BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR 2022

Síntesis Conceptual 5:
Regulación de la expresión génica II
Posibles puntos de regulación de la expresión génica
Procesamiento del mARN eucariota

Modificación del extremo 5’

Splicing

Modificación del extremo 3’

 Modificación del extremo 5’ del pre-mARN:
‘Capping’

Enlace 5’ a 5’ de 7-metil
guanosina
Complejo de unión a Cap
cap binding complex (CBC)

Funciones del CBC:

 Evita la degradación por exonucleasas

 Permite el adecuado transporte a través de los poros nucleares

 Interactúa con la subunidad menor del ribosoma durante

la traducción
 Splicing del mARN

Los genes eucariotas son discontinuos

Secuencias consenso que delimitan a los intrones
snRNAs

snRNPs
(‘snurps’)

R: A o G
Y: C o U
El Spliceosoma

EJC

EJC: Exon junction complex

 Aprox.
27000 genes

300000
proteínas
 Aprox.
27000 genes

1 gen ≠ 1 mARN
1 gen ≠ 1 proteína

300000
proteínas
 Splicing alternativo

Ocurre en aprox. 2/3 de los genes humanos

Formas de splicing alternativo

Splicing
alternativo

Splicing
alternativo

Splicing
alternativo
Formas de splicing alternativo

Splicing
alternativo

Splicing
alternativo
Ejemplo: Procesamiento diferencial del extremo 3’

Anticuerpos unidos a
membranas

Anticuerpos secretados
Procesamiento diferencial del extremo 3’
 En el splicing alternativo participan
proteínas reguladoras del splicing

La regulación frecuentemente es tejido específica

 Modificación del
extremo 3’ de los
mRNA eucariotas:
Clivaje y
poliadenilación

Las PABPs (poly-A binding proteins)

regulan el inicio de la traducción y la
estabilidad del mARN
 Transcripción y procesamiento de los tARNs

•Los tRNAs contienen intrones que deben sufrir splicing.

Son transcriptos por la RNA polimerasa III
•Este splicing ocurre por un mecanismo distinto al de los mARNs, ya que
es llevado a cabo por proteínas exclusivamente.

•Este proceso ocurre en el nucleolo

Maduración del ARNt
Los rARNs son procesados en el núcleo

Transcripto por ARN pol I

5S Transcripto por
ARN pol III
Los snoARNs guían el procesamiento del rARN
 Procesamiento del ARNr transcripto primario
45S (nucléolo).
• Clivaje y formación de los ARNr 18S, 5.8S y 28S.
• Modificación covalente de los nucleótidos.

Ensamblado de las subunidades ribosomales

(nucléolo).
Incorporación del ARNr 5 S.
Formación de las subunidades ribosomales-
 Genes de rARNs

A diferencia de la gran mayoría de los genes que se

encuentran representados una vez por genoma haploide,
en humanos hay aprox. 200 copias de genes de rRNA
por genoma haploide.

Estas copias se encuentran agrupadas en regiones de

cinco cromosomas
Genes de rARNs

organizador
nucleolar

Comosoma
acrocéntrico
 El nucleolo

El nucléolo es la expresión morfológica de la transcripción del ARN

prerribosómico por los organizadores nucleolares y su maduración
posterior.
El ensamblaje de los ribosomas ocurre en el nucleolo

Componentes de tinción pálida: ADN del organizador nucleolar

Componente fibrilar: transcriptos 45S
Componente granular: zona ensamblaje de ribosomas
Posibles puntos de regulación de la expresión génica
Exportación del mARN
maduro al citoplasma

Reconocimiento del mARN por factores

de iniciación de la traducción
 Localización del mARN

Ejemplo:

En neuronas, localización
del mARN de β-actina en el
cono de crecimiento axonal

Regulación espacial de la expresión génica mediante la traducción localizada

Posibles puntos de regulación de la expresión génica
Iniciación en eucariotas
Regulación del inicio de la traducción
Elongación
Factores de elongación

EF-1
EF-2
Terminación

Factores de
terminación
 Control traduccional mediado por proteínas que se unen
al mRNA

La proteína La proteína
unida impide la unida impide la
traducción del degradación del
mRNA mRNA

Aconitasa: Fe2+ binding protein

Ferritina (proteína almacenadora de iones Fe2+) y
transferrina (receptor de iones Fe2+)
Posibles puntos de regulación de la expresión génica
 Los mARN eucariotas poseen diferentes estabilidades

Inestables (vidas medias de pocos minutos)

mARN de c-myc ~15 min
Proteínas de control de cíclo celular,
Proto-oncogenes, citokinas mARN de ciclina D1 ~30 min

mARN de β-globina 10-20hs

Muy estables (vidas medias de varias horas)
Proteínas abundantes de mARN de colágeno α1 (I) >24 hs
importancia funcional

La degradación del mARN está mediada por diversas endo- y exo-ARNasas

codificadas en el genoma
 Elementos que regulan la estabilidad del mARN

• Cap en extremo 5’

• La union de proteínas de union a ARN (RBPs) a los elementos ricos en AU (AREs)

situados en los 3’-UTR regulan la estabilidad de los mARNs

• PABP unida a cola de poli-A

Degradación del ARNm por secuencias de terminación prematura
NMD (Nonsense-mediated decay)

5’ AAAAAAAA Estabilidad normal

ORF
stop 3’-UTR

5’ AAAAAAAA
ORF
stop 3’-UTR
NMD
stop
prematuro

• Codones stop prematuros inducen una degradación rápida del mARN

• Es un mecanismo de ‘control de calidad’ del mARN

Degradación del ARNm por secuencias de terminación prematura
NMD (Nonsense-mediated decay)

EJC : Exon junction complex

 microARNs
Biogénesis: Transcripción y procesamiento de los miARNs
 Reguladores post-transcripcionales de la expresión génica

∼ 21 nucleotides

- Inhibición de la traducción
AGO AGO - Degradación del mARN

AAAAA

RISC
(RNA induced
silencing complex) nt 2-8
‘SEED’ 5’
3’
 microARNs
Ejemplo: miR-9 regula los niveles de REST durante el desarrollo neuronal

REST es una proteína represora que suprime la expresión de genes neuronales

Posibles puntos de regulación de la expresión génica
Una vez sintetizada, la actividad de una proteína puede
ser regulada de distintas maneras....
 Regulación de la estabilidad proteica:
Sistema ubiquitina-proteasoma

La unión de varias
“ubiquitinas”

ubiquitin-ligasas

ubiquitina
 El proteasoma

19 S
20 S

19 S

El proteasoma es un complejo proteico con actividades de

proteasa ATP-dependiente, muy abundante en las células
Niveles de regulación de la expresión génica

SEMINARIO 3

SEMINARIO 4