PRUEBA CRUZADA MAYOR

Grupo Sanguineo
FORMATO Nombre y Apellidos
Transfusiones Previas ANTECEDENTES DATOS Sexo
Unidad :Tipo y cantidad CLINICOS SOLICITUD DE GENERALES Historia Clinica
Diagnostico Presuntivo SANGRE Sala/Cama
Mujeres:Nº Gestaciones

Rotulado Previo
MUESTRA DE Sangre venosa
SANGRE DEL Volumen:3-5 ml
RECEPTOR No hemolizada
Sin Anticoagulante

VERIFICACION UNIDAD DE
SELECCIÓN DE LA SANGRE:
UNIDAD DE SANGRE Tº Almacenada:2-8ºC
Fecha Expiracion
ABO-RH ADECUADA
Serologia:Negativa
DONADOR Comparable: Grupo ABO-RH

LAVADO
GLOBULOS ROJOS

PREPARADO GR %

TIPIFICACION SISTEMA
SISTEMA GRUPO SANGUINEO SISTEMA
ABO RECEPTOR/DONADOR RH

TECNICA PRUEBA CRUZADA TECNICA

TUBO MAYOR GEL

Enfermedades
CORRELACIONES PROBLEMA Condicion Clinica
CLINICAS SEROLOGICO Asociado Transfusiones
Uso Medicamentos

CONFIRMAR PRESENCIA DISCREPANCIAS DEMOSTRAR SI EL AC CAUSANTE ES UN ALO O

SEROLOGICAS PASADAS Y ACTUALES AOTO-AC

DESCARTAR ERROR HUMANO PRUEBA CRUZADA ANORMALIDADES EN EL SUERO RECEPTOR

(Causa Serologica) INCOMPATIBLE (FENOMENO ROLEAUX)
(Resolucion Problemas)

DESCARTAR ERROR HUMANO CONTAMINANTES PRODUCEN FP

(Causa No Serologica)
SELECCIÓN UNIDAD

ASPECTO PLASMA

• NO CONTAMINADO
• NO HEMOLISIS
• NO CAMBIOS COLOR

VERIFICACION ROTULADO
GRUPO SANGUINEO

FECHA VENCIMIENTO
100 – 200 ul 3 – 4 ml

SSF
NaCl 0,9%
3500 rpm / 2 min

12x75mm
MEZCLA INVERSION
PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD
Las pruebas de compatibilidad se efectúan
antes de transfundir la sangre para asegurarse
de que los hematíes del D. son compatibles con
el R.
Comprenden la determinación de los Grupos
ABO y Rh del receptor así como la presencia de
Acs. Irregulares en el suero del mismo.
Las PC requieren una ejecución muy cuidadosa
y la utilización de controles (+) y (-) adecuados.
PRUEBA CRUZADA
Permite descubrir Acs. en
el receptor contra Ag del
donante.
Se realiza habitualmente
por protocolo, aunque
teóricamente solo es
obligada en caso de
escrutinio de Ac.
irregulares positivo.
PRUEBA CRUZADA MAYOR
FUNDAMENTO
Consiste en enfrentar el suero del R con los Hematíes del D.
Consta de 4 fases:
Fase Salina
Fase Proteica
Fase Térmica
Fase Coombs
FASE SALINA
1 gotas GR al 5% del D.
2 gotas de Suero del R.
Centrifugar 3400 r.p.m x 15”
Lectura
NOTA:
Se emplea para poder
detectar generalmente Acs de
clase Ig M.
FASE PROTEICA
Agregar 2 gotas de Albúmina Bovina (reduce el
potencial Z).
Centrifugar a 3400 r.p.m x 15”
Realizar la lectura
• NOTA:
Se realiza empleando un
potenciador que sirve para
magnificar la Rx. Ag-Ac
de los Acs. de clase Ig G
FASE TERMICA
Incubar a 37ºC por 20 mins.
Centrifugar a 3400 r.p.m x
15”
Lectura
NOTA:
Diseñado para la
detección de Acs calientes
de tipo IgG
 FASE DE COOMBS
Lavar 4 veces (ClNa) con
SS a 1000 r.p.m x 2 min.
decantando cada vez que
se lava .
Agregar 2 gotas del
reactivo de Coombs.
Centrifugar a 3400 r.p.m x
15”
Lectura
PROCEDIMIENTO
CENTRIFUGACIÓN

OBTENCION
DEL SUERO
DEL
RECEPTOR
ESQUEMA DE LA REACCIÓN ANTÍGENO -
ANTICUERPO

AGLUTINACIÓN

Hematies resuspendidos
al 5%
 Lectura

Los resultados se reportaron valorando el nivel de aglutinación

mediante el método semicuantitativo en cruces, que tomó
valores desde 0 hasta +4
DETECCCIÓN DE ANTICUERPOS
IRREGULARES
Son aquellos que se producen frente a Ag. distintos a los del sistema
ABO.
Son Ac que generalmente aparecen por una inmunización, transfusional
o feto materna y pueden producir reacciones postransfusionles.
De suma importancia en el Dx. de EHRN y ciertos trastornos hematicos.
DETECCCIÓN DE ANTICUERPOS
IRREGULARES
Se puede llevar acabo mediante 3 tipos de técnicas:
1. Test de Coombs Indirecto.
2. Técnica enzimática
3. Técnica a 4 ºC.
Se recomienda al menos 2 de estas técnicas para obtener buenos
resultados en la detección de AI
TEST DE COOMBS INDIRECTO