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Esta es una copia de depósito del probiótico Bifidobacterium longum NCC3001 reduce las
puntuaciones de depresión y altera la actividad cerebral: un estudio piloto en pacientes con
síndrome del intestino irritable.
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Versión: Versión aceptada
Artículo:
Pinto-Sanchez, MI, Hall, GB, Ghajar, K et al. (19 autores más) (2017) El probiótico
Bifidobacterium longum NCC3001 reduce las puntuaciones de depresión y altera la actividad cerebral: un
Estudio Piloto en Pacientes con Síndrome de Intestino Irritable. Gastroenterología, 153
(2). 448-459.e8. ISSN 0016-5085
https://doi.org/10.1053/j.gastro.2017.05.003
© 2017 por el Instituto AGA. Esta versión manuscrita está disponible bajo la licencia CC-BY-
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manuscrito aceptado
Probiótico Bifidobacterium longum NCC3001 reduce los puntajes de depresión y altera

Actividad cerebral: un estudio piloto en pacientes con síndrome de intestino irritable
Maria Ines Pinto-Sanchez, MD, Geoffrey B. Hall, PhD, Kathy Ghajar, BSc, Andrea
Nardelli, MD, Carolina Bolino, MD, Jennifer T. Lau, BSc, Francois-Pierre Martin, PhD,
Ornella Cominetti, PhD, Christopher Welsh, BSc, Amber Rieder, BA, Jenna Traynor, BSc,
Caitlin Gregory, MD, Giada De Palma, PhD, Marc Pigrau, MD, Alexander C. Ford, MD,
Joseph Macri, PhD, Bernard Berner, PhD, Gabriela Bergonzelli, PhD, Michael G. Surette,
PhD, Stephen M. Collins, MD, Paul Moayyedi, MD, Premysl Bercik, MD.
PII: S0016-5085(17)35557-9 DOI: 10.1053/

