Protocolo: Diseño experimental para la obtención de nanopartículas de oro a partir

de té verde

Basado en: Green tea extract mediated biogenic synthesis of gold nanoparticles with
potent anti-proliferative effect against PC-3 human prostate cancer cells

Fecha: 30 de Marzo 2022

1. Objetivo: Proponer un diseño experimental para la obtención de GT-AuNPs a
partir de las hojas de té verde.

2. Metodología:
2.1. Materiales

HAuCl4⋅3H2O Univesidad EIA

Bicarbonato de Sodio Universidad EIA
Extracto de Carnelia Sinensis Té verde (Hojas) Central Mayorista
Agua destilada Universidad EIA

2.2. Diseño
HAuCl4⋅3H2O Bicarbonato de Sodio Extracto Agua ultrapura
1 5 mL - 10 mM 10 mM - 20 mL 25 mL 200 mL
2 5 mL - 10 mM 10 mM – 20 mL 25 mL 200 mL
3 5 mL - 10 mM 10 mM – 20 mμL 25 mL 200 mL

3. Procedimiento
3.1. Preparación del extracto:
• Hervir 200 ml de agua ultrapura con 1,5 g de hojas de Camellia sinensis (té
verde) durante 20 minutos.
• Antes de utilizar el extracto enfriar y filtrar.
• Luego, diluir el extracto de té verde resultante (1:50) y mezclar adecuadamente
para asegurar la homogeneidad en un matraz volumétrico.

3.2. Síntesis de GT-AuNPs

• Verter 25 mL de extracto de té verde en 5 mL de una solución acuosa de
HAuCl4 10 mM a temperatura ambiente.
• Mezclar por agitación e incubar durante 15 min a 40 °C.
• Mezclar una solución saturada de bicarbonato de sodio 10 mM (20 mL) y dejar
reaccionar con la mezcla para ajustar el pH de la solución.

3.3. Purificar
Las NP obtenidas se lavaron de otros componentes por centrifugación durante 15 min
a 10.000 rpm y t = 4°C. Se tomó el sobrenadante cuidadosamente por micropipeta, y el
precipitado con nanopartículas se resuspendió en 1 mL de agua bidestilada
3.4. Caracterizar
• Analizar por difracción de rayos X la estructura cristalina de las partículas
previamente sintetizadas.
• Distinguir por dispersión dinámica de luz (DLS) para determinar las poblaciones
y diámetro de estas partículas.
• Examinar la escala nanométrica particular producida en la superficie de las
partículas, por medio de la técnica de banda de resonancia de plasmones
superficiales (SPR) para verificar formación de GT-AuNPs.
• Analizar por análisis de microscopía electrónica de barrido y rayos X de energía
dispersiva (SEM-EDS) la forma de la superficie y la composición del elemento de
GT-AuNP.
• Observar por medio de microscopía electrónica de transmisión (TEM) las
imágenes con diferentes niveles de aumento de las nanopartículas de Au.