CINÉTICA ENZIMÁTICA

M.C. Lenin Omar Nevárez Prado

LA CINÉTICA ENZIMÁTICA
ESTUDIA LA VELOCIDAD
DE LAS REACCIONES
BIOQUÍMICAS
 LA VELOCIDAD
DE UNA
REACCIÓN
BIOQUÍMICA
CAMBIO DE LA CONCENTRACIÓN DE
UN REACTIVO O PRODUCTO POR
UNIDAD DE TIEMPO
LA VELOCIDAD
INICIAL V0
 LA CINÉTICA ENZIMÁTICA
ESTUDIA LA VELOCIDAD DE
LAS REACCIONES
BIOQUÍMICAS
CUANTIFICANDOLAS
LO QUE PERMITE COMPRENDER LAS
FUERZAS QUE REGULAN LAS VÍAS
METABÓLICAS
ORDEN DE UNA REACCIÓN
ORDEN DE UNA REACCIÓN

la adición de un reactivo no altera la

velocidad de una reacción

La velocidad es cte ya que la concentración

del reactivo es elevada para saturar todos
los sitios catalíticos en las enzimas.
ORDEN DE UNA REACCIÓN

la velocidad depende de la primera

potencia de la concentración de un
solo reactivo y sugiere que el paso
limitante de la velocidad es una
reacción unimolecular
ORDEN DE UNA REACCIÓN

la velocidad de reacción depende de las

concentraciones de los dos reactivos.
ORDEN DE UNA REACCIÓN
la molecularidad número de
es el
moléculas que colisionan en una
reacción de un solo paso.

• Una reacción unimolecular

A → B tiene molecularidad de uno

• una reacción bimolecular

A + B → C + D tiene molecularidad de dos.
 CINÉTICA DE
MICHAELIS-MENTEN
 CINÉTICA DE MICHAELIS-MENTEN

S se une al sitio activo de una enzima E, se forma un

Cuando el sustrato
complejo intermedio (ES). Durante el estado de transición el sustrato
se convierte en producto P. Tras un lapso breve, el producto se disocia
de la enzima
CINÉTICA DE MICHAELIS-MENTEN

se asume que:
1. k−1 es despreciable en comparación con k1
2. la velocidad de formación de ES es igual a la velocidad de su degradación durante la
mayor parte del curso de la reacción (suposición del estado estacionario de equilibrio
dinámico)
 CINÉTICA DE MICHAELIS-MENTEN
Michaelis y Menten introdujeron una nueva cte, Km (conocida como constante de Michaelis):
CINÉTICA DE MICHAELIS-MENTEN

Cada enzima tiene una Km característica para

un sustrato particular bajo condiciones
especificadas.
LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA SE EXPRESA EN
UNIDADES INTERNACIONALES (UI)
Una UI se define como la cantidad de enzima que produce 1 mol de producto por minuto
Cuál será la velocidad de una proteasa si tiene una velocidad
máxima de 0.5 mol/seg y una km de 5 n/L cuando se emplea
una concentración inicial de una proteína de 2 n/L
Cuál será la velocidad de una proteasa si tiene una velocidad
máxima de 0.5 mol/seg y una km de 5 n/L cuando se emplea
una concentración inicial de una proteína de 2 n/L
Cuál será la velocidad de una hexoquinasa si tiene una
velocidad máxima de 0.0025 mol/seg y una km de 0.052 n/L
cuando se emplea una concentración inicial de una proteína
de 0.00002 n/L
Cuál será la velocidad máxima de una enolasa si tiene una
velocidad inicial de 0.0035 mol/seg y una km de 0.022 n/L
cuando se emplea una concentración de glucosa de 0. 02 n/L
Cuál será la km de una isomerasa cuando se emplea una
concentración de fructosa de 0. 042 n/L si se sabe que la
velocidad inicial de la enzima es 0.5 mol/seg y la velocidad
máxima es 0.999 mol/seg
Cuál será la concentración de sustrato necesaria para que una
enzima trabaje inicialmente al 50% de la velocidad máxima
sabiendo que esta última es de 0.25 mol/seg y la Km es de
0.00014 molar
INHIBICIÓN
ENZIMÁTICA
GRÁFICAS DE LINEWEAVER-BURK
GRÁFICAS DE LINEWEAVER-BURK
INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
• Las moléculas que reducen la actividad de una enzima, denominadas inhibidores

Se unen de forma reversible

a la enzima libre, y no al
Competitiva complejo ES, para formar un
complejo EI

El inhibidor puede unirse

Reversible No competitiva tanto a la enzima libre como
al complejo enzima-sustrato

Inhibición El inhibidor sólo se une al

Acompetitiva complejo enzima-sustrato, y
no a la enzima libre.

Irreversible Se unen de forma

covalente a la enzima
INHIBIDORES COMPETITIVOS
Los inhibidores competitivos compiten con el sustrato por el mismo
sitio en la enzima libre de forma reversible.
INHIBIDORES COMPETITIVOS

MISMA Vmax
DIFERENTE Km
INHIBIDORES NO COMPETITIVOS
Los inhibidores no competitivos pueden unirse tanto a la enzima como al
complejo enzima-sustrato porque se unen a un sitio distinto del sitio
activo.
INHIBIDORES NO COMPETITIVOS

MISMA Km
DIFERENTE Vmax
INHIBIDORES ACOMPETITIVOS
Los inhibidores acompetitivos sólo se unen al complejo enzima-sustrato
y no a la enzima libre
INHIBIDORES ACOMPETITIVOS

DIFERENTE Km
DIFERENTE Vmax
INHIBICIÓN IRREVERSIBLE
Los inhibidores irreversibles suelen unirse de modo
covalente a la enzima.

Las enzimas que

contienen grupos
sulfhidrilo libres pueden
reaccionar con agentes
alquilantes como el
yodoacetato:
Qué tipo de inhibición tendrá una oxidorreductasa si se coloca
una concentración de glucosa 2M y se tienen los siguientes
datos

ENZIMA 1 2
Vmax 1 mol / seg 1 mol / seg
Km 3M 5M
Qué tipo de inhibición tendrá una peroxidasa si se coloca una
concentración de peróxido de hidrogeno 0.5M y se tienen los
siguientes datos

ENZIMA 1 2
Vmax 1 mol / seg 5 mol / seg
Km 5M 5M
Qué tipo de inhibición tendrá una deshidrogenasa si se coloca
una concentración de etanol 2M y se tienen los siguientes
datos

ENZIMA 1 2
Vmax 1 mol / seg 5 mol / seg
Km 5M 4M
REACCIONES DE SUSTRATOS
MÚLTIPLES
• La mayoría de las reacciones bioquímicas implican dos o más sustratos.

las reacciones multisustrato pueden dividirse en dos clases:

SECUENCIALES Y DE DOBLE
DESPLAZAMIENTO.
REACCIONES SECUENCIALES
Una reacción secuencial no puede proceder sino hasta que todos los sustratos se han unido
al sitio activo de la enzima
MECANISMOS:
1. ORDENADO el primer sustrato debe unirse a la enzima antes que el segundo
2. ALEATORIO
REACCIONES SECUENCIALES
Una reacción secuencial no puede proceder sino hasta que todos los sustratos se han unido
al sitio activo de la enzima
MECANISMOS:
1. ORDENADO
2. ALEATORIO los sustratos pueden unirse en cualquier orden y los productos se pueden
liberar en cualquier orden.
REACCIONES DE DOBLE
DESPLAZAMIENTO “PING-PONG”
El primer producto se libera antes de que el segundo sustrato se una