Homeostasis celular – Dra.
Cremer- 2017
Homeostasis del pH celular
Los procesos que participan del
balance ácido-base involucran todos los
mecanismos que mantienen los valores de los
iones hidrógeno de los líquidos corporales,
LEC y LIC, dentro de los límites aceptables
para la vida. Si bien el organismo cuenta con
sistemas de control y regulación sistémicos que
intervienen en este balance ácido-base del
LEC, como los amortiguadores sanguíneos, la
ventilación y la regulación renal, el pH del
LEC puede perturbarse por distintas razones
fisiológicas y patológicas. Las modificaciones
en la carga de protones del LEC y también los
productos de la actividad propia de cada célula
pueden también perturbar el pHintracelular
(pHi) que es contrarrestado por mecanismos
homeostáticos celulares. El pH intracelular es
un reflejo del pH extracelular y viceversa.
La homeostasis del pHi es un aspecto
crucial del LIC, independientemente del tipo
de célula. Prácticamente todos los procesos
celulares (metabolismo, crecimiento,
contractilidad, corrientes iónicas a través de la
membrana) pueden ser perturbados por
cambios en la [H+], ya que afecta el estado de
ionización de todos los ácidos y bases débiles.
Químicamente los H+ libres son
pequeños y altamente reactivos, lo que les
permite unirse más fuertemente que el Na+ o el
K+ a las moléculas cargadas negativamente,
como los residuos de aminoácidos de
proteínas, ello por ejemplo reduce de la
eficiencia de los mecanismos contráctiles
mediados por proteínas ante caída del pHi, un
incremento rápido en el pHi encamina el
pasaje de fase Go/Gl celular a fase S
modificando su crecimiento ó división celular.
El pHi tiene efecto sobre proteínas que forman
los canales iónicos y se conductividad, en
particular los canales de K+ donde la
acidificación del LIC bloquea la conductancia
en las células excitables; también tiene efecto
sobre el canal rectificador de potasio Kir1.1
(ROMK) que se cierra en respuesta a pHi<7,0,
aunque existen otros canales de K+ en los que
la acidificación del LIC en cambio los abre,
como los TREK-1, con la subsecuente salida
de potasio e hiperpolarización, como la que
ocurre durante la isquemia cerebral ó cardíaca.
Lo mismo ocurre sobre uniones gap que
modifican su conductancia ante cambios en el
pHi. El pHi afecta la actividad enzimática,
variable crítica para determinar la coordinación
bioquímica celular; cambios del orden de 0,2
del pHi decrece la tasa metabólica y altera la
trasncripción génica, la síntesis de ADN y
proteínas determinando el cese de las
funciones celulares.
Origen de los protones del LIC y pHi
La gran mayoría de las células tiene un
valor de pHi entre 6,9-7,2 debido a la
producción de ácidos, los bajos niveles de
HCO3− y los niveles pCO2 de alrededor de 45
mmHg. Además, cada compartimiento
intracellular presenta un pH diferencial acorde
a su producción de carga ácida.
Fig. 1 Valores de pH en estructuras subcelulares, el valor de la
mitocondria es el correspondiente a la matriz mitocondrial.
El metabolismo celular es la principal
fuente de protones y mantenerlos en sus límites
fisiológicos implica que las tasas de generación
y eliminación deben ser iguales. La carga ácida
celular se genera por producción de ácidos
volátiles y de ácidos fijos.
El CO2, producto final de la oxidación
de glúcidos, lípidos y aminoácidos, que se lo
considera ácido en virtud de reaccionar con el
agua para formar ácido carbónico, es un "ácido
volátil" debido a que es un gas y puede ser
eliminado por los pulmones.
Los “ácidos fijos” son productos de la
oxidación parcial de glúcidos, lípidos y
aminoácidos que da lugar a la formación de
ácidos orgánicos (lactato, piruvato,
acetoacetato, -hidroxibutirato) siendo todos
ellos ácidos débiles capaces de liberar H+ ó
ácido sulfúrico (H2SO4) y ácido fosfórico
(H3PO4) provenientes principalmente de

