PRACTICA

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MEMBRANA CELULAR

INTRODUCCION

Todas las células de los organismos vivos se encuentran recubiertas por una
membrana que recibe el nombre de plasmática, que impide que todo el
contenido químico de la célula se disperse. A su vez, la célula se halla
constituida principalmente por una bicapa de lípidos en la cual se hallan
inmersas proteínas. La composición química, organización física y función de
una membrana biológica depende de tres componentes bioquímicos: lípidos,
proteínas y carbohidratos. El paso de muchos materiales hacia adentro y hacia
fuera de la célula u orgánulo, se ve afectado por la bicapa lipídica que actúa
como barrera selectiva de dicho material. Esta permeabilidad selectiva
determina el ingreso de sustancias necesarias, el flujo de agua y salida de
productos de desechos. El paso de moléculas pequeñas no afecta de forma
evidente la estructura de la membrana, en cambio el ingreso o eliminación de
las macromoléculas si incluyen cambios visibles en la estructura de la
membrana celular debido a los procesos empleados para tal fin.

Estructura de la membrana celular

(Fuente: https://i.pinimg.com/736x/77/c3/6b/77c36be376b8a474211bfbc5e8b25f9f.jpg)
Las proteínas inmersas dentro de la bicapa lipídica juegan un papel muy
importante en el transporte de sustancias que por su solubilidad y carga
eléctrica no pueden atravesar directamente la membrana, en cambio moléculas
muy pequeñas no polares y con alta liposolubilidad tienen la capacidad de
pasar directamente a través de la membrana plasmática.

La permeabilidad de la membrana tiende a aumentar con factores como la

temperatura dado al incremento de la velocidad del movimiento de iones y
moléculas aumenta el paso a través de la membrana. Es importante aclarar que
la permeabilidad es una propiedad inherente de la membrana, mas no de la
sustancia. La membrana selecciona el material que debe ingresar o no. En este
proceso es importante conocer el concento dedos procesos como son la
ósmosis y diálisis. El proceso mediante el cual una membrana es atravesada
por agua o una molécula de solvente se conoce con el nombre de ósmosis y al
proceso a través del cual una sustancia atraviesa una membrana con
permeabilidad diferencial se conoce con el nombre de diálisis.

De forma general los intercambios de sustancias a través de la membrana

plasmática son el resultado del proceso de difusión, por lo que la membrana
celular tiene la función de mantener el equilibrio químico entre el interior de la
célula y su medio.

En la difusión, las moléculas se mueven desde una región de mayor

concentración hacia otra de menor concentración. En el caso de la ósmosis, otra
vez se puede pensar en moléculas esta vez, en moléculas de agua en dos
compartimientos separados por una membrana. Si ninguno de los
compartimientos contiene un soluto, las moléculas de agua se moverán desde
una región de mayor concentración hacia otra de menor concentración. Sin
embargo, si añadimos un soluto a uno de los compartimientos, esto afectará la
probabilidad de que las moléculas de agua salgan de ese compartimiento y
que se dirijan hacia el otro; en concreto, disminuirá́ esa probabilidad.

Cuando soluciones de osmolaridades diferentes son separadas por una

membrana permeable al agua, pero no al soluto, el agua se moverá́ desde el
lado con menor osmolaridad hacia el lado con mayor osmolaridad. Se utilizan
tres términos hipotónica, isotónica e hipertónica para comparar la osmolaridad
de una célula con la osmolaridad del liquido extracelular alrededor de ella:

• Si el liquido extracelular tiene una menor osmolaridad que el liquido al

interior de la célula, se dice que es hipotónico (hypo = menos que) con
respecto a la célula, y el flujo neto de agua será́ hacia el interior de esta. En el
ambiente hipertónico las células pierden agua hasta alcanzar un estado
plasmolizado, reducción de su tamaño

• En el caso contrario, si el liquido extracelular tiene una mayor osmolaridad

que el citoplasma de la célula, se dice que es hipertónico (hyper = mayor que)
con respecto a ella y el agua saldrá́ de la célula a la región de mayor
concentración de soluto. En el ambiente hipotónico las células ganan agua
hasta alcanzar un estado turgente, aumentando su tamaño.

