GENÉTICA FORENSE

Pruebas de ADN

Las pruebas de ADN son consideradas el estándar de oro como evidencia en

cierto tipo de casos, especialmente en la identificación. Las pruebas genéticas ya
sea en la identificación humana, casos criminales o para establecer
parentesco, no indican características físicas o patológicas de la persona, ya que
se analizan secuencias que no codifican proteínas, lo que significa que no tienen
una función específica para el organismo, al menos obvia.

Técnicas básicas utilizadas por los genetistas forenses para obtener un perfil
genético, enfatizando las peculiaridades de estas cuando se aplican a
identificación humana:

1.-Extracción de ADN.

Los forenses obtienen ADN de una infinidad de fuentes biológicas muchas

veces no imaginadas, como chicle, manchas, pintalabios, una tasa, una
botella con agua, un pasamontaña, restos calcinados, un rastrillo, cepillo de
dientes, etc.

1a) Lisis celular, es decir, la destrucción de las células, ya sea epiteliales (por
ejemplo, mucosa oral en saliva, fluidos vaginales, leucocitos en sangre, etc.).
Este paso en muchos casos requiere un paso previo para obtener las células, de
sangre separar los leucocitos (que si tienen ADN) de los eritrocitos (sin ADN); de
osteocitos, descalcificar el hueso; de tejido desintegrarlo y homogeneizarlo, entre
otros.

1b) Purificación, para separar al ADN de las proteínas y los restos celulares que
dejó la lisis celular previa.

1c) Precipitación, que consiste en separar al ADN mediante su deshidratación

en alcohol absoluto y dejarlo secar.

1d) Re suspensión, para rehidratar el ADN con una solución que lo protege
de la posible degradación. Sin embargo, existen otros métodos de extracción
bastante utilizados en genética forense, como el Chelex, el papel FTA,las resinas
magnéticas, y la extracción diferencial.

2.-Cuantificación de ADN. Una de las técnicas más sencillas es la

espectrofotometría, la cual se puede realizar con cantidades mínimas de muestra

(1 L). Además de la concentración, se estima la pureza del ADN en cuanto a la

presencia de sales o proteínas que pudieran interferir posteriormente para obtener
un perfil genético. Sin embargo, para los genetistas forenses esta técnica puede
no ser suficiente ya que además del contexto criminal del que se trate, hay que
considerar que pueden ser mínimas lo que limita los ensayos o repeticiones que
se pueden hacer. Por ese motivo, las muestras forenses suelen cuantificarse por
medio de PCR en tiempo real

3.-Amplificación por PCR.

El objetivo de la reacción en cadena de la polimerasa, más bien conocida por

sus siglas en inglés como PCR, consiste en amplificar o generar millones de
copias secuencias del genoma, en este caso STRs lo que genera el perfil
genético. La PCR consiste en 25-30 ciclos en los que suceden los siguientes tres
pasos en cada ciclo:51) desnaturalización, por calor se desnaturalizan
(separan) las cadenas de ADN, )alineamiento de los iniciadores o primers
que se unen por complementariedad de bases y delimitan las regiones que se
van a replicar, y ) extensión, en cada ciclo de PCR se duplica la secuencia
blanco(STRs), por lo que en 25 a 30ciclos teóricamente habrá millones de copias,
facilitando su análisis posterior.

Normalmente se amplifican varios fragmentos de ADN en paralelo para evitar

agotar la muestra y para conseguir una mayor rapidez en el análisis (multiplex
PCR).

4.-Electroforesis Capilar (EC).

Los alelos STRs se diferencian por el número de veces que se repite una
secuencia corta, esto significa que el tamaño va a ser diferente entre un alelo y
otro. Para ver estas diferencias se emplea la EC, donde el producto de
PCR de cada muestra se separa a través de un capilar relleno de polímero por
acción de un campo eléctrico, proceso que dura alrededor de 30 minutos
por muestra.

