ENDOTELIO

ASPECTOS MOLECULARES Y DINÁMICA FUNCIONAL

Profesor
Carlos Castro Rojas
castrocarlos@unbosque.edu.co
 Ateroesclerosis HTA

Insuficiencia
cardiaca

Diátesis
hemorrágica Endotelio
Crecimiento de
tumores

Trombosis
Artritis
Objetivos

1. Reconocer la importancia del endotelio vascular como un órgano esencial para el control en el
tránsito de células y moléculas a otros tejidos, el control del tono vascular, la regulación de la
hemostasia y el control de la hemodinamia.

2. Identificar la diferencias estructurales del endotelio vascular asociado a los vasos sanguíneos
implicados en el transporte de sustancias hacia y desde diferentes órganos.

3. Comprender los mecanismos moleculares e identificar los principales agentes bioquímicos

asociados a los procesos fisiológicos en los que interviene el endotelio vascular.

4. Identificar las causas de la disfunción endotelial y establecer la relación entre esta última y las
patologías más frecuentes del sistema cardiovascular.
 Aspectos funcionales del endotelio
 Homeostasis vascular

 Vasculogénesis/Angiogéneisis

 Arteriogénesis

 Transporte de sustancias hacia y desde la sangre a los diferentes tejidos

 Reconocimiento y señalización celular

 Respuesta inmunológica

 Respuesta inflamatoria

 Control del tono vascular

Estructura interna de los vasos sanguíneos – sistema cardiovascular
 Cara abluminal
Cara luminal

Estructura interna de los vasos sanguíneos – sistema cardiovascular

Estructura de los vasos sanguíneos
 Sección transversal de una arteria muscular H&Ex350

 Las fibras elásticas son ricas en elastina y evitan la

proliferación del músculo liso.

Teniendo en cuenta el calibre de las arterias y el grosor de la túnica media,

no es posible nutrir las células del músculo liso solo por difusión
de compuestos. => Vasa Vasorum (vasos que nutren vasos)
Sección longitudinal pared de la aorta H&E x65

Estructura de los vasos sanguíneos

 Estructura interna de la pared vascular de una arteria (corte transversal)

a b

Sección transversal a poco aumento de una

arteria muscular de pequeño calibre. ocreína x65
Estructura interna de los capilares sanguíneos (corte transversal) a. continuo, b. fenestrado

Estructura de los vasos sanguíneos

 La célula endotelial

Células endoteliales en cultivo en monocapa. Micrografía electrónica 12000X

Sección transversal de
 Uniones célula‐célula  Orgánelos un capilar muscular.
Micrografía electrónica.
 Uniones célula‐matriz extracelular 10000X. E= eritrocito.
 Recubre la superficie interna de:

‐ Vasos sanguíneos (endotelio vascular)

‐ Cavidades cardíacas
‐ Vasos linfáticos (endotelio linfático)
‐ Cuerpos cavernosos

 Tiene una función glandular autocrina y paracrina

 Se organiza en monocapas celulares de células

escamosas que forman un epitelio plano simple.
Estructura interna de la pared vascular de
un vaso sanguíneo (corte transversal)

Aspectos generales del tejido endotelial

Función de barrera: evita la exposición directa de la membrana
basal al torrente sanguíneo.

Control del paso de sustancias desde la sangre a los tejidos

(permeabilidad y flujo transvascular).

Regulación hemodinámica: Regula el tono y

la función vascular.

Regula el crecimiento del músculo liso vascular.

Regula la coagulación de la sangre y la hemostasia.

Regula la adhesión de células sanguíneas (leucocitos)

a la pared vascular.

Participa en la angiogénesis. Estructura interna de la pared vascular de

un vaso sanguíneo (corte transversal)
Participa en la producción y modelamiento de la matriz extracelular.

