LABORATORIO PRACTICO MEDICINA TRANSFUSIONAL

LABORATORIO PRACTICA Nº7 “FENOTIPOS ANTÍGENOS SISTEMAS MENORES EN

TUBO”
La determinación de los antígenos presentes en los glóbulos rojos de una persona es lo que
conocemos como fenotipo eritrocitario.

Cuando determinamos el fenotipo, la ausencia de un antígeno debe corresponder a la

presencia del alelo alterno, el cual estará en dosis doble (homocigoto). En cambio, si ambos están
presentes se refieren como heterocigotos.

Igual que el anti D, C, c, E y e, se encuentran disponibles en el comercio reactivos para

fenotipar sistemas sanguíneos de importancia clínica como Kell, Duffy, Kidd y MNSs.

PROCEDIMIENTO FENOTIPO EN TUBO

Reactivos IgM

1. En tubos de Khan previamente marcados con el antígeno a estudiar, depositar una gota del
antisuero correspondiente.
2. Preparar una solución al 5 % de los glóbulos rojos en estudio en PBS y añadir una gota a
cada tubo. Mezclar.
3. Rotular 2 tubos extras, uno será el control positivo y otro el control negativo.
4. Utilizar como control positivo células comerciales de identificación de AI PI/PII que presente
el antígeno y como control negativo células que no presenten el antígeno. (ver antigrama
correspondiente)
5. El tubo en estudio más los respectivos controles deben ser sometidos a las mismas
condiciones de estudio.
6. Incubar 5-10 minutos a temperatura ambiente.
7. Mezclar y centrifugar bajo condiciones de lectura.

Los resultados positivos indican que el antígeno correspondiente está en los glóbulos en estudio
y el resultado negativo que el antígeno no se encuentra presente en los glóbulos rojos en estudio.

Reactivos IgG

1. En tubos de Khan previamente marcados con el antígeno a estudiar, depositar una gota del
antisuero correspondiente.
2. Preparar una solución al 5 % de los glóbulos rojos en estudio en PBS y añadir una gota a
cada tubo. Mezclar.
3. Rotular 2 tubos extras, uno será el control positivo y otro el control negativo.
4. Utilizar como control positivo células comerciales de identificación de AI PI/PII que presente
el antígeno y como control negativo células que no presenten el antígeno. (ver antigrama
correspondiente)
5. El tubo en estudio más los respectivos controles deben ser sometidos a las mismas
condiciones de estudio.

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6. Añadir 1 gota de LISS a cada tubo.

7. Incubar 15 minutos a 37ºC.
8. Lavar 4 veces con solución salina PBS. Eliminar completamente el último sobrenadante.
9. Agregar 2 gotas de antiglobulina humana a cada tubo.
10. Mezclar bien y centrifugar.
11. Leer removiendo los eritrocitos y ver si hay aglutinación
12. Validar resultados negativos con células control Coombs.

Los resultados positivos indican que el antígeno correspondiente está en los glóbulos en estudio
y el resultado negativo que el antígeno no se encuentra presente en los glóbulos rojos en estudio.

ANTÍGENO MUESTRA ESTUDIO CONTROL POSITIVO CONTROL NEGATIVO

ESTUDIADO Nº PANEL PANEL

TIPO REACTIVO
MARCA
LOTE
FECHA VENCIMIENTO