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CROMATOGRAFÍA DE PAPEL

INTRODUCCION

La cromatografía es uno de los métodos más potentes utilizado en la separación de mezclas


complejas como cromatografía de gases o cromatografía de líquidos, ésta presenta una cierta
igualdad en todos los tipos de cromatografía y es que por medio de este suelen separarse en dos
fases: fase móvil y otra que es fase estacionaria. (Figura 1)

Esta técnica es utilizada en todas las ramas de la ciencia y es muy importante ya que permite
principalmente la separación, luego la identificación, cuantificación, calificación y determinación
de los componentes químicos de los cuales están formadas estas sustancias, esta técnica se basa
en cuanto a las propiedades físicas de ciertos materiales las cuales interactúan con otras
sustancias o mezclas, la cual permite descomponer la mezcla y analizar sus constituyentes. “Los
componentes en una muestra a analizar se van distribuyendo en estas dos fases, cuando la fase
móvil atraviesa la fase estacionaria es lo que se denomina proceso de elución” (¿Qué es
Cromatografía?, n.d.), todo esto es resultado de múltiples repeticiones del proceso de sorción
para así lograr una mejor calidad del trabajo, observar la separación y poder visualizarlos en una
gráfica llamada cromatograma.

Los procedimientos más destacados son: la cromatografía en papel, cromatografía en capa fina,
cromatografía en columna y la cromatografía de gases. y son técnicas muy utilizadas ya sea en
campos de investigación o en el campo industrial.

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Los analitos son un concepto importante ya que son las sustancias que se van a separar y se
analizaran para darle resultado a la cromatografía utilizada, al igual la muestra que es la mezcla
que se va a analizar y están compuestos de varios analitos en unión con otras sustancias de poco
interés de los que serán separados los analitos.

El tiempo de retención es el que se demora un analito en pasar de la columna o sistema desde


donde pase la fase móvil hasta el detector. La selectividad consiste en la capacidad de diferenciar
cada componente en la mezcla.

La separación de los analitos depende totalmente de la afinidad de cada uno de los componentes,
dependiendo así de su naturaleza, donde algunas sustancias tenderán a moverse con la fase móvil
y otras permanecen sobre la fase estacionaria.

Ejemplos de cromatografías de situaciones que podemos presenciar en la vida cotidiana: vino


derramado sobre un papel blanco, análisis de sangre, exámenes de orina, etc.

Figura (1). Fase móvil, fase estacionaria.

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RESUMEN

La cromatografía de papel es una técnica utilizada para separar y analizar mezclas de sustancias
para moverse a través de un papel absorbente a diferentes velocidades, las sustancias de la
muestra se separan y forman bandas de colores distintas. Estas bandas pueden ser analizadas para
determinar los componentes presentes en la muestra de adsorción y solubilidad, generando
bandas características. Al finalizar, se obtiene un patrón cromatográfico que facilita la
identificación y cuantificación de los componentes presentes en la muestra.

PALABRAS CLAVES

Papel absorbente, solvente, adsorción, solubilidad, patrón cromatográfico.

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OBJETIVOS

GENERALES:

 Separar y analizar los componentes de una muestra y generar un patrón visiblemente


distintivo de bandas cromatográficas.
 Identificar sustancias, cuantificarlas y clasificarlas.

ESPECIFICOS:

 Lograr la separación efectiva de los componentes de una muestra


 Obtener un patrón cromatográfico visualmente distintivo que sirva como firma única para
la muestra, permitiendo la identificación de sus componentes.
 Facilitar la identificación de sustancias presentes en la muestra mediante características
de las bandas cromatográficas.
 Posibilitar la determinación cuantitativa de las cantidades relativas de cada componente
en la muestra

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Vaso precipitado

Embudo de vidrio

Papel de filtro

Base soporte

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MARCO TEORICO

PROCEDIMIENTO

1. Coloca las hojas, cortadas en pedacitos, en el mortero. Añade etanol y arena lavada.
Tritura hasta que los pigmentos sean disueltos por el alcohol, que tomará un color verde
intenso.
2. Filtra el contenido del mortero en un embudo con papel de filtro. Vierte el filtrado en el
vaso de precipitado hasta alcanzar un centímetro de altura. Tapa el vaso para saturar el
ambiente de etanol.
3. Corta una tira de papel de filtro de 4 cm de anchura y 15 cm de longitud. Sujeta
verticalmente en el vaso de precipitado utilizando el soporte, y con el extremo sumergido
en el líquido.
4. Espera 20-30 minutos. Saca la tira de papel y deja secar al aire.