Participación del endotelio en procesos fisiológicos

Sustancias secretadas por el endotelio y endotelio activado:
 Angiotensina II
 Prostaciclina (PGI2)
 Bradicinina
 Sustancia P
 Histamina
 Oxído Nítrico (NO)
 Factor Hiperpolarizante Derivado de Endotelio (EDHF)
 Endotelina (ET)
 Prostaglandina H (PGH2)
 Tromboxano A2 (TXA2)
 Heparan Sulfato
 Factor de Crecimiento Transformante β (TGF β)
 Factor de Crecimiento Endotelial Vascular (VEGF)
 Factor Básico de Crecimiento de Fibroblastos (bFGF)
 Factor de Crecimiento Derivado de Plaquetas (PDGF)
 Activador de Plasminógeno Tisular (t‐PA)
 Inhibidor del Activador de Plaminógeno‐1 (PAI‐1)
 Moléculas de Adhesión de Monocitos (ICAM‐1, VCAM‐1,
ELAM, E‐Selectina, PECAM) Estructura interna de la pared vascular de
 Especies Reactivas de Oxígeno (Anión Superóxido, Peróxido un vaso sanguíneo (corte transversal)
de Hidrógeno, Anión Hidróxilo)
 Interleuquinas (IL‐1,4,6,8,10) y Citocinas (TNF‐α, NF‐κB).
Aspectos generales del tejido endotelial
SNC, Piel, Corazón, Pulmón Glándulas, Intestino, Riñón Hígado y Bazo

Organización estructural del endotelio

 Micrografía electrónica de transmisión.
Micrografía electrónica de barrido. Endotelio fenestrado
Sección de endotelio fenestrado en capilares
en capilares sanguíneos renales
sanguíneos de los glomérulos renales. Nótese la
(poros aprox. 25 nm de diámetro)
presencia de una lámina basal gruesa.

Composición de la lámina basal (capa sub‐endotelial): Colágeno IV, Colágeno V, Proteoglícanos del heparan sulfato,
Glucoproteínas, Laminina , Enactina.
¿De qué manera participa la lámina basal en la difusión de proteínas desde el endotelio fenestrado?

Organización estructural del endotelio

Micrografía electrónica de barrido. Endotelio discontinuo (sinusoide) La presencia de un endotelio vascular
en capilares sanguíneos hepáticos. Nótese la ausencia de lámina basal discontinuo sin lámina basal en los
capilares hepáticos facilitan el flujo de
macromoléculas hacia y desde la
sangre.

Organización estructural del endotelio

 Glicocálix

A B

Micrografía electrónica de transmisión. A. Endotelio mostrando el glicocálix.

B. Endotelio después de ser despojado del glicocálix (nótese la extravasación tisular de plasma)

Composición= Proteoglicanos unidos a glusosaminoglicanos (permeable a agua, oxígeno y pequeñas moléculas)

Organización estructural del endotelio

Mecanismos de crecimiento de vasos sanguíneos

A. Arteriogénesis: iniciado por cambios en el flujo

sanguíneo (incremento de las fuerzas de cizalla)
por oclusión (estenosis) de una arteria mayor.
Implica el remodelamiento de arteriolas
colaterales contiguas a la lesión con la disrupción
de la lamina elástica y la migración de células
musculares lisas.

B. Angiogénesis: Crecimiento de vasos sanguíneos

a partir de vasos pre‐existentes. Desencadenado
principalmente por eventos de hipoxia a través
del factor inducible por hipoxia (HIF‐1).

C. Vasculogénesis: Proceso de formación de vasos

sanguíneos de novo. Depende del reclutamiento
y diferenciación de células progenitoras o trans‐
diferenciación de otras células.
Vasculogénesis
Proceso de formación de nuevos vasos sanguíneos a partir de células precursoras:

 Hemangioblastos ‐> Angioblastos a partir del mesodermo, durante el desarrollo embrionario.

