Sntesis de ARN. El ARN se sintetiza sobre un molde de ADN mediante un proceso llamado transcripcin del ADN.

Las molculas de ARN son sintetizadas por encimas ARN polimerasa que generan una copia de ARN a partir de una secuencia de ADN. En procariotas hay un nico tipo de ARN polimerasa y en clulas eucariotas hay tres tipos: ARN polimerasa I: transcribe los ARN ribosmicos de gran tamao. ARN polimerasa II: transcribe los ARN mensajeros y algunos ARN pequeos como por ejemplo los espleiceosomas. ARN polimerasa III: transcribe los ARNt y ARNr de pequeo tamao. La ARN polimerasa comienza a sintetizar cuando encuentra una secuencia de ADN llamado promotor y termina cuando encuentra una secuencia de ADN llamada seal de terminacin. Despus de unirse al promotor, la ARN polimerasa abre la doble hlice de ADN en el lugar donde se va a producir la transcripcin. Una de las dos cadenas de ADN actua como patrn y va a depender de la regin promotora a la que se une ala encima. La molcula de ADN solo se sintetiza en la direccin 5 3 por esto la orientacin del promotor indica la cadena de ADN que transcribe. La ARN polimerasa se desplaza progresivamente a lo largo del ADN, desenrollando la cadena de ADN y sintetizando el ARN que cada vez de hace ms largo. A medida que se va sintetizando la molcula, la cadena de ADN se va enrollando en doble hlice. Cuando llegamos al punto de terminacin, el ARN se desprende y los enzimas se liberan. Cuando llegamos al punto de terminacin, el ARN se desprende y los encimas se liberan. La ARN polimerasa trabaja en cadena: sobre el ADN hay varias ARN polimerasas y desde un principio el ARN sintetizado se une a las protenas que varan segn el ARN sintetizado. En la transcripcin intervienen factores de naturaleza proteica de tres tipos: 1.- Factores de transcripcin: son diversas protenas que se unen al ADN promotor convirtiendolo en funcional. 2.- Factores de iniciacin: es una de las subunidades de ARN polimerasa y se libera tras la sntesis de los ocho primeros nucleotidos. 3.- ARN polimerasa tras la liberacin del factor de iniciacin y sirven para factores de elongacin: estos se incorporan a la molcula de la elongacin de la cadena de ARN. En procariotas el ARN sintetizado va actuar como un ARNm maduro. En eucariotas va a sufrir un proceso de maduracin. Tanto en eucariotas como en procariotas hay una serie de protenas reguladoras que ayudan a determinar que genes transcriben. Hay cientos de estas protenas, unas son activadoras y otras inhibidoras o represoras. El cdigo gentico. Cada aminoacido est especificado por un triplete de nucletidos de la molcula de ARNm. Este recibe el nombre de codn. El triplete complementario, situado en el ARNt, se llama anticodn. El ARN est compuesto de catro tipos de nucletido por lo que existen 64 posibles secuencias distintas de tres nucletidos. Tres de esas secuencias son tripletes de terminacin que determinan el final de una cadena polipeptdica. Estos codones son: UAA-UGAUAG. Los 61 tripletes restantes codifican los 20 as. Cada a pode estar