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ANEXOS

HISTORIA DE CROMATOGRAFÍA

Inicia en el año 1906, con el británico ruso mikhail tswett y describió esta técnica donde fue
aplicada a la separación de pigmentos de plantas, dándole el nombre de cromatografía a este
método de separación de mezclas por el resultado que se visualizaba en las bandas o laminillas
de papel coloreadas como resultado del pigmento que se separaban por su adsorción sobre
columnas de yeso.

Después de cierto tiempo de descubierta esta técnica, la cromatografía quedó prácticamente


olvidada hasta 1930, gracias a los científicos kuhn y lederer aplicaron la separación de
carotenoides, a través del tiempo esta técnica se fue conociendo cada vez más generando
resultados positivos ya que incrementó el conocimiento de esta técnica generando diversas
técnicas claramente todas diferentes entre sí pero con conocimiento inicial común, un tipo de
ellas fue la cromatografía de reparto. 1848 Way y Thompson: Reconocieron el fenómeno de
intercambio iónico en sólidos.1850 Runge, Schoenbein, y Goeppelsroeder: Estudiaron el análisis
por capilaridad en papel. 1876 Lemberg: Ilustró la reversibilidad y estequiometria del
intercambio iónico en minerales como el silicato de aluminio.1892 Reed: Separación en columna
en tubos de caolín usados para la separación de FeCI3 y el CuSO4.Inicios (1900-1930): El
químico ruso Mikhail Tsvet es considerado el pionero de la cromatografía. En 1906, introdujo la
idea de separar compuestos basándose en su afinidad por diferentes sustancias absorbentes. En
1931, acuñó el término "cromatografía".1935 Holmes y Adams: Sintetizó resinas orgánicas para
intercambio iónico.1938 Reichstein: Introdujo la cromatografía líquida o fluida, así extendió las
aplicaciones de la cromatografía a sustancias sin color. 1938 Izmailov y Schraiber: Describieron
el uso de la capa fina de alúmina extendida sobre un vidrio. 1939 Brown: Primero que usó la
cromatografía circular en papel. Cromatografía de Papel (1940-1950): Martin y Synge
desarrollaron la cromatografía de papel en 1941, marcando un avance significativo. Su trabajo se
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centró en la separación de aminoácidos utilizando papel y líquidos. Cromatografía en Capa Fina
(1950): Stahl introdujo la cromatografía en capa fina en 1950, utilizando una capa delgada de
material adsorbente en lugar de papel. Esto permitió una separación más rápida y eficiente.
Cromatografía de Gas (1950-1960): La cromatografía de gas fue desarrollada por A. J. P. Martin
y R. L. M. Synge en la década de 1950. Esta técnica permitió la separación de compuestos
volátiles y gaseosos. 1964 J. C. Moore: Desarrolló la cromatografía de permeación en gel.
Cromatografía Líquida de Alta Resolución (1970-1980): Se introdujo la cromatografía líquida de
alta resolución (HPLC), que mejoró la eficiencia y la velocidad de separación, especialmente en
aplicaciones industriales y farmacéuticas. A lo largo de las décadas, la cromatografía ha
evolucionado con el desarrollo de nuevas técnicas y avances tecnológicos, convirtiéndose en una
herramienta esencial en química analítica y bioquímica.

TIPOS DE CROMATOGRAFÍA

Existen varios tipos de cromatografía, cada uno con sus aplicaciones específicas.

1. Cromatografía de Gases (GC): Separación de compuestos volátiles basada en su interacción


con una fase estacionaria en estado gaseoso.
2. Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC): Separación de compuestos en fase líquida
utilizando alta presión para mejorar la velocidad y eficiencia.
3. Cromatografía de Capa Fina (TLC): Separación en una capa fina de adsorbente sobre una
placa, útil en análisis cualitativo.
4. Cromatografía de Intercambio Iónico: Separación de iones basada en sus interacciones con
una resina cargada.
Puede clasificarse en:
 Cromatografía de intercambio catiónico. La fase estacionaria contiene grupos
funcionales cargados negativamente, por lo que retiene cationes (cargados
positivamente).
 Cromatografía de intercambio aniónico. La fase estacionaria contiene grupos
funcionales cargados positivamente, por lo que retiene aniones (cargados
negativamente).