 Células progenitoras endoteliales (EPC) en adultos.
 Arteriogénesis

 Identificación de estrés de flujo (citoesqueleto)

 Reclutamiento de monocitos
 Producción de citoquinas y TNF‐α (monocitos)
 Activación de células endoteliales
 Remodelamiento de la lámina basal
 Proliferación y migración de células musculares
lisas
 Crecimiento de las célula endoteliales
 Engrosamiento de arteriola

a. Arterial femoral de ratón.

b. Arteria femoral de ratón después de ser ocluída.

Arteriogénesis
Angiogénesis

hipoxia

VEGF: Factor de crecimiento endotelial vascular

TGFβ: Factor de crecimiento transformante β
uPAR: Receptor del activador de plasminógeno tipo uroquinasa
MMPs: Metaloproteasas de matriz extracelular
Ang‐1: Angiopoyetina‐1 (se une al receptor Tie‐2)

Angiogénesis = formación de vasos sanguíneos a partir de vasos ya formados

 Pericitos

 Células periendoteliales presentes en la

microvasculatura de venas y arterias.

 Tienen un papel estructural y de

soporte para los capilares sanguíneos.

 Participan activamente en la
angiogénesis, guiando los tubos
germinativos.

 Tienen funciones vasodilatadoras y

vasoconstrictoras en los capilares.

 Son esenciales en la organización

estructural y funcional de la BHE.
Célula endotelial de punta

Célula endotelial tallo

Angiogénesis en capilares en la retina de ratón.

Las flechas indican las células endoteliales de punta

Angiogénesis
Angiogénesis y Cáncer

Lucentis® (ranibizumab)
Avastin ® (bevacizumab)

lapatinib, sunitinib, sorafenib, axitinib,

pazopanib.

Angiogénesis = formación de vasos sanguíneos a partir de vasos ya formados

Control del paso de sustancias desde la sangre a los tejidos (permeabilidad vascular).
Las células del endotelio vascular son un tipo de células epiteliales polarizadas especializadas

Vías para la difusión transcapilar de solutos de

Pequeño tamaño.

Fisiología del endotelio vascular

Control del paso de sustancias desde la sangre a los tejidos (permeabilidad vascular).
Las células del endotelio vascular son un tipo de células epiteliales polarizadas especializadas
Vías para la difusión de solutos de gran tamaño

Simionescu, M. et al.1987. physiology. 2:97‐100.

Fisiología del endotelio vascular

Caveolas
Trancitosis mediada por caveolas en células endoteliales

Caveolas
 Células endoteliales en cultivo. Micrografía electrónica de transmisión (12000 X)

 Uniones célula‐célula  Organelos

 Uniones célula‐matriz extracelular

Células Endoteliales
 Colágeno IV, proteoglicanos,
Glicoproteínas (fibronectina,
laminina, elastina, tenascina,
trombospondina, vitronectina)

Filamentos y proteínas contráctiles del citoesqueleto de las células endoteliales

 Formas de unión celular (cell junctions):

 Unión estrecha/oclusiva (tight

junction/zonula occludens)
 Unión adherente (adherens junction)
 Desmosoma (desmosome)
 Hemidesmosoma (hemidesmosome)
 Uniones canal (gap juncion)

Tipos de unión intercelular entre células epiteliales

 Diapédesis

PECAM‐1:Molécula de adhesión celular endotelio‐plaqueta‐1; JAMs: Moléculas de adhesión conectoras; FN: Fibronectina,
VN: Vitronectina; Ang 1/2: Angiopoyetina 1/2; VEGF: Factor de crecimiento endotelial vascular; TIE2: Receptor 2 endotelial
tipo tirosina quinasa; eNOS: Óxido nítrico sintasa endotelial; MMP=Metaloproteasas de membrana.

Organización estructural de las células del endotelio vascular

El grado de permeabilidad
en las uniones estrechas
depende del tipo de
Claudina, Ej. en los
capilares cerebrales
Claudina 5 forma uniones
muy fuertes, que impiden
incluso el paso de
moléculas pequeñas.