aminoácidos azufrados y fosfoproteínas, ácidos
nucleicos ó fosfolípidos.
En condiciones basales, la producción
metabólica de ácidos es relativamente
constante para cada tipo celular; además a
través de la membrana celular los H+ y ácidos
débiles como el NH4+ tienden a entrar a la
célula siguiendo su gradiente electroquímico,
además se produce la pérdida de bases débiles
como el HCO3-, el lactato o el acetato.
La carga ácida celular lleva a pensar en
un pHi cercano al 6,4; valor potencialmente
citotóxico y lejos del cuantificado en la
mayoría de las células de 7,2. Este hecho
muestra que existen mecanismos alcalinizantes
que remueven constantemente ácidos desde el
citosol que contrarrestan tanto la producción de
ácidos como su difusión desde el LEC.
Mecanismos de regulación del pHi
La concentración de H+ intracelular es
directamente proporcional de la diferencia
entre la actividad de los cargadores de ácido y
expulsores de ácidos e inversamente
proporcional al poder amortiguador total
celular de sus propios buffers intracelulares
citosólicos.
Sistemas amortiguadores del LIC
El poder de amortiguación total de una
célula es la suma de los poderes de
amortiguación de todos los sistemas buffers
individuales citosólicos. Acorde a la definición
de Brønsted’s los sistemas buffers están
conformados por ácidos/bases débiles, cuya
disociación es parcial, con sus
correspondientes bases/ácidos conjugados.
Para interpretar adecuadamente estos
procesos de amortiguación hay que recordar
varios principios físico-químicos que explican
los procesos básicos involucrados en los
sistemas de reacciones químicas. Cuando tiene
lugar una reacción química reversible se
observa que llegado un determinado momento
las cantidades netas de reactivos y productos se
mantienen invariables, este hecho no significa
que la reacción cese, sino que la velocidad a la
que se forman los productos se iguala a la
velocidad a la que se regeneran los reactivos,
es decir, la reacción está en equilibrio químico.
Al leer la reacción de izquierda a derecha
(sentido directo) los reactivos en A reaccionan
para formar los productos en B (ver más
abajo). Pero como es una reacción reversible
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(se representa mediante una flecha de doble
sentido) se interpreta que los productos
también reaccionan para formar los reactivos
(sentido inverso).
La Ley de acción de masas predice
que al aumentar la concentración de los
reactivos aumenta la velocidad de una reacción
(“La velocidad de una reacción química es
proporcional al producto de la concentración
de las sustancias reaccionantes”), ya que el
número de choques entre moléculas aumentará
al existir mayor número de moléculas
presentes en la unidad de volumen del sistema
que reacciona (mayor concentración). El valor
de la constante de equilibrio de dicha reacción
permite predecir en que dirección va a
evolucionar espontáneamente un sistema, o sea
predecir la tendencia de la reacción química a
formar productos; es característica de cada
reacción e independiente de las cantidades
iniciales de reactivos y productos.
Para una reacción en el equilibrio
A<======>B
-si Keq es mayor a 1, en equilibrio la
concentración de B será mucho mayor que la
concentración de A, lo cual indica que la
transformación en producto es casi completa,
el equilibrio esta desplazado hacia la derecha
-si Keq es cercano a 1, en equilibrio las
concentraciones de A y B son
aproximadamente iguales, lo que indica que
no ocurre transformación completa
-si Keq es mucho menor a 1, en
equilibrio la concentración de B es mucho
menor que la concentración de A, por lo que la
reacción no ocurre en forma apreciable; la
reacción química esta desplazada hacia la
izquierda.
Aplicando los conceptos antes
descriptos, si AH es un electrolito débil la
unión AH no es vencida fácilmente por la
interacción de A y H con el agua, por lo tanto
AH se disociará pobremente, lo cual se
reflejará en un valor de Keq que se aleja de 1,
este efecto puede aplicarse un ácido débil
donde la reacción estará más desplazada hacia
la izquierda cuanto más débil sea el ácido.
AH + H2O  A- + H3O+ (ión hidronio)
ó expresada como
AH  A- + H+
Estos conceptos se completan
aplicando el Principio de Le Chatelier que

