Universidad Autónoma de Sinaloa
Facultad de Ciencias Químico Biológicas
Lic. Químico Farmacéutico Biólogo
Análisis Clínicos
UNIDAD II
ESTUDIO DE LA GLUCOSA
Temas
Glucosa basal
Glucosa posprandial
Curva de tolerancia a la glucosa
Resistencia a la insulina
Hemoglobina glicada
GLUCOSA
Es el principal monosacárido resultante de la digestión de los glúcidos
(carbohidratos), principal fuente de energía del organismo.
Los carbohidratos de la dieta son digeridos y absorbidos en el intestino delgado
pasando por vía portal a la sangre.
60 a 120 min después de la Valor máximo de 140 mg/dL en
comida sangre
disminuye a las 2 a 3 horas y media a 70 – 110 mg/dL
Polisacáridos: Almidón, dextrinas
Alimentación Disacáridos: Sacarosa, lactosa, maltosa
Monosacáridos: (el grupo más importante) glucosa,
fructuosa, galactosa, manosa
GLUCOSA
El cerebro y las células del tejido nervioso son
las únicas de todo el cuerpo que reciben
glucosa directamente del torrente sanguíneo sin
la mediación de la insulina. La glucosa es, en
este caso, la única fuente de energía.
Representa el 2% de nuestro peso, y requiere el 20%
de la energía que ingerimos
Por la sangre la glucosa llega al hígado donde se metaboliza mas del
60%.
El hígado funciona como un regulador de la glucosa sanguínea: cuando
los niveles de glucosa son elevados, ésta es metabolizada a través de la
ruta glucolítica o almacenada como glucógeno. Cuando los niveles de
glucosa son bajos se moviliza a partir de glucógeno.
La glucosa es llevada por torrente
sanguíneo a las células que lo La glucosa que no se necesita es
necesitan con ayuda de la fosforilada a glucosa-1-fosfato para ser
insulina almacenada como glucógeno
Si existe un excedente de glucosa se transforma
en ácidos grasos y esterificándose con el glicerol
forman los triacilgliceroles, éstos van y se
depositan en el tejido adiposo (glándulas
mamarias, caderas, abdomen, etc)
glucogenogénesis
La insulina y el glucagon son dos hormonas esenciales en el control
homeostático del nivel de glucosa sanguínea.
Las células β de los islotes de Langerhans del páncreas, perciben los
niveles de glucosa circulantes después de comer y liberan insulina que se
fija a una proteína receptora de la membrana celular que facilita la
entrada de la glucosa a los tejidos musculares y adiposo, disminuyendo así
la glucemia.
Acción de la insulina
La insulina que se libera del páncreas en respuesta a una elevación de la
glucemia, desencadena una cascada de activación de la fosfoproteína
fosfatasa
Esta fosfatasa cataliza la hidrólisis de los grupos fosfatos de todas las
enzimas implicadas en el metabolismo del glucógeno (fosforilasa,
fosforilasa quinasa, sintetasa).
El resultado es la inactivación de la glucogenólisis (rompimiento del
glucógeno) y la activación de la grucogenogénesis (formación de
glucógeno).
La insulina antagoniza los efectos del glucagon.
Cuando el organismo entra en fase de ayuno, el descenso de la glucosa plasmática
motiva que las células ⍺ de los islotes de Langerhans del páncreas secreten glucagon
para activar la glucogenólisis en el hígado, y un aumento de la adrenalina la activará
en el músculo, para asegurar la demanda de glucosa.
INSULINA INSUFICIENTE O DEFECTUOSA
(afinidad disminuida para los centros receptores)
DIABETES MELLITUS
La GLUCOSA permanece elevada en sangre al no
ser captada por las células, acompañado de
poliuria y una constante deshidratación
La ausencia de insulina favorece la glucogenólisis (rompimiento de la molécula de
glucógeno para formar glucosa) y si no es suficiente se lleva a cabo la gluconeogénesis
(obtención de glucosa a partir de compuestos no carbohidratos como grasas, proteínas,
minerales, aminoácidos, etc.), dado que el organismo intenta compensar la falta de
glucosa intracelular.