Organización de las uniones intercelulares entre las células endoteliales

Endotelio y estructuras conexas en el SNC
Vl= vesícula en cara luminal
Va=vesícula en cara abluminal
Vc=vesícula en citoplasma
Ec=célula endotelial
Bl=lámina basal
P=pericito

Las flechas indican la presencia de caveolas – transporte transcelular

Presencia de vesículas y caveolas en el endotelio vascular

Transporte de sustancias en el endotelio
Aspectos funcionales del endotelio

 Transporte de
sustancias hacia y
desde la sangre al
espacio intersticial

Barrera hemato‐encefálica
Transporte transcelular:
 Transportador Glut1 (Glucosa).

 Transportador de aminoácidos
Catiónicos.

 Transportador de insulina.
Aspectos funcionales del endotelio

 Transporte de
sustancias hacia y
desde la sangre al
espacio intersticial
Endotelio vascular periférico
 Transporte paracelular:
 Transporte transcelular:
 Caveolas (Caveolina): Ej.: Transporte de insulina
(exógena), transporte intracelular de colesterol
de novo.

 Transporte mediado por clatrina: Ej.: Transporte

De C‐LDL.
 Homeostasis vascular

Tono vascular Vasoconstricción Vasodilatación

Crecimiento Factores estimulantes Factores Inhibidores

Hemostasia Factores procoagulantes Factores anticoagulantes

Participación del endotelio en la homeostasis vascular

 Moduladores de crecimiento

Estimulantes Inhibidores

Factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) Heparan sulfato

Factor de crecimiento fibroblástico (FGF) Factor de crecimiento transformante β (TGF‐ β)
Factor de crecimiento 1 similar a insulina (IGF‐1) Óxido nítrico (NO)
Interleucina 1 (IL‐1) Prostaciclina (PGI2)
Endotelina Bradicinina
Angiotensina II

Sustancias producidas/liberadas por las células endoteliales

 Agregación plaquetaria Adhesión leucocitaria

PGI2
ASA X

TXA2: Tromboxano; PGI2: Prostaciclina; NO: Óxico nítrico; AA: Ácido araquidónico; L‐Arg: Arginina; ET: Endotelina; VCAM:
Molécula de adhesión a células vasculares; ICAM: Molécula de adhesión intercelular; PDGF: factor de crecimiento
derivado de plaquetas; TGFβ:factor de crecimiento transformante β; FGF: factor de crecimiento de fibroblastos; VEGF:
Factor de crecimiento vascular endotelial. ASA= ácido acetilsalicílico.
Participación del endotelio en diversos procesos fisológicos
 Reguladores de la hemostasia y factores trombolíticos

Antitrombóticos/trombolíticos Protrombóticos/trombogénicos

Activador del plasminógeno tisular (t‐PA) Factor inhibidor del activador del plasminógeno tisular (FIPT‐1)
Trombomodulina Factor de von Willebrand (fvW)
Heparan sulfato Trombina
Óxido nítrico (NO) Factor activador de plaquetas (PAF)
Prostaciclina (PGI2) Factor tisular (tromboplastina)
Inhibidor del factor tisular
Molécula de adhesión celular endotelio‐plaqueta‐1(PECAM‐1)

Sustancias producidas/liberadas por las células endoteliales

TF = Factor tisular

Factores protrombóticos y antitrombóticos producidos por el endotelio vascular

 Fases de la hemostasia (coagulación) en
respuesta al daño endotelial
(tromboplastina)

Endotelio

Subendotelio

PK: Precalicreina KAPM: Kininógeno de alto peso molecular

α‐2PI: α2‐antiplasmina FL: fosfolípidos
FIPT‐1: Factor inhibidor del activador de plasminógeno tisular
Entramado de fibrina tPA: activador del plasminógeno tisular

fvW: Factor de von Willebrand

ADP: Adenosina difosfato

Participación del endotelio vascular en la hemostasia

 Fases de la hemostasia (coagulación) en
respuesta al daño endotelial

Endotelio

Subendotelio

Entramado de fibrina

Participación del endotelio vascular en la hemostasia

 Vías de la cascada de coagulación

(Tromboplastina)

Participación del endotelio vascular en la hemostasia

 Regulación de la hemostasia: fibrinólisis

[Uroquinasa, Factor Activador del Plasminógeno Tisular (t‐PA)]

Tomada del manual Merck.