enuncia "Si un sistema químico en equilibrio se
somete a cualquier causa externa
perturbadora, el equilibrio se desplaza en el
sentido que contrarresta la acción producida".
Aplicando el mismo ejemplo de la reacción,
A<======>B
-si se “agrega más cantidad de B” al
sistema en equilibrio la reacción se desplaza
hacia A, contrarrestando el incremento de B
producido.
En ese sentido, las soluciones de
ácidos débiles y la sal de su base débil
conjugada, ó bases débiles y la sal de su ácido
débil conjugado, que reaccionan de esa forma,
se comportan como "soluciones
amortiguadoras" o "buffers", ya que tienden a
resistir los cambios de pH. Al añadir a estas
disoluciones ácidos y/o bases se produce un
cambio mínimo en el pH, ya que los ácidos ó
bases débiles formados de la reacción tienden a
disociarse pobremente.
Por lo tanto, con:
AH  A- + H+
-si se agrega al sistema un ácido fuerte,
aumentará la [H+], el equilibrio se desplazará
hacia la izquierda favoreciendo la formación
del ácido débil, esta reacción consumirá los
protones añadidos y mantiene el pH al formar
un ácido débil
-si se agrega una base fuerte [OH-], se
producirá inicialmente una disminución de
[AH] y el equilibrio se desplazará hacia la
derecha generando una base débil.
La capacidad amortiguadora de la
solución se mide como la cantidad de ácido o
base añadida para lograr un cambio de una
unidad en el pH. El valor de pH en el cual el
sistema se encuentra disociado en un 50% se
conoce como pK y cada sistema buffer tiene un
valor de pK característico y representa el valor
de pH en el que puede alcanzar su máxima
capacidad amortiguadora. Por lo tanto, la
eficacia del sistema amortiguador o tampón
depende de las concentraciones de [AH] y [A-],
del pH del medio y es máxima cuando el pH a
regular está próximo a los valores de pKa.
En el caso de los buffers citosólicos
pueden clasificarse como intrínsecos y
extrínsecos.
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Los buffers intrínsecos son sistemas
cerrados donde ningún miembro del par
amortiguador puede escapar ó agregarse a la
célula, el sistema fosfato (orgánico e
inorgánico) y las proteínas pertenecen a este
grupo.
El sistema amortiguador fosfato está
compuesto por una base débil, el fosfato
dibásico de sodio y un ácido débil, el fosfato
monobásico de sodio. A pH fisiológico la
concentración de HPO42- es del 80%, 4 veces
superior a la de H2PO4-. Así, el sistema tampón
fosfato es muy eficaz para amortiguar ácidos.
Si se añade un ácido fuerte reacciona el
componente básico, el fosfato dibásico de
sodio, generando el ácido débil fosfato
monobásico de sodio.
H2PO4-  HPO42- + H+
Las grandes cantidades de fosfato
dentro de las células y su pK de 6.8, cercano a
los valores de pHi de alrededor de pH 7,0, lo
convierten en un sistema intracelular muy
eficiente e interviene junto a las proteínas
celulares de manera importante en la
amortiguación de los ácidos fijos.
Las proteínas celulares poseen propiedades
amortiguadoras por los grupos ionizables que
poseen los aminoácidos. Son electrolitos
anfóteros, es decir, pueden tanto ceder
protones como captarlos y, a un determinado
pH, tener ambos comportamientos al mismo
tiempo. La carga depende del pH del medio, en
un medio muy básico se cargan negativamente,
mientras que en el fuertemente ácido lo hacen
positivamente. A valores de pH por debajo del
pH isoeléctrico la carga neta de la proteína es
positiva, y a valores de pH por encima del pH
isoeléctrico, la carga neta de la proteína es
negativa. La mayoría de las proteínas
intracelulares tienen carga negativa, ya que su
pH isoeléctrico es menor que el pH fisiológico.
Esta propiedad amortiguadora a nivel
celular podría relacionarse con los grupos
carboxilos de los aminoácidos, sin embargo su
pKa es de 2, y por otro lado el pKa de los
grupos amino es de alrededor de 9,5; lo cual se
aleja del pH de la mayoría de los líquidos
biológicos. Por lo tanto, el poder amortiguador
a pH fisiológico de todas las proteínas depende
del grupo imidazol del aminoácido histidina, ya

que su pKa está próximo a 7 (la hemoglobina es
una proteína buffer efectiva debido a su alta
concentración y a la alta cantidad de residuos
histidina, y si bien es intracelular se considera
parte de los buffer sanguíneos). Como las
proteínas celulares se encuentran en alta
concentración, y el pKa cercano a 7, resultan
ser un buen amortiguador.
Fig 2 Estructura del grupo histidina de las proteínas que
funcionan como amortiguadores
Los buffers extrínsecos son sistemas
abiertos en los que una de las partes del par
puede atravezar la membrana, como el sistema
HCO3-/H2CO3 y el sistema H3/NH4-.
En el sistema bicarbonato/ácido
carbónico, el ácido carbónico con dos
protones ionizables de constantes pKa de 3,8
y pKa de 10,2, tendría una capacidad
amortiguadora pequeña, pero se deshidrata a
CO2, reacción catalizada por la enzima
anhidrasa carbónica (AC), y el sistema
acoplado completo abierto tiene un pKa de 6,1
CO2 + H2O ⇒ H2CO3 ⇒ H+ + HCO3–
En este sistema acoplado, todo el CO2
disuelto es considerado como la forma ácida
del tampón y aunque el pKa esta alejado del
pHi, y no esta presente en cantidades
importantes en el LIC, es un sistema eficaz ya
que el exceso de CO2 puede difundir de la
célula y ser eliminado por ventilación
pulmonar de manera rápida, además la
proporción bicarbonato-ácido carbónico al pH
fisiológico es 20:1, lo que le proporciona una
alta capacidad tampón frente a los ácidos
fijos.
Mecanismos alcalinizantes celulares
Los mecanismos alcalinizantes se
basan en expulsores de ácido que son
transportadores que eliminan activamente H+ ó
incorporan bases débiles como HCO3-,
alcalinizando el pHi.
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La mayoría tienen en común que
emplean la energía derivada del gradiente
intra-extracelular de Na+ para realizar el
intercambio de iones a través de la membrana.
Fig 3 Modelo de funcionamiento de sistemas alcalinizantes y
acidificantes celulares
Intercambiador Na+/H+ (NHE)
Todas las células poseen
intercambiadores NHE (Na+-H+ Exchangers)
acoplados a la bomba Na/K-ATPasa (también
citados en su función como reguladores del
volumen celular). El NHE se activa
directamente ante el descenso del pHi, ya que
el incremento de H+ del LIC lo estimula al
favorecer la unión de los protones a sitios de
regulación alostérica del transportador en su
cara citoplasmática, un sitio al ser ocupado
induce un cambio conformacional que activa al
transportador y otro sitio media la expulsión
del H+ después de ser activado. El NHE
alcanza su máximo rendimiento a un pHi de
6,0 y tornándose prácticamente inactivo a pHi
> 7,4 .
Se han descripto 9 isoformas de NHE
que se diferencian por sus funciones y su
localización en los diversos tejidos. NHE1 es
el principal regulador del pHi, ubicuo en las
membranas celulares y en la basolateral de los
epitelios. Los subtipos NH6-9 se encuentran
regulando el pH de las organelas, en
endosomas, Golgi, RER; mientras que NH2-4
se encuentran en el sistema digestivo y renal
interviniendo en funciones absortivas y
secretoras en las que están involucradas H+.
La acción de NHE1 puede ser regulada
por hormonas como insulina, adrenalina,
vasopresina, endotelina y factores de
crecimiento, mediante fosforilación;
modificando así la actividad del transportador

