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BIOLOGÍA CELULAR Y LABORATORIO

PRÁCTICA # 3 PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA CELULAR:

ACCIÓN DE LOS COMPUESTOS ORGÁNICOS Y LA TEMPERATURA SOBRE SU


ESTRUCTURA

INTRODUCCIÓN

La membrana celular es la organela por donde pasan selectivamente al interior o exterior de la


célula las sustancias ionizadas o no, este pasaje suele hacerse a veces, porque las sustancias
ser disuelven en la membrana o también como parte de su fisiología que regula el pasaje de
dichas sustancias.

El equilibrio entre la impermeabilidad a iones y moléculas como azucares y la permeabilidad al


agua es el responsable de la turgencia de la célula.

Hoy en día no se ha podido comprender exactamente el mecanismo que controla la


permeabilidad de la membrana celular.

Se ha observado que la permeabilidad tiende a aumentar con la temperatura, pero el hecho de


que las diferencias observadas a distintas temperaturas no son proporcionales a los aumentos
de temperatura, parece indicar que entre 0 y 30 °C no se producen cambios estructurales en
las membranas, además no todas las sustancias siguen esa norma. Se supone por lo tanto,
que el aumento de la permeabilidad se debería solo al aumento de la velocidad del movimiento
de iones y moléculas que acelerarían el pasaje a través de la membrana.

1. OBJETIVO

El estudiante desarrollará habilidad en el manejo de las técnicas y los materiales que le


permitan observar las funciones celulares, en este caso de la membrana plasmática.

2. MATERIALES

• 8 tubos de ensayo (por equipo).


• 1 gradilla para 12 tubos.
• 1 cuchilla o navaja
• Remolacha fresca

3. REACTIVOS.

• Alcohol absoluto
• Acetona
• Detergentes (Tritón, SDS, Comercial)
• Glicerol

• 4. PROCEDIMIENTO Y TRABAJO PARA ENTREGAR

a. Efecto de la temperatura (procedimiento):

• Corte 11 trozos de remolacha pequeña de 4 cm de longitud, 0.5 cm de ancho y 0.2 cm de


espesor, lo más uniforme posible.
• Lave los trozos en agua corriente durante 3 minutos para eliminar el pigmento de las
células seleccionadas y deje los trozos en agua.
• Marque 4 tubos de ensayo de la siguiente manera: 0 °C, T. ambiente, 50 °C y 70 °C.
• Coloque un trozo seco en el tubo marcado con 0 °C, tápelo y anote en el tubo el número
del equipo. Déjelo en la nevera durante 90 minutos, anote la hora.
• Ponga otro trozo seco en el tubo T. ambiente, tápelo y déjelo en la gradilla.
• Caliente agua en baño maría hasta 70 °C. Tome un trozo de remolacha con una pinza y
agítelo sin soltarlo después deposítelo en el tubo marcado 70 °C y tápelo.
• Repita el paso anterior con el otro trozo usando agua caliente a 50 °C.
• Luego de una hora y media, saque el tubo de la nevera, añada 10 Ml de agua a cada uno
de los 4 tubos, tápelos y déjelos durante 30 minutos, agite los tubos para que difunda en el
liquido todo el pigmento que haya salido de las células.
• Saque los trozos de remolacha y “lea” cada tubo dándole un valor de 10 al tubo donde se
presentó mayor cantidad de pigmento difundido.

Tabla # 1. Efecto de la temperatura sobre la liberación de pigmento de remolacha

Tratamiento Cualificación de la concentración del pigmento


1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
T. ambiente
50 °C
70 °C
0 °C

Efecto de los solventes orgánicos:

Procedimiento:
Separe los 7 trozos de remolacha restantes y proceda de la siguiente manera:
• Deposite en cada uno de los 4 tubos medianos, 10 ml del solvente orgánico de acuerdo
a lo siguiente:
o Tubo 1 solución de Glicerol
o Tubo 2 alcohol absoluto
o Tubo 3 acetona
o Tubo 4 detergente comercial
o Tubo 5 detergente SDS
o Tubo 6 detergente tritón
o Tubo 7 agua destilada

Deposite un trozo de remolacha en cada tubo y tápelo, déjelos reposar durante 60 minutos,
agitándolos de vez en cuando, al final retire el trozo de remolacha y usando la misma escala
anterior haga las lecturas.

Tabla # 2. Efecto de los solventes orgánicos sobre la liberación de pigmento de


remolacha

Tratamiento Cualificación de la concentración del pigmento


1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Glicerol
Alcohol absoluto
Acetona
Detergente comercial
Detergente SDS
Detergente Tritón
Agua destilada

Preguntas:

1. ¿Cuál es el efecto del incremento y la disminución en la temperatura sobre la


permeabilidad de la membrana?

2. ¿Qué explicación molecular puedes dar acerca de este fenómeno?

3. ¿Qué esperarías si se usará como solvente el aceite de oliva?

4. ¿Qué efecto tiene la acetona, el glicerol, el etanol y los detergentes en la


permeabilidad?

BIBLIOGRAFÍA

• Lodish H. Biología celular y molecular. Octava edición. Editorial Médica


Panamericana, Madrid. 2016.
• Karp, G. Biología Celular y Molecular. Conceptos y experimentos. Octava edición.
Ed, Mc Graw Hill, 2015.
• Alberts B, Bray D, Lewis J, Raff M, Roberts K, Watson JD. Biología Molecular de la La
Célula. Sexta edición, ediciones Omega. 2018.