M.Sc. Omar D.

Pairazamán Quiroz
Departamento Académico de Ciencias Biológicas
2021
 Thomas D. Brock, 1926 (93 años)
“Las bacterias pueden crecer ... a cualquier temperatura a la que haya agua
líquida, incluso en piscinas que están por encima del punto de ebullición”.

Universidad Nacional de Cajamarca Fisiología y Genética Microbiana M.Sc. Omar D. Pairazamán Quiroz
¿Los microorganismos termófilos fueron los primeros en aparecer sobre la tierra?
 LIMITACIONES BIOQUÍMICAS DE LA VIDA A ELEVADAS TEMPERATURAS

ATP
120°C

150°C
AUMENTO DE TEMPERATURA

80°C

45°C

10°C
 LÍMITES SUPERIORES DE TEMPERATURA PARA EL METABOLISMO ENERGÉTICO I

Universidad Nacional de Cajamarca Fisiología y Genética Microbiana M.Sc. Omar D. Pairazamán Quiroz
 REGISTRO DE MICROORGANISMOS TERMÓFILOS E HIPERTERMÓFILOS I

120°C

Hipertermófilos
AUMENTO DE TEMPERATURA

80°C

Termófilos

45°C

Termotolerantes
Mesófilos

10°C

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 AUMENTO DE TEMPERATURA

45°C

10°C
80°C
120°C

Alteración estructural

ADN
Despurinación y
despirimidación

Inestabilidad del C2
ARN

Desnaturalización
PROTEÍNAS
EFECTO DE LAS ALTAS TEMPERATURAS EN LOS SERES VIVOS

Inestasbilidad
MEMBRANA
 ADAPTACIONES DE PROCARIOTAS A ELEVADAS TEMPERATURAS

ADN PROTEÍNAS
RIBOSOMA

ARN

Modificado de Gerday and Glansdorff. 2007. Physiology and Biochemistry of Extremophiles y Brock, 2016. Biología de los Microorganismos.

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 ADAPTACIÓN DE LA MEMBRANA I
Adaptaciones de procariotas a elevadas temperaturas
Brock, 2016. 14ª Edición

FIGURA. Principales lípidos de arqueas y la estructura de las membranas citoplasmáticas de arqueas. (a, b) observe que el
hidrocarburo del lípido esta unido al glicerol por un enlace éter en ambos casos. La cadena hidrocarbonada en (a) es el
fitanil (C20) y en (b), fitanil (C40), (C) el principal lípido de Thaumarchaeota es el crenarqueol, un lípido conteniendo anillos Gerday and Glansdorff. 2007. Physiology and Biochemistry of Extremophiles
de 5 y 6 carbonos. (d, e) estructura de membrana en arqueas puede se en bicapa o monocapa (o mezcla de ambos).

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 DNA

SOLO EN
HIPERTERMÓFILOS
▪ Menos concentración de pares
de GC en el ADN de ADN
hipertermófilos PROTEÍNAS
RIBOSOMA
▪ ADN girasa reversa, actúa
estabilizando el ADN,
mediante el
superenrrollamiento positivo
del ADN, en microorganismos
que crecen arriba de 80°C ARN
▪ Proteínas básicas de cierre que
estabilizan el ADN, genera
estructuras parecidas a los
nucleosomas

▪ Impide daños Qx en el ADN

▪ Alta concentración de solutos ▪ 2,3 – difosfoglicerato cíclico de K (despurinación y despirimidación)
celulares (iones) Iones de
potasio, Mg y Compuestos ▪ Dimioinositol – fosfato de potasio ▪ Protegen contra el estrés
orgánicos compatibles osmótico

Modificado de Gerday and Glansdorff. 2007. Physiology and Biochemistry of Extremophiles y Brock, 2016. Biología de los Microorganismos.

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 RIBOSOMAS

ADN
PROTEÍNAS
RIBOSOMA
• 15% Más Concentración de
GC, en el ARNr que en el resto
de organismos que no son
hipertermófilos
ARN

▪ Poliaminas: putresina, espermidina ▪ Estabilizan a los ribosomas ý

ácidos nucleicos a altas
temperaturas

Modificado de Gerday and Glansdorff. 2007. Physiology and Biochemistry of Extremophiles y Brock, 2016. Biología de los Microorganismos.

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 RNA

ADN PROTEÍNAS
RIBOSOMA

ARN • Elevada cc., de GC

• Protección con sales de K+ y
poliamidas
• Uso de chaperonas de ARNs
pequeños, durante la
maduración (Chapernas)

Modificado de Gerday and Glansdorff. 2007. Physiology and Biochemistry of Extremophiles y Brock, 2016. Biología de los Microorganismos.