y el pH. La anhidrasa carbónica (AC) también
se acopla a un sitio de unión incrementando su
actividad para una más eficaz remoción de
protones (de forma similar fue descripto como
moléculas del citoesqueleto y membrana lo
activan ente el cambio de volumen).
Fig 4 Modelo de Intercambiador NHE, factores que lo regulan y
sitios de acción
Bomba de protones
Las bombas de protones usan la
hidrólisis de ATP para remover eficientemente
H+ (también presentes en estructuras
subcelulares que remueven protones del
citosol). Estas bombas en general están
acopladas en paralelo a canales aniónicos ó en
sentido contraparalelo a canales de K+ para
contrarrestar el manejo de cargas. Aunque es
menos relevante, la bomba K+/H+-ATPasa
electroneutra es importante en los procesos de
secreción ácida de epitelios como el gástrico y
el renal, pero su función en la regulación del
pHi aún no está muy esclarecida.
Fig 5 Mecanismos generadores y amortiguadores de protones del
LIC
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Cotransportador lactato-/H+ (MCT)
Dependiendo de la función celular los
distintos mecanismos de regulación del pHi
cobran importancia, por ejemplo en la célula
muscular esquelética en actividad el
cotransportador lactato-/H+ es el más
significativo, ya que posee la mayor capacidad
para remover H+, por encima de los
mecanismos del NHE, y son activados ante el
descenso del pH.
Intercambiador Na+/Cl-/HCO-3 (NCBE)
Estos intercambiadores transportan
Na+ y bicarbonato hacia el interior celular
intercambiándolo por Cl-, y tienen una
estequiometría 1:1:2, alcalinizando el interior
celular. Han sido identificados en neuronas,
endotelio, riñones, células pancreáticas , y sus
propiedades funcionales ante una caída del pHi
dependen del gradiente del Cl-, Na+ y
bicarbonato, si bien la energía disponible a
través del influjo de Na+ es suficiente para el
intercambio Cl-/bicarbonato.
Cotransportador Na+/HCO-3 (NBC)
El cotransportador Na+/HCO-3
transporta ambos iones hacia el interior celular,
y puede actuar con una estequiometría 1:1
electroneutra NBC3 ó 1:2 electrogénicas
NBC1 y NBC4, aunque su importancia en la
regulación del pHi es escasa. NBC es activado
por un aumento de la carga ácida y pueden ser
modulados por mensajeros químicos mediante
la activación ROS-dependiente de las kinasas
ERK.
NBC funciona células del túbulo renal
tiene dirección neta de transporte hacia fuera,
extrayendo del LIC ambos iones, en estas
células es importante en el transporte
transepitelial de ácidos.
Fig 6 Gráfico que explica la actividad de los mecanismos
transportadores en función del cambio del pH del LIC