5. Cromatografía de Afinidad: Utiliza la interacción específica entre una biomolécula y una matriz
para la separación, común en biología molecular.
6. Cromatografía de Exclusión Molecular (SEC): Separa moléculas según su tamaño en una
columna con poros de diferentes tamaños.
7. Cromatografía de Fase Reversa (RP): La fase estacionaria es menos polar que la fase móvil,
utilizada en HPLC para compuestos hidrofóbicos.
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8. Cromatografía de Columna: Separación en una columna empacada con material adsorbente.
De este modo, la cromatografía en columna se puede clasificar como:
 Cromatografía sólido-líquido. La fase estacionaria es sólida y la móvil es
líquida.
 Cromatografía líquido-líquido. Ambas fases son líquidas.
 Cromatografía líquido-gas. La fase estacionaria es líquida y la móvil es gaseosa.
 Cromatografía sólido-gas. La fase estacionaria es un sólido y la móvil es
gaseosa.

9. Cromatografía de Papel: Similar a la TLC, pero utilizando papel como sustrato.


10. La cromatografía de adsorción: Es un método de separación basado en las interacciones
adsorbente-soluto y se utiliza comúnmente en la separación de compuestos orgánicos y en la
purificación de sustancias químicas.
11. La cromatografía de partición: Es un método de separación en el cual los componentes
de una mezcla se distribuyen entre una fase estacionaria líquida inmovilizada y una fase
móvil líquida que fluye a través de ella y se utiliza en la separación de compuestos
orgánicos y biomoléculas. Es común en técnicas como la cromatografía líquida de
partición y la cromatografía en columna de partición.

Existen dos tipos de cromatografía dependiendo de la polaridad de la fase estacionaria y


la fase móvil:
 En fase normal. La fase estacionaria es polar y la fase móvil es apolar.
 En fase reversa. La fase estacionaria es apolar y la fase móvil es polar.

12. Cromatografía en Supercrítico (SFC): Utiliza un fluido supercrítico como fase móvil
para separar compuestos.
13. Cromatografía en Fase Normal (NPC): Similar a la cromatografía de fase reversa, pero
con una fase estacionaria más polar.
14. Cromatografía de Afinidad a Proteínas (PCA): Se utiliza para purificar proteínas
basándose en interacciones específicas entre la proteína y un ligando.
15. Cromatografía de Troceado (SFC): Combina principios de la cromatografía de gases y
líquidos, utilizando un fluido supercrítico.

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¿QUE ES LA CLOROFILA A Y B?
la clorofila a y clorofila b son los principales
pigmentos fotosintéticos. Las moléculas de
clorofila absorben longitudes de onda azules y
rojas, como se demuestra con los picos en los
espectros de absorción.

¿QUE SON LOS CAROTENOS?

Los carotenos son pigmentos sintetizados que


abundan en la naturaleza, especialmente, en
flores, vegetales y frutas. Esto le da un color
rojo, anaranjado, amarillo o verde oscuro. Por
lo tanto, se encuentra en el tomate, la
zanahoria, la calabaza, la yema de huevo, las
espinacas, el pimiento rojo, los albaricoques y
melocotones secos, etc.

¿QUE SON LAS XANTOFILAS?

Son los compuestos químicos pertenecientes al grupo de los carotenoides que poseen uno
o más átomos de oxígeno en su estructura. Las xantofilas se encuentran de forma natural
en muchas plantas, son compuestos pigmentados y presentan también acción
fotosintética. Estos pigmentos, más resistentes a la oxidación que las clorofilas,
proporcionan sus tonos amarillentos y parduscos a las hojas secas. Las xantofilas
usualmente no tienen ninguna actividad como vitamina A. La criptoxantina es una
excepción, ya que tiene una actividad como vitamina A algo superior a la mitad de la del
beta-caroteno.

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¿QUÉ ES EL ALCOHOL?

El alcohol etílico o etanol es uno de los componentes más habituales del botiquín de primeros
auxilios casero. En las farmacias se puede adquirir con dos tipos de concentración: de 70º y de
96º.
El alcohol etílico es un líquido transparente con olor característico. Su fórmula química
es H3C-CH2-OH, además, es una materia prima importante para síntesis.

Presenta activación con algunos solventes y derivados de celulosa y forma azeótropos


binarios y ternarios con el agua y los principales acetatos facilitando procesos de
impresión y pintado. También es de gran aplicación en la industria por su bajo contenido
de humedad y se utiliza como materia prima en procesos de síntesis orgánica e industria
química.

¿PARA HACER CROMATOGRAFÍA ES MEJOR EL AGUA O EL ALCOHOL?

