ESPECTROFOTOMETRÍA

ATÓMICA
En 1831, John Frederick William Herschel
demostró, que las sales de diferentes metales
producen distintas coloraciones a la flama son
puestas en contacto con ésta.
Así por ejemplo la sales de calcio dan a la flama
un color naranja, las de sodio un color amarillo,
las de potasio un color violeta, las de cobre un
verde azulado, las de estroncio un color verde
amarillo, etc. Estas observaciones fueron
corroboradas posteriormente por otros
investigadores sugiriendo que de esta forma
podría identificarse el metal formador de la sal
en un compuesto químico específico.
Kirschoff y Bunsen en 1859 ampliaron el conocimiento
de la naturaleza de este fenómeno, cuando la luz
colorida producida por el metal en la flama la hicieron
incidir en un depósito óptico que separa la radiación
emitida por el metal, de la luz solar. En éste instrumento
que fue llamado espectroscopio ( espectroscopio=
observación del espectro )
Se observa que cada metal que emite radiación de diferente color, presenta líneas que
aparecen en diferentes posiciones en la pantalla o campo de observación, y esto es
independientemente de las condiciones en que se realiza el experimento así como de la
naturaleza de la sal metálica y únicamente depende del metal. Adicionalmente, la
intensidad de la línea está directamente relacionada a la concentración del elemento en
solución.
La espectroscopía atómica se puede dividir en tres
clases :

1. Espectroscopía de Absorción Atómica (EAA)

2. Espectroscopía de Emisión Atómica ( EEA)

3. Espectroscopía de Fluorescencia Atómica (EFA)

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN ATÓMICA EN FLAMA
AAS, (atomic absorption spectroscopy)

Cada metal absorbe luz a una longitud de onda característica,

por ejemplo:
 Para un mismo elemento:
Espectro de Absorción Espectro de Emisión

Los átomos absorben luz de la fuenta de Los átomos emiten luz longitudes de
radiación a longitudes de onda específicas onda específicas después de que fueron
expuestos a alguna fuente de exitación.
Elementos detectables por absorción atómica
Hollow cathode lamp: Lámpara de cátodo hueco
Spray chamber: Cámara de nebulización
Baffle: Dispositivo utilizado para restringir el flujo del fluidor su propagación.
Fume extraction: Campana extractora de humos
Burner: quemador
Drain: desechos
 LÁMPARA DE CÁTODO HUECO
• Consiste en un ánodo de tungsteno y un cátodo cilíndrico
cerradas herméticamente en un tubo de vidrio lleno con
neón / argón a una presión de 1 a 5 torr.

• El cátodo está constituido con el metal cuyo espectro se

desea obtener, o bien, sirve de soporte para una capa de
dicho metal.

• Una parte de estos átomos se excitan con la corriente que

pasa a través de ellos y, de este modo, al volver al estado
fundamental emiten su radiación característica,

• Los átomos metálicos se vuelven a depositar difundiendo

de nuevo hacia la superficie del cátodo o hacia las paredes
del vidrio.

Ionización Chisporroteo Exitación Emisión

Cuando se aplica un potencial del orden de 300V y corriente de 2 a 30 mA,
entre los electrodos se produce la ionización del gas.

Con las colisiones entre los iones positivos y el cátodo negativo, los cationes
gaseosos adquieren la suficiente energía cinética como para arrancar algunos de
los átomos metálicos de la superficie del cátodo y producir una nube atómica o
“chisporroteo”.

Los átomos arrancados se encuentran en estados excitados y de este modo al

volver al estado fundamental emiten sus radiaciones características.

Al final, los átomos metálicos se vuelven a depositar difundiendo de nuevo hacia la

superficie del cátodo o hacia las paredes del vidrio
 LÁMPARA DE DESCARGA SIN ELECTRODOS

Consiste en una bombilla de cuarzo bajo una atmósfera de gas inerte que contiene una pequeña
cantidad de metal deseado. La lámpara no contiene electrodos.