Mecanismos acidificantes
Son mecanismos que mediante la
pérdida de bases débiles y/o la entrada de H+
disminuyen el pHi y regulan el pHi ante
modificaciones del mismo.
Intercambiadores Cl-/HCO-3 (AE)
Los transportadores de bicarbonato TB
son importantes componentes de la
homeostasis celular del pH, ya estudiamos los
cotransportadores Na+/HCO-3 (NBC) y los
Intercambiadores Na+/Cl-/HCO-3 (NCBE)
como mecanismos alcalinizantes dependientes
de sodio, y ahora como acidificante el
intercambiador Cl-/HCO3- independiente de
Na+ (AE).
Los intercambiadores AE son
electroneutros con una estequiometría 1:1 que
Interrelación pH extracelular y pH intracelular en el balance ácido-base del organismo
La célula puede estar expuesta a
cambios en el pH del LEC de distintos
orígenes. Los desórdenes del balance ácido-
base del LEC son regulados por los sistemas
amortiguadores sanguíneos en forma
inmediata, y por el sistema respiratorio con el
manejo del CO2 en minutos a horas.
Como la PCO2 del LEC repercute a
nivel celular, debido a su difusión rápida a
través dela membrana, las modificaciones del
CO2 del LEC impactan directamente en el pHi,
y son amortiguados a nivel celular
transcurridas pocas horas desde el origen de la
perturbación. Así, en una acidosis respiratoria,
el 90% del CO2 es amortiguado en el interior
de las células, ya que el CO2 difunde rápida y
fácilmente y en el citosol CO2 por la AC forma
H2CO3 y en su mayoría (pero no la totalidad)
se disocia lentamente en HCO3 y H+. La
mayoría de las células contienen abundante
anhidrasa carbónica, que acelera la
acidificación celular y así se produce una caída
aguda en el pHi. La mayoría de los protones
formados en esta reacción son amortiguados
por buffers intracelulares, proteínas ó fosfatos
(no bicarbonato), que tamponarán los protones
a expensas de una liberación del potasio;
resultando ello en una pérdida neta de K+ del
LIC por los canales pasivos. Por su parte, se
explusa el bicarbonato formado a través de
contratransportadores Cl-/bicarbonato, cuya
actividad es aumentada por la caída del
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promueve la recuperación del pHi tras una
sobrecarga alcalina.
Se conocen al menos 3 isoformas: AE1
(en eritrocitos), AE2 (en todos los tipos
celulares) y AE3 (corazón, cerebro y retina.
Este mecanismo está regulado por el gradiente
de Cl- y se activa sólo si el pHi se eleva lo
suficiente como para alterar la relación Cl-
intra y extracelular. AE participa también en la
regulación del volumen celular (a excepción
del eritrocito).
Intercambiadores Cl-/OH- (CHE)
Estos intercambiadores expulsan OH-
en intercambio con Cl-, independiente tanto de
Na+ como de HCO3– , pero dependiente de la
concentración de Cl–. Se activan en respuesta a
una alcalinización intracelular.
pHextracelular (aunque la acidificación del
LIC tienda a inhibir su actividad). Una
respuesta similar se da también sobre los
intercambiadores Na+/H+ y cotransportadores
Na+/bicarbonato, que son inhibidos por la caída
del pHextacelular.
Fig 7 Respuesta celular y curso temporal de la respuesta ante una
acidosos respiratoria
En el caso de caída de la PCO2 (por
una alcalosis respiratoria) el déficit de protones
del LEC es suplido por H+ del LIC, a través de
la activación de intercambiadores Na+/H+,
generando una alcalosis intracelular.
En el caso que el aumento significativo
de los H+ en el LEC sea de origen metabólico,
como un aumento del ácido láctico en una
acidosis metabólica, éstos son amortiguados en
un 50% en el interior celular; ya que hay
difusión de los H+ al LIC, que aunque más
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lenta es también efectiva. Durante la acidosis

metabólica la caída de bicarbonato del LEC
inhibe la actividad de los mecanismos
extrusores de protones y estimula los que
incorporan protones al LIC.

Como estudiamos, las vías de intercambio de

protones incluyen bombas, transportadores y
canales gatillados por voltaje, sólo un
pequeño porcentaje atraviesa directamente la
membrana. Sin embargo, también algunos
protones pueden atravesar la membrana
asociados a moléculas que difunden
libremente, hacia ó desde el LEC. Hv1 son
Canales de protones que se activan por voltaje, Fig 8 Respuesta celular ante una acidosis metabólica (MAc)
y se encuentran activos sólo bajo condiciones
en los que el gradiente electroquímico del H+ Por el contrario, cuando aumenta el
bicarbonato del LEC (como en una alcalosis
tiende al eflujo ante cambios en la temperatura,
despolarización ó cambios de pH como metabólica) aproximadamente un 30% de éste
alcalosis del LEC, y se encuentran inactivos en es tamponado en el LIC, y el déficit de
la acidosis metabólica. protones genera una alcalosis intracelular, por
los mecanismos opuesos a los descriptos
previamente.