codificado por mas de un triplete. generalmente las dos primeras bases se mantienen constantes y la tercera vara. Se dice que el cdigo xentico es degenerado porque varios tripletes poden codificar al mismo a. Esta degeneracin implica que exista ms de un ARNt para algunos as. En concreto hay 31 ARNt. El cdigo genetico est altamente conservado, siendo igual en organismos tan diversos como bacterias, plantas y animales. Sin embargo, las mitocondrias tienen un cdigo gentico con algunas diferencias. Ribosomas. Los ribosomas estn formados por ARNr y protenas. Su funcin es la sntesis proteica. Localizacin: En procariotas se encuentran libres en el protoplasma y en eucariotas poden estar libres en el citoplasma o adheridas a las membranas del retculo endoplasmtico. Tambin hay ribosomas en la matriz de las mitocondrias y en el estroma de los cloroplastos. Tipos: se caracterizan por su coeficiente de sedimentacin. Este es un ndice da velocidad de la sedimentacin y se expresa en unidades SUEDBERG (S). Asi, los ribosomas de eucariotas son de 80 S, los de procariotas de 70 S y los de cloroplastos y mitocondrias oscilan entre 55 y 80 S. Cada ribosoma est formado por dos subunidades: la subunidad mayor oscila entre 35 y 60 S y la subunidad menor entre 25 y 40 S. La subunidad menor se une al ARNm y al ARNt mientras la subunidad mayor cataliza la formacin de los enlaces peptdicos (son los que se forman en la unin de los as). Los ribosomas contienen cuatro lugares de unin para el ARN. Uno para el ARNm y tres para el ARNt. Un lugar llamado lugar de unin peptidil_ARNt o lugar P que acoge la molcula de ARNt que est unida al extremo da cadena polipeptdica en crecemento. Otro lugar denominado lugar de unin aminoacil_ARNt o lugar A que acoge la molcula de ARNt entrante cargada con un a. Para que el ARNt se una a estos lugares es necesario que su anticodn tenga los pares de bases adecuados, es decir, complementarios con el codn del ARNm. Un tercer lugar: lugar E (de Exit) que es el lugar de salida. Concepto de polirribosomas o polisomas: estn formados por varios ribosomas colocados sobre el mismo ARNm. Cando un ribosoma traduce unha secuencia suficiente, un nuevo ribosoma se coloca sobre el extremo 5 de la molcula de ARNm. Sntese de protenas. La secuencia de nucletidos de la molcula de ARNm es traducida a la secuencia de as correspondientes producindo una cadena proteica determinada. La traduccin de un ARNm a la protena depende de una molcula adaptadora: el ARNt. Este presenta en un extremo un triplete que reconoce al complementario en el ARNm y en el otro extremo se une a un determinado a. Los ARNt son molculas pequeas de ARN, entre 70 e 90 nucletidos, de una sola hebra que por medio del emparejamiento de bases, dentro de la misma molcula, se pliega de forma que en dos dimensiones parece una hoja de trbol. El reconocimiento de la unin del a correcto al ARNt depende de enzimas denominadas: aminoacil_ARNt_sintetasas que acoplan covalentemente cada a al su conjunto apropiado de molculas de ARNt. Hay una sintetasa diferente por cada a, es decir, va haber 20 distintos. La reaccin catalizada por la sintetasa que une al a al extremo 3 del ARNt es una reaccin acoplada a la liberacin de

energa entre el ARNt y el a. La energa de este enlace se utiliza posteriormente para unir covalentemente el a a la cadena polipeptidica en crecimiento. La sintesis de protenas tiene tres fases: Iniciacin Elongacin Terminacin Las tres se producen de forma similar entre procariotas y eucariotas. Fase de iniciacin: Para que se inicie la sintesis, un ARNt llamado iniciador tiene que colocarse en el lugar P del ribosoma. Este ARNt lleva siempre metionina (en eucariotas). Nas procariotas lleva formil_metionina. La unin del ARNm al ribosoma se produce por la subunidad menor. Esta reconoce al extremo 5 del ARNm debido al capuchn aadido en la transcripcin en el ncleo. La subunidad ribosmica se desplaza por el ARNm hasta encontrar un codn que codifique para metionina (AUG). En este punto, se incorpora la subunidad mayor del ribosoma que se une a la subunidad menor y a continuacin ya puede colocarse un nuevo ARNt en el lugar A y asi pasamos ya a la fase de elongacin. El ARNm puede tener varios codones de iniciacin (AUG que codifiquen para metionina) pero como la subunidad menor del ribosoma reconoce el extremo 5 va empezar a sintetizar cando encuentra el primer codn de iniciacin, por lo tanto solo una protena es sintetizada a partir de cada ARNm, se habla entonces de que son monocistrnicos. Los ARNm de procariotas no presentan el capuchn en el estremo 5 y tienen una secuencia especfica en el sitio de iniciacin cerca de un codn AUG. Estas secuencias poden estar repetidas varias veces por lo que tambin va haber varios puntos de iniciacin, por lo tanto, los ARNm de procariotas pueden codificar para varias protenas. Son policistrnicos. Fase de elongacin: Primero se une un aminoacil_ARNt al lugar A del ribosoma. Despus se forma un nuevo enlace peptdico entre la cadena peptdica y el a unido al ARNt en el lugar A. Por ltimo la subunidad menor del ribosoma se desplaza tres nucletidos sobre el ARNm expulsando el ARNt utilizado y dejando libre el lugar A del ribosoma. Este ciclo de tres etapas se repite una y otra vez durante la sntesis de una cadena proteica. Fase de terminacin: Cando se alcanza a un codn de terminacin (UAA-UGA-UAG) finaliza el proceso de traduccin. Unas protenas citoplasmticas denominadas factores de liberacin se unen al codn de terminacin, se libera el polipptido completo y el ribosoma se disocia en sus dos subunidades.