Cuando se aplica a la bombilla un campo de radiofrecuencia, el gas inerte es ionizado, originándose

los iones que son acelerados por la componente de radiofrecuencia del campo hasta adquirir la
energía suficiente para excitar a los átomos del metal.

• El espectro de emisión producido es típicamente mucho más intenso que la de las lámparas de
cátodo hueco.
• Requieren una fuente de poder por separado
• La cantidad de material de analito utilizado es mucho menor que las cantidades utilizadas en las
lámparas de cátodo hueco.
 LÁMPARAS DE MULTIELEMENTOS

Es posible tener lámparas de cátodo hueco de multielementos. Cuando existe

La seguridad de que no hay interferencias espectrales interelementos y cuando
Las propiedades metalúrgicas son adecuadas para hacer la aleación necesaria
se pueden construir cátodos con más de un elemento metálico. De ésta forma
una lámpara puede servir para determinar hasta seis elementos.

Ventajas:
• Costo

Desventajas:
• El haz de radiación producido no tiene la intensidad ni la pureza espectral
que una lámpara de un solo metal.
• Si se emplea para determinar un solo elemento, los otros elementos que
conforman el cátodo también se gastan.
Un típico instrumento de absorción atómica retiene varias lámparas
cada una para un elemento diferente. Las lámparas están alojadas en
una torreta giratoria para que lámpara correcta puede ser rápidamente
seleccionada.
QUEMADOR (PORTAMUESTRA)

La FLAMA tiene tres funciones básicas:

1. Permite pasar la muestra a analizar del estado líquido a estado gaseoso.

2. Descompone los compuestos moleculares del elemento de interés en átomos

individuales o en moléculas sencillas.

3. Excita estos átomos o moléculas.

Las condiciones que debe cumplir una llama para considerarla satisfactoria es que
tenga la temperatura adecuada y que en ella se forme un ambiente gaseoso que
permita las funciones mencionadas. Además, el ruido de fondo de la llama no debe
interferir las observaciones a efectuar.

Una llama típica consta de: cono interno, cono externo y zona entre conos como
podemos observar en la siguiente figura
QUEMADOR

La zona interconal es la llamada parte

caliente de la flama y en ella tiene
lugar una combustión completa.

Esta llama es la que se utiliza

prácticamente en análisis por
fotometría de flama y espectroscopía
de absorción atómica. La altura de esta
zona sobre el quemador varía
considerablemente con el tipo de
quemador, la naturaleza de los gases
utilizados y su velocidad de flujo.
Oxidantes y Combustibles comunes utilizados en espectroscopía de flama
QUEMADOR
Optimización de la flama - Alineación del quemador
NEBULIZACIÓN
QUEMADOR DE PREMEZCLADO
• Es el más utilizado debido a la uniformidad en la intensidad de la llama.
• En este, la solución de muestra, el combustible y el oxidante se mezclan antes de que
lleguen a la punta del quemador.

Ventajas: No hay turbulencia, no produce ruido, estabilidad

Desventajas: solo 5% de la muestra llega a la flama
Cámara de nebulización del quemador de premezclado

Un tubo capilar flexible conecta la solución al nebulizador. En la punta de el

capilar, la solución es nebulizado es decir, separada en pequeñas gotas. Las gotas
más grandes se drenan, mientras que los más pequeños llegan a la flama y se
vaporizan.

Difusor de flujo

cámara de mezcla con cabezal

del quemador
Nebulizador
Esfera de impacto

Tapa
QUEMADOR DE CONSUMO TOTAL

En éste, la muestra completa es atomizada en

la flama.

Desventajas: Produce ruido.