j.gastro.2017.05.003 Referencia: YGAST 61167
Aparecer en: Gastroenterología

Fecha de aceptación: 2 de mayo de 2017
Cite este artículo como: Pinto-Sanchez MI, Hall GB, Ghajar K, Nardelli A, Bolino C, Lau JT, Martin FP, Cominetti
O, Welsh C, Rieder A, Traynor J, Gregory C, De Palma G, Pigrau M , Ford AC, Macri J, Berner B, Bergonzelli G,
Surette MG, Collins SM, Moayyedi P, Bercik P, el probiótico Bifidobacterium longum NCC3001 reduce las
puntuaciones de depresión y altera la actividad cerebral: un estudio piloto en pacientes con síndrome del intestino
irritable, gastroenterología (2017) ), doi: 10.1053/j.gastro.2017.05.003.
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MANUSCRITO ACEPTADO
El probiótico Bifidobacterium longum NCC3001 reduce las puntuaciones de depresión y altera el cerebro
Actividad: Estudio Piloto en Pacientes con Síndrome de Intestino Irritable.
2 2
María Inés Pinto-Sánchez1 MD, Geoffrey B Hall Doctorado, Kathy Ghajar Licenciada en Ciencias, Andrea Nardelli1 MD,
1 3
carolina bolino Doctora en Medicina, Jennifer T Lau1 Licenciatura en Ciencias, Francois-Pierre Martin Doctorado, Ornella Cominetti3 Doctorado,
1 2 2
cristobal gales Licenciatura en Ciencias, Amber Rieder2 Licenciatura en Ciencias, Jenna Traynor Licenciatura, Caitlin Gregory MARYLAND,
Giada De Palma1 PhD, Marc Pigrau1 MD, Alexander C Ford4 MD, Joseph Macri5 PhD,
6 6
Bernardo Berner Doctora, Gabriela Bergonzelli Doctorado, Michael G. Surette1 Doctorado,
1
Esteban M. Collins MD, Paul Moayyedi1 MD, Premysl Bercik1 MD.
1Departamento de Medicina, Instituto de Investigación de Salud Digestiva de la Familia Farncombe, McMaster
Universidad, Hamilton, ON, Canadá
2Departamento de Psicología, Neurociencia y Comportamiento, Universidad McMaster, Hamilton, ON,
Canadá.
3 Instituto Nestlé de Ciencias de la Salud SA, Lausana, Suiza
4Leeds Gastroenterology Institute, St. James's University Hospital e Leeds Institute of Biomedical
y Ciencias Clínicas, Universidad de Leeds, Leeds, Reino Unido.
5Departamento de Patología, Universidad McMaster, Hamilton, ON, Canadá.
6Centro de Investigación Nestlé, Instituto de Nutrición, Lausana, Suiza.
Título breve: B. longum reduce la depresión en pacientes con SII
Fuente de financiación: Nestlé SA, Suiza,
Autor para correspondencia: Premysl Bercik, MD
Departamento de Medicina, Instituto de Investigación de Salud Digestiva de la Familia Farncombe,
1
MANUSCRITO ACEPTADO
Universidad McMaster, Hamilton, ON, Canadá
correo electrónico: bercikp@mcmaster.ca
CONFLICTO DE INTERÉS: MIPS, AN, GH, ACF, KG, AR, JT, CW, GDP, MP, JM, CG, CB,
JL, MS y PM no tienen ningún conflicto de intereses con respecto a este documento. GB y BB son empleados de
Nestec SA, Suiza. MFP y OC son empleados de Nestlé Institute of Health Sciences SA. PB
y SMC recibió apoyo de investigación de Nestlé.
DIVULGACIÓN: MIPS recibió un premio de becas para profesionales de la salud de CIHR-CAG. PB es
ganador del premio HHS Early Career Research Award y titular de la cátedra Richard Hunt-AstraZeneca en
Gastroenterología.
CONTRIBUCIÓN DE MANUSCRITOS
MIPS: adquisición, análisis e interpretación de datos; análisis estadístico, redacción del manuscrito;
GH: concepto y diseño del estudio; adquisición, análisis e interpretación de datos de fMRI; KG AR, JT,
CG: adquisición, análisis e interpretación de datos de fMRI; AN: adquisición de datos clínicos, CB: estudio
concepto y diseño; CW: desarrollo de bases de datos y adquisición de datos; JL, MS: análisis de microbiota,
revisión crítica del manuscrito; FPM, OC: Análisis metabolómico RMN e interpretación de datos, BB:
análisis de microbiota, revisión crítica del manuscrito por contenido intelectual importante, GB: estudio
diseño, revisión crítica del manuscrito para contenido intelectual importante: AF, SMC: crítico
revisión del manuscrito y contenido intelectual importante; PM: Diseño del estudio, análisis estadístico,
revisión crítica del manuscrito para contenido intelectual importante; PB: Diseño del estudio, crítico
revisión del manuscrito y supervisión del estudio. Todos los autores revisaron y aprobaron la última
versión del manuscrito.
2
MANUSCRITO ACEPTADO
Expresiones de gratitud:
Los autores agradecen a Peter McLean y Mirna Del Valle por su invaluable apoyo y estudio.
seguimiento y vigilancia. También agradecemos a Tiago Nunes por sus comentarios reflexivos sobre el manuscrito,
Mireille Goillard para el análisis de neurotransmisores, Francis Foata para la detección de BL y Margaret
Fahnestock por el asesoramiento sobre el análisis de BDNF y a Laeticia Da Silva y al Dr. Sebastiano Collino por
su contribución en la generación de datos de metabolómica.
3
MANUSCRITO ACEPTADO
RESUMEN
Antecedentes y objetivos : los probióticos pueden reducir los síntomas del síndrome del intestino irritable (SII), pero poco
se conoce acerca de sus efectos sobre las comorbilidades psiquiátricas. Realizamos un estudio prospectivo para
evaluar los efectos de Bifidobacterium longum NCC3001 (BL) sobre la ansiedad y la depresión en
pacientes con SII.
Métodos : Realizamos un estudio aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo de 44 adultos con
SII y diarrea o un patrón de heces mixtas (basado en los criterios de Roma III) y ansiedad leve a moderada
y/o depresión (basado en la escala de Ansiedad y Depresión del Hospital) en la Universidad McMaster en
Canadá, de marzo de 2011 a mayo de 2014. En la visita de selección, se registraron la historia clínica y los síntomas.
Se evaluaron y se tomaron muestras de sangre. Luego, los pacientes fueron asignados aleatoriamente a grupos y
administrado diariamente BL (n=22) o placebo (n=22) durante 6 semanas. En las semanas 0, 6 y 10, determinamos los pacientes
niveles de ansiedad y depresión, síntomas del SII, calidad de vida y somatización usando validado
cuestionarios En la semana 0 y 6 se recogieron muestras de heces, orina y sangre, y funcional
Se realizó una prueba de imagen por resonancia magnética (fMRI). Evaluamos los patrones de activación cerebral,
microbiota fecal, perfiles de metaboloma en orina, marcadores séricos de inflamación, neurotransmisores y
niveles de neurotrofinas.
Resultados : En la semana 6, 14/22 pacientes en el grupo BL tuvieron una reducción en las puntuaciones de depresión de 2 puntos o
más en la escala de Ansiedad y Depresión Hospitalaria, frente a 7/22 pacientes del grupo placebo (p = 0,04).
BL no tuvo un efecto significativo sobre la ansiedad o los síntomas del SII. Los pacientes del grupo BL tuvieron una media
aumento en la puntuación de calidad de vida en comparación con el grupo placebo. El análisis fMRI mostró que
BL redujo las respuestas a los estímulos emocionales negativos en múltiples áreas del cerebro, incluida la amígdala y
regiones frontolímbicas, en comparación con el placebo. Los grupos tenían perfiles similares de microbiota fecal,
marcadores séricos de inflamación y niveles de neurotrofinas y neurotransmisores, pero el BL
4
MANUSCRITO ACEPTADO
grupo había reducido los niveles de orina de metilaminas y metabolitos de aminoácidos aromáticos. En la semana 10,
las puntuaciones de depresión se redujeron en los pacientes que recibieron BL frente a placebo.
Conclusión: En un ensayo controlado con placebo, encontramos que el probiótico BL reduce la depresión pero no
puntuaciones de ansiedad y aumenta la calidad de vida en pacientes con SII. Estas mejoras fueron
asociado con cambios en los patrones de activación cerebral que indican que este probiótico reduce la actividad límbica
reactividad. ClinicalTrials.gov no. NCT01276626.
Palabras clave: SII, ansiedad, depresión, fMRI
5
MANUSCRITO ACEPTADO
ANTECEDENTES
El síndrome del intestino irritable (SII), caracterizado por dolor abdominal y hábitos intestinales alterados, afecta
1 2
11% de la población mundial , tiene un impacto socioeconómico significativo y es actual
1
los tratamientos tienen una eficacia limitada . Su fisiopatología no se conoce por completo, pero se considera
3
ser un trastorno de la interacción intestino-cerebro y frecuentemente se acompaña de trastornos psiquiátricos1,4 .
La evidencia acumulada sugiere que las bacterias comensales desempeñan un papel en el SII, ya que múltiples estudios
han demostrado una composición o actividad metabólica anormal de la microbiota intestinal en pacientes con
5
SII . Disbiosis, desencadenada por gastroenteritis bacteriana aguda, antibióticos o factores dietéticos, que son
se sabe que afecta la composición de la microbiota, puede impulsar no solo el componente gastrointestinal
6
del SII, pero también contribuyen a su comorbilidad psiquiátrica . Además, bacterias probióticas específicas
7
se ha demostrado que mejora los síntomas gastrointestinales en el SII .
Hemos demostrado previamente que la administración de B. longum NCC3001 subspecies longum
cepa (BL) normalizó el comportamiento similar a la ansiedad y el factor neurotrófico derivado del cerebro del hipocampo
(BDNF) en ratones con inflamación intestinal de bajo grado, a través de vías vagales dependientes8,9 .
Con base en estos resultados, planteamos la hipótesis de que BL mejorará la comorbilidad psiquiátrica en pacientes
con trastornos intestinales crónicos y, por lo tanto, realizamos un estudio piloto en pacientes con SII. como la ansiedad y
la depresión son bastante difíciles de distinguir en modelos animales, con frecuencia coexisten en pacientes
y se informaron niveles alterados de BDNF central en ambas condiciones, elegimos como nuestro principal
objetivo evaluar el impacto del BL en la ansiedad y la depresión comórbidas. el secundario
Los objetivos fueron entonces evaluar el efecto de BL sobre los síntomas del SII y la calidad de vida, y explorar
cambios en los patrones de activación cerebral, marcadores inflamatorios circulantes, neurotransmisores,
neurotrofinas, perfil de la microbiota intestinal y metabolitos de la orina como medida de la actividad microbiana del huésped
6
MANUSCRITO ACEPTADO
interacciones metabólicas. Teniendo en cuenta la gran heterogeneidad del SII, decidimos restringir nuestro estudio
a pacientes con SII con diarrea o patrón mixto de heces, ya que parecen compartir neurosensorial similar
interacción inmune y es más probable que presenten inflamación intestinal de bajo grado y similares
microbiota en comparación con pacientes con SII con estreñimiento10,5 .
Aunque varios estudios clínicos investigaron los efectos de las bacterias probióticas en el comportamiento y el cerebro
función11-12, principalmente en individuos sanos, nuestro estudio es el primero en demostrar que los probióticos pueden
mejorar las puntuaciones de depresión, así como alterar los patrones de actividad cerebral en pacientes con SII con comorbilidad
depresion y ansiedad.
7
MANUSCRITO ACEPTADO
MÉTODOS
Supervisión del estudio
Realizamos un estudio piloto aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo, de un solo centro de
Marzo de 2011 a mayo de 2014. El estudio fue aprobado por Hamilton Health Sciences y St.
Joseph's Health Care Research Ethics Boards, todos los participantes firmaron el consentimiento informado. los