Replicacin del ADN. Todos los organismos duplican a su ADN, de una forma muy exacta, antes de cada divisin celular. Cada una de las dos clulas hijas hereda una doble hlice de ADN que contiene una cadena antigua y una recien sintetizada, por eso se dice que la replicacin es semiconservativa. La replicacin del ADN se origina en una estructura denominada orquilla de replicacin que es una region en la que sus cadenas de ADN se separan actuando como patrones para la sntese de ADN. Hay dos protenas que abren la hlice: ADN_helicasa y las protenas desestabilizadoras de hlice, tambin llamadas protenas de unin a la cadena sencilla. Estas ltimas vuelven recta la hlice y la mantienen abierta. La ADNpolimerasa sintetiza las cadeas complementarias a cada una de las cadenas primitivas. Para que se inicie la copia de ADN hace falta un ARN especfico: ARN_cebador que hace que empiece a actuar la ARNpolimerasa. El ARN_cebador es sintetizado por el enzima ARN_primasa. Este se une directamente al ARN_helicasa formando una estructura llamada primosoma que se va desplazando con la cadena en formacin. La ADNpolimerasa solo sintetiza ADN en direccin 5-3, es decir, la cadena complementaria a la que se abre de 5-3se sintetiza continuamente. La cadena complementaria a la que se abre de 5-3 tambin se sintetiza en sentido 5-3pero formando pequeos fragmentos denominados fragmentos de OKAZAKI. Los mltiples fragmentos que se forman se unen por la accin de la ADN_ligasa. La cadena que es utilizada para sintetizar la nueva cadena de forma contnua se llama cadena conductora y otra se llama cadena retrasada. En la cadena conductora solo se necesita un ARN_cebador. En la cadena retrasada hace falta un ARN_cebador por cada fragmento de okazaki. La ARN_primasa va sintetizando estos ARN_cebadores a intervalos. Estes van siendo elongados como ADN hasta que alcanza el ARN_cebador del fragmento de okazaki ya rematado. Entonces la ARNpolimerasa sustituye al ARN_cebador por ADN y la ADN_ligasa une los diferentes fragmentos de okazaki. La cadena retrasada y el ADN sintetizado sobre ella, sufre un plegamiento de manera que la ARNpolimerasa da cadena retrasada y la ARNpolimerasa de cadena conductora se unen formando un complejo nico. Hay unas protenas especiales topoisomerasas que evitan que el ADN se enrolle al girar en la replicacin. Por un lado tenemos la topoisomerasa I que produce una ruptura transitoria de una sola hebra. la topoisomerasa II produce una ruptura transitoria en ambas cadenas, en el punto donde se entrecruzan. Cada regin de ADN replicada a partir de un origen de replicacin se denomina replicn. La replicacin presenta un mecanismo de autocorreccin: la base mal emparejada es eliminada por una exonucleasa 3-5" que se incorpora a la ARNpolimerasa.

Reparacin del ADN. Cando hay porciones de ADN alteradas, estas son reconocidas por perder su emparejamiento con la cadena complementaria no lesionada. Esta porcin lesionada es eliminada por una serie de enzimas denominadas nucleasas de reparacin del ADN. Despus, esta porcin, es remplazada por los elementos correctos mediante la ADNpolimerasa y finalmente la ADN_ligasa une el fragmento reparado al resto de la cadena. Solo cuando ambas cadenas se daan en el mismo par de bases la clula quedaria sin una copia correcta. En los virus con una sola cadena de cido nucleico no puede realizarse la reparacin, por lo que la fracuencia de mutacin es mucho ms elevada. Recombinacin gentica. Permite que grandes zonas de ADN de doble hlice puedan intercabiar de un cromosoma a otro. Hay dos grandes clases de sistemas de recombinacin: Recombinacin general Recombinacin de sitio especfico. Recombinacin general: Se basa en extensas interacciones entre pares de bases de cadenas de las dos dobles hlices de ADN que se recombinan. El intercambio entre cromtidas puede ocurrir entre cromtidas hermanas y entre cromtidas de cromosomas homlogos. Las dos hebras de una cromtida se sueldan con las dos hebras de la otra cromtida (tanto sea hermana u homloga) el intercambio entre cromtidas hermanas pasa inadvertido, pues ambas son genticamente idnticas. Por el contrario, entre cromtidas homlogas es probable que la secuencia do cromosomas homlogos maternos sea ligeramente diferente a la secuencia del homlogo paterno por lo que en este caso hay alteraciones de la secuencia. Recombinacin de sitio especfico: Se produce entre cortas secuencias de ADN, sobre una o las dos cadenas de doble hlice y que son reconocidas especificamente por enzimas de recombinacin de sitio especfico. Estos enzimas reconocen secuencias determinadas de un cromosoma y cortan segmentos que insertan en otros cromosomas por mecanismos de corte y empalme.