QUEMADORES
 ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA DE
HAZ SIMPLE (UN HAZ)

La función de el chopper rotante o modulador rotante es convertir la luz constante que

proviene de la lámpara, a luz pulsante que se utiliza para medir la intensidad de la luz absorbida
por los elementos sin interferencia por la radiación de la flama.
 ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA DE
HAZ SIMPLE (UN HAZ)

En un instrumento de doble haz, la radiación emitida por la fuente es dividida

por un modulador con espejos; esta pieza está girando, de manera que el haz
de la fuente pasa alternadamente por la muestra y referencia. Estos dos
haces son recombinados en un espejo especial (half-silvered mirror) pasan a
través de un monocromador y finalmente la señal es enviada por medio de un
fotomultiplicador.
 INTERFERENCIAS

• Físicas
• Químicas
• De ionización
• Espectrales
 INTERFERENCIAS FÍSICAS
Este tipo de interferencias está relacionado con la efectividad con que la solución es
transportada a la llama y son causadas por diferencias en las propiedades físicas de
las soluciones:

• viscosidad,
• tensión superficial o
• presión de vapor

Un ejemplo de estas interferencias se observa en la determinación de Mg y Cu en

presencia de ácido fosfórico. A mayor concentración de H3PO4 la viscosidad de la
solución aumenta, disminuyendo la velocidad de aspiración de ella y una fracción
menor llega a la llama, produciéndose una absorbancia menor de la muestra.

Solución

Preparar las soluciones estándar con los mismos componentes de la matriz

de la solución problema
 INTERFERENCIAS QUÍMICAS
Interferencia química es cualquier alteración en el número total de átomos
libres formados por unidad de volumen debido a la formación de compuestos
químicos termoestables. Las causas más comunes de éstas son:

• Disociación incompleta de la molécula formada o formación de una

sal difícil de fundir

El efecto del fosfato en la determinación de calcio es un ejemplo de este tipo

de interferencia. El calcio con el fosfato pirofosfato de calcio, que es estable en
una llama aire/acetileno.
Así la cantidad de átomos libres de calcio generados en la flama será menor
que la obtenida con una solución de calcio de igual concentración, pero sin
presencia de fosfato, provocando una disminución de la señal.

Existen otros componentes que dan también una disminución de la señal de

absorción del elemento de interés. Tal es el caso de silicatos, aluminatos y
pirosulfatos de calcio, magnesio, estroncio y bario.
 INTERFERENCIAS QUÍMICAS
• Reacción espontánea de los átomos libres con otros átomos o radicales
presentes en el medio ambiente.

Esta interferencia es causada por la formación de óxidos e hidróxidos u

ocasionalmente carburos o nitruros, debido a la reacción de los átomos
libres con los productos de la combustión de la llama.

Aproximadamente unos 30 metales no se pueden determinar con llama

aire/acetileno (ejemplo: aluminio, silicio, boro, elementos lantánidos, etc.).
La magnitud de la interferencia va a depender del tipo de estequiometría
de la llama.
INTERFERENCIAS QUÍMICAS
Las interferencias químicas pueden ser minimizadas por las siguientes formas:

• Empleo de llamas con mayores temperaturas. Como ejemplo tenemos la

flama acetileno/óxido nitroso, la que es capaz de descomponer totalmente los
compuestos.

• Agregar a la solución muestra un elemento “liberador” el cual forma con el

elemento interferente un compuesto más estable que con el elemento a
determinar.

• Agregar a la solución muestra un elemento “protector” que reaccione con el

analito y del cual más fácil descomponerse en la flama.
INTERFERENCIAS DE IONIZACIÓN
Un átomo neutro en su estado fundamental puede ser ionizado a temperaturas
elevadas. Así, el número total de átomos disponibles para la absorción de la radiación
por unidad de volumen disminuye, lo que produce una pérdida de sensibilidad.

Esta interferencia depende tanto de la temperatura de la llama como del potencial de

ionización del elemento en estudio.