GLUCOSA BASAL
Cuando los niveles de glucosa basal son superiores a lo que se considera normal (70-
110 mg/dL) se conoce como hiperglucemia, la cual puede ser síntoma de una
enfermedad como la diabetes.
Cuando los niveles de glucosa son inferiores a lo que se considera normal se conoce
como hipoglucemia (tasa inferior 50-60 mg/dL), esto puede deberse a una mala
administración de la insulina en los diabéticos, en personas no diabéticas se debe a
consumo de dietas hipocalóricas y en estados patológicos como cáncer pancreático.
Factores que modifican o regulan la concentración de glucosa circulante
1.- Absorción intestinal
2.- Producción endógena
3.- Utilización
4.- Excreción
1. Absorción de glucosa
Normalmente la capacidad de un adulto para absorber glucosa es no
mayor de 1g/Kg. peso/Hr., pero puede ser modificado por las siguientes
circunstancias:
§ Ingesta excesiva
§ Problemas tirodeos
Ingesta excesiva de carbohidratos
§ Cuando se absorbe mayor cantidad de lo normal, se aumenta el
peristaltismo pudiendo ocasionar diarrea y con ello la disminución de la
absorción normal.
Por lo tanto en hipoglucémicos se recomienda mejor tratamiento por vía
intravenosa que por vía oral.
Efecto de las hormonas tiroideas
Hipotiroidismo → hipoglucemia ← Disminuye la absorción
Hipertiroidismo → hiperglicemia ← Aumenta la absorción
Cuando hay problemas de origen tiroideo hay modificación en la absorción,
ya que en el hipertiroidismo actúan ensanchando los capilares de las
vellosidades intestinales y viceversa
2.- Producción Endógena de Glucosa
Producción: se lleva a cabo mediante varios factores sobre todo de tipo hormonal.
Entre ellos:
Ø Glucagon: favorece la glucogenólisis
Ø H. Tiroideas: favorece la glucogenólisis con tendencia a hiperglicemia
Ø Adrenalina: estimula la glucogenólisis produciendo un aumento rápido de
glucosa para afrontar emergencias.
Efecto → ↑ Adrenalina → ↑ Glucosa
Ø Insulina: Sirve como transporte activo para la combustión de la glucosa
disponible, inhibe la conversión de glucógeno a glucosa (glucogenólisis) favorece
la lipogenesis.
Ø Hormona de la corteza suprarrenal (glucocorticoides, cortisol) y hormona del
lóbulo anterior de la hipófisis (hormona adrenocorticotropica–ACTH) las dos
favorecen la glucogenólisis con tendencia a hiperglicemia.
Si aumenta la hormona aumenta la glucogenólisis, por lo tanto produce
hiperglicemia y viceversa.
Enfermedades crónicas y agudas de hígado
Como: hepatitis y cirrosis hepática
En éstas enfermedades se disminuye la capacidad de elaboración y
almacenamiento de glucógeno, entonces después de las comidas
posteriores a 2 horas puede presentarse una hiperglicemia (por no
transformar la glucosa en el tiempo adecuado) o una hipoglucemia
en ayunas (porque el hígado enfermo almacena bastante
glucógeno y no se reutiliza).
3.- Utilización de la glucosa
Para que se aproveche la glucosa, debe pasar al
interior de la célula, para la obtención de
energía y su degradación a CO2 + H2O.
La utilización de la glucosa se lleva a acabo en el
citoplasma y en las mitocondrias, esto con la
ayuda de la insulina, la cual hace permeable la
pared celular.
La glucosa se utiliza por el organismo de la siguiente
manera:
a) En el citoplasma: Se realiza el proceso
enzimático glucolítico de Embden Meyerhoff, o
ciclo de la glucólisis, que consiste en degradar la
glucosa hasta ácido láctico o pirúvico, mediante
reacciones enzimáticas oxidativas, los cuales en
presencia de Acetil CoA, forma el oxalacetato, que
es como entra al ciclo de KREBS.
b. En el ciclo de Krebs a nivel de la matriz mitocondrial, se lleva a cabo la
segunda oxidación de la glucosa, generando 12 ATP.
c. En las crestas mitocondriales se realiza el ciclo de los citocromos o
cadena respiratoria, donde concluye la degradación de la glucosa hasta
CO2 + H2O + AE ↑ de aproximadamente 36 a 38 ATP/ cada molécula de
glucosa.