El alcohol es mejor para separar sustancias polares, mientras que el agua es mejor para separar
sustancias no polares. Por lo tanto, lo mejor sería saber la naturaleza de la muestra que se quiere
analizar y de sus componentes, para poder decidir si el agua o el alcohol es el solvente más
adecuado.

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GLOSARIO
Adsorción: La adsorción es un proceso físico-químico en el que una sustancia es
retenida en la superficie de otra. En este proceso, los átomos, iones o moléculas de una
sustancia se adhieren a la superficie de otra.
Alúmina: La alúmina es un compuesto químico que se encuentra en la
naturaleza. También se conoce como óxido de aluminio y su fórmula química es Al2O3.
Análisis cualitativo: El análisis cuantitativo es una forma de averiguar la calidad de una
inversión o un activo mediante el uso de números y estadísticas. Consiste en utilizar
modelos matemáticos y estadísticos para analizar datos y tomar decisiones sobre
inversiones, operaciones empresariales u otros sistemas complejos.
Bandas cromatográficas: Las bandas cromatográficas se refieren a las áreas o líneas
visibles en un patrón cromatográfico después de realizar una técnica de separación, como
la cromatografía.
Capilaridad: La capilaridad es un fenómeno físico en el cual un líquido asciende o desciende
en un tubo capilar delgado debido a las fuerzas intermoleculares entre el líquido y las paredes
del tubo.
Compuestos hidrofóbicos: Los materiales hidrofóbicos son aquellos que se basan en el
concepto químico de la hidrofobicidad, es decir, la capacidad de la sustancia para repeler
el agua
Compuestos volátiles: Los compuestos volátiles son sustancias químicas que tienen la
capacidad de evaporarse fácilmente a temperaturas ambiente y convertirse en vapor o
gas.
Criptoxantina: La criptoxantina es un pigmento natural que se encuentra en algunas
frutas y verduras. También se conoce como beta-criptoxantina.
Estequiometria: La estequiometría es una rama de la química que se ocupa de las relaciones
cuantitativas entre los reactivos y los productos en una reacción química
Fluido super critico: Un fluido supercrítico (FSC) es una sustancia que se encuentra a una
temperatura y presión superiores a su punto crítico. El punto crítico es la temperatura y
presión más altas a las que una sustancia puede existir como gas y como líquido en
equilibrio.
Patrón cromatográfico: Un patrón cromatográfico se refiere a un conjunto de bandas o picos
que resultan de la separación de componentes en una muestra mediante cromatografía.

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Resina: La resina es una sustancia viscosa y fluida, sólida en ciertos estados de
temperatura, que se origina principalmente en ciertos tipos de plantas o se produce de
manera sintética.

Reversibilidad: La reversibilidad es la capacidad de un sistema termodinámico


macroscópico de experimentar cambios de estado físico, sin un aumento de la entropía,
resultando posible volver al estado inicial cambiando las condiciones que provocaron
dichos cambios.
Solubilidad: La solubilidad es la medida de la capacidad de una sustancia para disolverse en
otra. Se expresa comúnmente en términos de la cantidad máxima de soluto que puede
disolverse en una cantidad específica de solvente a una temperatura dada. La solubilidad puede
variar según las condiciones, como la temperatura y la presión.
Solvente: Un solvente es una sustancia, generalmente líquida, que tiene la capacidad de
disolver o mezclar otras sustancias sin cambiar su composición química. En una solución, el
solvente es la sustancia presente en mayor cantidad y es la que disuelve al soluto (la sustancia
que se disuelve en el solvente). El agua es uno de los solventes más comunes en la naturaleza,
pero hay muchos otros, como el alcohol, la acetona y el éter.
Tubos de caolín: Los "tubos de caolín" pueden referirse a tubos de ensayo recubiertos con
caolín. El caolín es un tipo de arcilla blanca que se utiliza a veces como revestimiento en tubos
de ensayo de vidrio.

CONCLUSIONES

Algunas conclusiones que se pueden obtener de la cromatografía de papel son:

Permite identificar los diferentes componentes presentes en una muestra, ya que cada uno se
separa y se visualiza como una mancha individual en el papel cromatográfico.

La separación se basa en las diferencias de afinidad entre los componentes de la muestra y el


papel absorbente, así como en las diferencias de solubilidad en el solvente utilizado.

Los resultados de la cromatografía de papel se pueden visualizar mediante la aparición de


manchas o bandas en el papel, cada una correspondiente a un componente diferente.
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7. Instituto Europeo de Nutrición y Salud | Copyright 2023 https://ienutricion.com/carotenos-
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