Estas interferencias se pueden eliminar agregando a todas las soluciones estándar y a

la muestra un exceso del elemento que sea fácilmente ionizable en la llama, por
ejemplo: el sodio, potasio, litio o cesio, o mediante el empleo de una llama de menor
temperatura.
INTERFERENCIAS ESPECTRALES
En este tipo de interferencias, la radiación del elemento a determinar es
directamente influenciada, existiendo interferencias espectrales de línea e
interferencias espectrales de banda:

• Las interferencias espectrales de línea

Ocurren cuando hay superposición de dos líneas atómicas.

Un ejemplo se tiene en la determinación de trazas de zinc en una matriz de hierro,

debido a que la línea de absorción del hierro (213.86 nm) se superpone a la línea
de resonancia del zinc (213.86 nm).

Este tipo de interferencias no son frecuentes debido a la naturaleza específica. Si

se llegan a presentar se pueden eliminar seleccionando una segunda línea de
resonancia del elemento de interés (probablemente se obtenga mayor
sensibilidad o empleando una ranura del monocromador más angosta).
INTERFERENCIAS ESPECTRALES
• Las interferencias espectrales de banda

Se producen debido a la absorción de la radiación por moléculas o radicales, y

por dispersión de la radiación por sólidos.

Para ambos efectos, que en principio son distintos, se emplea el término absorción
de fondo. Aquí existe una pérdida de radiación no específica que lleva a
absorbancias mayores que la absorbancia obtenida por el analito. La señal está
compuesta por la absorción del elemento a determinar más la absorción no
específica.

La absorción molecular ocurre cuando una especie molecular en el atomizador posee

un perfil de absorción que se superpone al del elemento de interés.
INTERFERENCIAS ESPECTRALES
Los métodos más empleados en la corrección de la absorción de fondo (BG) son:

La forma más eficaz para medir la absorción de fondo es realizar la medición

empleando una lámpara de deuterio o de hidrógeno que emite un espectro
continuo bajo los 320 nm (es absorbida por las moléculas en la flama)

En estos instrumentos ambas fuentes radiantes (lámpara de cátodo hueco y de

deuterio son moduladas a la misma frecuencia, pero desfasadas, recorriendo el
mismo camino óptico a través de la muestra en el monocromador para llegar al
detector.

Absorción total de átomos de analito = Absorción total - Absorción de fondo

ANÁLISIS CUANTITATIVO
SENSIBILIDAD

Propiedad analítica que se define como la capacidad de un método para

discriminar entre concentraciones semejantes de analito. La sensibilidad de un
método analítico corresponde a la pendiente de la curva de calibración.

Unidades: 1 / Unidades de concentración

SEÑAL Y RUIDO
- Cada medida analítica tiene dos partes: la señal (que suministra información
acerca del analito) y el ruido (información no deseada).

- El valor promedio del ruido (N) de un instrumento suele ser constante e

independiente del valor de la señal (S). Por ello, para señales pequeñas el valor
del ruido da lugar a errores más importantes que en el caso de señales grandes.

- En general, se considera imposible detectar señales cuando la relación S/N es

menor de 2 o 3.
Existen dos tipos fundamentales de ruido:

- Ruido químico: proviene de la variación no controlable de las variables que

afectan la química del sistema estudiado (variaciones en temperatura, presión,
humedad, etc.).

- Ruido instrumental: Se origina en fenómenos eléctricos del propio instrumento

o en las variaciones en la radiación electromagnética que es recogida por los
componentes del instrumento (ruido ambiental).
LÍMITE DE DETECCIÓN
Existen distintas formas de definir el límite de detección de un método de acuerdo a criterios
estadísticos, basados en el cociente entre la magnitud de la señal de la medida y el ruido de
fondo producido por el instrumento o por el blanco analítico.

Límite de Detección IUPAC (Unión Internacional de Química Pura y

Aplicada)

Concentración de analito que origina una señal que puede diferenciarse

estadísticamente de un blanco analítico.

Límite de Detección del Método (LD):

Corresponde a la concentración mínima de un compuesto que puede ser

detectada en una matriz real, la cual es tratada incluyendo separaciones y
pretratamientos. Estadísticamente diferente a la señal producto del blanco
obtenido en las mismas condiciones.