El estudio se registró en Clinicaltrials.gov con el nombre NCT01276626. Todos los autores tuvieron acceso al estudio.
datos y revisó y aprobó el manuscrito final.
Participantes
Se reclutaron pacientes adultos con diagnóstico de SII con diarrea o patrón mixto (Roma III
criterios)13, y puntuaciones de ansiedad y/o depresión de leves a moderadas basadas en el Hospital Anxiety
y Depresión (HAD)14 (puntuación HAD-A o HAD-D 8-14). Pacientes con antecedentes de orgánica.
enfermedades, inmunodeficiencia, cirugía abdominal mayor, una condición psiquiátrica distinta de la ansiedad
o depresión, uso de inmunosupresores, glucocorticosteroides, opioides, antidepresivos o
Se excluyeron los ansiolíticos en dosis regulares, el consumo de alcohol o drogas ilícitas. Loperamida y
los laxantes estaban permitidos como medicamentos de rescate. Se prohibieron otros probióticos en cualquier forma durante
el período de ejecución de 1 mes y la prueba. Los antibióticos estaban prohibidos durante los 3 meses previos a la
Período de rodaje y prueba.
Diseño del estudio
El estudio involucró cuatro visitas al hospital (Figura complementaria 1). En la visita de selección (-4 semanas),
Se evaluó la historia clínica y los síntomas y se realizó un examen físico y un análisis de sangre completo.
realizado. En la visita inicial (semana 0), los criterios y síntomas de inclusión y exclusión fueron
reevaluado, se recogieron muestras de heces, orina y sangre, y se realizó un estudio de fMRI.
8
MANUSCRITO ACEPTADO
Luego, los pacientes fueron aleatorizados para recibir 42 sobres de BL secado por aspersión (1.0E+10 CFU
/1 gramo de polvo con maltodextrina) o placebo que contiene 1 gramo de maltodextrina. Tratamiento
los productos eran indistinguibles en términos de empaque, color, sabor y consistencia. Los pacientes fueron
instrucciones de disolver el contenido del sobre en 100-200 ml de leche sin lactosa, leche de soja o arroz
leche, precalentada a 20° centígrados. Se pidió a los pacientes que no cambiaran sus hábitos alimenticios ni la ingesta de fibra.
Los participantes registraron la ingesta del tratamiento, los sobres vacíos se usaron para evaluar el cumplimiento en
la próxima visita (semana 6), donde se evaluaron sus síntomas, muestras de sangre, orina y heces
recogida y prueba fMRI realizada. Finalmente, los síntomas de los pacientes fueron reevaluados en un seguimiento
visita (semana 10).
Además de las visitas regulares al hospital, también se evaluaron las puntuaciones HAD a las 3 semanas de tratamiento.
siguiendo la solicitud de Health Canada. Los cuestionarios HAD se proporcionaron a los pacientes en la Visita 1 y
luego enviado por correo postal o electrónico a los investigadores.
Criterios de valoración del estudio
El criterio principal de valoración fue una reducción en las puntuaciones de ansiedad y/o depresión de ÿ2 puntos en HAD
scale13 a las 6 semanas. Esto se basó en la media previamente establecida clínicamente importante
diferencia para la puntuación de ansiedad y depresión en la escala HAD de 1,3 y 1,4, respectivamente14 .
Los criterios de valoración secundarios incluyeron la mejora en las puntuaciones de ansiedad y depresión (HAD, continuo
datos), ansiedad (State-Trait Anxiety Inventory, STAI), alivio adecuado global del SII, síntomas del SII,
somatización, calidad de vida, cambios en los patrones de activación cerebral (Resonancia Magnética funcional
imágenes, fMRI), marcadores inflamatorios séricos, neurotransmisores y BDNF, y orina
perfiles metabonómicos y de microbiota fecal.
9
MANUSCRITO ACEPTADO
Aleatorización
La secuencia de aleatorización se realizó mediante un programa informático (Proc Plan, SAS, V. 9.1). A
la aleatorización en bloque se estratificó por género y estado del SII (diarrea o patrón mixto de heces). los
los códigos se guardaron en sobres opacos cerrados asignados a los pacientes según estratos. Cada paquete era
asignado un número de acuerdo con la secuencia de aleatorización. En el momento del reclutamiento, los pacientes fueron
asignado a uno de los cuatro estratos y dado el siguiente número de aleatorización consecutivo disponible para
ese estrato. La asignación al tratamiento se ocultó a los participantes y al personal del estudio.
Los productos de tratamiento indistinguibles en términos de empaque, color, sabor y consistencia, fueron
identificado con dos códigos no hablantes por brazo. Su identidad era ciega a los sujetos, los investigadores
y personal de apoyo, conocido únicamente por el fabricante, Nestlé Product Technology Center Konolfingen
Suiza.
Mediciones de estudio
La ansiedad y la depresión se evaluaron mediante la puntuación HAD. Como una medida adicional de ansiedad,
utilizó el STAI15, que evalúa tanto el estado como el rasgo de ansiedad. Se evaluaron los síntomas y signos del SII
por el puntaje del IBS de Birmingham16 y la escala de heces de Bristol17. Para evaluar una mejora general de
síntomas del SII, a los pacientes se les hizo una pregunta validada: "Durante la última semana, ¿ha tenido
alivio adecuado de sus síntomas del SII?” con una opción dicotómica de respuestas18 . relacionados con la salud
la calidad de vida (QoL) se midió con el SF-3619 y la somatización con el PHQ-15
cuestionarios20 .
La actividad cerebral se evaluó mediante imágenes de resonancia magnética funcional (fMRI) usando General
3-Tesla Discovery MR 750 eléctrico, escáner de cuerpo entero de diámetro corto con 32 receptores en paralelo
canales (General Electric, Milwaukee, WI). El protocolo de 1 hora incluía un T1 de siete minutos
escaneo estructural ponderado, seguido de cuatro repeticiones de una cara temerosa enmascarando hacia atrás
10
MANUSCRITO ACEPTADO
paradigma21 (Figura complementaria 2) durante cuatro escaneos dependientes del nivel de oxígeno en sangre fMRI22
(BOLD EPI; TR/TE=2800/35 ms, ángulo de giro=90º, cortes de 3 mm de espesor, sin espacios, campo de visión=24 cm,
matriz=64x64). El procesamiento previo de los datos de resonancia magnética se completó con Brain Voyager QX versión 2.8.2,
32 bits (Brain Innovation, Maastricht, Países Bajos). Se inspeccionaron los datos anatómicos y funcionales.
y exploraciones con artefactos o exploraciones de fMRI con movimiento superior a 5 mm en cualquiera de los 6 planos fueron
excluidos del análisis. Los escaneos anatómicos se transformaron en orientación sagital estándar y
se sometió a una normalización espacial en el espacio estándar de Talaraich. Corrección de tiempo de escaneo de rebanadas y 3D
la corrección de movimiento se llevó a cabo en los datos de fMRI y el suavizado espacial aplicado usando un
Filtro gaussiano (FWHM=6 mm). La amígdala fue seleccionada como región de interés (ROI), inicialmente
derivado del WFUPick Atlas y refinado de acuerdo con puntos de referencia anatómicos en el grupo completo
imagen T1 transformada promedio.
Se recogieron muestras de sangre y orina después de un ayuno nocturno. Después del procesamiento, las muestras fueron
almacenado a -80 C hasta la evaluación. Las muestras para BDNF se recolectaron utilizando PAXgene Blood RNA
(PreAnalytiX, Qiagen BD, Toronto, Canadá). Los niveles séricos de citocinas y PCR se evaluaron mediante
Kit ultrasensible Human ProInflamatory 7-Plex (MSD, Gaithersburg, MD) y CRP Abbott
Kit de arquitecto (Abbott Laboratories, IL), respectivamente. El nivel de proteína BDNF fue evaluado por Human
Kit ELISA BDNF DuoSet (R&D Systems, Minneapolis, MN). Los neurotransmisores plasmáticos fueron
cuantificado utilizando los siguientes kits: 5-HT: IBL, Hamburgo, Alemania; Sustancia P: Abcam, Cambridge,
REINO UNIDO; CGRP: Cloud-Clone Corp, Houston, TX.
Los metabolitos de la orina se evaluaron mediante perfiles de RMN 1H utilizando un Bruker Avance II de 600 MHz
espectrómetro equipado con una sonda de 1,7 mm a 300 K (Bruker Biospin, Rheinstetten, Alemania),
usando una secuencia de pulsos estándar con supresión de agua, y procesado usando TOPSPIN (versión
2.1, Bruker, Alemania) paquete de software. La identificación del metabolito se logró utilizando
base de datos y experimentos de espectroscopia 2D 1H NMR. El análisis quimiométrico se realizó utilizando
11
MANUSCRITO ACEPTADO
el paquete de software SIMCA-P+ (versión 14.0, Umetrics AB, Umeå, Suecia) y de forma interna
Desarrolló rutinas de MATLAB. Proyección ortogonal a estructuras latentes (OPLS) y OPLS
Se empleó el análisis discriminante (OPLS-DA) para explorar la varianza en la metabolómica
datos que pueden explicar las diferencias estadísticas entre grupos de muestras. La precisión de la clasificación
del OPLS-DA se estableció a partir de las muestras predichas en el ciclo de validación cruzada de 7 veces.
Para resaltar el peso de las variables individuales en el modelo, Variable Importance in Projection
(VIP), con un valor superior a 1 utilizado como umbral por convención. Para detalles adicionales, vea
Métodos complementarios.
El análisis de la microbiota se realizó utilizando la secuenciación Illumina de la región V3 del gen 16S rRNA
como se describió anteriormente23, para obtener más detalles, consulte Métodos complementarios. PCR24 específica de cepa bacteriana
se utilizó en extractos de ADN fecal para detectar la presencia de BL al final del período de tratamiento.
análisis estadístico
Los análisis estadísticos se realizaron utilizando IBM-SPSS (IBM-SPSS Statistics v20, Chicago, IL). Nosotros
realizó cálculos de potencia post-hoc basados en nuestros datos animales anteriores, que mostraron una fuerte
potencial terapéutico de este probiótico8-9. Estimamos que un tamaño de muestra de 19 en cada grupo sería
tener una potencia del 80 % utilizando una prueba de ÿ2 de dos grupos con un nivel de significación bilateral de 0,05 suponiendo un 30 %
tienen una mejora en la depresión y/o ansiedad en el grupo placebo y 75% en el B. longum
grupo.
Los datos de todos los sujetos aleatorizados se analizaron de acuerdo con los principios de intención de tratar (ITT) para
el resultado primario. Para lidiar con los datos faltantes, usamos el análisis de casos extremos asumiendo que
todos los sujetos faltantes no tuvieron mejoría en los síntomas. Datos excluidos por evaluación de protocolo (PP)
de sujetos que no completaron el ensayo debido al consumo de medicación prescrita o no
12
MANUSCRITO ACEPTADO
cumplimiento del protocolo del estudio, y se utilizó para los resultados primarios y secundarios. Para
prueba de los efectos en los dos puntos finales primarios, Pearson Chi-Squared y Mann-Whitney U test
se utilizaron según corresponda. Además, las puntuaciones HAD se analizaron al inicio del estudio, semana 3, 6 y 10
post-tratamiento usando medidas repetidas de ANOVA. ANCOVA se utilizó para ajustar las líneas de base
diferencias en las puntuaciones de depresión HAD. Se utilizó una prueba de dos caras y se consideró p<0.05
Estadísticamente significante.
Los datos de fMRI fueron analizados por el modelo lineal general (GLM) con eventos experimentales convolucionados
con la función de respuesta hemodinámica. Se construyeron mapas de activación identificando grupos de
actividad asociada con las diferencias máximas en la activación de las condiciones experimentales (miedo, feliz,