Muerte celular: necrosis y apoptosis
La muerte celular puede ocurrir a
través de dos procesos: necrosis y apoptosis.
La muerte celular por necrosis se da
ante lesiones ó situaciones de estrés celular
irreversibles, mientras que el programa de
apoptosis, incorporado en el material genético
de cada célula, sólo se activa en aquellas
células destinadas a morir en cierto momento,
y lejos de ser dañina, es esencial para un
desarrollo adecuado.
La distinción entre necrosis y
apoptosis es poco clara en algunas patologías,
como sucede en el daño isquémico posterior a
un accidente vascular. Las mismas células
pueden sufrir ya sea necrosis o apoptosis en
respuesta a estímulos diferentes, o un mismo
insulto puede generar apoptosis o necrosis
dependiendo de su intensidad, o de la
distribución temporal de las condiciones
inductoras de muerte, como serían los insultos
agudos comparado con aquellos distribuidos a
lo largo de períodos prolongados. Así, aunque
hay injurias que se asocian mayoritariamente a
apoptosis o a necrosis, más que tipos distintos
de muerte celular, hoy se propone la existencia
de un continuo de respuestas, las que
determinan sus características morfológicas.
Las características morfológicas de la
necrosis son muy distintas a las de la
apoptosis. Las células apoptóticas muestran
compactación nuclear, condensación de la
cromatina, fragmentación el ADN,
vesiculación de la membrana celular y
desintegración de la célula en múltiples
vesículas y los restos celulares son fagocitados
por las células cercanas, generalmente sin
inflamación acompañante. En contraste, las
células necróticas muestran tumefacción
mitocondrial, dilatación del retículo
endoplásmico y vacuolación del citoplasma; no
hay vesiculación de la membrana celular, sino
que las células tumefactas eventualmente se
lisan, el contenido celular es liberado al
espacio intercelular, dañando a las células
vecinas y generando un proceso inflamatorio.
Necrosis celular
Las células sufren necrosis cuando son
expuestas a estrés extremo. Distintos tipos
celulares toleran grados diferentes de estrés y
todas las células poseen mecanismos
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homeostáticos que pueden compensar cambios
ambientales y mantener el compartimiento
interno estable, pero la mantención de la
integridad es limitada. Condiciones adversas
intensas, como la falta de oxígeno o nutrientes
esenciales (isquemia), temperatura elevada,
compuestos tóxicos, y estrés mecánico
(trauma), que superan la capacidad de los
sistemas de protección comprometerán en
forma irreversible los mecanismos
homeostáticos, dañando y eventualmente
causando la muerte celular.
La necrosis, que también recibe otros
nombres como muerte accidental u oncosis,
generalmente se representa como respuesta
celular extrema ante una lesión y desencadena
una reacción inflamatoria en el tejido.
La lesión de las células más común puede
iniciarse por hipoxia, que afecta directamente
la respiración aerobia de la célula. A medida
que disminuye la PO2 en el interior celular se
produce una pérdida de la fosforilación
oxidativa y una disminución en la producción
de ATP. El agotamiento resultante del ATP
produce una amplia gama de efectos
secuenciales sobre muchos sistemas
intracelulares como:
- reducción de la actividad de la bomba
Na/K-ATPasa, que da lugar a una
acumulación de sodio en el interior de
la célula con salida de potasio hacia el
exterior
- incremento neto del soluto del LIC que
se acompaña de un aumento de agua,
tumefacción celular y dilatación del
retículo endoplásmico
- aumento de la glucólisis anaerobia que
mantiene la producción de energía
mediante la generación de ATP
- incremento de la carga osmótica
intracelular por la acumulación de
catabolitos como fosfatos inorgánicos
y lactato producto de la glucólisis
anaerobia y nucleósidos de purina
Esta alteración celular dispara un mecanismo
de defensa frente a la alteración de la
homeostasis. Así, el núcleo de la célula
comienza a transcribir ADN con información
para la síntesis de proteínas protectoras de la
célula (hsp–heat-shock proteins-, chaperonas).

En ocasiones estas proteínas son capaces de
restaurar las funciones celulares, pero en otras
no y es entonces cuando la célula continuará
de manera inevitable hacia su destrucción.
El pHi y el pHe tiene importancia en el
inicio y la progresión de la necrosis. En
condiciones normales, el pHi se mantiene en
un rango fisiológico estrecho pero en
condiciones patológicas, como isquemia o
trauma, el pHi se acidifica en forma transitoria
por los cambios metabólicos. Además, la
disminución del pHe repercute en la
disminución del pHi, y por lo tanto en la
actividad de los transportadores de H+
Si la hipoxia se mantiene, existe un mayor
agotamiento de ATP con deterioro
morfológico mayor, como:
- dispersión del citoesqueleto con
pérdida de microvellosidades
- alteración estructural del aparato de
síntesis proteica con desprendimiento
de los ribosomas del retículo
endoplásmico rugoso y la disociación
de los polisomas en monosomas
- dilatación de las mitocondrias y del
retículo endoplásmico
- concentraciones aumentadas de agua,
sodio, cloro y con disminución en la
concentración de potasio en el LIC
Si se restablece el aporte de oxígeno, todos
estos trastornos son reversibles; pero si la
isquemia persiste, se produce una lesión
irreversible.
Esta irreversibilidad se define por dos
fenómenos, la incapacidad para revertir la
disfunción mitocondrial que conduce a la
depleción total de ATP, y la aparición de
trastornos profundos en la función de la
membrana, tanto la membrana mitocondrial
como plasmática.
El calcio es un mediador importante de las
alteraciones bioquímicas y morfológicas que
conducen a la muerte celular. La concentración
de calcio del LIC esta finamente regulada por
distintos mecanismos intracelulares, éstos ante
condiciones patológicas pueden estar alterados
y el calcio del LIC aumenta drásticamente por
ingreso desde el LEC ó desde fuentes
intracelulares como el RER (con la aperture de
los receptores de ryanodine RyR). En
condiciones normales NCX es la principal vía
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de salida de calcio al LEC, pero este
transportador puede actuar en manera reversa
durante episodios de fuerte despolarización de
la membrana e incrementar el calcio
intracelular junto al sodio intracelular. El
aumento del calcio intracelular activa la salida
de calcio de la mitocondria a través de poros
que se abren transitoriamente.
Los mecanismos que se constituyen en la
irreversibilidad del proceso incluyen:
- intensa tumefacción de las
mitocondrias, pérdida del potencial de
membrana de las mitocondrias y
disfunción mitocondrial
- pérdida de citocromo C mitocondrial y
caspase-9 mitocondrial
- pérdida de los fosfolípidos de
membrana
- alteraciones profundas del
citoesqueleto y formación de vesículas
en la superficie celular
- generación de especies reactivas de
oxígeno, los radicales libres del
oxígeno, parcialmente, reducidos son
moléculas muy tóxicas que lesionan
las membranas celulares y otros
constituyentes de las células
- pérdida de aminoácidos intracelulares,
como glicina que protege a las células
hipóxicas de la lesión irreversible de la
membrana
- lesión extensa de las membranas
plasmáticas
- hinchazón de los lisosomas
- pérdida continuada de proteínas,
enzimas, coenzimas y ácidos
ribonucleicos a través de las
membranas hiperpermeables
- lesión de las membranas lisosomales,
seguida por la salida de sus enzimas al
citoplasma y la activación de sus
hidrolasas ácidas, con ARNasas,
ADNasas, proteasas, fosfatasas,
glucosidasas y catepsinas.
- aumento del calcio citosólico que
activa proteasas calpaínas que actúan
conjuntamente con las catepsinas
lisosomales liberadas en el citoplasma
y caspasas
La activación de estas enzimas conduce a
una digestión enzimática de los componentes
celulares, que se pone de manifiesto por la

