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Septiembre de 2013
1. INTRODUCCIÓN 3
2. BIOSEGURIDAD 4
2.1 GESTIÓN DE LA BIOSEGURIDAD 4
2.2 CAPACITACIÓN INICIAL 4
2.3 UBICACIÓN, DISTRIBUCIÓN DE AMBIENTES Y ACCESO AL LABORATORIO 5
2.4 VESTUARIO Y PROTECCIÓN PERSONAL 6
2.5 PROCEDIMIENTOS DE RUTINA 8
2.6 PROCEDIMIENTOS EN CASO DE EMERGENCIAS 9
2.7 MANIPULACIÓN Y DESECHO DE MATERIALES 10
3. USO Y MANEJO DEL EQUIPO DE LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA 11
3.1 DISPOSITIVOS DE PIPETEO 11
3.2 MICROPIPETAS 12
3.3 CENTRIFUGADORA (FIGURA 4) 12
3.4 AGITADORES MAGNÉTICOS (FIGURA 5) 14
3.5 REFRIGERADORAS (FIGURA 6) 14
3.6 AUTOCLAVE 15
3.7 BALANZA ANALÍTICA 15
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1. Introducción
Este manual se elabora para reducir al mínimo los efectos adversos de errores
humanos que puedan poner en riesgo la integridad física de los usuarios del
laboratorio y el adecuado funcionamiento del equipo.
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2. BIOSEGURIDAD
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2.3 Ubicación, distribución de ambientes y acceso al laboratorio
1. Oficina: Primer espacio. Acceso libre. Su función es facilitar todos los procesos
administrativos de las investigaciones que se llevan a cabo en el laboratorio.
1. El ingreso a las zonas de trabajo del laboratorio debe estar autorizado por el
coordinador del laboratorio.
2. Las puertas que separan las áreas del laboratorio se mantendrán cerradas.
3. No se permite la permanencia de estudiantes en el área de oficina durante las
prácticas de laboratorio.
4. No se permite la entrada de niños ni de mujeres embarazadas en las áreas de
preparación de medios, siembra y crecimiento.
5. No se permite el ingreso de animales al laboratorio.
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2.3.3 Normas de uso de las áreas del laboratorio
El vestuario apropiado para trabajar en el laboratorio incluye una bata de tela gruesa
que aisle la ropa y la proteja de salpicaduras y manchas. Su función principal es evitar
que los contaminantes que se encuentran en la ropa del investigador/estudiante se
introduzcan en los cultivos y muestras.
Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que puedan
implicar contacto directo o accidental con materiales potencialmente infecciosos,
tóxicos o peligrosos.
Las manos pueden contaminarse cuando se trabaja en el laboratorio. También son
vulnerables a las heridas producidas por objetos punzantes o cortantes. Los guantes
desechables de látex, vinilo o nitrilo de tipo quirúrgico, aprobados para uso
microbiológico, son los más extendidos para el trabajo general de laboratorio y para
manipular agentes infecciosos, incluyendo muestras de sangre y otros líquidos
corporales que se utilizan para hacer estudios de ADN.
Después de manipular material infeccioso o trabajar en una cámara de flujo laminar, y
antes de abandonar el laboratorio, es preciso retirar los guantes y lavarse las manos
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concienzudamente. Los guantes desechables usados deben eliminarse junto con los
residuos de laboratorio.
Para trabajar cultivo de tejidos y marcadores moleculares se utilizan guantes de látex
o nitrilo. Los guantes de nitrilo tienen la ventaja, respecto a los guantes de látex, de
que con ellos se tiene una menor transpiración. Para trabajar con materiales
potencialmente peligrosos se trabaja con doble guante o guantes de látex gruesos y
largos.
Se han notificado casos de reacciones alérgicas como dermatitis e hipersensibilidad
inmediata después de usar guantes de látex, particularmente los que llevan talco, por
lo que deberá estar conciente de esto al utilizarlos por primera vez. Los guantes no
deben usarse fuera de las áreas de trabajo del laboratorio.
Para manipular recipientes calientes se utilizan guantes de lana especiales para aislar
el calor. La figura 1 muestra los diferentes tipos de guantes adecuados para el trabajo
en el laboratorio.
Figura 1. Tipos de guantes para protección en laboratorio. De izquierda a derecha: guantes desechables
de nitrilo, guantes reusables de lana, guantes desechables de látex delgados y guantes
de látex gruesos reusables.