fijación) 21. Los contrastes de señales BOLD se sometieron a análisis de efectos aleatorios y se corrigieron para
comparaciones múltiples utilizando el enfoque de tasa de descubrimiento falso25. Efectos aleatorios de segundo nivel
Los análisis GLM evaluaron las diferencias en las respuestas del grupo a las caras temerosas antes y después
tratamiento. Las predicciones a priori de que BL modulará la activación en la amígdala se probaron con
análisis de región de interés (ROI). Se co-registró un mapa estándar de Brodmann (WFU Pic Atlas)26
al conjunto de datos anatómicos compuestos promedio y se utiliza para prescribir regiones de interés (ROI) en el
amígdala derecha e izquierda. Se usó un modelo de deconvolución relacionado con eventos para cada participante para
examine el cambio de señal % BOLD en todos y cada uno de los vóxeles dentro del ROI. Se corrigieron los contrastes.
para comparaciones múltiples a nivel de clúster utilizando la metodología de tasa de descubrimiento falso
(FDR(q)<.05)25 y el valor estadístico promedio para el ROI informado.
Para el análisis metabonómico, se integraron señales representativas de los metabolitos identificados y
probado usando la prueba no paramétrica de Mann Whitney.
Papel de la fuente de financiación
13
MANUSCRITO ACEPTADO
Nestec SA no participó en la recopilación, análisis o interpretación de los datos clínicos. los
el autor correspondiente estuvo a cargo de la recopilación y el análisis de datos y tuvo la responsabilidad final
para la decisión de enviar para su publicación.
14
MANUSCRITO ACEPTADO
RESULTADOS
Pacientes del estudio
Sesenta pacientes se inscribieron en el estudio (Figura 1). Dieciséis pacientes no pasaron la prueba de detección debido a: 1)
síntomas de SII muy leves (n=2) o puntuación HAD baja (n=1); 2) uso de antibióticos (n=2); 3)
falta de voluntad para seguir el protocolo (n=7), o 5) pérdida durante el seguimiento (n=4). Así, 44 pacientes fueron
aleatorizados (22 en cada brazo del estudio), de los cuales 38 completaron el estudio (BL=18, placebo=20).
Durante el tratamiento, seis pacientes abandonaron debido al uso de antibióticos (n=4) o antidepresivos.
(n=2). No se observaron diferencias entre los grupos en las características basales (Tabla 1),
excepto por puntajes HAD-D más altos en el grupo BL (Tabla 2).
Medida de resultado primaria: Mejoría en las puntuaciones de depresión y/ o ansiedad
A las 6 semanas, 14 de 22 (64 %) pacientes en el grupo BL habían disminuido las puntuaciones de depresión (HAD-D
ÿ2 puntos) en comparación con 7 de 22 (32 %) pacientes que recibieron placebo (riesgo relativo (RR) 1,98; 95 %
intervalo de confianza (IC) 1,16-3,38; p=0.04) en la población ITT (Tabla 3A). Esta respuesta fue
más prominente en el análisis PP con 78% en el grupo BL en comparación con el 35% del grupo placebo
grupo con puntuaciones más bajas de depresión (RR 2,4; IC 95% 1,26-4,58; p=0,016). La mejora en
Las puntuaciones de HAD-D se mantuvieron tanto en ITT (RR 2,05; IC del 95 % 1,07-3,93; p=0,04) como en PP
análisis (RR 2,14; IC 95% 1,11-4,12; p=0,04) a las 10 semanas de seguimiento. Los resultados a las 6 semanas fueron
similar cuando el análisis se realizó solo en el subgrupo de pacientes con puntajes iniciales
indicativo de depresión (HAD-D ÿ8), (RR 3,75; IC 95% 0,6-22,1; p=0,047). No significativo
se encontraron diferencias en el número de pacientes con disminución de la ansiedad (HAD-A ÿ2 puntos) entre
los grupos a las 6 o 10 semanas de seguimiento.
Se realizó un análisis de sensibilidad para explorar la relación entre las puntuaciones de depresión y
síntomas gastrointestinales mostró que el efecto beneficioso de BL en las puntuaciones de depresión en 6 y 10
15
MANUSCRITO ACEPTADO
semanas era más probable que ocurriera en aquellos pacientes que reportaron un alivio adecuado de los síntomas del SII
(Tabla 3B).
Resultados secundarios
puntajes HAD
Después del tratamiento, no hubo diferencias significativas en las puntuaciones de HAD-D cuando se evaluó como un
resultado continuo entre los dos grupos (Tabla 2), pero al ajustar las diferencias iniciales
se encontró una mejoría mayor en el grupo BL (ANCOVA p=0,049). Puntuaciones de ansiedad evaluadas como
un resultado continuo fueron similares entre los dos grupos (Tabla 2).
Síntomas del SII
No hubo diferencia en el alivio adecuado de los síntomas del SII en el análisis ITT a las 6 semanas (RR 1.6,
IC 95% 0,86-2,91; p=0,22), pero el análisis de PP mostró un beneficio estadísticamente significativo de BL sobre
placebo (RR 2,03 IC 95% 1,13-3,65; p=0,02). Sin embargo, este efecto beneficioso no se mantuvo
a las 10 semanas de seguimiento (RR 0,70, IC 95% 0,24-2,09; p=0,52). No se encontraron diferencias significativas
observado en la puntuación general de Birmingham o subpuntuaciones de estreñimiento, diarrea o dolor en 6 o 10
semanas (Cuadro 2).
Ansiedad de estado y rasgo y somatización
No se observaron diferencias en las puntuaciones STAI entre los grupos a las 6 o 10 semanas de seguimiento
(Tabla 2). Las puntuaciones de somatización también fueron similares entre los grupos a las 6 o 10 semanas de seguimiento
(Tabla 2).
Calidad de vida
La calidad de vida mejoró en el subdominio físico en el grupo BL en comparación con el placebo (p = 0,03; IC del 95 %
0,01-0,90) (Tabla 2), con mejoría en la salud física general (funcionamiento físico; p=0,04;
dieciséis
MANUSCRITO ACEPTADO
IC 95% 0,43-0,51) y problemas con el trabajo u otras actividades diarias (rol físico; p=0,01; IC 95%
0,009-0,013).
Patrones de activación cerebral por fMRI
Los patrones de activación cerebral diferían en respuesta a caras temerosas versus caras felices en todos los sujetos estudiados
(Figura complementaria 3, Tabla complementaria 1). Antes del tratamiento, no había diferencia en
respuesta a estímulos de miedo versus fijación entre placebo y el grupo BL , excepto por una mayor
compromiso de la asociación visual y las cortezas parietales en el último grupo (Figura 2A-B).
Sin embargo, después del tratamiento, en comparación con el placebo, el grupo BL mostró una participación reducida del
amígdala, las cortezas frontal y temporal, así como un mayor compromiso de las regiones occipitales en
respuesta a los estímulos de miedo (en comparación con la fijación) (Figura 2B-C, Tabla 4). En general, el cambio en
la participación de la amígdala se correlacionó con el cambio en las puntuaciones de depresión (r=0,52, p=0,004;
Figura 2E). Dentro del grupo BL , la participación reducida de la amígdala se correlacionó con una disminución
puntuaciones de depresión (r=0,58, p=0,03), pero esto no se observó en el grupo placebo (r=0,20,
p=0,46). En el grupo BL , era más probable que ocurriera una reducción del compromiso de la amígdala en pacientes
con alivio adecuado de los síntomas del SII que en aquellos sin él (RR 3.07 IC 95% 0.89-10.59; p=0.03),
pero esto no se observó en el grupo control (RR 1,5 IC 95% 1,00-2,23; p=0,51; Figura 2E).
No hubo diferencia al comparar la respuesta a rostros temerosos versus neutrales.
Marcadores inflamatorios, neurotransmisores y niveles de BDNF
Sin diferencias en marcadores inflamatorios séricos (CRP, TNF ÿ, IFN ÿ, IL-1 ÿ, IL-6, IL-8, IL-10, IL12
y cociente IL-10/12) o neurotransmisores (5-HT, sustancia P y CGRP) entre los
grupos a las 6 semanas (Tabla complementaria 2). De manera similar, no hay cambios en el ARNm de BDNF en sangre o
Se identificaron los niveles de proteína BDNF.
17
MANUSCRITO ACEPTADO
Composición de la microbiota intestinal
No hubo diferencias importantes en los taxones, la distancia de composición o la diversidad alfa (Shannon, Chao1
y los índices de especies observadas) antes o después del tratamiento entre los dos grupos. microbiota
Los perfiles también fueron similares cuando se evaluaron mediante el análisis de coordenadas del principio de Bray-Curtis o Bray
Comparaciones de distancia de Curtis (Figura 4 complementaria). BL se detectó al final del tratamiento en
15 de 18 (80%) pacientes del grupo probiótico.
Metabonómica de la orina
El análisis discriminante OPLS se aplicó usando un componente predictivo y dos ortogonales para
modele las diferencias metabólicas de la orina entre los dos grupos (Figura 5 complementaria). El modelo
fue estadísticamente robusto solo para el análisis posterior al tratamiento (R2X = 0.17, R2Y = 0.84, Q2Y = 0.20, donde
R2X: variación explicada en los datos metabonómicos (metabolitos en orina), R2Y: grupo explicado
varianza (placebo y probiótico) y Q2Y: robustez del modelo). Antes del tratamiento, había
ninguna diferencia entre los dos grupos (Q2Y<0). Sin embargo, después del tratamiento, el grupo BL mostró una
menor excreción urinaria de fenilacetilglutamina (PAG), creatina, sulfato de 4-cresol y
trimetilamina-N-óxido (TMAO) (Figura 5 complementaria, Tabla 6). Niveles de sulfato de 4-cresol
después del tratamiento se correlacionó con las puntuaciones de depresión en el grupo BL (r=-0,53, p=0,03) pero no en el grupo
grupo de control. No se encontró ninguna otra correlación entre los metabolitos y las puntuaciones de depresión o la
actividad de la amígdala.
Eventos adversos
No se observaron eventos adversos graves, con una relación probable o cierta con el producto del estudio.
(Cuadro complementario 3).
18
MANUSCRITO ACEPTADO
DISCUSIÓN
En este estudio aleatorizado, controlado con placebo, encontramos que la administración de 6 semanas de
Bifidobacterium longum NCC3001 (BL) disminuyó las puntuaciones de depresión pero no las de ansiedad, lo que fue
nuestro resultado primario, y la disminución de las respuestas a los estímulos temerosos en múltiples áreas del cerebro involucradas en
el procesamiento de las emociones, incluida la amígdala y las regiones frontolímbicas. Pacientes que recibieron BL
también informaron una mejoría en los síntomas generales del SII y el dominio físico de la calidad de vida. A pesar de ser
un estudio piloto con un número limitado de sujetos, este es el primer ensayo que muestra que un probiótico específico
mejora las puntuaciones de depresión en pacientes con SII e induce cambios pronunciados en la actividad cerebral en
regiones que han sido previamente implicadas en la depresión, y que están influenciadas por anti
terapia depresora27,28. De hecho, tanto la depresión como los trastornos de ansiedad se han asociado con
hiperactividad de la amígdala y la evidencia convergente sugiere que un mecanismo por el cual Selectivo
Los inhibidores de la recaptación de serotonina (ISRS) ejercen su acción beneficiosa al regular a la baja su
actividad27,28. Nuestro estudio también valida el uso de algunos modelos murinos8,9 para detectar probióticos por su
beneficio terapéutico potencial en humanos, ya que se demostró previamente que BL mejora la ansiedad
Comportamiento y química cerebral en ratones.
Existe un interés creciente en el papel de la microbiota intestinal en la salud y la enfermedad. Las bacterias intestinales
no solo instruye y da forma al sistema inmunológico del huésped, e impacta su metabolismo, sino que también afecta
función en el intestino y el sistema nervioso central29,30. Los estudios en animales han demostrado que los cambios
en la composición de la microbiota31 o la administración de probióticos específicos, incluidas las bifidobacterias, puede