pérdida de ribonucleoproteína, desoxi-
rribonucleoproteínas y glucógeno. El pHi se
hace neutro o alcalino a medida que la lesión
se hace irreversible. En la cromatina nuclear
aparecen áreas de condensación desigual y en
núcleo sufre una lenta disolución (cariolisis).
Tras la muerte celular, los componentes
celulares son progresivamente degradados y
existe un escape generalizado de enzimas
celulares hacia el espacio extracelular. La
célula muerta puede ser reemplazada por
grandes masas compuestas por fosfolípidos y
éstas son fagocitadas por otras células o
degradadas a ácidos grasos.
La salida hacia el plasma de las enzimas
intracelulares a través de la membrana
plasmática proporciona parámetros clínicos
importantes de muerte celular; por ejemplo en
el músculo cardíaco dañado se liberan
transaminasas, deshidrogenasa láctica (LDH),
creatina cinasa (CK) y proteínas específicas
del músculo cardiaco (troponinas), por ello la
elevación de los niveles séricos de estas
moléculas es un criterio clínico valioso de
muerte celular en el músculo cardíaco en el
infarto miocárdico.
Fig 9 Mecanismo efector de la necrosis celular
La Muerte celular producida por
diversos estímulos nocivos que son capaces de
producir necrosis cuando se administran en
dosis bajas, por ejemplo, el calor, la radiación,
la hipoxia, los fármacos citotóxicos
anticancerosos, pueden inducir apoptosis si el
estímulo lesivo es leve, aunque las dosis
elevadas del mismo estímulo causan la muerte
celular por necrosis.
Homeostasis celular – Dra. Cremer- 2017
Fig 10 Fotografías electrónicas de los procesos de apoptosis y
necrosis celular
Apoptosis
La apoptosis, también conocida como
“suicidio celular” o “muerte celular
programada” (MCP), se inicia por señales
internas ó externas y tiene una significación
funcional importante durante el desarrollo
embrionario y en las fases posteriores, como
proceso de remodelación de los órganos que
implica la muerte “programada” de numerosas
células. Por medio de la MCP se eliminan
células que después de haber cumplido sus
funciones, fundamentalmente en el desarrollo,
deben ser eliminadas.
El mecanismo interno que constituye
la muerte celular por apoptosis se puede
desencadenar por estímulos de origen
extracelular o intracelular.
El estímulo extracelular más frecuente,
durante el desarrollo, es la falta de factores
tróficos encargados de mantener la
funcionalidad celular (por ejemplo, factor de
crecimiento neural –NGF–). Las señales
extracelulares en el adulto, entre las que
destacan las moléculas de la familia del factor
de necrosis tumoral, activan la vía extrínseca
de la apoptosis por medio de su unión a
receptores específicos de la membrana celular
(apoptosis mediada por receptor). La vía
extrínseca es reclutada por la activación de
receptores de muerte en la membrana celular
tales como Fas/CD95 y el receptor de factor de
necrosis tumoral (TNFR1) por ligandos
específicos. Las señales extrínsecas controlan
el balance en la célula de las vías reguladoras
de promoción de sobrevida y promoción de
muerte celular (como Bcl-2, ceramida,
inductores mitocondriales de muerte), lo que
eventualmente resulta en la activación de