ELECCIÓN DE POLIMORFISMOS A ESTUDIAR

Como norma general diremos que siempre que sea posible se realizará el análisis
de polimorfismos de ADN nuclear, pues son los que más información nos darán
en cuanto a la identidad de la muestra. Uno de los fragmentos de ADN nuclear
más estudiados es la amelogenina. Se trata de un marcador muy útil porque nos
informa sobre el sexo del individuo al que pertenece la muestra dubitada. Pero
existen situaciones en las que es recomendable el análisis de otros tipos de
polimorfismos como son los polimorfismos de ADN mitocondrial y polimorfismos
ligados al cromosoma Y:

ADN mitocondrial

Este tipo de ADN, transferido por herencia materna, se emplea cuando el ADN es
de baja cantidad o se encuentra altamente degradado (23

Cuando existe una gran degradación de las muestras enviadas al laboratorio por
las malas condiciones de conservación en que permanecieron hasta que fueron
halladas o por la antigüedad que tienen. En este caso el ADN mitocondrial se
encontrará en mejor estado que el nuclear debido a su mayor número de copias
por célula y de no obtener resultados concluyentes en el análisis del ADN nuclear
de este tipo de muestras, podemos pasar a obtener resultados positivos en el
análisis de su ADN mitocondrial. Tal es el caso de restos óseos y dientes antiguos
o sometidos a condiciones extremas.

Cromosoma Y

Existen varios casos especiales en los cuales el análisis de los polimorfismos

situados en el cromosoma sexual Y pueden ser de gran utilidad:

Estos marcadores se utilizan en los dos tipos de estudios forenses: estudios de

vínculos biológicos de parentesco y en identificación de vestigios biológicos. En
estos últimos, los marcadores Y tienen la ventaja de estar presentes solo en
varones y se utilizan en los delitos contra la integridad sexual, o en general
cuando la víctima es mujer, el agresor varón y en las evidencias hay poco material
o ADN masculino comparado con el femenino. Lo que sucede en estos casos es
que en los marcadores genéticos autosómicos se detectará solo el perfil
mayoritario (el femenino), sin embargo, en los marcadores de cromosoma Y esta
competencia desaparece y quedará expuesto el haplotipo Y del agresor.

Estos marcadores no suelen utilizarse en los estudios de paternidad sencillos

(cuando se tiene al supuesto padre), sin embargo, son de gran utilidad en
estudios de parentesco biológico en ausencia del supuesto padre, en casos de
investigación de personas perdidas, en casos de identificación en desastres en
masa, etc., donde complementan en general los estudios de los STR
autosómicos.

Son empleados también en investigaciones antropológicas, históricas y

genealógicas. Por ejemplo, son muy utilizados como trazadores de migraciones
humanas a través del linaje masculino.

Así como tiene ventajas, la utilización del cromosoma Y en genética forense tiene
desventajas o limitaciones. La determinación de un perfil genético autosómico
individualiza una persona, sin embargo, la de un haplotipo de cromosoma Y
individualiza un linaje paterno. Cuando se lo detecte puede ser del imputado en
un delito penal, pero también puede ser de su padre, abuelo, hermano, o de
cualquier individuo de su mismo linaje paterno. De modo que en un juicio no
tendrá el mismo valor probatorio que un perfil autosómico y necesitará
seguramente de otras pruebas para ser de utilidad.

Factores para considerar en la evaluación del ADN

Los criminalistas utilizan pruebas o iluminación especial para indicar que fluidos
corporales están presentes Se pueden encontrar el ADN que puede ser de la
misma persona o que otra persona haya tocado la mancha. Para saber la
transferencia y cantidad de ADN depende de varios factores, tales como: (26)

1. La variabilidad de persona a persona.

 2. Cuánto tiempo ha pasado y qué hemos hecho desde que nos lavamos las
manos/el cuerpo.
3. La intensidad del contacto (por ejemplo, un toque breve o un fuerte apretón
de manos).
4. si las superficies están húmedas o secas, ásperas o lisas, absorbentes o
no absorbentes.

Comprensión actual de las tasas de error en el ADN

Si se observa una coincidencia entre un sospechoso y la evidencia de la escena

del crimen, entonces existen tres posibilidades:

➔ El sospechoso depositó la muestra.

➔ El sospechoso no proporcionó la muestra, pero tiene el perfil por
casualidad.
➔ El sospechoso no proporcionó la muestra y el resultado de la coincidencia
es un falso positivo debido a un cambio de muestra o algún otro tipo de
error o transferencia.

Bibliografía:

1. https://camjol.info/index.php/RCFH/article/view/9804/11198
2. https://lourditas.com/docs/papers/forensics-spanish/Prieto-2004-CEJ.pdf
3. Ferreira Capote Raúl Pedro .El ADN Forense [Internet] 2020.[ citado 8 de
diciembre del 2023]. Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/revcubgencom/cgc-2020/cgc203
4.