• En una solución isotónica (iso = igual), el liquido extracelular tiene la misma

osmolaridad que la célula y no habrá́ ningún movimiento neto de agua hacia
adentro o hacia afuera de esta.

Figura 1. Osmolaridad del liquido extracelular y movimiento por ósmosis.

Fuente: Open Sax- Biology

El transporte activo de moléculas hacia dentro y hacia fuera de la célula es

igualmente importante, pues la célula tiene la capacidad de transportar iones y
moléculas a través de su membrana en contra de gradientes de concentración,
usando el mecanismo de transporte activo. En este laboratorio veremos como
ocurre el transporte de diferentes substancias a través de la membrana celular.

OBJETIVOS

• Evaluar como la membrana celular responde cuando se le enfrenta a una

solución hipertónica o hipotónica
• Identificar los fenómenos de turgencia y plasmólisis en los modelos celulares

• Comprender la importancia de estos fenómenos para la célula y los efectos

que pueden tener sobre ella.

MATERIALES (por grupo):

q 2 huevos q 1 Remolacha tierna a

q 1 papa cruda temperatura ambiente *
q 1 papa cocida q Portaobjetos
q Vinagre blanco q Cubreobjetos
q Un recipiente plástico q Microscopio
q 1 Remolacha congelada q Papel de arroz
desde la noche anterior * q Acetona
q Tubos de ensayo
 q 50 gr de Detergente * q Agua del grifo o filtrada
q Servilletas de papel de cocina q Syrup o Miel
* q Sal de mesa
q Agua destilada q 2 vasos transparentes
q Baño María q Guantes desechables
q Cuchilla, cuchillo o bisturí* q Cinta de medir (metro)
q Pinzas* q Pétalos de rosa roja

(*) Material que el estudiante debe traer.

PROCEDIMIENTO

1.Corte 7 trozos de remolacha a temperatura ambiente, de forma rectangular,

cuyo tamaño le permita entrar y salir con facilidad del tubo de ensayo, y su
largo no sobrepase la mitad del tubo, deben quedar lo más uniformes posibles.
Corte, además, 1 fragmento de la remolacha congelada del mismo tamaño que
los anteriores.
2. Lave todos los trozos de remolacha en agua corriente durante 3 minutos, para
eliminar el pigmento de las células seccionadas. Ojo debes cuidar de no
mezclar los fragmentos pues se te pueden confundir después de lavados.

1. EFECTO DE LOS SOLVENTES ORGÁNICOS SOBRE LA

ESTRUCTURA DE LA MEMBRANA

PROCEDIMIENTO

1. Separe los 3 trozos de remolacha de los que lavaste, que se sacaron de la

remolacha a temperatura ambiente.
2. Deposite los trozos de remolacha en los 3 tubos, que rotularas como
agua, acetona y alcohol
3. Debes colocar en cada tubo el solvente correspondiente que cubra la
muestra de remolacha y quede uniforme. Tápelos y déjelos reposar
durante 30 a 40 minutos, agitándolos de vez en cuando
4. Retire el trozo de remolacha
5. Saque los trozos de remolacha y "lea" cada tubo dándole un valor de 0 a
10 a la cantidad de pigmento difundido en cada uno de los tubos.
Consigne los resultados en la siguiente tabla :
 Análisis de resultados

Para analizar los resultados anteriores, analiza las siguientes preguntas:

1. ¿Cual de los 3 tubos toma una coloración más roja?
2. ¿A que consideras que se deba esto?
3. ¿Qué relación existe entre la intensidad del color (dependiendo del
solvente) y las características estructurales de la membrana

2. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ESTRUCTURA DE

LA MEMBRANA

PROCEDIMIENTO

1. Marque 4 tubos de ensayo de la siguiente manera: 0°C, T. ambiente,

50°C y 70°C.
2. Coloque el trozo de la remolacha que fue congelada en el tubo marcado
con 0°C.
3. En otro tubo seco coloque un trozo a T. ambiente
4. Caliente agua en Baño de María hasta 70°C. Tome un trozo de remolacha
con una pinza y agítelo sin soltarlo en el agua caliente durante un minuto
exacto. Déjelo en el tubo marcado a 70°C.
5. Repita el paso anterior con el otro trozo usando agua caliente a 50° C.
6. Añada agua a cada uno de los 4 tubos, de manera que se cubra el trozo
de remolacha y queden todos con la misma cantidad de agua, tápelos y
déjelos durante 30 minutos, mueva periódicamente los tubos para que
difunda en el liquido todo el pigmento que haya salido de las células.
7. Saque los trozos de remolacha y "lea" cada tubo dándole un valor de 0 a
10 a la cantidad de pigmento difundido en cada uno de los tubos.
Consigne los resultados en la siguiente tabla:

Análisis de resultados
Para analizar los resultados anteriores, analiza las siguientes preguntas:
1. ¿Por qué el tubo marcado como 0ºC es el que toma la coloración mas
intensa?
2. ¿Qué sucede con los componentes de la membrana a 70ºC, y de ahí la
diferencia de color con la membrana que fue sometida a 50ªC?

3. TURGENCIA Y PLASMOLISIS

PROCEDIMIENTO

Turgencia.

1. Con la punta del bisturí́ realice una incisión no profunda en la cara

anterior de un pétalo.
2. Con las pinzas rasgue la superficie hasta obtener un pequeño fragmento
de la epidermis. Recuerde que la idea es que sea delgado para facilitar
su observación en el microscopio.
3. Lleve el fragmento a un extremo del portaobjetos y colóquele una gota
de agua destilada. Use cubreobjetos.
4. Observe con el objetivo de 40X
5. Dibuje lo observado.

Plasmólisis

1. Prepare un segundo fragmento de la epidermis del pétalo.

2. Llévelo al extremo del portaobjetos y colóquele unas gotas de solución
de NaCl al 9%.
3. Use cubreobjetos y cúbralo
4. Observe con el objetivo de 40X
5. Dibuje lo observado.

TURGENCIA PLASMÓLISIS
 Análisis de resultados

Para analizar los resultados anteriores, analiza las siguientes preguntas:

1. ¿Qué diferencias encuentras entre el pétalo con agua y el que se le aplicó
solución salina 9%?
2. ¿A qué se deben las diferencias?
3. ¿Cuál de las dos soluciones se considera hipotónica y cual hipertónica?

4. SOLUCIONES HIPERTÓNICAS VS HIPOTÓNICAS. EFECTOS

SOBRE LA MEMBRANA DEL HUEVO

Para este experimento usaremos la membrana de un huevo como modelo. Sin

embargo, esta se encuentra protegida por una cascara resistente hecha de
carbonato de calcio a manera de membrana externa. Esta membrana es
semipermeable, permite la entrada y salida de moléculas y particularmente de
agua.

• Obtención de la membrana semipermeable

1. Para usar la membrana debemos eliminar la cascara y para ello debemos

sumergir los 2 huevos en acido acético (vinagre), usando un recipiente lo
suficientemente grande para que queden cubiertos en su totalidad
2. Espera entre 12 y 24 horas, revisando cada huevo con regularidad
3. Después de un tiempo, retira el huevo del recipiente y enjuaga con
abundante agua, teniendo en cuidado de no romper la membrana
interna. Usa los guantes para este paso.
4. Como resultado tenemos una membrana semipermeable para el
experimento.
5. Deben quedar como muestra la figura
PROCEDIMIENTO

• Antes de iniciar y para evaluar los efectos de cada solución sobre la

membrana del huevo DEBES MEDIR la circunferencia de cada huevo con
un metro flexible ANTES de sumergir los huevos en cada solución

