PRACTICA 13.

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ASCÓRBICO (vitamina C)

INTRODUCCION
El ácido ascórbico o vitamina C, es uno de los componentes en gran variedad de frutas,
además es uno de los nutrientes necesarios para el hombre y los demás animales. Se
caracteriza por su hidrosolubilidad, y acción fundamental en un amplio rango de reacciones
metabólicas, actuando a la manera de hormonas, fijándose a receptores hormonales de
determinadas células a las que estimulan en varias funciones; protección de numerosas
sustancias (sobre todo lípidos) contra la acción del oxígeno (antioxidantes), y la
intervención de algunas vitaminas para que se cumpla el metabolismo de otras vitaminas
En los años 1960 se supo que el ácido ascórbico intervenía en la síntesis de colágeno, lo
que empezó a explicar el mecanismo del escorbuto, pero su función y el mecanismo en esta
síntesis no se conoció hasta casi treinta años después, en 1989 con la investigación del
grupo de Kari Kivirikko, en el Departamento de Bioquímica médica de la Universidad de
Oulu (Finlandia), y su conocimiento fue un gran paso en la bioquímica, pues llevó a
ampliar la función de la vitamina C como coenzima. En general, las vitaminas
hidrosolubles no son sintetizadas ni almacenadas en el organismo siendo necesario un
suministro constante.
La necesidad de esta vitamina diaria para mujeres y varones adultos es de 60 mg; es de
destacar que las recomendaciones dietéticas diarias se calculan para exceder las
necesidades de la mayor parte de los individuos y, por lo tanto, asegurar que están cubiertas
las necesidades de casi todas las personas. También es de destacar que un uso prolongado
de esta vitamina puede producir precipitación de cálculos de oxalato en el tracto urinario,
diarrea, cefaleas, náuseas, vómitos y gastralgias.

Existen varios procedimientos para determinar la vitamina C, químicos, potenciometricos,

cromatograficos, espectrofotométricos, etc. Este semestre se utilizara un método químico,
que tiene como fundamento el método de titulación, entre ellos está el método de titulación
de oxidación-reducción con 2,6 diclorofenol indofenol y el método de Morh, utilizando 2-
nitroanilina dando lugar a un derivado 2-nitrofenilhudrazida del ácido oxálico, el cual en
presencia de un exceso de NaOH forma una sal sódica de color violeta cuya absorbancia se
mide a 540 nm.

PRELABORATORIO

1. ¿Qué se entiende por vitaminas?

2. ¿Cómo se clasifican las vitaminas?, cite ejemplos
3. ¿Qué enfermedades casusa en el organismo humano la carencia de vitamina C.
4. ¿Qué enfermedades casusa en el organismo humano el exceso de vitamina C

MATERIALES Y REACTIVOS
Colorante 2,6 diclorofenol-indofenol al 0.5M, Ácido Ascórbico 1mg/mL, Ácido Acético al
5%, Cloroformo, Agua destilada, Bureta, 2 Erlemeyer de 100 y 250 mL, Agitador, Balanza,
Pipetas, Pinzas para bureta, Soporte, Matraz volumétrico de 100 mL, Embudo.
Material a traer por parte del estudiante: Muestra de orina de una persona que haya
tomado vitamina C el día anterior a la prueba, Limón, naranja, una tableta de vitamina C,
guantes y tapabocas, gafas de protección, cinta o marcador para rotular, toalla (2, una para
uso personal y otra para el trabajo práctico), jabón personal y jabón para lavado de material
de vidrio, gotero.

PROCEDIMIENTO

PARA MUESTRAS INCOLORAS. (muestra orina, limón, naranja o vitC)

 En un vaso coloque un volumen exacto de 3 mL de muestra, agregue 2 mL de ácido
acético al 5% y titule con una solución de 2,6- diclorofenol-indofenol hasta obtener un
color rosa estable. Registre el volumen utilizado para titular (V1).
 Tome luego 3 mL de agua como blanco, adiciónele ácido acético como en el paso
anterior y titúlelo con 2,6 diclorofenol. indofenol ( B1).
 Titule la solución patrón de ácido ascórbico siguiendo exactamente el procedimiento
anterior (P).
 Si creé que alguna de sus muestras contiene una alta concentración de vitamina C,
puede diluirla con agua destilada y proceder a titularla. Hay que tener en cuenta este
factor de dilución para hacer los cálculos.

SUPONGA LOS SIGUIENTES RESULTADOS:

CALCULOS
Muestras Vol (mL) de 2,6-
dicloro….para titular
Orina 1,2
Limón 11
Naranja 12,2
Tableta de Vitamina C 13
blanco 0,2
Patrón 0,4

La concentración de la vitamina C en su muestra, se calcula como sigue:

Vitamina C (mg
100
mL = ) V 1−B 1
P−B 1
x 2 x factor de dilución

Realice una tabla de resultados. Suponga que no hubo dilución.

Que reacción experimento el ácido ascórbico con el colorante redox ( 2,6-
diclorofenolindofenol). Escriba la ecuación correspondiente.
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________

¿Con una dieta normal, es necesario adicionar complementos de vitamina C? ¿Cuál es el

contenido recomendado de vitamina C en un adulto y en un niño?
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________

Cite por lo menos 10 alimentos ricos en Vitamina C, de nuestro país.

_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
PARA MUESTRAS COLOREADAS (muestra orina, limón, naranja o vit. C)
Puesto que es difícil ver el punto final de la titulación cuando las muestras son muy
coloreadas, tome las muestras como en el caso anterior y agrégueles 1 mL de ácido acético
y adicione luego 2 mL de cloroformo y titule con el 2,6-diclorofenol-indofenol, hasta
obtener el color rosa estable en la fase clorofórmica (fase inferior orgánica). Los cálculos
son los mismos que en el caso anterior.

NOTA: Para este laboratorio, suponga que no hubo muestras con color intenso que
enmascararon los resultados.

CONCLUSIONES:
BIBLIOGRAFIA CONSULTADA

Grupo de trabajo N°. _______________________________________________________

Integrantes ______________________________________________________________
Fecha de práctica__________________________________________________________
Fecha de entrega de informe_________________________________________________