alterar el comportamiento y la química cerebral del huésped8,9,32. Es probable que múltiples mecanismos estén involucrados en este
comunicación microbiota-cerebro, incluidas las vías inmunitarias, neurales y metabólicas30. Tenemos
previamente investigó extensamente el efecto beneficioso de BL en el comportamiento en modelos murinos y
demostrado que este probiótico normaliza el comportamiento similar a la ansiedad inducida por la inflamación y el hipocampo
19
MANUSCRITO ACEPTADO
Niveles de BDNF8,9. El efecto beneficioso sobre el comportamiento estuvo mediado por la señalización vagal, posiblemente
9
a través de la liberación de metabolitos neuroactivos que actúan sobre las neuronas entéricas .
A pesar de la evidencia acumulada de la influencia de la microbiota en el comportamiento en modelos animales, los datos
de los humanos son bastante limitados30. Dos estudios en voluntarios sanos no informaron efectos importantes de
probiótico en las puntuaciones de ansiedad y depresión33,34 . Un estudio piloto muy reciente en pacientes con
depresión mostró que la depresión mejoró tanto en el grupo de placebo como en el de probiótico, aunque el
la mejoría pareció ser mayor en los últimos35. El único estudio, que vinculó directamente el intestino
microbiota a la función cerebral, evaluaron los efectos de la mezcla de bacterias probióticas en mujeres sanas.
Aunque no se observó ningún cambio en el comportamiento en ese ensayo, la resonancia magnética funcional mostró una disminución de la actividad BOLD
en las regiones del cerebro límbico y sensorial en respuesta a las expresiones faciales, que estimulan emocional
respuestas 12. Utilizamos un desafío emotivo similar que se sabe que induce la activación en varios cerebro
regiones, incluida la amígdala, donde la respuesta de miedo es particularmente destacada36 , y cual fue
así elegido como un ROI predeterminado. Encontramos que la administración de BL disminuyó la activación de la
amígdala y el complejo frontolímbico en comparación con el placebo, que fue paralelo a
disminución de las puntuaciones de depresión. La amígdala no solo está involucrada en la regulación del miedo y la ansiedad,
sino también en la activación del eje hipotálamo-pituitario-suprarrenal (HPA)37 y la modulación del
sensibilidad visceral38. En nuestro estudio, las puntuaciones de dolor parecieron mejorar más en el grupo BL en comparación
al grupo placebo, aunque la diferencia no fue estadísticamente significativa. Sin embargo, el BL
era más probable que el grupo reportara un alivio adecuado de los síntomas del SII y esto se asoció con
disminución de la activación de la amígdala. Por lo tanto, los cambios en la percepción del dolor podrían explicar la
mejora de los síntomas del SII en el grupo BL , pero esto debe investigarse más a fondo en el futuro,
ensayos mejor potenciados.
20
MANUSCRITO ACEPTADO
Múltiples estudios han demostrado los efectos beneficiosos de diferentes probióticos en pacientes con SII,
7
y un metanálisis reciente ha demostrado que las bifidobacterias tienen más probabilidades de mejorar
síntomas gastrointestinales que los lactobacilos. Los mecanismos subyacentes pueden implicar la mejora de
inflamación intestinal de bajo grado presente en un subconjunto de pacientes con SII39 . La inflamación también ha sido
relacionado con trastornos psiquiátricos, ya que las citoquinas proinflamatorias pueden afectar el estado de ánimo por una serie de
mecanismos, incluida la activación del eje HPA y la alteración del metabolismo de
neurotransmisores40 . No encontramos diferencias en los niveles séricos de PCR o citoquinas entre placebo
y pacientes que recibieron BL, lo que indica que el efecto beneficioso de este probiótico no está mediado por
8.
mejora en la inflamación, de acuerdo con el estudio previo en ratones
8
Nuestro estudio murino demostró que el BDNF del hipocampo estaba regulado al alza por BL . neurotrofina
BDNF influye en la supervivencia y diferenciación de las neuronas, la formación de sinapsis funcionales y
neuroplasticidad41 y está disminuida en el trastorno depresivo mayor42. No encontramos diferencias en suero
BDNF o niveles de neurotransmisores, incluida la serotonina, en pacientes que recibieron BL en comparación con los pacientes
en el grupo de placebo, pero esto no descarta la posibilidad de que los niveles de BDNF o de neutransmisores
en regiones específicas del cerebro fueron moduladas por el probiótico.
Dado que los cambios en la composición de la microbiota intestinal se han relacionado con alteraciones del comportamiento y del cerebro
química31, evaluamos los perfiles bacterianos fecales antes y después del tratamiento. Análisis de heces
La secuenciación del gen 16S rRNA sugiere que el efecto beneficioso de BL es independiente de las principales
Alteraciones en la composición microbiana. Sin embargo, BL alteró el perfil metabólico urinario sugestivo
de degradación bacteriana regulada a la baja de metilaminas y aminoácidos aromáticos43, incluido un
disminución del cometabolito bacteriano huésped 4-sulfato de cresol, un subproducto de la fermentación de la tirosina44 .
Curiosamente, se sabe que el sulfato de 4-cresol inhibe la dopamina ÿ-hidroxilasa45, que es un componente
de la vía biosintética de catecolaminas implicada en la regulación del estado de ánimo46. Esta enzima que convierte
21
MANUSCRITO ACEPTADO
la dopamina en noradrenalina se expresa en el sistema nervioso central y periférico, así como en
células cromafines de la médula suprarrenal47, y su actividad disminuida se ha asociado con
depresión46 . En nuestro estudio, los niveles de sulfato de 4-cresol se correlacionaron con puntuaciones mejoradas de depresión en
Grupo BL que sugiere que la vía de la dopamina/noradrenalina puede desempeñar un papel importante en el efecto
de este probiótico. En estudios futuros, un enfoque metabolómico específico debería proporcionar más información
en el impacto de BL en el metabolismo bacteriano de aminoácidos aromáticos y la subsiguiente
modulación de la producción de catecolaminas del huésped.
Aunque este es el primer ensayo aleatorizado que muestra que los probióticos disminuyen las puntuaciones de depresión en el SII
pacientes existen limitaciones que es importante recalcar. Utilizamos la escala HAD para identificar
pacientes con comorbilidad psiquiátrica, que está bien validado y ampliamente utilizado en estudios
3
investigar el SII como una herramienta simple para detectar ansiedad o depresión comórbidas . es psicométrico
propiedades pueden ser inferiores a las escalas de calificación administradas por médicos para la depresión y la ansiedad, pero su
principal ventaja es que no mide los síntomas somáticos13,48, un fuerte factor de confusión en
cualquier estudio de pacientes con SII. De hecho, no existe un cuestionario validado superior que pueda usarse en
pacientes con un trastorno médico concurrente. Sin embargo, un ensayo confirmatorio que utilice pruebas específicas adicionales
Se necesitan herramientas psicométricas en una cohorte más grande de pacientes para corroborar nuestros resultados actuales. A
La debilidad de nuestro estudio fue la diferencia en las puntuaciones iniciales de depresión entre los dos grupos.
con valores más bajos en el grupo placebo. La mejora en la depresión en el grupo probiótico
podría relacionarse con la regresión a la media o reflejar un efecto suelo. Creemos que esto es poco probable, sin embargo,
como un resultado estadísticamente significativo a favor de BL se mantuvo al ajustar las diferencias de referencia
usando, y al realizar el análisis solo en el subgrupo de pacientes con puntajes de referencia
indicativo de depresión (HAD-D ÿ8). Además, hubo una disminución lineal en la subescala de depresión.
de la puntuación HAD en el grupo BL que no coincidió con la puntuación HAD del placebo
22
MANUSCRITO ACEPTADO
(Figura complementaria 6). Además, los cambios observados en los patrones de activación cerebral en el
áreas involucradas en la regulación del estado de ánimo en el grupo BL apoyan la idea de que este probiótico tiene propiedades anti
propiedades depresivas. No hemos demostrado ningún efecto de BL sobre los síntomas intestinales individuales, pero nuestro
El estudio no tuvo el poder estadístico adecuado para detectar estos cambios. Por lo tanto, un motor más grande y con la potencia adecuada
Se necesita un ensayo con pacientes con SII y depresión comórbida para verificar nuestros datos sobre psiquiatría y
los síntomas intestinales antes de BL pueden recomendarse en la práctica clínica.
En conclusión, B. longum NC3001 tiene efectos beneficiosos de larga data en comorbilidad leve a moderada.
depresión y mejora temporalmente los síntomas generales del SII y la CdV. Esto está asociado con
cambios en la actividad de múltiples áreas del cerebro involucradas en el procesamiento emocional, pero no mejora en
síntomas intestinales individuales, lo que sugiere que los efectos centrales de este probiótico subyacen a su terapéutica
efecto, posiblemente a través de la modulación de la producción de catecolaminas del huésped.
23
MANUSCRITO ACEPTADO
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29
MANUSCRITO ACEPTADO
LEYENDAS
Figura 1: Población de estudio de diagrama de flujo
Figura 2: Patrones de activación cerebral evaluados por fMRI
Se utilizó la resonancia magnética funcional (fMRI) para evaluar la respuesta BOLD a los miedos.
estímulos en comparación con la fijación. Se muestran las diferencias de grupo en el patrón de activación. En la línea de base,
al examinar todas las regiones del cerebro (A), hubo un compromiso ligeramente mayor de la visual
asociación (A1) y cortezas parietales (A2) en el grupo B longum (BL) en comparación con el placebo
grupo, sin diferencia en la región predeterminada de interés (ROI), amígdala (B). Después del tratamiento
(a las 6 semanas), el grupo BL mostró un menor compromiso de la amígdala, así como frontal y
cortezas temporales que están involucradas en la ansiedad y la regulación del estado de ánimo (C, D; en amarillo-naranja) y
mayor compromiso de las regiones occipitales (en azul) en comparación con el grupo placebo. A las 6 semanas,
la activación de la amígdala se correlacionó con las puntuaciones de depresión en toda la cohorte y el grupo BL
(E, panel medio y derecho). Los pacientes con un alivio adecuado de los síntomas del SII (puntos azules) fueron más
probable que tengan menos participación de la amígdala que los pacientes sin mejoría en su
Síntomas del SII (puntos rojos).
30
MANUSCRITO ACEPTADO
Tabla 1: Características demográficas de la población de estudio
B. largo Placebo
n=22 n=22
Estado del estudio, n (%)
Terminado 18 (82) 20 (91)
abandonado 4 (18) 2 (9)
Edad, mediana (RIC) 46,5 (30-58) 40,0 (26-57)
Mujer, n (%) 12 (54) 12 (54)
Etnia n (%)
caucásico 19 (86) 21 (95)
Otro 3 (14) 1 (5)
Tabaquismo
3 (14) 3 (14)
Fumadores, n ( %)
Consumo de alcohol
8 (36) 11 (50)
Consumidores, n (%)
Consumo de fibra, g/ día,
18,0 (12,0-23,2) 13,5 (10,0-18,2)
mediana (RIC)
IMC, mediana (RIC) 25,1 (21,5-28,4) 24,6 (22,3-29,5)
SII subtipo n (%)