ejecutores de muerte celular, las caspasas y
endonucleasas, entre otras. La familia Bcl2
está involucrada en la regulación y tiene
miembros con efecto anti-apoptótico (Bcl2 y
Bcl-xL) y pro-apoptosis (Bax y Bak). Los
miembros Bcl2 multidominio pueden preservar
o alterar la integridad mitocondrial al regular la
liberación de factores apoptogénicos como
citocromo c, smac/diablo o factores de
inducción de apoptosis.
Los estímulos intracelulares más
típicos son la expresión de mensajes genéticos
de suicidio celular, la hipoxia celular o que la
célula no pase los controles –check-points–
para entrar en mitosis. La vía intrínseca se
activa por la translocación de moléculas pro-
apoptóticas a la mitocondria, induciendo la
liberación de factores apoptogénicos
mitocondriales (citocromo c) al citosol,
activando la caspasa iniciadora 9 y
posteriormente la vía efectora. El estrés del
retículo endoplásmico, incluyendo la alteración
de la homeostasis del calcio y la acumulación
de proteínas mal plegadas, también puede
resultar en muerte programada a través de la
activación de la caspasa 12.
Sea cual sea el inductor de la apoptosis
(extra o intracelular) se induce la expresión de
genes para la síntesis de un tipo particular de
proteínas con alta actividad enzimática
denominadas caspasas. Cuando estas proteasas
se activan, actúan sobre otras proteínas
celulares o sobre el ADN nuclear originando
su destrucción.
Basándose en sus funciones
proapoptóticas, las caspasas se han dividido en
dos grupos: caspasas iniciadoras y caspasas
efectoras. En la apoptosis, las primeras
caspasas (caspasas 8 y 9), denominadas
iniciadoras, son activadas a través de las
moléculas adaptadoras FADD (proteína de
asociación Fas con dominio de muerte) y
Apaf1 (factor activador de proteasa apoptótica
1) respectivamente. Las caspasas iniciadoras
activan las pro-caspasas efectoras, las que son
responsables del daño mitocondrial, las
alteraciones nucleares y, eventualmente, la
muerte celular.
Además, las mitocondrias se afectan
por el daño apoptótico y se origina la
liberación del citocromo-c y la formación de
apoptosomas (complejos de proteínas
conteniendo el citocromo-c). Una vez que se
forma el apoptosoma se le une la caspasa-9,
Homeostasis celular – Dra. Cremer- 2017
desencadenando una cascada de reacciones de
proteolisis que conducen a la muerte celular.
A diferencia de la apoptosis, la
activación de las caspasas durante la necrosis
se asociaría al daño mitocondrial secundario a
los altos niveles de calcio intracelular, o por
activación de otros sistemas de proteasas como
la calpaina o las catepsinas. De esta manera,
las caspasas serían activadas en forma
inapropiada y contribuirían a la muerte
necrótica de manera similar a la de otros
procesos celulares desregulados, sin conferir a
la célula una morfología apoptótica.
Más recientemente apareció el término
anoikis que es la apoptosis inducida por la
pérdida de anclaje de la célula a la matriz
extracelular o porque las interacciones célula-
matriz son insuficientes o inapropiadas. Este
proceso parece relacionado con las integrinas
que son glucoproteínas integrales de la
membrana plasmática que intervienen en la
adhesión con las células de la matriz
extracelular, en su migración, en la
organización del citoesqueleto y en la
transducción de señales. Esta pérdida de
anclaje de determinadas células epiteliales
provoca una fuerte activación de caspasa-8 y
caspasa-3.
Cuando se observa al microscopio el
proceso de apoptosis se caracteriza por el
hecho de que la célula adquiere una morfología
arrugada, la pérdida del agua intracelular
conlleva la condensación del citoplasma y
cambios en la forma y el tamaño celular.
Una característica específica de la
apoptosis es la preservación, al menos en la
fase inicial, de la integridad estructural y de la
mayoría de las funciones de la membrana
plasmática. También, los orgánulos celulares
incluyendo la mitocondria y los lisosomas,
permanecen preservados durante el inicio de la
apoptosis, aunque el potencial transmembrana
de la mitocondria está enormemente
decrementado.
El núcleo cambia notablemente de
forma y se aprecia como la cromatina, que
normalmente está en forma de eucromatina o
cromatina dispersa (indica actividad
transcripcional del ADN), comienza a
concentrarse formando cromatina condensada
o heterocromatina (indica que el ADN no está
transcribiendo) y finalmente todo el núcleo se
 Homeostasis celular – Dra. Cremer- 2017

hace muy denso (falta total de actividad La duración de la apoptosis puede

transcripcional del ADN) con la imposibilidad variar, pero generalmente es corta (3-6 horas),
de la síntesis de proteínas y la consiguiente incluso es más breve que la duración de la
muerte y fragmentación de la célula. mitosis. De esta forma, bajo condiciones de
Este proceso de fragmentación se homeostasis, cuando la proporción de células
manifiesta morfológicamente por la aparición muertas está equilibrada por la tasa de
de diferentes vesículas esféricas (cuerpos proliferación celular, el índice mitótico puede
apoptóticos), rodeados de membrana celular, exceder del índice apoptótico.
que contienen diversos organoides
citoplasmáticos degenerados. La activación de
la transglutaminasa que une proteínas
citoplásmicas, la pérdida de microtúbulos,
pérdida de la asimetría de los fosfolípidos de la
membrana plasmática que permite la
exposición de la fosfatidilserina en la cara
externa de la membrana plasmática, y otros
cambios de la membrana plasmática
precondicionan a este proceso. Los cuerpos
apoptóticos son fagocitados por las células
vecinas como fibroblastos o células epiteliales
(no necesariamente por macrófagos) sin
desencadenar ninguna reacción inflamatoria en Fig 11 Vía molecular de la apoptosis
el tejido.
 Homeostasis celular – Dra. Cremer- 2017

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