1. Consigna el valor de esta medida en la tabla para identificar cambios en

el volumen de cada huevo.
2. A cada vaso desechable transparente rotúlalo con los nombres de cada
solución, usaremos 1 huevo para cada vaso.
3. Para la solución hipotónica usaremos agua del grifo o filtrada, la cantidad
suficiente para que el huevo quede sumergido completamente
4. Para la solución hipertónica usaremos Syrup o miel, asegúrate de
agregar la cantidad suficiente para que este quede completamente
sumergido
5. Esperamos observar cambios visibles en los huevos en un periodo entre
8 y 12 horas
6. Finalizado el tiempo de exposición procedemos a medir la superficie de
la circunferencia de cada huevo usando la cinta métrica

• En la solución hipertónica debemos esperar que pierda peso y

circunferencia, en cambio en la solución hipotónica se espera que gane
peso y circunferencia (SI TIENES EN CASA UNA GRAMERA SERIA
EXCELENTE QUE ADEMAS DE LA CIRCUNFERENCIA LE TOMARAS EL
PESO INICIAL Y FINAL A LOS HUEVOS)

RESULTADOS Y ANÁLISIS

• Usa esta tabla para registrar tus observaciones

CIRCUNFERENCIA CIRCUNFERENCIA DIFERENCIA

SOLUCION
INICIAL FINAL
HIPOTONICA
HIPERTONICA

OPCIONAL

SOLUCION PESO INICIAL PESO FINAL DIFERENCIA

HIPOTONICA
HIPERTONICA

Análisis de resultados

Observe y describa lo que sucede en cada caso, relacionado con su

observación con el fenómeno osmótico y la apariencia de cada huevo
 1. ¿Que ocurrió́ con el huevo de la solución Hipertónica?
2. ¿Que ocurrió́ con el huevo de la solución Hipotónica?
3. 4. ¿Cual es la solución química del jarabe de syrup? ¿Cual es la
concentración de carbohidratos?
4. Si usas miel. ¿cual es la composición química de la miel?

PROCEDIMIENTO (Opcional)

Si quieres puedes repetir el procedimiento anterior intercambiando los huevos

entre los vasos. Introduce el huevo que estaba en la solución hipertónica y
pásalo a la solución hipotónica y viceversa. Recuerda usar nuevas soluciones
para este paso.

• ¿Que ocurre con los huevos? ¿Sigue la membrana estando

semipermeable? ¿obtuviste los mismos resultados con huevos
diferentes? ¿Hubo alguna diferencia?.

5. IMPORTANCIA DE LA INTEGRIDAD DE LA MEMBRANA

CÉLULAS DE PAPA CRUDA Y COCIDA

• Para evaluar los efectos de la integridad de la membrana en el transporte de

sustancias, utilizaremos dos papas, una papa cruda y una papa cocida.

PROCEDIMIENTO

1. A cada papa le haremos un agujero en la parte central usando una

cuchara para facilitar la extracción del material
2. Colocar las papas en un recipiente de vidrio o plástico, procedemos
adicionar aproximadamente 50ml de agua sumergiendo parte de la papa
en el liquido (ver video)
3. Ahora con la ayuda de una cuchara adicionamos la sal a cada agujero de
las papas, asegurándonos no derramar sal sobre el agua del recipiente
que las contiene.
4. Dejamos reposar por 3 horas y observamos los cambios
RESULTADOSAnálisis
Y ANÁLISIS
de resultados

1. ¿Qué cambios importantes notas en las dos papas? Describe eso cambios
2. ¿Cuál es la principal diferencia entre la papa cruda y la cocida con
relación a la integridad de la membrana?
3. ¿Crees que la integridad de la membrana tiene algo que ver con los
resultados obtenidos? ¿por qué?

CUESTIONARIO

1. De acuerdo con el tipo de solución en función a la presión osmótica, indique

que ocurre con los glóbulos rojos en cada uno de los tres esquemas:

2. ¿En que consiste el proceso de diálisis? De un ejemplo de una aplicación

practica de la diálisis en el campo de la salud
3. ¿Que relación hay entre el peso molecular de las sustancias y la
velocidad de difusión?
4. ¿Que características osmóticas tienen las soluciones parenterales y
orales administradas a un paciente? ¿Por que deben ser así́? Analice su
repuesta con base en lo observado en este experimento
5. ¿Como afecta la temperatura y los solventes orgánicos la fluidez de la
membrana celular?