Glucosa
+
Insulina
Núcleo
Glucosa + K
Hexoquinasa Glucosa-6-
Insulina 1 Mg++ PO4+ ATP
ATP
Urea, Creat. Mitocondria
CO2, O2, etc Ciclo de Krebs Cresta
CO2 + H2O + 36 ATP ↑
Nota: pacientes con acidosis diabética requieren de reposición de K
EJERCICIO
Dentro de los factores que modifican la entrada de glucosa en la fibra muscular, los más
importantes, fisiológicamente hablando, serían la actividad contráctil, la insulina y las
catecolaminas (adrenalina, noradrenalina, dopamina).
El metabolismo de la fibra muscular es única, ya que puede modificarlo en una
extensión mucho mayor que cualquier otro tejido. Así, un músculo en contracción
puede incrementar su metabolismo oxidativo más de 50 veces y su captura de glucosa
en 35 veces.
La fibra muscular no es dependiente de un solo sustrato para obtener energía, sino que
además de glucosa puede utilizar ácidos grasos libres, glucógeno y triglicéridos
FASE INICIAL: Glucógeno muscular principal fuente de energía
Posteriormente, la utilización de glucógeno desciende, y cuando el ejercicio es
muy prolongado la disminución de niveles de oxigeno contribuye a la fatiga,
EJERCICIO junto a la formación de productos de desecho (como NH4, etc.),
desplazándose el metabolismo hacia las grasas como reserva energética
cuando el ejercicio alcanza varias horas.
Sin embargo, además de estos sustratos, la glucosa en sangre constituye un
importante "combustible“ para las células musculares en contracción.
Así, durante los primeros 10 minutos de ejercicio, la glucosa sanguínea puede proporcionar el 8-
14% del metabolismo energético. Si el ejercicio se prolonga hasta 40 - 50 minutos, la glucosa
podría llegar a ser el 20-30% de los combustibles empleados y hasta un 35-40% si el ejercicio
llega hasta 90-180 minutos.
4. Excreción de la glucosa
Normalmente no hay excreción de glucosa, pero se puede presentar en algunas
circunstancias especiales:
Glucosuria: La glucosa no es reabsorbida totalmente por el riñón cuando
rebasa el umbral renal de 300 mg/dL en sangre pues rebasa el máximo de
reabsorción (sin enmargo hay evidencias que al rebasar los 180 md/dL, ya hay
presencia de glucosuria), generalmente ocurre en diabetes mellitus, o daños
renales crónicos.
Metodología para medición de glucosa
Métodos químicos: Macrométodos
a) Método de Folin-Wu (inespecífico)
Determina todas las sustancias reductoras presentes en el filtrado
desproteinizado, reducen los iones cúpricos o cuprosos, formando un
precipitado de óxido cuproso, que es disuelto con reactivo
fosforolibdico, formando un compuesto complejo estable de color azul
proporcional a la concentración de sustancias reductoras presentes.
No utilizado en la actualidad por su inespecificidad
b) Método de Hultman o de la O-Toluidina (semiespecífico)
Determina ciertas sustancias reductoras, como son las aldolasas o aldoexosas,
ejemplo: lactosa, fructuosa y manosa (glucosa 92-93%), por medio de reacción de
condensación.
Fundamento: la ortotoluidina es una amina aromática primaria que con ácido acético
caliente reacciona con las aldoexosas presentes en la muestra, ya sea del filtrado
desproteinizado, suero o plasma, formando un compuesto complejo verde azuloso
proporcional a su concentración.
* En la actualidad casi no se utiliza por tener predisposición al cáncer y ser corrosivo.
2.- Métodos enzimáticos (micrométodos)
Método de Trinder o Enzimático
Es específico porque determina únicamente la glucosa por medio de una reacción
enzimática (glucosa oxidasa-peroxidasa).
Fundamento: donde la glucosa es transformada por medio de la enzima glucosa
oxidasa a ácido glucónico y peróxido de hidrógeno, la cual en presencia de la enzima
peroxidasa unida al cromógeno (4 amino fenazeno/fenol) formará un compuesto de
color rojo proporcional a la cantidad de glucosa presente.
