➢ Escuela o Programa: Escuela de Recursos Naturales.

➢ Carrera: Técnico en Calidad de los Alimentos

➢ Asignatura/Sección: Equipamiento de Análisis –ALR2141

Clase 5a: 17-10-2023

Laboratorios de Análisis de Alimentos: tipos de
siembra en medios de cultivo

➢ Docente: Miriam Troncoso H.

➢ Correo: mir.troncoso@profesor.duoc.cl

Sede Puente Alto

 Recordemos
clase anterior……

Link pendiente: Preparación de medios de cultivo

https://www.youtube.com/watch?v=Gpqxz6pklHk
Contenidos de hoy….

✓ Siembra de diferentes medios de cultivos

 En el laboratorio para aislar una bacteria
patógena o indicadora requiere…….
Temperatura
Atmósfera (O2)

Sólido Líquido

Nutrientes Aw pH
 Requerimientos para hacer una siembra de
cultivo en el laboratorio

✓ Área de trabajo sanitizada

✓ Mechero

✓ Asa de inoculación (pipeta)

✓ Medio de cultivo

✓ Lápiz marcador
 Técnicas de siembra

• En estría
• En profundidad
• Por agotamiento
Prepararación superficie o área de trabajo:

• Limpiar y sanitizar superficies.

• Limpieza en seco.
Cloro
Enjuague
Alcohol 70º

*Usar papel desechable.

Diámetro
esterilidad
Mechero Bunsen
Medios de cultivo clasificados por su uso
Líquido 1. De transporte
Líquido 2. De conservación
Líquido 3. De dilución; de re-suspensión
Líquido 4. De revivificación
Líquido 5. De pre-enriquecimiento previo; de enriquecimiento
a. De enriquecimiento selectivo
b. De enriquecimiento no selectivo
Sólido 6. De aislamiento
a. De aislamiento selectivo
b. De aislamiento no selectivo
c. Selectivo cromogénico; selectivo
fluorogénico
Sólido 7. Diferencial; de caracterización
Sólido 8. De identificación
Sólido 9. De recuento Define tipo de ensayo en el control de calidad
Sólido 10. De confirmación
Líquido 11. Con neutralizante
Líq. Y So. 12. De usos múltiples
Líq. Y Sol. 13. De referencia
1. Siembra en medios sólidos

1.1 Placas

1.2 Tubos con agar inclinado

1.3 Medios semisólidos

Siembra o Inoculación de tubos

Medio sólido a líquido o semisólido

Medio líquido a líquido o semisólido
 1.1 Siembra en placa

✓ Por diseminación en superficie

✓ Por mezcla (o incorporación) del inóculo con el

medio de cultivo

Ej:
Agar Sangre
Agar MC
Agar
Recuento
Agar VRBG
1.1 Siembra por diseminación en superficie
Siembra por estría
La técnica de siembra en
estría es usada para aislar
cepas puras en una placa ✓ Recta
Petri a partir de un inóculo o ✓ Continua
muestra con diferentes ✓ En cuadrante
especies. ✓ En cuadrante radial
✓ Cruzada
Siembra por agotamiento
Colonias aisladas
1.1 Siembra por diseminación en superficie
Siembra por extensión con asa Drigalsky
• El objetivo es aislar colonias

• Se deposita sobre la superficie de la

placa una gota ó 0,1 ml de una
determinada dilución .

• Se extiende con ayuda de asa de

Drigalsky o rastrillo, estéril en todas
las direcciones hasta que esté
completamente seco. Se aplica para realizar
• Las células diseminadas sobre la recuentos de diluciones
superficie formaran colonias aisladas
1.1 Siembra por incorporación, inmersión, mezcla
o vertido en placa
• Esta técnica permitir el cálculo del número o recuento de
bacterias presentes en una muestra.
• Se realizan diluciones seriadas de la muestra y se siembra cada
una de ellas.
• Se agrega el medio estéril a aprox 45°C, se mezcla por rotación,
se deja solidificar y luego incuba.
Recuento por inmersión o vertido en
placa

10-1 10-2 10-3 10-4

Vertido Diseminación
Videos

https://www.youtube.com/watch?v=W6xpPJZIb1E

https://www.youtube.com/watch?v=6NckVGCobwY

https://www.youtube.com/watch?v=fg8oY300cvk
1.2 Inoculación de tubos con agar inclinado
Por punción y estría en tubo

Ej:
Agar TSI
Agar LIA
Agar Urea
1.3 Siembra en medio semisólido

• Siembra en picadura o por punción

 2. Siembra en medios líquidos

✓ Habitualmente se realiza en
tubos, frascos o Erlenmeyers

✓ Siembra con asa circular o

pipeta

✓ No sirve para aislamiento de MO

(No forma colonias)

✓ Permite obtener una población

microbiana grande
Ej.:
Caldos de pre-enriquecimiento
Caldos de enriquecimiento
2. Siembra en medios líquidos

• Líquido a Líquido • Sólido a líquido

Primera etapa del diagnóstico bacteriológico:
Observación de cultivos bacterianos - Fenotipo

• Forma
• Margen
• Elevación
• Color
• Olor
• Tamaño
• Apariencia
¿Qué hemos aprendido el día de hoy?

Conclusión final
➢ Escuela o Programa: Escuela de Recursos
Naturales.
➢ Carrera: Técnico en Calidad de los Alimentos
➢ Asignatura/Sección: Equipamiento de Análisis.

¡Muchas gracias por tu participación!

➢ Docente: Miriam Troncoso H.

➢ Correo: mir.troncoso@profesor.duoc.cl

Sede Puente Alto