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 PROTEÍNAS

Proteína termotolerantes no son diferentes de las

termolábiles

ADN PROTEÍNAS
RIBOSOMA
Proteína plegada incorrectamente

ARN
“Chaperonas”

Proteína plegada correctamente

Modificado de Gerday and Glansdorff. 2007. Physiology and Biochemistry of Extremophiles y Brock, 2016. Biología de los Microorganismos.

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 PROTEÍNAS DE CHOQUE TÉRMICO (Chaperonas)

Normal RpoH
DnaK

RpoH
DnaK

Calor

DnaK Impide la agregación de proteínas recién

RpoH
sintetizadas y estabiliza los plegados
E. coli Transcripción GroEL Cataliza el plegamiento correcto de
proteínas que habrían sido plegadas de
GroES manera incorrecta
 BACTERIAS HIPERTERMÓFILAS

Thermotogae (Toga = vaina)

Bacilos gramnegativos
(66°C – 80°C)
Fuentes termales terrestres y chimeneas submarinas

Thermotoga
• Muestra alta similitud con
genes de Archaea
hipertermófilas
• Aerobia y anaerobia

Thermodesulfobacterium
• Lípidos de membrana con
enlace éter
• C17
• Combina lípidos de Archaea y
Bacteria
• Anaerobia estricta

• ¿Qué tienen de especial el genoma de Thermotoga y los lípidos de

Thermodesulfobacterium?

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 BACTERIAS HIPERTERMÓFILAS

Aquificae (“Productor De Agua”---oxidación del H2—H2O)

Bacilos gramnegativos, forma agregados
(80 - 95°C)
Fuentes termales terrestres, chimeneas submarinas, pozos sulfurosos

Aquiflex (hasta 95°C)

• Genoma pequeño (1/3 de E.
coli).
• Microaerofílico
• La más termófila de todas las
bacterias conocidas.
• Autótrofo y quimiolitótrofo
estricto.

Thermocrinis (hasta 80°C)

• Uno de los primeros

miroorganismos termófilos
estudiados.
• Descubierto en Yellowstone,
por T. Brock.
• Serpentinas de color rosado

• ¿Cuál es el significado evolutivo de que los organismos del linaje Aquiflex sean
tanto hipertermófilos como quimiolitótrofos del H2?

Universidad Nacional de Cajamarca Fisiología y Genética Microbiana M.Sc. Omar D. Pairazamán Quiroz
 BACTERIAS HIPERTERMÓFILAS

Deinococcus – Thermus
Bacilos gramnegativos, forma agregados
(80 - 95°C)
Fuentes termales terrestres, chimeneas submarinas, pozos sulfurosos

Deinococcus
• Son grampositivos que se
tiñen de gramnegativos.
• Carecen de lípido A
• Cromosoma en forma de
toroide (anillos apilados)

Thermus (60 – 80°C)

• Se extrae la Taq Polimerasa

• Desarrolla una teoría de como Deinococcus radiodurans logró desarrollar la

capacidad de autoreparación frente al daño por radiación

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 II. Zonas geotermales del planeta, del Perú y de Cajamarca II
ZONAS GEOTERMALES ACTIVAS EN EL MUNDO

Haukadalur, Vesturland, Italia

Reserva natural
Islandia Kronotski, Península de
Kamchatka, Rusia

Japón
Parque Nacional de
Yellowstone, USA

Geiser de Candarave,
Perú

Geiser del Taitio, Chile

Isla Decepción,
Antartida
Zona volcánica Taupo,
Waikato, Nueva Zelanda

EIT UNC M.SC. Omar D. Pairazamán Quiroz

 II. Zonas geotermales del planeta, del Perú y de Cajamarca II
ZONAS GEOTERMALES ACTIVAS EN EL PERÚ

EIT UNC M.SC. Omar D. Pairazamán Quiroz

 III. Estudios de microbiota termófila en el Perú III
ZONAS GEOTERMALES ACTIVAS EN EL PERÚ

EIT UNC M.SC. Omar D. Pairazamán Quiroz

 IV. Potencial biotecnológico de termófilos en Cajamarca IV
ZONAS GEOTERMALES ACTIVAS EN CAJAMARCA

EIT UNC M.SC. Omar D. Pairazamán Quiroz

 Departamento de Cajamarca
IV

Cutervo (Piñipata)

San Ignacio (Guaro montero )

Chota
(El Naranjo, Ashdín chillapampa, Jaén (aguas termales del distrito
Tapón, Manshate, la Oroya, Opa) de granadillas)

Hualgayoc (san José del Cumbe,

Santa Cruz Cumbe Chontapampa pinipato)
(Aguas termales chancay baños)