Glucosa + O2 + H2O GOD Ácido glucónico + H2O2
2 H2O2 + 4 -AF + Fenol POD Quinona coloreada + 4 H2O
Valores de referencia: 70 - 110 mg/dL
PROCEDIMIENTO
CONDICIONES DE REACCIÓN:
§ Longitud de onda: 505 nm
§ Temperatura de reacción: 37 ºC
§ Tiempo de reacción: 5 minutos
§ Volumen de muestra: 10 µL
§ Volumen de reactivo de trabajo: 1ml
§ Volumen final de reacción: 1.01 ml
PROCEDIMIENTO
En tubos para reacción marcados B (Blanco) S (Standar) C (control) y M (muestra) colocar:
B S C M
Estándar - 10 µL - -
Control - - 10 µL
Muestra - - - 10 µL
Reactivo de trabajo 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
Incubar 5 minutos en baño de agua a 37ºC. Posteriormente leer en espectrofotómetro a 505 nm o en
fotocolorímetro con filtro verde (490 – 530nm) llevando el aparato a cero con el blanco de reactivo.
CÁLCULO DE LOS RESULTADOS:
Glucosa mg/dL = P x F donde F = Conc. Std. (mg/dL)
Abs Std
CAUSAS DE CONCENTRACIÓN ANORMAL
üSe puede presentar hiperglicemia en:
üEndocrinopatías (Diabetes mellitus, hipertiroidismo)
ü Enfermedad hepatocelular extensa
ü Ingesta excesiva de carbohidratos
üAdministración de sustancias químicas o medicamentosas (diuréticos,
corticoides, etc)
üReacciones del SNC (estrés, miedo, tensión mental, etc.)
ü Se puede presentar una hipoglucemia en:
üEndocrinopatías (hipotiroidismo, Hipopituitarismo, enfermedad
de Addison, etc)
üEnfermedad hepática (hepatitis y cirrosis)
üDesnutrición (o problemas de absorción intestinal)
üCausas de origen químico (administración excesiva de insulina)
GLUCOSA POSTPRANDIAL
La glucosa en sangre en ayunas (tras una noche de 8-10 horas sin tomar
alimento), generalmente oscila entre 70 a 110 mg/dl.
Los niveles de glucosa empiezan a aumentar a los 10 minutos tras iniciar la
comida.
La glucemia postprandial está determinada por la absorción de
carbohidratos, la secreción de insulina y la de glucagón, y sus efectos
coordinados sobre el metabolismo de la glucosa en hígado y tejidos
periféricos.
En personas sin diabetes el nivel de glucosa a los 120 minutos tras el
inicio de la comida, rara vez excede de los 140 mg/dL y vuelven a niveles
previos a la comida en 2-3 horas.
A pesar de que los niveles de glucosa han llegado a niveles basales tras
3 horas, la absorción de carbohidratos continúa durante al menos 5 - 6
horas tras la comida.
Procedimiento
ü Se toma una muestra de sangre en ayunas para medir glucosa basal.
ü Se manda al paciente a desayunar lo que acostumbra.
ü Se toma el tiempo desde que empezó a desayunar, y al cabo de dos
horas se toma una nueva muestra para medir glucosa posprandial.
ü En condiciones normales, no debe rebasar los 140 mg/dL a las dos
horas tras ingesta de alimentos
ü Pacientes con intolerancia a la glucosa revelarán un valor entre 140 -
200 mg/dL, (alto riesgo de diabetes y ECV)
Esta prueba resulta obsoleta dado que:
• No se puede controlar lo que ingiere el paciente de alimento.
• Hay traslado y movimiento durante el transcurso de la prueba
• No se controla el tiempo real.
Esta es sustituida por una glucosa postcarga
Se sustituye el desayuno por una carga de glucosa de 75 gr.
El paciente permanece en reposo en el laboratorio y el tiempo es medido
adecuadamente.
RESISTENCIA A LA INSULINA
La resistencia a insulina (RI) es una condición que ha demostrado ser
predictora de DM2.
La obesidad, principalmente la de tipo abdominal, como tal es un estado de RI
ya que el tejido adiposo secreta adipocinas como TNF-alfa e IL-6 que juegan un
papel directo en la RI, inhibiendo la acción insulínica.