Participación del endotelio vascular en la hemostasia

 Regulación de la hemostasia: fibrinólisis

Participación del endotelio vascular en la hemostasia

 Célula endotelial activada vs Célula endotelial no activada

Equilibrio de las actividades pro y anticoagulantes en el endotelio vascular

 Sustancias vasoactivas
Acción sobre el musculo liso vascular
Vasodilatadores Vasoconstrictores

Óxico nítrico (NO)

Endotelina (ET‐1)
Factor hiperpolarizante derivado de endotelio (EDHF)
Angiotensina II
Prostaciclina (PGI2)
Tromboxano A2
Bradicinina
Prostaglandina H2
Acetilcolina
Ácido araquidónico
Serotonina
Trombina
Histamina
Nicotina
Sustancia P
Adenosina

Estimulación de la síntesis de vasodilatadores por: moléculas señalizadoras (Acetil colina, Bradicinina),

hipoxia, estrés mecánico (fuerza de cizalla), deformación celular.

Sustancias producidas/liberadas por las células endoteliales

 Sustancias vasoactivas
Acción sobre el musculo liso vascular

COX=ciclooxigenasa
NOS=óxido nítrico sintasa
PLA2=fosfolipasa A2

Estimulación de la síntesis de vasodilatadores por: moléculas señalizadoras (Acetil colina, Bradicinina),

hipoxia, estrés mecánico, deformación celular.

Sustancias producidas/liberadas por las células endoteliales

l‐Arg, l‐arginina; AA, ácido araquidónico; ET, endotelina; EDHF, factor hiperpolarizante derivado del endotelio; NO,
óxido nítrico; PGI2, prostaciclina; • O2−, anión superóxido; TXA2, tromboxano A2; cGMP, monofosfato cíclico de
guanosina; cAMP, monofosfato cíclico de adenosina.

Control del tono vascular

 OXIDO NITRICO (NO) = factor relajante derivado del endotelio (EDRF)
 Es producido y liberado por células endoteliales a
partir de arginina por acción de eNOS =oxido nítrico
sintasa endotelial.

 Su producción es estimulada por factores mecánicos

(fuerza de cizalla en las células) y humorales
(Bradicinina, Angiotensina 1, ET‐1, trombina,
histamina, catecolaminas).

 Tiene acción paracrina.

 Actuando sobre el músculo liso es un potente

vasolidatador.

 Inhibe la agregación plaquetaria, inhibe la

proliferación del músculo liso, inhibe la adhesión de Las especies reactivas de oxígeno (ROS) inhiben al NO
monocitos y leucocitos a las células endoteliales y la
síntesis de componentes de la matriz extracelular.
Control del tono vascular
 El NO es el principal mediador endotelial vasolidatador de factores físicos y humorales
(factor de respuesta)

eNOS=Óxido Nítrico Sintasa Endotelial

GC= Guanilato Ciclasa
Toblli, J.E et al. Vascular Health and Risk Management 8(1):151‐60
El sistema Bardikinina‐Angiotensina es uno de los principales reguladores de la función del NO
 El sistema Bardikinina‐Angiotensina es uno de los principales reguladores de la función del NO

IECA

BPPs
(péptidos potenciadores de bradikinina)

Captopril
Primer IECA de uso clínico

Tratamiento de la HTA (hipertensión arterial) IECA=Inhibidor de la enzima convertidora de angiotensina

 OXIDO NITRICO (NO)
Los nitratos y la nitroglicerina son un grupo de compuestos utilizados en la farmacoterapia de la
angina de pecho, una enfermedad causada por la obstrucción de las arterias coronarias.