Diarrea Femenina 6 (27) 6 (27)
Femenino Mixto 6 (27) 6 (27)
Diarrea masculina 8 (37) 7 (32)
Masculino Mixto 2 (9) 3 (14)
Ansiedad y depresión, n (%)

Ansiedad (HAD-A ÿ8) 21 (95) 18 (82)
Depresión (HAD-D ÿ8) 13 (59) 8 (36)
Ansiedad y depresión 12 (54) 6 (27)
No hay diferencias significativas entre los grupos para las características demográficas (valor P para todos
comparaciones entre grupos >0,05)

MANUSCRITO ACEPTADO
Tabla 2. Puntuaciones de depresión, ansiedad, síntomas del SII, calidad de vida y somatización
Diferencia significativa diferencia media

Antes del tratamiento Post-tratamiento, 6 semanas Seguimiento, 10 semanas
Prueba/ Media (DE) IC del 95 % IC del 95 %
Placebo B. longa Placebo B. longa Placebo B. longa 4,7 4,7
5.2 7.6 4.5 3.9 0.6 0.15
Depresión HAD-D
(3,0) (3.7) (3.1) (3.1) (-1,6 a 2,6) 0,6 (3.5) (3.8) (-2,5 a 2,5)
9,3 (2,6) 10.2 7.1 6.5 8.0 7.6 0,39
Ansiedad HAD-A
(3.2) (3.9) (3.8) (-1.9 a 3.2) (4.3) (4.8) (-2,7 a 3,5)
40.4 41.3 38.8 33.1 5.7 37.6 38.4 -0.83
Ansiedad STAI
(12.3) (13.9) (12.9) (9.5) (-2,0 a 13,5) (11.9) (15.3) (-10,1 a 8,4)
44.0 47.7 42.5 39.4 3.1 42.2 32.3 2.84
Ansiedad TAI
(11,9) (10,5) (11.3) (11.6) (-4,5 a 10,6) 3,8 (11,3) (12.7) (-5.2 a 10.9)
17,8 17,7 12.6 8.8 13,0 12.4 0,55
SII-Birmingham:
total (7.9) (7.1) (9.2) (9.2) (-2.4 a 9.9) (6.9) (9.5) (-4,9 a 6,1)
3.8 3.0 3.1 1.4 1.7 3.2 2.5 0.71

Birmingham:
estreñimiento (3.6) (3.1) (3.5) (1.6) (-0,1 a 3,6) (3.5) (3.8) (-1.7 a 3.2)
8.2 8.5 4.7 4.1 0.5 5.1 5.2 -0.17

Birmingham:
Diarrea (4.3) (4.8) (4.3) (5.8) (-2,8 a 3,9) (3.2) (4.9) (-2,9 a 2,6)
Birmingham: 6.3 6.2 4.9 3.4 1.5 4.7 4.7 0.15
Dolor (3.9) (3.2) (4.1) (3.5) (-1.1 a 4.1) (3.4) (3.8) (-2.4 a 2.4)
43,9 45,0 43.1 49,9 -6.8 * 46,9 46.4 0.52

QoL-SF-36: Físico
(10.8) (10.1) (9.9) (8.8) (-13,2 a -0,4) (10.0) (9.6) (-6,3 a 7,4)
41,9 39.4 43.3 47.1 -3.80 41.3 46.4 -5.06
QoL-SF-36 Mental
(11,1) (11,8) (9,7) (9,9) (-10,4 a 2,8) (12,0) (12,8) (-13,7 a 3,6)
CDV-SF-36: 78,5 78,3 76,8 94,5 -14,7* 79,2 83,3 -4.17
(22.5) (24.2) (22.7) (9.5) (-26,7 a -2,7) (23.1) (19.8) (-18,7 a 10,4)
Funcionamiento físico
CDV-SF-36: 51.3 61.1 47.5 80.8 -33.4* 59.7 62.5 -2.77
(38.4) (43.1) (38.8) (35.9) (-58,5 a -8,2) (38.5) (42.2) (-30,1 a 24,6)
Rol físico
61.2 51.0 58.2 65.1 -6.9 62.2 60.1 2.11
CDV-SF-36:
(24.2) (20.1) (23.3) (20.7) (-21,7 a 7,9) (25.5) (20.4) (-13,5 a 17,7)
dolor corporal
55.2 59.6 60,9 68.1 -7.3 59,9 65,6 -5.61
CDV-SF-36:
Salud general (19.2) (20.9) (22.1) (17.0) (-20,6 a 6,1) (20.7) (21.1) (-19,8 a 8,5)
45.5 40.3 43.7 55.3 -11.5 46.4 49.7 -3.33

QoL-SF-36: Vitalidad
(19.2) (18.7) (18.9) (17.4) (-23,8 a 0,7) (20.4) (25,0) (-18,8 a 12,1)
CDV-SF-36: 61,9 56,9 68.1 77.2 -9.08 63,9 72.2 -8.33
(21.6) (26.8) (24.4) (19.4) (-24,0 a 5,8) (26.7) (22.5) (-25,1 a 8,4)
funcionamiento social
60.0 55,6 56.7 78.4 -21,8 59.3 68.5 -9.25
CDV-SF-36:
Rol emocional (39.9) (39.6) (40.6) (38.9) (-48,5 a 4,9) (43.6) (43.5) (-38,7 a 20,2)
62.0 59.6 65,6 71.5 -5.9 64.0 69.3 -5.33

CDV-SF-36:
Salud mental (20.2) (18.7) (17.6) (16.4) (-17,4 a 5,5) (20.6) (20.6) (-19,3 a 8,6)
11.1 11.9 10.0 8.4 1.61 9.4 10.0 -0.63

PHQ15: Somatización
MANUSCRITO ACEPTADO
(2.9) (3.5) (3.9) (3.2) (-0,8 a 4,0) (3.5) (4.8) (-3.4 a 2.2)
*p<0,05 frente a placebo; HAD-D: puntuación de ansiedad y depresión hospitalaria para la depresión, HAD-A:
Puntuación hospitalaria de ansiedad y depresión para ansiedad, STAI/TAI: estado y rasgo de ansiedad
Inventario, QoL SF-36: Calidad de Vida Forma Corta 36; PHQ-15: Cuestionario de Salud del Paciente;
MANUSCRITO ACEPTADO
Tabla 3: Disminución de ÿ2 puntos en las puntuaciones HAD de depresión y ansiedad a las 6 y 10 semanas
en todo el grupo (A) o cuando se estratificó según el alivio adecuado de los síntomas del SII (B)
B longitud Placebo Análisis ITT Análisis de PP

Salir
norte norte
RR IC 95% valor p RR IC 95% valor p
Disminuir HAD-D
14 7 1.98 1.16-3.38 0.04 2,40 1,26-4,58 0.01
ÿ2 a las 6 semanas
Disminuir HAD-A
14 11 1.31 0,72-2,42 0.54 1.69 0,76-3,77 0.19
ÿ2 a las 6 semanas
AB-
Disminuir HAD-D
13 6 2.05 1.07-3.93 0.04 2.14 1.11-4.12 0.04
ÿ2 a las 10 semanas
Disminuir HAD-A
12 10 1.4 0,65-2,82 0.50 1.6 0.77-3.17 0.34
Salir B longitud Placebo Análisis ITT Análisis de PP

norte norte
RR IC 95% valor p RR IC 95% valor p
Alivio adecuado de los síntomas del SII
Disminución HAD-D ÿ2
11 2 3.07 0,89-10,6 0.03 3,07 0,89-10,6 0.03
a las 6 semanas
Disminuir HAD-A
11 4 1.53 0,72-3,27 0,66 1,53 0,72-3,27 0.34
ÿ2 a las 6 semanas
Disminuir HAD-D
4 1 6.00 1,03-35,9 0.04 6,00 1,06-35,9 0.04
Disminuir HAD-A
4 4 1.5 0,85-2,64 0.46 1,50 0,85-2,64 0.46
No Alivio adecuado de los síntomas del SII
Disminución HAD-D
3 5 0,93 0,29-2,98 1.0 1.6 0,56-4,54 0,56
ÿ2 a las 6 semanas
Disminuir HAD-A
3 7 0,66 0,23-1,92 0.34 1,14 0,45-2,90 0.98
ÿ2 a las 6 semanas
Disminuir HAD-D
9 5 1.60 0,67-3,78 0.31 1,80 0,80-4,02 0.25
MANUSCRITO ACEPTADO
Disminuir HAD-A
8 6 1.18 0,52-2,68 0.73 1,33 0,62-2,84 0.70
Gastar 2 prueba, HAD-D: Ansiedad hospitalaria y puntuación de depresión para la depresión, HAD-A: Hospital
Puntuación de ansiedad y depresión para la ansiedad, ITT: análisis por intención de tratar, PP: por protocolo
análisis
MANUSCRITO ACEPTADO
Tabla 4: Patrones de activación cerebral en todas las regiones del cerebro (arriba) y la amígdala (abajo).
Brodmann No.
Izquierda derecha región del cerebro valor T valor p
área vóxeles
Derecha Giro temporal medio licenciatura 21 4.62796 0.000013 818
Cerebelo * 3.964027 0.000154 452

Derecha
Derecha Giro frontal inferior licenciatura 47 4.564617 0.000017 4657
Derecha Cuña licenciatura 19 -3.889998 0.0002 1268
Derecha Giro occipital medio licenciatura 19 -4.455264 0.000026 898
Derecha Giro frontal medio BA 10 4.099587 0.000095 526
Amígdala/
Derecha licenciatura 28 3.983939 0.000144 1474
Giro parahipocampal
Derecha Cuña licenciatura 19 -3.709217 0.000372 1527
Derecha Giro frontal medial licenciatura 11 4.73075 0.000009 365
Izquierda Giro occipital medio licenciatura 19 -4.04685 0.000115 1196
Amígdala/
Izquierda licenciatura 35 4.451565 0.000026 1727
Giro parahipocampal
Izquierda Giro frontal medio BA 10 3.687655 0.0004 1080
Izquierda Giro temporal medio licenciatura 21 4.097827 0.000096 689
Izquierda derecha región del cerebro valor T valor p Nº vóxeles
Derecha Amígdala 3.98394 0.000144 690
Izquierda Amígdala 4.031566 0.000121 212
Patrones de activación cerebral evaluados por resonancia magnética funcional para las diferencias de grupo posteriores al tratamiento
(placebo frente a tratamiento; miedo frente a fijación) en todas las regiones del cerebro (arriba) y para análisis de ROI-amígdala (abajo).
Todos los datos están corregidos para comparaciones múltiples; FDR(q)<.05. Los valores T positivos identifican regiones de mayor
activación en respuesta a estímulos de miedo para el grupo placebo en comparación con el grupo BL .
MANUSCRITO ACEPTADO
Tabla 5: Metabolitos urinarios después de 6 semanas de tratamiento evaluados por RMN 1H
Señal de RMN 1H Correlación OPLS Concentración relativa (au)