Celendín
(La villa y LLanguat)
San Miguel
(Aguas termales de Quilcate)
San Marcos
Aguas termales baños calientes
Cajamarca El azufre (volcán)
(baños del Inca, Yumagual, Jesús)
 M.Sc. Omar D. Pairazamán Quiroz
Departamento Académico de Ciencias Biológicas
2021
23
 Contenido

1. Movimiento en procariotas
2.1. Mediado por flagelo bacterianos
▪ Estructura del flagelo bacteriano
▪ Síntesis de flagelos bacterianos
▪ Mecanismo de quimiotaxisis
1.2. Flagelos arqueanos
1.3. Deslizamiento en superficies sólidas
1.4. Deslizamiento por sacudidas o contracciones
 Movimiento en procariotas
Flagelos en bacteria

Microbial appendages. (a) Flagella of Salmonella typhimurium. (b) Pili of Escherichia coli. (Source: Pili
Image courtesy Indigo Instruments. Visit http://www.indigo.com.) Reprint permission is granted with this
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 Movimiento en procariotas
Tinción de flagelo

Colorante “A” Procedimiento:

Fucsina básica 0.6g - Colocar una gota de suspensión del
Etanol 95% 50 mL germen móvil en una lámina
Dejar en reposo por 24 horas a T° ambiental portaobjeto inclinada, completamente
limpia y desengrasada.
Colorante “B” - Fijar a temperatura ambiente
NaCl 0.37g - Añadir el colorante de Leifson, que
Ácido tánico 0.73 mL cubra totalmente la lámina portaobjeto
Agua destilada 50 mL (aprox. 2 – 2.5 mL), durante 5, 10, 15,
Mezclar volúmenes iguales de solución A y B 20 minutos respectivamente.
Ajustar a pH 5 con NaOH 1N - Lavar con agua destilada, secar T°
Se obtienen mejores resultados cuando se ambiente y observar a inmersión
guardan la mezcla en refrigeración (5°C) por 2 (100X)
ó 3 días
 Movimiento en procariotas
Tipos de flagelo

Pseudomonas gracilis Spirillum undula

Pseudomonas pyocyanea Bacillus subtilis

Pseudomonas macroselmis Thiospirillum rufum Bacillus oedematis

 Movimiento en procariotas
Velocidad celular y orientación

Movimiento en procariotas con flagelación perítrica y polar. (a)

Peritrica: el movimiento hacia delante es producido por la rotacion
de todos los flagelos en sentido antihorario en penacho. La rotacion
en sentido horario hace que la celula de un vuelco y despues, la
vuelta a la rotacion en sentido antihorario dirige a la celula hacia
una nueva direccion. (b) Polar: las celulas cambian de
direccion invirtiendo la rotacion flagelar (es decir, tirando en lugar
de empujar) o, en los flagelos unidireccionales, parando
periodicamente para reorientarse y despues moviendose hacia
delante por rotacion en sentido horario de los flagelos.
 Movimiento en procariotas
Estructura del flagelo
El flagelo está compuesto por 3 partes: Mecanismo de acción del motor

- Filamento

- Gancho

- Motor

- FPM
- Segundo sistema de
Cuerpo basal emergencia que transfiere
Estator electrones directamente al
motor
 Movimiento en procariotas
Genética del flagelo CRP - AMPc
Operon flhD
1 er
14 operones Niveles 2 do 1er Nivel P O flhC flhD
3 er
Genoma de FlhC FlhD
E. coli
S. tiphi

2do Nivel P O a fliA

Proteínas estructurales del A
corpúsculo basal
Proteínas activadores B
transcripcionales 3er nivel

3er Nivel
Operon fliC Operon motA Operon tar
P O P O P O

Proteínas flagelinas Proteínas del motor Receptores transmembrana

Proteínas de la transducción
de la quimiotaxis
 Movimiento en procariotas
Ensamblaje del flagelo

1. Organización compleja entre motor, gancho y filamento

2. ¿Cómo se transportan los componentes del citoplasma a su respectivo lugar?

Biosíntesis del flagelo. La síntesis empieza con el ensamblaje de los anillos MS y C en la membrana citoplasmática,
seguido de la formación de los otros anillos, el gancho y la proteína cap. A continuación las moléculas de flagelina
atraviesan el gancho para formar el filamento y se colocan en su posición guiadas por las proteínas cap.
 Movimiento en procariotas
¿Quién es más rápido el guepardo o las bacterias?