La resistencia a la insulina (RI) se asocia con una serie de alteraciones
metabólicas que constituyen el llamado síndrome metabólico (SM).
Medidas deseables de cintura
CINTURA EN MUJERES CINTURA EN HOMBRES
Según la Organización Mundial de la Salud establece
< 80 cm < 90 cm
Según la Norma Oficial Mexicana NOM-043-SSA2-2005 (Servicios básicos de salud. Promoción y
educación para la salud alimentaria)
< 88 cm < 102 cm
> 88 riesgo > 102 riesgo
El SM se utiliza en la práctica clínica para identificar a sujetos con alto riesgo de
padecer diabetes y de desarrollar enfermedad cardiovascular (ECV).
Se caracteriza por una
RESISTENCIA A LA respuesta defectuosa o
INSULINA anormal de la insulina en los
tejidos periféricos (músculo
esquelético, hígado y tejido
adiposo principalmente)
produciendo entre otras
alteraciones una
disminución en la
captación y utilización de
la glucosa por estos
tejidos.
Las alteraciones que aparecen en la situación de Resistencia a Insulina conducen a:
Aumento en los niveles Incremento de la secreción de
plasmáticos de glucosa insulina = hiperinsulinismo
plasmático
Esto mantiene la glucemia durante un tiempo en rango normal.
Glucosa basal normal, pero Intolerancia a la glucosa/
aumentan los valores de glucosa resistencia a la insulina
postprandial
Más tarde, aparece la elevación de la glucosa en ayunas y finalmente cuando los
mecanismos compensadores fallan, se establece la diabetes.
En resumen
Insulina post-Ingesta
Glucosa basal Glucosa postpandrial Condición
carbohidratos
Normal Valor normal a las 2 hr Personas sin problema de
Aumento insulina
< 110 mg/dL <140 mg/dL DM2
Intolerancia a la glucosa,
Normal A las 2 hr Valores de
Aumento insulina resistencia a la insulina,
<110 mg/dL 140 a 200 mg/dL predisposición a DM2
> 126 mg/dL hiperinsulinemia > 200 mg/dL DM2
Valores de referencia de Insulina: 5 - 20 μU/mL
2 horas postprandial: 50 - 200 μU/mL
CURVA DE TOLERANCIA ORAL A LA GLUCOSA (CTOG O CTG)
Esta es una prueba del tipo estímulo–respuesta, para confirmar o
descartar DM2, sobre todo cuando cursa asintomática.
Esta prueba mide la capacidad que tiene el organismo para metabolizar
la glucosa, de manera que en los sujetos con alteraciones en el
metabolismo de los carbohidratos, esta capacidad se encuentra
alterada, y en el caso particular de los sujetos con (DM2), esta capacidad
se encuentra disminuida.
Procedimiento
Con un ayuno de 10 a 12 horas se toma una muestra sanguínea y determinar glucemia.
De acuerdo con el criterio del Expert Committee on the Diagnosis and
Classification of Diabetes (ECDCDM), si el valor de glicemia en ayunas es igual
o mayor a 126 mg/dl, se diagnostica Diabetes Mellitus y la realización de la
prueba está contraindicada.
Se le administrar al paciente una carga de glucosa, (75 gramos de glucosa disuelta en
250 mL de agua. En realidad, el criterio establece 1.75 gramos de glucosa por kilogramo
de peso corporal, hasta un máximo de 75 gramos)
Se toma una nueva muestra sanguínea a los 30 min, 60 min, 120 min y 180 min, para
determinación de glucosa
VALORES DE REFERENCIA: Ingesta de 75 gr
Tiempo Valor normal En DM2
Glucosa basal 70 - 110 mg/dL > 126 mg/dl
30 - 60 min 180 - 160 mg/dL > 200 mg/dL
120 min Hasta 140 mg/dL > 200 mg/dL
180 min Hasta 120 mg/dL > 145 mg/dL
HEMOGLOBINA GLICADA O GLICOHEMOGLOBINA
Su importancia fisiológica se puso de manifiesto a partir del hallazgo de
que parte de la hemoglobina en la sangre de individuos sanos está
glicada y que el nivel de glicación es mayor en pacientes diabéticos.