Metabolitos urinarios valor p
(multiplicidad) coeficiente (VIP) Placebo B longitud
creatina 3.04 (s) -0,44 (1,36) 14,49 (10,3) 7.44 (3.0) 0.007
Fenilacetilglutamina 7,43 (m) -0,50 (1,76) 4.5 (1.8) 3.01 (1.3) 0.013
sulfato de 4-cresol 2.35 (segundos) -0,36 (1,42) 5.38 (2.3) 3.9 (1.7) 0.022
N-óxido de trimetilamina 3.27 (segundos) -0,32 (1,18) 44,0 (61,2) 15,48 (4,5) 0.002
Los datos de metabolitos se informan como media (SD) con una unidad arbitraria (au) derivada de 1H NMR
área de pico espectral. VIP: Importancia Variable en la Proyección; m: multiplete; s: singlete.

MANUSCRITO ACEPTADO
Figura 1.
MANUSCRITO ACEPTADO
ROI - Amígdala I
Y Placebo Datos almacenados licenciado en Derecho
5 5 5
0 0 0
-5 -5 -5
Pearson r = 0,14, Pearson r = 0,52, Pearson r = 0,53,

p = 0,02 p = 0,004 p = 0,04
-10 -10 -10
-2 -1 0 1 2 -2 -1 0 1 2 -2 -1 0 1 2
Activación de la amígdala D (% BOLD) Activación de la amígdala D (% BOLD) Activación de la amígdala D (% BOLD)
Alivio adecuado de los síntomas del SII Sin alivio adecuado de los síntomas del SII
MANUSCRITO ACEPTADO
Figura complementaria 1: Diseño del estudio
1
MANUSCRITO ACEPTADO
Figura complementaria 2: El paradigma de enmascaramiento hacia atrás.
El paradigma del enmascaramiento hacia atrás: la fijación fue alterada, seguida de la presentación de un
cara temerosa o feliz durante 67 ms, seguido del enmascaramiento de los estímulos con cara neutra durante 83 ms
EM. Los participantes tenían 1800 ms para responder. Se recogieron cuatro presentaciones del paradigma, con
84 intentos por presentación (escaneo).
2
MANUSCRITO ACEPTADO
Figura complementaria 3. Respuestas grupales a estímulos de miedo frente a estímulos felices o de fijación.
A. Respuesta del grupo completo a los estímulos de cara de miedo en ambos puntos de tiempo contrastados con el grupo completo
respuesta a estímulos de cara feliz. El análisis identificó varias regiones del cerebro que mostraban
mayor compromiso en respuesta a los estímulos del miedo, incluida la amígdala, la ínsula y las regiones en el
cortezas frontales.
B. Respuesta de grupo completo a estímulos de miedo contrastada con respuesta de grupo completo a estímulos de fijación, en ambos
Los puntos de tiempo revelaron una amplia activación que incluye las circunvoluciones fusiformes, el tálamo, las regiones estriadas, parietal
cortezas y complejo hipocampo/amigdala.
3
MANUSCRITO ACEPTADO
Figura complementaria 4: análisis de microbiota intestinal
4
MANUSCRITO ACEPTADO
Figura complementaria 5: Descripción general del perfil metabólico de orina 1H NMR y datos multivariados
análisis
A: perfil metabólico urinario de RMN 1H típico con la firma del metabolito seleccionado resaltada en
áreas espectrales alifáticas (0.5 – 4.5 ppm) y aromáticas (6.5 – 9.0 ppm).
B: Descripción general de los gráficos de coeficiente OPLS-DA resultantes de los datos de RMN de orina y discriminante de grupo
análisis (placebo arriba, probióticos abajo). Los gráficos de los coeficientes de OPLS se presentan utilizando un
transformación de escala y proyección para ayudar a la visualización de biomarcadores. La dirección de las señales en
las parcelas relativas a cero indican covarianza positiva o negativa con el grupo de interés. Cada
variable se traza con un código de color que indica su poder de discriminación calculado a partir de la
matriz de correlación que destaca regiones espectrales ricas en biomarcadores.
5
MANUSCRITO ACEPTADO
6
MANUSCRITO ACEPTADO
Figura complementaria 6: Diferencias en las medias marginales estimadas para HAD-D y HAD-A
( medidas múltiples ANOVA )
HAD-D: puntuación de ansiedad y depresión hospitalaria para la depresión, HAD-A: ansiedad y depresión hospitalaria.
Puntuación de depresión para la ansiedad
7
MANUSCRITO ACEPTADO
Tabla complementaria 1: Respuestas del grupo completo en ambos puntos temporales en respuesta a estímulos de miedo frente
a estímulos felices
Izquierda/
región del cerebro Área T de Brodmann valor p Nº vóxeles

Correcto
Derecha La isla licenciatura 13 5.4106 0.000008 3136
Derecha Giro temporal superior licenciatura 22 4.8403 0.00004 7845
Derecha Giro temporal inferior licenciatura 20 4.1807 0.000244 469
Derecha Lóbulo parietal inferior BA 40 3.9513 0.000456 1144
Derecha Giro temporal superior licenciatura 38 -4.6615 0.000065 181
Derecha giro cingulado licenciatura 24 4.4890 0.000105 1416
Derecha La isla licenciatura 13 3.3460 0.002279 186
Núcleo Lentiforme Años. Globo

Derecha 4.7033 0.000058 4401
pálido
Derecha tálamo almohadón 4.6475 0.000067 1116
Derecha Lóbulo paracentral licenciatura 5 4.2963 0.000178 855
Izquierda Giro parahipocampal licenciatura 27 4.3273 0.000163 306
Izquierda precúneo licenciatura 19 3.6435 0.001043 589
Izquierda Amígdala Amígdala 3.9502 0.000458 144
Izquierda Con la cola Cola caudada 3.3883 0.002041 156
Izquierda La isla licenciatura 13 3.6715 0.000968 567
Izquierda Núcleo Lentiforme putamen 4.2270 0.000215 978
Izquierda Giro occipital medio licenciatura 19 3.5165 0.00146 231
Izquierda Giro frontal inferior licenciatura 46 3.4428 0.001771 142
Izquierda Giro temporal medio licenciatura 21 3.78414 0.000717 505
Izquierda Giro temporal superior licenciatura 22 4.2784 0.000187 683
Izquierda Giro temporal inferior licenciatura 20 3.5100 0.001485 209
8
MANUSCRITO ACEPTADO
Tabla complementaria 2: Niveles de citocinas inflamatorias, BDNF y neurotransmisores a las seis semanas
Base Después del tratamiento (6 semanas)

Prueba /
EN pags
Mediana (RIC) B longitud Placebo B longitud Placebo
PCR 1,12 (0,4-2,3) 0,85 (0,4-0,9) 1,32 (0,45-1,7) 1,70 (1,0-1,9) 120.5 0.18
TNF a 0,98 (0,82-1,17) 0,96 (0,89-1,25) 0,97 (0,82-1,05) 1,06 (0,95-1,29) 116.0 0.33
IFN- C 0,13 (0,07-0,22) 0,11 (0,08-0,15) 0,14 (0,10-0,18) 0,13 (0,09-0,18) 136.0 0.79
IL-6 0,22 (0,14-0,27) 0,20 (0,15-0,24) 0,18 (0,13-0,26) 0,23 (0,18-0,40) 90,0 0.06
IL-8 0,79 (0,64-1,42) 0,90 (0,65-1,17) 0,97 (0,70-1,14) 0,85 (0,66-1,11) 119.0 0.39
IL-1 b 0,97 (0,70-1,14) 0,05 (0,02-0,07) 0,04 (0,02-0,05) 0,04 (0,01-0,06) 116.0 0.33
IL-10 1,32 (1,10-1,61) 1,39 (1,17-1,48) 1,45 (1,05-1,66) 1,69 (1,32-2,02) 101.0 0.14
IL-12 p70 0,09 (0,04-0,15) 0,05 (0,04-0,07) 0,06 (0,05-0,08) 0,06 (0,04-0,09) 136.0 0.78
relación IL10/12 26,5 (18,7-36,4) 24,1 (20,9-31,1) 19,7 (11,6-27,7) 24,4 (16,8-36,0) 114.0 0.30
BDNF /
20 (20-28) 29 (17-52) 25 (17-41) 37 (21-55) 124.0 0.10
b actina
ELISA BDNF 6.61 (2.43-8.41) 4,87 (3,21-11,11) 7,00 (3,60-10,56) 5,83 (3,15-10,37) 148.0 0,65
CGRP 23,6 (17,1-28,8) 25,2 (18,8-30,8) 23,8 (17,4-30,3) 26,5 (20,9-32,7) 147.0 0.34
Sustancia P 1,01 (0,61-1,42) 1,26 (0,75-1,60) 1,03 (0,75-1,49) 1,19 (0,59-1,51) 176.0 0.91
serotonina 12,3 (5,8-14,5) 10.2 (6.6-19.3) 8.3 (4.2-14.9) 8,9 (5,9-12,1) 165.0 0,67
Concentraciones de biomarcadores individuales: CRP (mg/L), TNF ÿ, IFN ÿ, IL-6, IL-8, IL-1 ÿ, IL-10 (todas
pg/mL), BDNF/ ÿ actina Log10-5 (copias /ng de ARN), BDNF ELISA (ng/mL) CGRP (pg/mL), Sustancia P
(ng/ml), serotonina (ng/ml),
9
MANUSCRITO ACEPTADO
Tabla complementaria 3: Eventos adversos más comunes
Acontecimiento adverso B longitud Placebo Valor p Causalidad Resultado