LD = 3 ( Sy/x / m)
LD: Unidades de concentración
LÍMITE DE CUANTIFICACIÓN

Corresponde a la concentración mínima de un analito que puede ser

cuantificada en una matriz real, la cual es tratada siguiendo todas las etapas
del método empleado, incluyendo separaciones y pretratamientos. Esta
mínima concentración produce una señal cuantificable con un nivel de
confianza de 95%.

LD = 3 ( Sy/x / m)
APLICACIONES

• Minería
• Medicina (Análisis en muestras biológicas, como elementos en el fluido
cerebroespinal, Pb, etc).
• Industria
• Ambiental (Metales pesados, análisis de aguas, análisis de suelos).
• Petroquímica
• Farmacéutica
• Alimentaria (ej: análisis de contaminantes por oligoelementos, análisis de vinos,
aceites, detección de Zn, Pb, Sn As).
• Metalurgia (Aleaciones, generalmente Fe, Pb, Ni, Cr, Mn, Co,Sb).
• Forense (Pb, Cu, Sb, Ba, provenientes de pólvora y proyectiles).
 ESPECTROFOTOMETRÍA DE
ABSORCIÓN ATÓMICA CON HORNO DE GRAFITO
( ELECTROTÉRMICA )
 ESPECTROFOTOMETRÍA DE
ABSORCIÓN ATÓMICA CON HORNO DE GRAFITO GFAAS
( ELECTROTÉRMICA )
Las muestras e depositan en un tubo de grafito, que es
calentado eléctricamente para vaporizar y atomizar el
analito.
• Esta técnica fue el resultado de contar con una tecnología que
empleara mínimos volúmenes de muestra, inferiores a 100
microlitros o directamente sobre muestras orgánicas líquidas.

• Tiene una sensibilidad de hasta ppb.

 PROCEDIMIENTO
Secado.

Una vez que la muestra ha sido inyectada en el tubo de grafito, se calienta a una
temperatura algo inferior al punto de ebullición del solvente (usualmente entre 80 a
180 ºC). El objetivo de esta etapa es la evaporación del solvente. La muestra
inyectada (2-20 μL) en el horno de grafito es sometida a una temperatura algo inferior
al punto de ebullición del solvente (80-180 ºC). Aquí se evaporan el solvente y los
componentes volátiles de la matriz.

Calcinado.

El próximo paso del programa es el calcinado por incremento de la temperatura, para

remover la mayor cantidad de material (materia orgánica) de la muestra como sea
posible, sin pérdida del analito. La temperatura de calcinación usada varía típicamente
en el rango de 350 a 1600 ºC. Durante el calcinado, el material sólido es
descompuesto mientras que los materiales refractarios, como por ejemplo los óxidos,
permanecen inalterados.
Atomización.

En esta etapa, el horno es calentado rápidamente a altas temperaturas

(1800-2800 ºC) para vaporizar los residuos del paso de calcinado. Este
proceso lleva a la creación de átomos libres en el camino óptico. Se mide la
absorbancia durante este paso. La temperatura de atomización depende de
la volatilidad del elemento. Usualmente se agrega una cuarta etapa para
limpieza del horno a una temperatura algo superior a la temperatura de
atomización. Cuanto mejor sea la separación de los elementos
concomitantes del analito, mejor será la atomización y la determinación
estará mas libre de interferencias.
 DESCRIPCIÓN GENERAL DEL HORNO DE GRAFITO

Consiste en un cuerpo de acero con un par de contactos eléctricos, que tiene

en su parte central una cavidad para que sea colocado un tubo de grafito.

El tubo de grafito es un tubo cilíndrico hueco de aprox. 4 cm de largo y un cm

de diámetro, con un orificio en el centro para que la muestra que se desea
analizar sea inyectada automáticamente..