La hemoglobina glicada es una heteroproteina de la sangre, que
resulta de la unión de la hemoglobina con carbohidratos libres.
La glicación se define como la reacción de grupos aminos primarios de aminoácidos,
péptidos y proteínas con el grupo carbonilo de los azúcares reductores. En tres
etapas:
BASE DE SCHIFF Alcanza el
Asociación del azúcar equilibrio
con la proteína termodinámico
en unas horas
El equilibrio
termodinámico reordenamiento hacia una forma mas
se alcanza entre estable llamado PRODUCTOS DE
2 - 4 semanas AMADORI
Tras meses de contacto con la glucosa,
originan los productos de glicación avanzada
(PGA), es un proceso lento e irreversible
FACTORES QUE DETERMINAN LA INTENSIDAD DE LA GLICACIÓN
ü La concentración de Glucosa sanguínea
ü El tiempo durante el que se mantiene esa cantidad de Glucosa
ü La vida media (tiempo que tarda en destruirse) de la proteína glicada
ü En el caso de la Hemoglobina, y teniendo en cuenta que la vida media del
eritrocito es aproximadamente de 120 días, su determinación nos servirá
para evaluar el control de las cifras medias de Glucosa en sangre que ha
mantenido un diabético durante los 2 a 3 meses precedentes a la realización
del análisis
VALORES DE REFERENCIA
Nivel no diabético: ≤ 5,6%; en la práctica descarta el diagnóstico
de diabetes;
Nivel prediabético (riesgo aumentado de diabetes o
prediabetes): entre 5,7% y 6,4%;
Nivel diabético: ≥ 6,5%, que es compatible con el diagnóstico de
diabetes
INTERFERENCIAS /FALSOS POSTIVOS O NEGATIVOS
La Hb-carbamilada suele aparecer en pacientes con insuficiencia renal y su
concentración es proporcional a la concentración de urea y es
indistinguible de la HbA1c por algunos métodos; esto puede incrementar
falsamente las concentraciones de HbA1c.
Hb-acetilada descritas en pacientes que ingieren ácido acetil salicílico en
dosis mayor a 4 g/día y en algunos sujetos alcohólicos pueden presentar
incrementos falsos de concentraciones de HbA1c.
Cualquier condición clínica que acorte la supervivencia de los eritrocitos
o disminuya su vida media.
La anemia por deficiencia de hierro puede llevar a incrementos en HbA1c
por arriba de 2%, lo cual puede ser reversible al ser tratado con hierro.
la anemia hemolítica tiene el efecto opuesto al de la deficiencia de
hierro al reducir las concentraciones de HbA1c
Transfusiones recientes.
METODOLOGÍA PARA HbA1c
Se dispone de numerosos métodos para la determinación de HbA1C:
ü Inmunoturbidimetría (inmunológica)
üCromatografía de Intercambio catiónico
ü Concentración isoeléctrica
ü Electroforesis
ü Colorimetría (ácido tiobarbitúrico)
ü HPLC (Cromatografía líquida de alta performance), técnica de
referencia para NGSP (Nacional Glycohemoglobin Standadization
Program)
Recomendaciones pre-analíticas
Muestras obtenidas por punción venosa o capilar
Utilizar EDTA como anticoagulante de elección
Almacenar no más de una semana a 4°C o 1 año a -20°C.
Procesar muestras de sangre entera
No es necesario el ayuno
Inmunoturbidimetría (inmunológica)
Los métodos inmunológicos utilizan anticuerpos contra una secuencia de
aminoácidos que varían de 3 a 8 de la fracción N-terminal de la
hemoglobina glicada.
Tienen como ventaja el que son específicos para la HbA1c y pueden ser
incorporados a los autoanalizadores de química clínica ya sea por métodos
de inmunoturbimetría o de inmunoanálisis enzimático en donde se utiliza
una proteasa para digerir la hemoglobina y producir fructosil-aminoácido
que por la acción de una oxidasa produce peróxido de hidrógeno
METODOS ELECTROFORÉTICOS
Se basan en el hecho de que la molécula de HbA1c es diferente a la
molécula de la HbA y esta característica hace que puesta la sangre en
una corriente se desplace de acuerdo con sus características físico-
químicas relacionadas con las cargas eléctricas.