VS
Y ¿para que sirve el movimiento?
Movimiento en procariotas
Quimiotaxis

Respuesta a la señal
MCP
Proteínas quinasas
Atrayentes y repelentes

Control de la rotación flagelar

Che W, Che A, Che Y, Che Z
Motor flagelar

Adaptación

CheB, MCPmetiladas
 Atrayentes
2. ADAPTACIÓN

Metil MCPs Insensibles a atrayentes

1. CONTROL DE
CheR
CheW LA ROTACIÓN DEL Sensibles a repelentes
FLAGELO
CheA CheA-P
Estator
CheB-P

CheY CheY-P
Desmetilación
CheZ

Repelentes
2. ADAPTACIÓN

Metil MCPs
1. CONTROL DE
CheR
CheW LA ROTACIÓN DEL
FLAGELO
CheA CheA-P
Estator Insensibles a repelentes
CheB-P Sensibles a atrayentes
CheY CheY-P
Desmetilación
CheZ
Movimiento en procariotas
Quimiotaxis
 Movimiento en procariotas
Flagelos en Archaea

Modelo simplificado del sistema de transducción de

señales de quimiotaxis y el archaellum en euryarchaea. Los
MCP se organizan en matrices quimiosensoriales junto con
CheW y CheA, que es necesario para la integración y
amplificación de la señal. La autofosforilación de CheA da
como resultado la fosforilación de CheY. CheY fosforilado
se une a CheF, que está presente en la base del motor del
archaellum. CheF requiere ArlCDE que forman el complejo
de interruptores, para unirse al motor
archaellum. Posiblemente ArlCDE no solo se une a la
proteína motora del archaellum ArlH, sino que también
interactúa con el casquete polar, para asegurar la
localización polar. Las proteínas individuales de la capa S
forman un cristal 2D. Las proteínas accesorias de
quimiotaxis se excluyen por simplicidad. Ambiente
extracelular azul. Amarillo, citoplasma. M, membrana. MCP,
proteína de quimiotaxis que acepta metilo. Puntos rojos,

https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/mmi.14527
 Movimiento en procariotas
Movimiento en medio de cultivo (swarmers=dispersión)

Development of the P. mirabilis swarming colony. Multicellular swarming behavior and swarming colony formation
were observed by inoculating cells at the center of an agar plate and incubating them at 37 ◦C. The swarming colony was
then photographed at 6 (upper), 24 (middle), and 48 (bottom) hours postinoculation. Consolidation zones are seen as the
dark areas separating lighter regions of swarming motility. (Source: From Belas, R. ASM News 58:115–22, 1992.)
 Movimiento en procariotas
Movimiento en medio de cultivo (swarmers=dispersión)
Medio acuoso Superficie sólida húmeda

Sistema de transducción
Estructuras flagelares

quimiotáctico igual
Vibrio parahaemoliticus Vibrio parahaemoliticus

diferentes
Célula nadadora Célula dispersiva
(flagelo polar envainado) (flagelo polar envainado +
flagelos laterales)

Sistema de natación Fla Sistema de natación Laf

¿Como ocurre esto? ¿Objetivo?

1. El flagelo polar actúa como un sensor táctil. La resistencia a la rotación Colonizar rápidamente ese
del flagelo provoca una transducción intracelular, desbloqueando la ambiente
transcripción de los operones del sistema Laf (silenciosos).
2. Bajas concentraciones de hierro
Movimiento en procariotas
Motilidad en espiroquetas
Leptospira biflexa serovar patoc. (a) Dark-field micrograph illustrating the hookshaped ends
and helical cell morphology. Cell length is 10 μm. (b) Transmission electron micrograph of one
cell end. Note the protoplasmic cell cylinder (PC) and periplasmic flagellum (PF). (c) Scanning
electron micrograph illustrating the hook-shaped ends and right-handed helical PC. Cell length
is 19 μm. (Source: From S. F. Goldstein and N. W. Charon, Cell Motility Cytoskel. 9:101–110,
1988.)

Possible conformations and gyrations of periplasmic flagella and protoplasmic cylinder of

Leptospira. Motion is toward the right of the figure (open arrow). The anterior spiral end is left-
handed. An observer behind the cell (left side of figure) sees the spiral and hook-shaped ends
gyrate CCW (thin arrows) because of the rotation of the periplasmic flagella in that direction,
while the protoplasmic cylinder rotates CW (wide filled arrows). (Source: From Goldstein, S. F.
and N. W. Charon, Cell Motility Cytoskel. 9:101–110, 1988.)
Movimiento en procariotas
Deslizamiento

Bacterias deslizantes. (a, b) Las células de la gran

cianobacteria Oscillatoria miden unos 35 μm de ancho. (b)
Filamentos de Oscillatoria deslizándose sobre una superficie de
agar. (c) Masas de células de la bacteria Flavobacterium
johnsoniae alejándose por deslizamiento desde el centro de la
colonia (la colonia tiene unos 2,7 mm de ancho). (d) Cepa
mutante de F. johnsoniae en la que se ve la morfología típica de
una colonia no deslizante (las colonias tienen un diámetro de
entre 0,7 y 1 mm). Véase también la Figura 2.56.
 Movimiento en procariotas
Mecanismos de deslizamiento