinas
• Perfil de proteínas en
cromatografía
PRUEBAS SEROLOGICAS
Concepto importante: Fenómeno de prozona Ag-AC
equilibrio

Los reactivos vienen a una

concentración alta de
anticuerpos, por lo tanto es
importante titular y que este en
una zona de equivalencia

Cuando hay exceso de antígeno

no hay tanto problema
 PRUEBAS SEROLOGICAS
¿Cómo se detecta si la reacción antígeno-anticuerpo ocurrió?

Se conjuga el anticuerpo en la región Fc con algo que de una señal cuando la reacción
ocurre. Al conjugarse con la región Fc no cambia la afinidad del anticuerpo
¿Con qué se conjuga?

• Partículas de latex -> Precipitación y aglutinación

• Enzimas + sustrato (peroxidasa, fosfatasa alcalina)-> ELISA, Western blot,
ELISPOT
• Fluorocromos (Fluoresceina, Ficoeritrina) -> Inmunofluorescencia, Citometría de
flujo
• Isotopos radioactivos (yodo 132) -> Radioinmunoanálisis, Gammagrafías
• Biotina / Avidina -> Todas
• Toxinas bacterianas
CONJUGACIÓN DE ANTICUERPOS
PRUEBAS DIRECTAS E INDIRECTAS
Pruebas directas -> Se detecta el antígeno en las muestra con un
anticuerpo anti ese antígeno
Pruebas indirectas -> Se detecta un anticuerpo anti antígeno con un
anticuerpo anti ese otro anticuerpo. Se pueden medir Ac totales o
isotipos
PRUEBAS DIRECTAS E INDIRECTAS
Ejemplos pruebas directas: Ejemplos pruebas indirectas:
PRUEBAS SEROLÓGICAS
IMPORTANTES:
1 : 8 Min
• Aglutinación
• Difusión en geles (inmunodifusión)
• ELISA, ELISA por competición y ELISA sándwich
• CLIA
• Inmunofluorescencia
• Radioinmunoanálisis
• Western blot
AGLUTINACIÓN

¿Con qué se conjuga?

Látex
HEMOAGLUTINACIÓN Con eritrocitos
INHIBICIÓN DE LA HEMOAGLUTINACIÓN
Con punto es aglutinadooo
Mirar 1 antes del .

¿Cuál paciente tiene mayor

carga de anticuerpos anti-
hemaglutinina?

¿Cómo se evidencia el
fenómeno de prozona?
INMUNODIFUSIÓN
 Peroxidasa
Fosfatasa-alcalina
ELISA Enzima y sustrato
- anotarrrrrr
Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas

Es una prueba indirecta

Tiene alta sensibilidad y especificidad
ELISA POR COMPETICIÓN
Es una prueba directa
ELISA SÁNDWICH
Es una prueba directa
CLIA
Inmunoensayo de quimioluminiscencia

Puede ser directo o indirecto

Tiene alta sensibilidad
INMUNOFLUORESCENCIA
Puede ser directo o indirecto

Conjugado a flurocromos = fluoresceína, ficoeritrina

RADIOINMUNOANÁLISIS
Puede ser directo o indirecto

Conjugado con isotopos radioactivos

Tiene alta sensibilidad

Ya no se usa tanto por la radiación, desechos tóxicos, inestabilidad de

los compuestos y costos
WESTERN BLOT
Es una prueba indirecta
PRUEBAS DE
INMUNIDAD
CELULAR
PRUEBAS DE INMUNIDAD CELULAR
Estas pruebas permiten evaluar las células que participan en la
inmunidad innata y adaptativa

Las pruebas evalúan las funciones y mecanismos efectores de las

células

Es más difícil de evaluar que la inmunidad humoral porque se

requieren que las células estén vivas (recordar las cosas que han
facilitado la investigación en inmunidad humoral)
CITOMETRÍA DE FLUJO

Muy
import
ante
CITOMETRÍA DE
FLUJO

Dot blot

Las células de la
citometría de flujo se
pueden reutilizar para
volver a analizar
CITOMETRÍA DE MASAS

Similar a la citometría de flujos

Anticuerpos conjugados con

lantánidos

Las células son pulverizadas

Lantanidos isotopos tienen un

espectro más amplio que los
APLICACIÓN Y DATO IMPORTANTE

Las mujeres embarazadas de

parto pretérmino tienen mayor
actividad de monocitos clásicos
PRUEBAS CELULARES

Las pruebas de inmunidad celular se dividen en:

•Pruebas de cuantificación -> Evaluar el número de células

mediante morfología o marcadores

•Pruebas funcionales -> Evaluar que la célula funcione, por

ejemplo producción de sustancias solubles
PRUEBAS FUNCIONALES
PRUEBAS FUNCIONALES
PRUEBAS CUANTITATIVAS
 HEMATOPOYESIS

Para cada célula en la

hematopoyesis hay
marcadores
SEPARACIÓN DE CÉLULAS

Existe
EVALUACIÓN DE POLIMORFONUCLEARES
QUIMIOTAXIS
FAGOCITOSIS Y ESTALLIDO
RESPIRATORIO
La capacidad oxidativa (de matar) de los
neutrófilos se calcula por la formación de
radicales libres a través de la activación de la
NADPH oxidasa.