Para prevenir lesiones en los ojos se usan lentes de seguridad, viseras (figura 2) u
otros dispositivos de protección. Utilícelos para evitar daños por salpicaduras,
impactos y fuentes de radiación ultravioleta artificial (durante el uso del
transiluminador).
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2.4.1 Normas respecto al vestuario y protección personal
Los procedimientos de rutina son todos los que se llevan a cabo regularmente y que
incluyen manejo de reactivos químicos y equipo del laboratorio.
El personal que trabaja en los laboratorios está expuesto a los peligros que implican
las sustancias químicas. Es importante que el personal tenga los debidos
conocimientos acerca de los efectos tóxicos de las sustancias químicas que utiliza, las
vías de exposición y los peligros que pueden estar asociados a su manipulación y
almacenamiento.
Los fabricantes y/o proveedores de sustancias químicas facilitan hojas informativas
con datos sobre la seguridad de los materiales y otras informaciones sobre los
peligros químicos. Esas responsabilidd de cada investigador leer la información sobre
los productos que va a utilizar.
La exposición a sustancias químicas peligrosas puede darse por las siguientes vías:
Inhalación.
Contacto.
Ingestión.
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2.5.1 Normas respecto a procedimientos habituales en el laboratorio
2.6.1 Derrames
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2.6.2 Incendios
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3. USO Y MANEJO DEL EQUIPO DE LABORATORIO DE
BIOTECNOLOGÍA
A continuación se describen las indicaciones que deben seguirse para hacer uso del
equipo existente en el laboratorio.
Las pipetas que tengan los extremos de succión agrietados o astillados deben
desecharse, ya que dañan las juntas herméticas por las que se insertan en los
dispositivos de pipeteo y crean un peligro.
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Figura 3. Dispositivos de pipeteo.
3.2 Micropipetas
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Los cestillos y los soportes se deben emparejar por el peso y equilibrar
correctamente con los tubos en su sitio.
El espacio que debe dejarse entre el nivel del líquido y el borde de cada tubo de
centrifugación debe ser especificado en las instrucciones del fabricante.
Para equilibrar los cestillos vacíos se empleará agua destilada.
El interior de la cubeta de la centrifugadora se inspeccionará a diario para
observar si existen manchas o suciedad en el rotor. Si éstas son manifiestas, se
deben examinar de nuevo los protocolos de centrifugación.
Los rotores y los cestillos de la centrifugadora deben observarse diariamente
para detectar signos de corrosión y grietas.
Los cestillos, los rotores y la cubeta de la centrifugadora deben limpiarse
después de cada uso con un detergente suave, diluido en una relación 1:10 en
agua y un cepillo de textura suave no metálico. Para la limpieza de los rotores
no utilizar detergentes alcalinos o soluciones limpiadoras que pudieran
remover la película protectora. Utilizar cepillos plásticos en las actividades de
limpieza de los rotores. Los cepillos metálicos rayan el recubrimiento
protector, generando una fuente futura de corrosión que acorta la vida útil del
rotor. Lavar el rotor inmediatamente en el caso de que se presenten derrames
de sustancias corrosivas. Secar el rotor con aire seco, siempre que haya sido
limpiado y enjuagado con agua.
Después del uso, los cestillos se depositarán en posición invertida a fin de
vaciar el líquido utilizado para equilibrar.
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3.4 Agitadores magnéticos (figura 5)
Durante el funcionamiento de los agitadores se produce un aumento de la
presión dentro del recipiente, por lo que pueden desprenderse entre la tapa y
el recipiente aerosoles.
Gradúe la temperatura y la velocidad de agitación acorde a su necesidad.
No se aleje de la estufa por mucho tiempo, vigile que el líquido no se derrame.
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3.6 Autoclave
El manejo y el mantenimiento ordinario son responsabilidad de personas
capacitadas (coordinador del laboratorio, auxiliar de investigación o
investigadores capacitados).
El vapor de agua estará saturado de sustancias químicas (por ejemplo,
inhibidores de la corrosión) que podrían contaminar los objetos que se están
esterilizando.
Todo el material debe colocarse en recipientes que permitan una fácil
evacuación del aire y una buena penetración del calor; la cámara no debe
sobrecargarse, de modo que el vapor alcance por igual a toda la carga.
Después de usar la autoclave y antes de abrirla, asegúrese de que la presión
haya bajado.
Cuando se introduzcan líquidos en la autoclave, la evacuación debe ser lenta,
pues al sacarlos pueden hervir debido al sobrecalentamiento.
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