norte norte
Estreñimiento 0 2 0.48 NR NR 1.0 Recuperado

NR Recuperado
Sangrado rectal 0 1.0 NR NR NR Recuperado
Rinitis 2 11 Posible Posible Recuperado
Recuperado
Recuperado
dolores de cabeza 4 1 0.34 Posible Recuperado
Posible Recuperado
NR 1.0 Recuperado
NR 1.0 Recuperado
NR 1.0 Recuperado
vesículas orales 0 NR 1.0 NR 1.0 NR Recuperado
Fisura anal 0 1.0 NR NR NR 1.0 Recuperado
Dolor de cuello 1 1 NR 1.0 NR 1.0 NR Recuperado
Infección de orina 1 0 NR NR NR 1.0 NR Caído*
Náuseas 0 1 1.0 NR 1.0 NR Recuperado
Síntomas de ERGE 102 1 Recuperado
Recuperado
Recuperado
Dolor abdominal 0 1 Recuperado
Diarrea 0 Recuperado
Frío 2 12 Recuperado
Recuperado
Recuperado
Recuperado
Otitis 1 0 Caído*
Alergia a la comida 0 Recuperado
faringitis 11 0 Caído *
estreptocócica
Dolor de espalda 0 1.0 NA 1.0 NA Recuperado
iritis 0 1.0 NA Recuperado
Ataque de ansiedad 110 1 Recuperado
Total 18 14 0.31
NR: No relacionado, *Fuera del estudio debido al uso de antibióticos
10
MANUSCRITO ACEPTADO
Métodos complementarios:
Análisis de microbiota:
El análisis de la microbiota se realizó utilizando la secuenciación Illumina de la región V3 del gen 16S rRNA
1
como se describió anteriormente . Los datos fueron procesados por una canalización de bioinformática interna que
2 3 4 5 6.
incorpora filtrado de calidad, Cutadapt , PandaSeq , AbundanteOTU , madre y QIIME
Abundantes OTU proporcionan resultados de secuencias agrupadas en unidades taxonómicas operativas (OTU).
7 8
Las asignaciones taxonómicas usan el clasificador RDP con el set de entrenamiento de Greengenes . Análisis
incluye medidas de diversidad alfa para cada muestra y estimaciones de la diversidad total usando QIIME, como
así como medidas de diversidad ÿ (Unifrac ponderado y no ponderado, Bray-Curtis) y otras estadísticas
análisis usando QIIME y el paquete PhyloSeq9 implementado en R.
Análisis metabolómico:
Se aplicó el perfil de metabolitos 1H NMR a las muestras de orina, ya que este biofluido contiene
útiles representaciones promediadas en el tiempo de la historia metabólica homeostática reciente del individuo
y también llevan información indirecta sobre las actividades metabólicas microbianas intestinales a través de la excreción
patrones de muchos cometabolitos polares microbianos-mamíferos10, 11 (Figura complementaria 5A).
Se mezclaron cuarenta µL de orina con 20 µL de solución tampón de fosfato deuterado KH2PO4 0,6 M,
que contiene 1 mM de 3-(trimetilsilil)-[2,2,3,3-2H4]-1-propionato de sodio (TSP, cambio químico
referencia ÿH = 0,0 ppm). Se transfirieron 60 µl de la mezcla a tubos de RMN de 1,7 mm. RMN 1H
Los espectros se adquirieron con un espectrómetro Bruker Avance II de 600 MHz equipado con un 1,7 mm
sonda a 300 K (Bruker Biospin, Rheinstetten, Alemania), utilizando una secuencia de pulso estándar con
11
MANUSCRITO ACEPTADO
supresión de agua y procesado con el software TOPSPIN (versión 2.1, Bruker, Alemania)
paquete. La identificación del metabolito se logró utilizando una base de datos interna y 2D 1H NMR
experimentos de espectroscopia
El análisis quimiométrico se realizó con el paquete de software SIMCA-P+ (versión 14.0,
Umetrics AB, Umeå, Suecia) y rutinas MATLAB desarrolladas internamente. Proyección ortogonal
a estructuras latentes (OPLS)12 y análisis discriminante OPLS (OPLS-DA) se emplearon para
explorar la varianza en los datos metabonómicos que pueden explicar las diferencias estadísticas entre
grupos de muestras. La precisión de clasificación del OPLS-DA se estableció a partir de la predicción
muestras en el ciclo de validación cruzada de 7 veces. Para resaltar el peso de las variables individuales en el
modelo, se utilizó Importancia Variable en la Proyección (VIP), con un valor superior a 1 utilizado como umbral
por convención. Además, las variables influyentes de RMN que están correlacionadas con la separación de grupos son
identificado utilizando los coeficientes de las variables según métodos publicados previamente13 .
Las señales representativas de los metabolitos identificados se integraron y probaron utilizando métodos no paramétricos.
Prueba de Mann-Whitney.
12
MANUSCRITO ACEPTADO
Referencias adicionales:
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bibliotecas de comunidades microbianas complejas mediante el ensamblaje de lecturas illumina de dos extremos. Aplicación
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datos de secuenciación de la comunidad. Métodos nacionales 2010, 7(5) : 335-336.
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13
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estrategias. Br J Clin Pharmacol 2013;75:619-29.
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2005;77:1282-1289.
14

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Versión: Versión aceptada

Probiótico Bifidobacterium longum NCC3001 reduce los puntajes de depresión y altera

PII: S0016-5085(17)35557-9 DOI: 10.1053/

Aparecer en: Gastroenterología

Actividad: Estudio Piloto en Pacientes con Síndrome de Intestino Irritable.

1Departamento de Medicina, Instituto de Investigación de Salud Digestiva de la Familia Farncombe, McMaster

Universidad, Hamilton, ON, Canadá

2Departamento de Psicología, Neurociencia y Comportamiento, Universidad McMaster, Hamilton, ON,

3 Instituto Nestlé de Ciencias de la Salud SA, Lausana, Suiza

y Ciencias Clínicas, Universidad de Leeds, Leeds, Reino Unido.

5Departamento de Patología, Universidad McMaster, Hamilton, ON, Canadá.

6Centro de Investigación Nestlé, Instituto de Nutrición, Lausana, Suiza.

Título breve: B. longum reduce la depresión en pacientes con SII

Fuente de financiación: Nestlé SA, Suiza,

Autor para correspondencia: Premysl Bercik, MD

Departamento de Medicina, Instituto de Investigación de Salud Digestiva de la Familia Farncombe,

Universidad McMaster, Hamilton, ON, Canadá

correo electrónico: bercikp@mcmaster.ca

y SMC recibió apoyo de investigación de Nestlé.

DIVULGACIÓN: MIPS recibió un premio de becas para profesionales de la salud de CIHR-CAG. PB es

versión del manuscrito.

su contribución en la generación de datos de metabolómica.

pacientes con SII.

cuestionarios En la semana 0 y 6 se recogieron muestras de heces, orina y sangre, y funcional

microbiota fecal, perfiles de metaboloma en orina, marcadores séricos de inflamación, neurotransmisores y

marcadores séricos de inflamación y niveles de neurotrofinas y neurotransmisores, pero el BL

reactividad. ClinicalTrials.gov no. NCT01276626.

Palabras clave: SII, ansiedad, depresión, fMRI

Hemos demostrado previamente que la administración de B. longum NCC3001 subspecies longum

objetivo evaluar el impacto del BL en la ansiedad y la depresión comórbidas. el secundario

cambios en los patrones de activación cerebral, marcadores inflamatorios circulantes, neurotransmisores,

microbiota en comparación con pacientes con SII con estreñimiento10,5 .

Supervisión del estudio

datos y revisó y aprobó el manuscrito final.

o depresión, uso de inmunosupresores, glucocorticosteroides, opioides, antidepresivos o

Período de rodaje y prueba.

Diseño del estudio

reevaluado, se recogieron muestras de heces, orina y sangre, y se realizó un estudio de fMRI.

visita (semana 10).

luego enviado por correo postal o electrónico a los investigadores.

Criterios de valoración del estudio

imágenes, fMRI), marcadores inflamatorios séricos, neurotransmisores y BDNF, y orina

perfiles metabonómicos y de microbiota fecal.

la calidad de vida (QoL) se midió con el SF-3619 y la somatización con el PHQ-15

imagen T1 transformada promedio.

REINO UNIDO; CGRP: Cloud-Clone Corp, Houston, TX.

base de datos y experimentos de espectroscopia 2D 1H NMR. El análisis quimiométrico se realizó utilizando

Desarrolló rutinas de MATLAB. Proyección ortogonal a estructuras latentes (OPLS) y OPLS

Se empleó el análisis discriminante (OPLS-DA) para explorar la varianza en la metabolómica

de sujetos que no completaron el ensayo debido al consumo de medicación prescrita o no

con la función de respuesta hemodinámica. Se construyeron mapas de activación identificando grupos de

(FDR(q)<.05)25 y el valor estadístico promedio para el ROI informado.

Para el análisis metabonómico, se integraron señales representativas de los metabolitos identificados y

probado usando la prueba no paramétrica de Mann Whitney.

Papel de la fuente de financiación

Nestec SA no participó en la recopilación, análisis o interpretación de los datos clínicos. los

para la decisión de enviar para su publicación.

Pacientes del estudio

excepto por puntajes HAD-D más altos en el grupo BL (Tabla 2).

Medida de resultado primaria: Mejoría en las puntuaciones de depresión y/ o ansiedad

los grupos a las 6 o 10 semanas de seguimiento.