Se mira con:
• Azul de tetrazolium (NBT)
• Citometría de flujo con rodamina
• Luminol
ESTALLIDO RESPIRATORIO
Correlación clínica -> Granulomatosis crónica
ANTICUERPOS ANTI GRÁNULOS
MARCADORES DE SUPERFICIE
MARCADORES ENZIMÁTICOS
Mieloperoxidasa
EVALUACIÓN DE MONOCITOS
SUBPOBLACIONES DE MONOCITOS

no clásicos

-> monoclásicos
MARCADORES DE SUPERFICIE
MARCADORES ENZIMÁTICOS
EVALUACIÓN DE LINFOCITOS B
MARCADORES DE SUPERFICIE
EVALUACIÓN DE LAS CADENAS
LIVIANAS mieloma múltiple
Revisar
EVALUACIÓN DE LINFOCITOS T
PRODUCCIÓN DE CITOCINAS

ELISPOT
PRODUCCIÓN DE CITOCINAS
MARCADORES DE SUPERFICIE
MARCADORES DE SUPERFICIE
EVALUACIÓN DE LINFOCITOS T CD8+
CITOTOXICIDAD POR LIBERACIÓN DE
CROMO
Tetrainer

1
+
apo
LINFOCITOS NK
VACUNAS
INMUNOPROFILAXIS

Una vacuna es un
componente que proviene de
un microorganismo que debe
inducir una respuesta inmune
adaptativa humoral y celular

Para que exista una vacuna se

requiere que haya inmunidad
demostrada contra ese
microorganismo
 INMUNOPROFILAXIS
¿Contra qué hay vacunas?

• Bacterias -> encapsulados, bacilos gram positivos y cocobacilo gram

negativo, BCG
• Virus -> sarampión, rubeola, varicela, dengue (solo para no endémicos),
viruela, COVID19
• Parásitos -> Únicamente malaria y solo para niños de África y soldados
estadounidenses. Se están desarrollando contra la uncinariasis,
esquistosomiasis y Chagas.
• Tumores -> terapia personalizada

No hay contra HONGOS

VACUNA ANTITUMORAL
CORRELATOS DE PROTECCIÓN
¿Qué parte de todo el sistema inmune está activando la vacuna?

Humoral

Celular
CORRELATOS DE PROTECCIÓN
INNATOS
CORRELATOS DE PROTECCIÓN
ADAPTATIVA HUMORAL
CORRELATOS DE PROTECCIÓN
ADAPTATIVA CELULAR
¿CÓMO HACEMOS UNA VACUNA
Se tiene que seleccionar un antígeno que sea inmunógeno. El antígeno debe ser
inocuo y no un factor de virulencia. En cuyo caso es necesario atenuarlo

¿Qué tiene una vacuna?

¿CÓMO SE IDENTIFICAN LOS
EPÍTOPES?
¿CÓMO HACEMOS UNA VACUNA
Fases del desarrollo de la vacuna
TIPOS DE VACUNAS
Hay tres tipos de vacunas:

• Vacunas vivas que se replican (atenuadas)

• Vacunas vivas que no se replican
• Vacunas no vivas que no se replican
VACUNAS VIVAS QUE SE REPLICAN

El microorganismo está vivo, se replica, pero está atenuado y es no virulento

¿Cómo se atenúan? -> Irradiación, mutaciones que eliminan factores de

virulencia

EJEMPLOS (MUY IMPORTANTE):

• BCG (Mycobacterium bovis)

• Polio oral
• Fiebre amarilla
• Sarampión
• Varicela
VACUNAS VIVAS QUE SE REPLICAN
 VACUNAS VIVAS QUE NO SE REPLICAN
El código genético del antígeno se pone en un virus vivo, pero sin genoma, para que el virus entre a
la célula y se produzca el antígeno. Sin embargo, el virus no se replica

Se utiliza adenovirus 5 y 26 y adenovirus de chimpancé

Si alguien ya esta inmunizado contra el adenovirus no le sirve

EJEMPLOS (MUY IMPORTANTE):

• SARS -> AstraZeneca

• Hepatitis C
• Influenza
• Ébola
• Virus de la rabia
• Malaria
VACUNAS NO VIVAS QUE NO SE
REPLICAN
La vacuna trae una parte del microorganismo o el microorganismo completo
muerto
VACUNAS NO VIVAS QUE NO SE
REPLICAN
Vacunas con carbohidratos purificados (anticapsulares):

Neisseria meningitidis
Haemophilus influenzae
Streptococcus pneumoniae

Contra serotipos específicos

 VACUNAS NO VIVAS QUE NO SE
REPLICAN
Vacunas que son microorganismos completos muertos:

• Bacterias -> Antrax, Vibrio colera y Bordetella pertussis

• Virus -> Hepatitis A, influenza, polio parenteral y rabia
• Parásitos -> En animales

Su uso ha tendido a disminuir en humanos

Puede inducir reacciones

 VACUNAS NO VIVAS QUE NO SE
REPLICAN
Vacunas que tienen el toxoide (proteína mutada de la toxina):

• Clostridium tetani -> Tetanospasmina

• Corynobacterium diphteria -> Toxina diftérica
• Bordetella pertussis -> Toxina pertussis

Mutación dirigida a la toxina

 VACUNAS NO VIVAS QUE NO SE
REPLICAN
Vacunas que tienen proteínas recombinantes

• Virus del papiloma humano -> Virus like particles (VLP)

• Hepatitis B
VACUNAS NO VIVAS QUE NO SE
REPLICAN
Vacunas con material genético

ADN y mRNA
ADYUVANTE
Es tan importante como el antígeno

Funciones (importante):
TIPOS DE ADYUVANTES
INMUNOLOGÍA
MODULO 3

GRACIAS
INMUNOLOGÍA
MODULO 3

GRACIAS