La electroforesis en el estudio de rutina de la HbA1c ha sido
remplazada por la cromatografía líquida de alta eficiencia
Métodos cromatográficos
Los métodos cromatográficos se subdividen en dos grandes
grupos diametralmente diferentes:
Ø La cromatografía de columna
Ø Cromatografía líquida de alta eficiencia/eficacia
Cromatografía de columnas
ü Prueba de minicolumnas es barata y de fácil acceso,
disponible en laboratorios clínicos de latinoamérica
de bajo volumen y pobre desarrollo tecnológico.
ü Aparte de que es dependiente del pH y la
temperatura a la cual se hace la prueba, tiene
problemas de calibración, baja reproducibilidad y
muchas de ellas no miden la HbA1c sino la Hb1
(hemoglobina glicada total).
ü Además, no están certificadas por el NGSP, situación
que la ubicaría como una prueba “obsoleta”.
Cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC)
üEl método de cromatografía líquida de alta eficiencia de intercambio
iónico se recomienda como un método de referencia por los
organismos internacionales relacionados con la hemoglobina glicada.
üEste método no se afecta por el pH ni la temperatura,
üNo se afecta por la presencia de hemoglobinopatías o falla renal.
üNo se afecta por la presencia hemoglobina carbametilada, ni por la
fracción lábil de la hemoglobina glicada
Estos sistemas utilizan una columna para eluir la solución en diferentes
fracciones: la HbA1a, la HbA1b, la HbA1c y la HbA0, sucesivamente, utilizando
diferentes tampones/búferes con diferencias en la fuerza iónica y en el pH.
Estos métodos presentan una excelente precisión y permiten una separación
rápida de la HbA1c.
Tiene como inconveniente que el costo del equipo y su funcionamiento sólo lo
pueden hacer los laboratorios grandes o instituciones de investigación; en
contraposición a lo anterior, la HPLC tiene grandes ventajas con relación a los
demás métodos disponibles para la medición de la HbA1c en el laboratorio
clínico, como son el de que no interfiere ningún otro tipo de
hemoglobinopatía
FUNDAMENTO
üPrimero es necesario inicialmente hemolizar la muestra.
üLuego se mezcla con la fase móvil (búfer con pH y carga definida) y se inyecta a alta presión a
través de una columna.
üLa muestra pasa por un sistema de separación compuesto por un prefiltro y una columna que
contiene la fase estacionaria.
üSegún las características moleculares de las proteínas, fundamentalmente su masa y su
carga, las diferentes moléculas de hemoglobina interactúan con la fase estacionaria, eluyendo
las diferentes fracciones de manera separada, en términos de tiempo.
üLuego de eluir las muestras, cada pico de elución corresponde a una proteína diferente que
puede ser cuantificada.
Utilidad ¿Qué complicaciones tiene?
HbA1C complicaciones
Especialmente si el aumento de HbA1c sucede en mas de dos ocasiones:
Ø Oculares
Ø Vasculares
Ø Renales
Ø Cardiopatía
Diagnóstico de diabetes
GPA (glucosa plasmática en ayunas):
mayor o igual a 126 mg/dL en dos ocasiones
HbA1c:
Mayor o igual a 6.5 %
Valor a las 2 horas tras ingesta de 75 gr. de glucosa:
Mayor o igual a 200 mg/dL
Consideraciones:
Por ejemplo imagina una persona con diabetes tipo 2 que únicamente mide su
glucosa en ayuno, de vez en cuando, una vez cada dos semanas, incluso alguien que
únicamente mide su glucosa en ayuno cada mes o cada 3 meses antes de ir a visitar al
médico, es posible que sus mediciones en ayuno tengan valores en rango meta, pero
su HbA1c esté muy elevada ¿qué sospecharías?
Otra posibilidad es que alguien tenga una HbA1c en su rango meta, pero los
resultados de su monitoreo de glucosa van desde hipoglucemias de 35 mg/dl hasta
hiperglucemias de 240 mg/dl y tener la misma HbA1c que alguien que tenga
mediciones de entre 70 y 140 mg/dL ¿tendría sentido tomar acciones junto con el
médico para mejorar el control, no crees ?