Nitratos /nitroglicerina Óxido nítrico (NO)

Músculo liso vascular

Relajación

Incremento del
aporte sanguíneo Vasodilatación
al corazón
 FACTOR HIPERPOLARIZANTE DERIVADO DEL ENDOTELIO (EDHF)

 Es producido y liberado por células endoteliales.

 Ejerce un efecto hiperpolarizante en la membrana celular de las células del músculo liso
incrementa la permeabilidad a K+ => relajación del músculo liso ‐> vasodilatación.

 Tiene acción paracrina.

 Su liberación es estimulada por acetilcolina (ACh) y bradikinina.

Control del tono vascular

 Endotelinas (ET)

 Existen tres isoformas ET‐1, ET‐2 y ET‐3.

 Su expresión se ve favorecida por: IL‐1, TGF‐β, hiperglicemia, estrés de rozamiento.

 Tienen acción vasoconstrictora actuando vía paracrina sobre el músculo liso ET‐2>ET‐1>ET‐3.
También tiene acción autocrina. Su mecanismo de acción depende del aumento de la [Ca2+]i

 Se estimula su producción por la elevación de calcio intracelular y por hipoxia.

 Su producción es inhibida por la fuerza de rozamiento sobre la célula endotelial.

 Participa en el crecimiento (actividad mitogénica) del tejido muscular liso, cardiovascular y renal.

Control del tono vascular

 Moduladores de la inflamación

Moduladores de adhesión molecular

Moléculas de adhesión leucocito‐endotelio (ELAM)

Moléculas de adhesión intercelular (ICAM‐1 e ICAM‐2)
Moléculas de adhesión vascular‐celular (VCAM)

Citocinas proinflamatorias Citocinas antiinflamatorias

Interleucina 10 (IL‐10)
Factor de crecimiento tumoral α (TNF‐ α) Inhibidor del factor Nuclear κB (IF‐ κB)
Interleucina 1 (IL‐1)
Interleucina 6 (IL‐6)
Factor Nuclear κB (NF‐ κB)
Interferón γ

Sustancias producidas/liberadas por las células endoteliales

Citocinas inflamatorias
incrementan la
permeabilidad del
endotelio:
Reorganización de
uniones adherentes y
uniones estrechas.

El proceso de difusión de células

a través del endotelio = Diapédesis

Diapédesis de leucocitos a través de las uniones intercelulares endoteliales

 En respuesta a citoquinas pro‐inflamatorias:
TNFα e IL-1
Aquí participan
Selectinas (P‐
selectina, E‐
selectina/ELAM‐1)
e Integrinas
Factores constitutivos

Aquí participan
VCAM‐1 e ICAM‐1 y
MCP‐1(proteína
quimioatractora de
monocitos)
Factores inducibles por citoquinas

Diapédesis de leucocitos a través de las uniones intercelulares endoteliales

 La disfunción endotelial ocupa un papel central en la enfermedad cardiovascular

MI=infarto de miocardio
CHF=Falla cardiaca congestiva
ESRD=Enfermedad renal terminal
Causas y consecuencias de la disfunción del endotelio vascular
Formación de la placa
de ateroma en el
endotelio vascular

La ateroesclerosis como una forma de disfunción endotelial

La ateroesclerosis como una forma de disfunción endotelial
Factores de riesgo asociados a alteraciones de la función endotelial y daño cardiovascular
Alteraciones en la angiogénesis
 Lecturas recomendadas

 Ceballos Reyes, G. y Sierra Ramírez, JA. Capítulo 40: El endotelio vascular: aspectos
morfofuncionales. En: Bioquímica. Hicks Gómez, Juan. 2Ed. Mc Graw Hill. 2007.

 Lahera, V. ; de las Heras, N.; Cachofeiro, V.; López Jaramillo, P. Capítulo 40: Fisiología
del endotelio y la pared vascular. En: Fisiología Humana. Fernández‐Tresguerres,
Jesús A., et al. 4Ed. Mc Graw Hill. 2010. [acceso en línea a través de Access
Medicine]